Formulario de Presentacin de

Proyecto de Investigacin

Ttulo:
Utilidad de Calprotectina fecal en diagnostico de Enfermedad
Injerto Versus Husped Intestinal en nios con Trasplante
precursores hematopoyticos alognico en Hospital Luis Calvo
Mackenna.
Investigadores Responsables:
Mara Paz Muoz Fernndez - Dr. Cristian Sotomayor.
Especialistas en formacin Responsables:
Ximena Benavides Carla Glvez

1. IDENTIFICACION DEL PROYECTO

TITULO:

Utilidad de Calprotectina fecal en diagnostico de Enfermedad Injerto Versus Husped

Intestinal en nios con Trasplante precursores hematopoyticos alognico en Hospital
Luis Calvo Mackenna.
DURACIN PROPUESTA DEL PROYECTO: 2 aos
2. INVESTIGADOR RESPONSABLE

Nombre:

Ximena Benavides Vargas

Email:

franbenavar@gmail.com

Jerarqua Acadmica (si corresponde): Especialista en Formacin

Nombre:

Carla Glvez

Email:

dracagalvez@gmail.com

Jerarqua Acadmica (si corresponde): Especialista en Formacin

3. PROFESOR RESPONSABLE

Nombre:

Mara Paz Muoz Fernndez

Email:

pazmunioz@gmail.com

Departamento o Unidad:

Unidad Gastroenterologa

Jerarqua Acadmica (si corresponde): Profesor Asistente

Nombre:

Cristian Sotomayor Fahrenkrog

Email:

cmsotomayorf@gmail.com

Departamento o Unidad:

Unidad Trasplante Medula sea

Jerarqua Acadmica (si corresponde): Profesor Asistente

4. CO-INVESTIGADORES (agregue los datos de todos los co-investigadores)

Nombre:

Francisco Saitua Doren

Email:

fjsaitua@hotmail.com

Departamento o Unidad:

Unidad Endoscopia

Jerarqua Acadmica (si corresponde): Profesor Asistente

Nombre:

Elisa Alcalde

Email:

ealcalde@calvomackenna.cl

Departamento o Unidad:

Servicio Anatoma Patolgica

Jerarqua Acadmica (si corresponde):

Nombre:

Mauricio Farfn

Email:

mfarfan@med.uchile.cl

Departamento o Unidad:

Unidad Investigacin

Jerarqua Acadmica (si corresponde):

5. RESUMEN DEL PROYECTO

Los sntomas intestinales son comunes despus de Trasplante de precursores Hematopoyticos
(TPH). Una causa es la enfermedad injerto versus husped (EICH) que afecta al 50-70% de este
grupo de pacientes. Actualmente el gold estndar para el diagnstico de EICH intestinal es la
histologa con la demostracin de apoptosis intra criptal en las clulas intestinales.
Se ha demostrado en adultos que niveles elevados de protena Calprotectina Fecal (CF) puede
ser considerada como un marcador sensible de EICH digestivo en pacientes trasplantados.En
nios no existen reportes de uso de CF en pacientes con TPH alognico.
Objetivo general:

Determinar utilidad de Calprotectina Fecal en sospecha de EICH

intestinal en pacientes peditricos que evolucionan con diarrea luego de TPH alognico.
Material y mtodos:

Estudio

prueba

diagnstica

con

diseo

observacional,

analtico,

transversal unicentrico, abierto en pacientes peditricos sometidos a TPH alognico con

sospecha EICH intestinal, casos consecutivos durante 2 aos en Hospital Calvo Mackenna
2016-2017.
Se incluir a pacientes peditricos entre 1 y 15 aos sometidos a TPH que evolucionan con
diarrea a los cuales se les realiza endoscopia digestiva alta y/o baja para toma biopsia intestinal
y que acepten participar previa firma de consentimiento informado.Se realizar test de
calprotectina fecal utilizando kit ELISA comercial a las 48 horas de iniciada la diarrea.Adems se
realizar estudio en deposiciones con:parasitolgico seriado deposiciones, coprocultivo, toxina
clostridium, estudios virales en deposiciones y tejido por reaccin polimerasa en cadena y
estudio histolgico y gradacin de EICH de las muestras de biopsias tomadas por
endoscopia.Todos los pacientes adems contarn con una medicin basal de calprotectina fecal
previo al TPH alognico, que conformaran el grupo control del estudio.
Anlisis estadstico:

Las Variables continuas con distribucin normal (medias) usa t student

en dos grupos. Variable nominales con distribucin no normal usa U Mann Whitney. P = 0,05. La
validez del test fue evaluada por Curva ROC. Se reporta sensibilidad y especificidad de nueva
prueba. La Medicin concordancia (ndice Kappa) para histologa y calprotectina.
Resultados esperados: Calprotectina fecal puede ser considerado como un biomarcador
sensible de EICH intestinal dado su habilidad de diferenciar por su valor cuantitativo el EICH de
otras causas de diarrea en pacientes sometidos a TPH alognico.
Contar con un biomarcador no invasivo para diagnostico de EICH permitira estratificar pacientes
que requieren estudios endoscpicos invasivos
Se necesitan ms estudios en poblacin peditrica para evaluar la real utilidad de CF en este
grupo de pacientes.

6. MARCO TEORICO:
El trasplante de precursores hematopoyticos (TPH) es el tratamiento de eleccin de diversas
enfermedades hematolgicas, oncolgicas, congnitas e inmunodeficiencias; est reservado para
aquellos pacientes que no tienen otra posibilidad de tratamiento . 1,2 El Hospital Luis Calvo
Mackenna (HLCM) es un centro de alta complejidad y en l se ubica la unidad de referencia
nacional de trasplante de precursores hematopoytico (UTMO HLCM/PINDA).
Los sntomas intestinales son comunes despus de TPH alognico y pueden deberse a diversidad
de causas. Una causa relevante, tanto por frecuencia como por severidad es la enfermedad
injerto versus husped (EICH) que afecta al 50-70% de este grupo de pacientes. 1 Uno de los
sntomas ms frecuentes de EICH intestinal es la diarrea. El diagnostico diferencial
especficamente para diarrea incluye infecciones intestinales, mucositis, toxicidad de los
medicamentos utilizados en la etapa de acondicionamiento y la EICH intestinal, entre otros.
La enfermedad de injerto contra husped es un trastorno inmunolgico asociado al trasplante e
inmunosupresin, que afecta a muchos rganos, incluyendo el tracto gastrointestinal, el hgado, la
piel y los pulmones. Para su correcto diagnostico requiere la sntesis de datos clnicos, laboratorio
y principalmente los hallazgos histopatolgicos.2
En una publicacin de datos nacionales en ao 2006, EICH en la UTMO HLCM/PINDA se
encontr una incidencia de 78% en su forma aguda y 37% en su forma crnica y siendo la
principal causa de morbilidad despus de un trasplante. 3
La EICH se clasifica en aguda o crnica segn caractersticas clnicas y de laboratorio,
habitualmente la forma aguda se manifiesta antes de los 100 das post trasplante y puede
comprometer el tubo digestivo, el hgado y la piel; la forma crnica se manifiesta ms tardamente
y puede comprometer cualquier tejido. 4La gravedad de la forma aguda se determina por el
compromiso de los tres rganos blanco y se clasifica en 4 grados (leve a severo) segn
parmetros clnicos y de laboratorio.5
En el tubo digestivo los lugares habitualmente comprometidos son estmago, duodeno y colon
principalmente en recto sigmoides, la ubicacin esofgica es inhabitual. 4
La importancia de un diagnstico temprano y exacto se debe a los diferentes enfoques
teraputicos, el resultado y el pronstico. El gold estndar para el diagnstico de EICH intestinal
es la histologa con la demostracin de apoptosis intra criptal en las clulas intestinales. 6 Para
poder obtener muestras de tejido, se requiere realizar procedimientos endoscpicos, que a veces
produce resultados no especficos y son procedimientos invasivos y no exentos de riesgos,
especialmente en este grupo de pacientes. Desafortunadamente hasta el momento, no hay
ninguna prueba no invasiva especfica disponible para el diagnostico de EICH intestinal.
La literatura ha demostrado en poblacin adulta que niveles elevados de CF puede ser
considerada como un marcador sensible de EICH digestivo en pacientes trasplantados 7, dado su
habilidad de distinguir la presencia de diarrea asociada a inflamacin colonica, de otras causas de
diarrea como infecciones, mucositis, etc.8
La Calprotectina Fecal (CF) es una protena que tiene 2 subunidades, cada una de las cuales
forman parte de la familia S100 de protenas y comprende aproximadamente la mitad de la
protena del citosol de las clulas inflamatorias, especialmente granulocitos.
Representa la mitad del citosol de los neutrofilos y tambin est presente en macrfagos. pero
parece noestar presenteen linfocitos.8 CF puede ser secretada extracelularmente en forma
soluble, pero ms comnmente se libera como consecuencia de la destruccin de la clula o

clulas epiteliales de la mucosa. Por lo tanto, mayor desprendimiento de clulas epiteliales podra
contribuir el aumento de los niveles encontrado en las heces.
Esta protena, fue inicialmente introducida en la prctica clnica para el diagnostico diferencial
entre trastornos funcionales y desordenes con inflamacin de la mucosa, como las enfermedades
inflamatorias en adultos y posteriormente tambin en nios. Tambin se ha utilizado como
marcador de rechazo en pacientes adultos trasplantados de intestino. 6,9,10
En adultos con EICH se ha reportado que niveles de CF sobre 250 mg/kg, tendra una sensibilidad
de 80% y especificidad de 90%. Niveles bajo 100 mg/kg tendran valor predictivo negativo cercano
a 100% y valores sobre 450 mg/kg un valor predictivo positivo de 100%. 6En nios no existen
reportes de uso de CF en pacientes con TPH alognico.
Este examen es no invasivo de fcil recoleccin en muestra nica de heces y por lo tanto podra
ser un marcador para identificar a aquellos pacientes que si requieren exmenes invasivos para
confirmacin de EICH intestinal.
Cul es la utilidad de Calprotectina Fecal en el diagnostico de EICH intestinalconfirmado por
histologa en pacientes peditricos que evolucionan con diarrea luego de TPH alognico?
Bibliografa:
1.- Barriga C., F et al.Trasplante de mdula sea en pacientes peditricos. Rev. chil. pediatr. [Online]. 1999,
vol.70, n.3 [citado 2013-10-25], pp. 194-200.
2.- Ferrara J, Levine J, Reddy P, Holler E.: Graft versus Host Disease. Lancet 2009, vol 373(9674):1550-1561
3.- Palma J, Mosso C, Paris C, Campbell M, Tong X, King A, Carrion F, Rivera GK.: Establishment of a
pediatric HSCT program in a public hospital in Chile. Pediatr Blood Cancer. 2006 Jun;46(7):803-10.
4. -Pindala J.: Graft-vs-host disease following allogeneic hematopoietic cell transplantation. Cancer Control.
2011 Oct; 18(4):268-76.
5. -Fang Xu C, et col: Endoscopic diagnosis of gastrointestinal graft-versus-host Disease. World J
Gastroenterol 2008 April 14; 14(14): 2262-2267
6.- Bastos Oreiro M, Castilla-Llorente C, AL de la Gua, Van Domselaar M, J Nieto, Rodriguez A, Gallardo D,
Canales M: Fecal calprotectin in allogeneic stem cell transplantation for the diagnosis of acute intestinal graft
versus host disease. Bone Marrow Transplantation 2012; 47 (9): 1241-1242
7.- Rodriguez-Otero P, Porcher P, Peffault de Latour R, Contreras M, Bouhnik Y, Xhaard A,Andreoli A, Ribaud
P, Kapel N, Janin A, Soci G, Robin M.: Fecal calprotectin and alpha-1 antitrypsin predict severity and
response to corticosteroids in gastrointestinal graft-versus-host disease. Blood 2012; 119(24):5909-5917.
8.- Chiusolo P, Metafuni E, Giammarco S, Bellesi S, Piccirillo N, Fanali C, Castagnola M, Zuppi C, De Michele
T, Leone G, Sica S: Role of fecal calprotectin as biomarker of gastrointestinal GVHD after allogeneic stem cell
transplantation. Blood 2012; 120(22):4443-4.
9.- Sudan D, Vargas L, Sun Y, Bok L, Dijkstra G, Langnas A.: Calprotectin: a novel noninvasive marker for
intestinal allograft monitoring.. Ann Surg. 2007; 246(2):311-5.
10.- Sidler MA, Leach ST, Day AS.: Fecal S100A12 and fecal calprotectin as noninvasive markers for
inflammatory bowel disease in children. Inflamm Bowel Dis. 2008; 14(3):359-66.
11. -McDonald GB, Sale GE. The human gastrointestinal tract after allogeneic marrow transplantation. In: Sale
GI,Shulman HM, editors. The Pathology of Bone Marrow Transplantation. New York: Masson; 1984. p. 83.

7. HIPTESIS DE TRABAJO

Valores de CF mayores de 450 mg/kg concuerdan en un 80% con EICH intestinal confirmado por
histologa en pacientes peditricos con TPH alognico.

8. OBJETIVOS DEL TRABAJO

A.- OBJETIVO GENERAL

Determinar utilidad de Calprotectina Fecal en la sospecha de EICH intestinal confirmado por

histologa en pacientes peditricos que evolucionan con diarrea luego de TPH alognico.

B.- OBJETIVOS ESPECIFICOS

Describir hallazgos clnicos y analticos en pacientes peditricos sometidos a TPH alognico

que evolucionan con diarrea y

desarrollan EICH comparado con pacientes peditricos

sometidos a TPH alognico que evolucionan con diarrea y no desarrollan EICH confirmada por
histologa.

Relacionar valores de CF con grados histolgicos de EICH y en ausencia de EICH en

pacientes con TPH alognico que evolucionen con diarrea.

Determinar el punto de corte de valores de CF en pacientes con EICH y sin EICH confirmados
por histologa segn curva ROC.

9. MATERIALES/PACIENTES y MTODO
1. Tipo y diseo de estudio
Tipo:
Prueba Diagnostica.
Diseo:
Estudio Observacional, Analtico transversal, no aleatorio, Unicentrico, abierto
Temporalidad: Transversal
Componentes:
- Prueba dg de comparacin: calprotectina fecal y Gold Standard (Histologa).
- Reporte de rendimiento de las pruebas evaluadas: sensibilidad, especificidad, curva ROC.
- Como prueba de screening: es rpida, de bajo costo, fcil de utilizar y de alta sensibilidad.
- Poblacin de estudio: Pacientes peditricos sometidos a TPH alognico con sospecha EICH
intestinal, casos consecutivos durante 2 aos
- Duracin: 2 aos.
2. Poblacin y lugar de estudio:
Poblacin: Pacientes peditricos entre 1 y 15 aos sometidos a TPH alognico que evolucionan
con diarrea y en cuyo diagnostico se sospecha EICH y son derivados a estudio
histolgico por endoscopia.
Lugar:
Unidad de TPH y Unidad Endoscopa. Hospital Luis Calvo Mackenna. Santiago Chile
3. Criterios exclusin/inclusin:
Criterios de Inclusin:
- Pacientes peditricos entre 1 y 15 aos sometidos a TPH alognico que evolucionan con
diarrea que son derivados a la Unidad de endoscopia con sospecha de EICH intestinal a
los cuales se les realiza endoscopia digestiva alta y/o baja en Hospital Luis Calvo
Mackenna.
- Firma consentimiento informado ( y asentimiento en mayores de 12 aos)
Criterios de Exclusin:
- Pacientes peditricos entre 1 a 15 aos sometidos a TPH alognico que son derivados a
la Unidad de endoscopia a los cuales se les realiza endoscopia digestiva alta y/o baja
cuyo diagnostico de derivacin es diferente a EICH en Hospital Luis Calvo Mackenna.
- Pacientes sometidos a TPH autlogos.
- Pacientes que no acepten participar.
- Pacientes con registros incompletos o muestras insuficientes para anlisis histolgico
4. Variables
Variables:
X diagnostica y ?
X=
Clnica sugerente de EICH (diarrea)
Pruebas diagnosticas : calprotectina fecal histologa intestinal
Y=

EICH intestinal confirmado. Rendimiento de calprotectina (sensibilidad, espcificidad y curva

ROC) frente a diagnostico confirmado de EICH (gold estndar = histologa)

Variables modificadoras: Edad, sexo, tipo TPH, estado nutricional, infecciones concomitantes,
infeccin por Citomegalovirus intestinal, uso antibiticos (tratamiento), tipo de tratamiento,
comorbilidades.

Mtodo medicin o unidades medidas:

-

Calprotectina fecal valores segn estandarizacin del fabricante. Se solicitara muestra

antes de 48 horas iniciada la diarrea y se congelara a -80C hasta su determinacin
utilizando kit ELISA comercial (Calprest, Eurospital SpA, Trieste, Italy (rango referencia: 0
50mg/kg).6 Puede ser valor dicotmico > 500 (+) y < 500 (-) segn determinacin curva

ROC.
Determinacin validez ( sensibilidad, especificidad) y seguridad ( VPP, VPN)
EICH intestinal valor dicotmico (grados de EICH 1 a 4 segn clasificacin histolgica
Donald y Sale)11 y EICH + / EICH .

5. Maniobra del estudio (Anexo 1)

6. Sesgos y control
Tipos:
-

Sesgo de seleccin:
Solo seleccin pacientes consecutivos derivados por sospecha de EICH a endoscopia
No es muestra aleatoria

Sesgo informacin
Mtodo cuantificacin calprotectina (ELISA)
Operador Endoscopa
Operador de estudio histopatolgico

Sesgo de Confusin
Sntomas clnicos inespecficos (diarrea)

Control Sesgos:
-

Seleccin:

Criterios inclusin estrictos

- Informacin:
Estandarizacin de curva de ELISA, utilizacin del mismo equipo.
Anlisis de CF segn especificaciones del fabricante
Personal que procesa CF es ciego a la histologa y sntomas clnicos.
El endoscopista y Anatomo patlogo son ciegos al resultado de la CF.
Solo 1 operador (el mismo endosocpista realiza todas las endoscopias) y el
mismo patlogo revisa y clasifica muestras histolgicas (tcnica
enmascaramiento = ciego a terceros).
-

Confusin:

Anlisis con Estratificacin por variables modificadoras.

10. DEFINICIONES OPERACIONALES

TPH: Trasplante de Precursores Hematopoyeticos. Es la reconstitucion hematopoyetica

parcial o total dada por la Infusion endovenosa de celulas progenitoras madres del sistema
hematopoyetico provenientes de la medula osea, sangre periferica o sangre de cordon
umbilical.
TPH Alogenicos : indica quereceptor y donante son distintos individuos

EICH: enfermedad injerto contra husped. Complicacion frecuente post TPH, mediada por
linfocitos T inmunocompententes del injerto. Se reconocen EICH aguda y cronica,
tradicionalmente se ha utilizado la temporalidad para definir una u otra, siendo los 100 dias
el corte establecido
EICH Agudo: se presenta en los primeros 100 dias post TPH, se caracteriza por
compromiso en grado variable en piel (eritema maculo- papular, prurito y en fases grves
bulas y descamacion), higado ( hiperbilirrubinemia, ictericia colestasica) y tubo digestivo
(diarrea, dolor, ileo, anorexia). La graduacion se ha establecido con score combinando los
tres sistemas involucrados. Tratamiento de primera linea se basa en corticoides.
Calprotectina Fecal: reactante de fase aguda, corresponde a una proteina estable que
se encuentra en el citoplasma de los polimorfonucleares y monocitos. Se eleva frente a
procesos inflamatorios intestinales. Es resistente a la degradacion proteolitica de las heces
lo que permite que sea detectada en ellas incluso hasta 5 dias a temperatura ambiental.

11. ANLISIS ESTADSTICO

-

Diseo: Muestreo no probabilstico, por conveniencia o cuotas.

Clculo Tamao muestral: Se tiene un patrn de oro robusto y se quieren conocer las
caractersticas operativas de una nueva prueba, contrastando sus resultados con ese patrn de oro
con 10 individuos en cada casilla marginal de la tabla de 2x2.
Se reclutara a todos los pacientes peditricos consecutivos durante 2 aos sometidos a TPH que
desarrollan diarrea a los cuales se les solicita endoscopa digestiva alta o baja para estudio de
EICH. N estimado segn nmero de trasplantes (TPH) anuales (12) y frecuencia de EICH (70%)
aproximadamente 14 pacientes por rama.

CALPROTECTINA
FECAL
HISTOLOGIA

SI

NO

TOTAL

R=7

S =7

14

T=7

U=7

14

14

14

28 (N PARES)

Sensibilidad Esperada:

80% (igual a GS)

Especificidad Esperada:

90% (Igual GS)

Razn no enfermos/ enfermos:

1 (simtrico)

Intervalo confianza:

95%

Si se calcula por formula;

-

Prueba de referencia:
Nueva prueba :

sensibilidad 80 %
sensibilidad 85%

H0= Sensibilidad A = Sensibilidad B

Formula:

Reemplazando los valores en la frmula:

1 =0,80
2= 0,85
= 0,85-0,80 = 0,05
Z 1-/2 = 0,975 (error tipo 1 estandarizado 5%)
Z1-, con potencia 80% = 0,84162 (error tipo 2 estandarizado 20%)
Resultado = n = 13.9 (14)
- Anlisis de resultados

Estadstica descriptiva del grupo en estudio (describir muestra). Caractersticas

demogrficas / Variables.
Prueba diagnstica (cuantitativa = calprotectina fecal)

a.

Cualitativas

nominal : sexo diagnostico oncolgico tipo TPH - estado nutricional

(eutrofia/sobrepeso/obesidad/desnutricin) sntomas (dolor abdominal, nauseas, vmitos,

diarrea, sangrado) - infeccin Citomegalovirus intestinal por Reaccin polimerasa en
cadena (si/no), uso antibitico (si/no), resultado exmenes deposiciones (Parasitolgico
seriado deposiciones, estudios virus en deposiciones por reaccin polimerasa en cadena,
Toxina clostridium, coprocultivo)
Estadgrafo de centralizacin
-

moda

Estadgrafo de dispersin
-

no

Grficos
b.

Grafico barras /torta

Cualitativas Ordinal : EICH intestinal (1-4)

Estadgrafo de centralizacin
-

Mediana

Estadgrafo de dispersin
-

Rango intercuartil / RIC

Grficos
Puede utilizar grafico de barras o torta

c.

Cuantitativas / continua: edad (meses) , tiempo post trasplante (das), calprotectina fecal
(mg/Kg)
Estadgrafo de centralizacin
-

Tienen distribucin normal

Uso media

Estadgrafo de dispersin
-

Desviacin estndar

Grficos
7.

Uso grafico de cajas o boxplot ( muestra distribucin de prueba diagnstica)

Estadstica analtica
Docimasia hiptesis:

H0= Sensibilidad A = Sensibilidad B

Variables continuas con distribucin normal (medias) usa t student en dos grupos
Variable nominales con distribucin no normal usa U Mann Whitney
P = 0,05
8.

Medidas asociacin
-

Regresin logstica (variables categricas)

Curva ROC describe el comportamiento de la prueba diagnstica (calprotectina)
Encontrar punto de corte y reportar sensibilidad y especificidad de nueva prueba
Reportar VPP y VPN de nueva prueba. LR+ y LR Comparar con Gold estndar que es la histologa
Medicin concordancia inter e intra observador (determinar ndice Kappa) para histologa y
calprotectina.

12. APLICACIONES Y RESULTADOS ESPERADOS:

En pacientes peditricos sometidos a TPH alognico que desarrollan diarrea, se espera demostrar
que valores elevados de CF (mayores a 450 mg/kg), representan un buen marcador de EICH
intestinal comparado conhistologa.
Permitira utilizar este examen no invasivo como screening de aquellos pacientes transplantados
que desarrollen diarrea y estratificar a quienes que requieran ser sometidos a endoscopia digestiva
para toma de biopsias y por lo tanto disminuir los riesgos asociados al procedimiento.
Segn resultados planificar aplicacin futura en procedimientos endoscpicos.

13. COMIT DE ETICA:

Este protocolo ser evaluado por del Comit de tica de la Facultad de Medicina de la Universidad
de Chile y por el director del Hospital Luis Calvo Mackenna.
Los participantes debern firmar consentimiento informado y asentamiento en mayores de 12 aos
previo a iniciar el estudio, (Anexo 3.1, 3.2). Se. Sera el padre o tutor legal quien firme
consentimiento en menores de 12 aos.
Se mantendr confidencialidad de la informacin recolectada, resguardando los datos de forma
que slo tengan acceso los investigadores y slo para efectos de este protocolo en particular.
Los investigadores cuentan con la formacin de tica incluida en el currculum de la carrera de
Medicina.

14. PLAN DE TRABAJO:

Junio
noviembre
2015
Desarrollo
proyecto
Presentacin
Comit tica
Reclutamient
o pacientes
Anlisis de
datos
AnlisisEstad
stico
Redaccinm
anuscribo
Envopublica
cin

14. ANEXOS

Diciembre
2015

Enero 2016
agosto 2017

septiembre
octubre
2017

Noviembre
2017

Diciembre
2017

Enero
2018

Anexo 1:

Maniobra del estudio

Enero 2016 -Noviembre 2017

Anexo 2:

FICHA RECOLECCIN DE DATOS

IDENTIFICACIN PACIENTE
Nombre:__________________________________________________________________
Edad:

_____meses

Ficha Clnica: ________

Fecha Nacimiento: __ /__/__

Sexo:
Masculino ________

Femenino ________

Diagnstico indicacin TPH:

LLA
LMA
LMC
PID

1RC
2RC
3RC
1 FC
> 1 FC

Otros diagnsticos:
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________
TIPO TPH:
Fecha Trasplante: __________
Fuente: M.O______
SCU______ Sangre perifrica_______
MATCH: _______________________________________ (numero)
Acondicionamiento:
Thiotep
Ciclofosfamid
a
ATG
Rituximab
IRCT
Irradiacin Testicular
Irradiacin Cerebral

Epi16

Melfalan

Busulfan

Metrotraxto
profilaxis
SI
SI
SI

ANTECEDENTE DE DURANTE EL AO ANTERIOR.

NO
NO
NO

Tiflitis
EII
Otro

SI
SI

NO
NO

ESTADO NUTRICIONAL AL INGRESO PROGRAMA TRASPLANTE

Peso _______ talla________
EUTROFIA

IMC: ________ Kg/m2

SOBREPESO

OBESIDAD

Z Score: _______
DESNUTRICION

ESTUDIO PRE- TRASPLANTE RECEPTOR

IgM

IgG

CMV
VEB
ADV
VHS-1
VHS-2

ESTUDIO DEPOSICIONES
Coprocultivo
Calprotectina fecal Basal
Parasitolgico Microsporidium
Criptosporidium
PAF

RESULTADO

IDENTIFICACION DONANTE
Fecha nacimiento:________________________
Sexo: Masculino: _________

Femenino:___________

PCR

ESTUDIO PRE-TRASPLANTE:
IgM

IgG

PCR

CMV
VEB
ADV
VHS-I
VHS-2

ESTADO CLINICO EN SOSPECHA EICH

Diagnsticos activos: _________________________________________________
_________________________________________________
_________________________________________________
_________________________________________________
_________________________________________________
_________________________________________________

Fecha Trasplante ___________

Das post- Trasplante: ________

ESTADO NUTRICIONAL:
Peso______ talla______

IMC: ________ Kg/m2

Z Score: _________

EUTROFIA

SOBREPESO

OBESIDAD

EICH
Cutneo
Heptico

SI
SI

GRADO MAXIMO
GRADO MAXIMO

NO
NO

DESNUTRICION

SINTOMAS:
Diarrea

Si

No

Vmitos

Si

No

Nauseas

S
i
Si

No

Si
Si
Si

no
No
No

Dolor
abdominal
HDA
HDB
Ileo
(ausencia
RHA)

No

Color

Volumen
________/da
Volumen
_______/dia

Tasa fecal
________/
da
Frecuencia
________/dia

Frecuencia
______/ dia

Sin
registro
Sin
registro

Requiere
morfina

Otros:
_________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________

TRATAMIENTOS:
INMUNOSUPRESOR:
Ciclosporina
Metilprednisolona
Prednisona
Sirolimus

Dosis/ kg
____________
____________
____________
____________

Tacrolimus
Micofenolato
Rituximab
Otro: _______

____________
____________
____________
____________

Aciclovir
Ganciclovir
Foscarnet
Cidofovir

___________
___________
___________
___________

Caspofungina
Anfotericina B
Voriconazol
Anidulafungina

__________
__________
__________
__________

ANTIVIRAL:

ANTIFUNGICO:

PROFILAXIS FNGICA:
PROFILAXIS ANTIVIRAL:

_________________________
Valganciclovir
Aciclovir

Dosis:____________

Dosis: __________
Dosis: __________

EXMENES DEPOSICIONES
Coprocultivo
Parasitologico
Toxina clostridium
Tincion microsporidium
Tincion criptosporidium
Adenovirus ( IF- PCR)
Rotavirus IF
Calprotectina fecal
Otros

Examen
Hemograma

PCR (mg/L)
Carga viral sangre CMV
Carga viral sangre VEB
Carga viral sangre ADV
Bili / GGT
Amilasa /lipasa
Albumina

Resultado
HTO/ Hb
Leucocitos
RAN
Plaquetas

LDH
T. Protrombina
ESTUDIO IMAGENOLOGICO

ECOGRAFA ABDOMINAL:

Fecha:_____________

Resultado: ____________________________________________________________

TAC ABDOMEN:

Fecha: _____________

Resultado: ____________________________________________________________

ENDOSCOPIA
Tipo ED
EDA ___________ EDB ______________ EDA + EDB ________
LESIN/ LUGAR

Esfago

Estomago

Duodeno

Colon

Sigmoides

Otro

Desprendimient
o
Edema
Eritema
Erosin
Nodularidad
Normal
Sangrado
Ulcera
Otro

HALLAZGOS HISTOLOGIA
Aplanamiento mucosa
Aplanamiento epitelial
Cuerpos Apoptticos
Infiltrado inflamatorio

Destruccin glandular
Perdida Criptas
Abscesos Criptas

IHQ
TIPO/ LUGAR

Esfag
o

CMV
ADV
VHS I-II
VEB

Estomago

Duodeno

Colon

Sigmoides

Otro

ANEXO 3.1
Consentimiento Informado
Rol de Calprotectina fecal en diagnostico de EICH intestinal en nios con
Trasplante precursores hematopoyticosalognico en Hospital Luis Calvo Mackenna
Unidad de Gastroenterologa/Endoscopia/TMO HLCM
Investigadores:
Dra. MPaz Muoz Fernndez. Gastroenterloga Infantil. Hospital Luis Calvo Mackenna - Universidad de Chile. (9-1284418)
Dra. Francisca Benavides Vargas. Becada de Pediatra. Hospital Luis Calvo Mackenna Universidad de Chile. (9-4438995)
Dra. Carla Glvez Veneros. Becada de Pediatra. Hospital Luis Calvo Mackenna Universidad de Chile. (9-8862660)
Dr. Francisco Saitua Doren. Cirujano Infantil. Hospital Luis Calvo Mackenna- Universidad de Chile. (25557880)
Dra. Elisa Alcalde. Anatomo Patlogo. Unidad de Anatoma Patolgica. Hospital Luis Calvo Mackenna ( 22255818)
Dr. Cristian Sotomayor. Unidad Trasplante Medula sea Hospital Luis Calvo Mackenna. (22255998)

Santiago, ______de ______ de 201__

Estimado Papa, Mama o apoderado (a)
Se invita a su hijo(a) a participar de un protocolo de investigacin clnica a cargo de la Unidad de
Gastroenterologa/Endoscopia/ TMO, titulado Utilidad de Calprotectina fecal en diagnostico de
Enfermedad injerto versus Husped intestinal en nios conTrasplante precursores
hematopoyticosalognico en Hospital Luis Calvo Mackenna
La diarrea es un sntoma frecuente luego del trasplantede precursores hematopoyticos y es
causada principalmente por bateras y virus. Ocasionalmente la diarrea puede ser secundaria a
una complicacin del trasplante, la enfermedad injerto versus husped. Para realizar un
diagnostico y tratamiento apropiado se requiere obtener una muestra o biopsia de tejido (intestinal)
el cual se estudia y se determina la presencia de esta condicin. Esta muestra se obtiene por
medio de una endoscopia. Su hijo ser sometido a este procedimiento segn indicacin de su
equipo tratante con este propsito es decir obtener una muestra de tejido para anlisis.
El objetivo de este estudio es realizar una muestra de deposiciones y determinar presencia de una
protena (calprotectina fecal) que seala inflamacin del intestino y comparar este resultado con el
anlisis del tejido.
Para esto se obtendr una muestra nica de deposiciones que ser procesada en el laboratorio de
Bioqumica del hospital y ser eliminada una vez obtenidos los resultados. Se realizara adems
registro de su diagnostico oncolgico, los sntomas y exmenes de laboratorio relacionados a este
episodio. El costo de este segundo examen ser por parte del equipo investigador. La toma de esta
muestra no expondr a su hijo a peligros.
Los beneficios de participar en este estudio son ampliar la posibilidad de deteccin de Enfermedad
Injerto versus husped y aportar en el conocimiento de esta enfermedad para ser utilizada
eventualmente en el diagnostico de otros nios.

Los resultado obtenidos en este estudio le sern informados en forma individual y podrn ser
utilizados slo con fines cientficos. Al final de este estudio, es posible que los resultados sean
presentados en congresos mdicos o publicados en revistas cientficas. En este caso no se darn
a conocer nombres ni otro dato de identidad.
Si usted no desea participar en este estudio solo se realizara el estudio endoscpico y no existir
perjuicio alguno en la salud de su hijo(a), podr mantener sus controles habituales con sus
mdicos tratantes y no se ver afectada la relacin mdico-paciente. Si ya iniciado el estudio Ud.
quisiera retirarse lo podr hacer sin problema y las muestras obtenidas as como los datos
recopilados sern eliminados.
Este estudio cuenta con la aprobacin del Comit de tica de la facultad de Medicina de la
Universidad de Chile, quin garantiza los derechos involucrados en el estudio, y en caso de duda
puede comunicarse al telfono: 22364723 o al correo: ceticacientifico@gmail.com.
Por medio del presente,
Yo,

______________________________________________

autorizo

que

mi

hijo

(a),

RUT___________________,

nombre_____________________________________________,

RUT________________, participe en el protocolo de investigacin titulado Utilidad de

Calprotectina fecal en diagnostico de EICH intestinal en nios conTrasplante precursores
hematopoyticos en Hospital Luis Calvo Mackenna
Declaro que he aceptado voluntariamente participar en este estudio.
Declaro que se me ha explicado ampliamente en que consiste este estudio, que se me ha
informado ampliamente sobre los posibles riesgos, molestias o inconvenientes y beneficios de la
participacin en ste.
Tomo conocimiento que no ser remunerado(a) econmicamente al aceptar participar en este
proyecto.
Si tiene preguntas acerca de esta investigacin mdica puede contactar o llamar a los
investigadores de este estudio.
_____________________________
Nombre, Rut y Firma
Responsable del paciente
_____________________________
Nombre, Rut y Firma Investigador

___________________________
Nombre, Rut y firma Testigo

Anexo 3.2
Asentimiento Informado
Utilidad de Calprotectina fecal en diagnostico de EICH intestinal en nios con
Trasplante precursores hematopoyticos alognico en Hospital Luis Calvo Mackenna
Unidad de Gastroenterologa/Endoscopia/ TMO HLCM
Investigadores:
Dra. M Paz Muoz Fernndez. Gastroenterloga Infantil. Hospital Luis Calvo Mackenna - Universidad de Chile. (9-1284418)
Dra. Francisca Benavides Vargas. Becada de Pediatra. Hospital Luis Calvo Mackenna Universidad de Chile (9-4438995)
Dra. Carla Glvez Veneros. Becada de Pediatra. Hospital Luis Calvo Mackenna Universidad de Chile (9-8862660)
Dr. Francisco Saitua Doren. Cirujano Infantil. Hospital Luis Calvo Mackenna- Universidad de Chile. (25557880)
Dra. Elisa Alcalde. Anatomo Patlogo. Unidad de Anatoma Patolgica. Hospital Lus Calvo Mackenna ( 22255818)
Dr. Cristian Sotomayor. Unidad Trasplante Medula sea Hospital Luis Calvo Mackenna. (22255998)

Santiago, ______de ______ de 201__

Estimado Joven:
Te invitamos a participar en un protocolo de investigacin clnica a cargo de la Unidad

de

Gastroenterologa/Endoscopia/ TMO, titulado Utilidad de Calprotectina fecal en diagnostico de

Enfermedad injerto versus Husped intestinal en nios conTrasplante precursores
hematopoyticos alognico en Hospital Luis Calvo Mackenna
La diarrea es un sntoma frecuente luego del trasplante de precursores hematopoyticos y es
causada principalmente por bateras y virus. Ocasionalmente la diarrea puede ser secundaria a
una complicacin del trasplante, la enfermedad injerto versus husped. Para realizar un
diagnostico y tratamiento apropiado se requiere obtener una muestra o biopsia de tejido (intestinal)
el cual se estudia y se determina la presencia de esta condicin. Esta muestra se obtiene por
medio de una endoscopia. Serssometido a este procedimiento segn indicacin de tu equipo
tratante con este propsito es decir obtener una muestra de tejido para anlisis.
El objetivo de este estudio es realizar una muestra de deposiciones y determinar presencia de una
protena (calprotectina fecal) que seala inflamacin del intestino y comparar este resultado con el
anlisis del tejido.
Para esto se obtendr una muestra nica de deposiciones que ser procesada en el laboratorio de
Bioqumica del hospital y ser eliminada una vez obtenidos los resultados. Se realizara adems
registro de tu diagnostico oncolgico, los sntomas y exmenes de laboratorio relacionados a este
episodio. El costo de este segundo examen ser por parte del equipo investigador. La toma de esta
muestra no te expondr a peligros.
Los beneficios de participar en este estudio son ampliar la posibilidad de deteccin de Enfermedad
Injerto versus husped y aportar en el conocimiento de esta enfermedad para ser utilizada
eventualmente en el diagnostico de otros nios.

Los resultados obtenidos en este estudio te sern informados en forma individual y podrn ser
utilizados slo con fines cientficos. Al final de este estudio, es posible que los resultados sean
presentados en congresos mdicos o publicados en revistas cientficas. En este caso no se darn
a conocer nombres ni otro dato de identidad.
Si no deseas participar en este estudio solo se realizara el estudio endoscpico y no existir
perjuicio alguno en tu salud, podrs mantener tus controles habituales con tus mdicos tratantes y
no se ver afectada la relacin mdico-paciente. Si ya iniciado el estudio t quisieras retirarte, lo
podrs hacer sin problema y las muestras obtenidas as como los datos recopilados sern
eliminadas.
Este estudio cuenta con la aprobacin del Comit de tica Facultad de Medicina Universidad de
Chile, quin garantiza los derechos involucrados en el estudio, y en caso de duda puede
comunicarse al telfono: 22364723 o al correo: ceticacientifico@gmail.com.
Por medio del presente,
Yo,

______________________________________________

RUT___________________,

autorizo mi participacin en el protocolo de investigacin titulado Utilidad de Calprotectina fecal en

diagnostico de EICH intestinal en nios conTrasplante precursores hematopoyticos alognico en
Hospital Luis Calvo Mackenna
Declaro que he aceptado voluntariamente participar en este estudio.
Declaro que se me ha explicado ampliamente en qu consiste este estudio, que se me ha
informado ampliamente sobre los posibles riesgos, molestias o inconvenientes y beneficios de la
participacin en ste.
Tomo conocimiento que no ser remunerado (a) econmicamente al aceptar participar en este
proyecto.
Si tienes preguntas acerca de esta investigacin mdica puedes contactar o llamar a los
investigadores de este estudio.
_____________________________

___________________________

Nombre, Rut y firma del paciente

Nombre, Rut y firma Testigo

______________________________
Nombre, Rut y Firma del investigador