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- RESPIROMETRA
2.1 Evolucin histrica de la respirometra
La utilizacin de respirmetros de distintos tipos, con el objetivo de realizar
medidas directas y continuas de las tasas de consumo de oxgeno de distintas
reacciones biolgicas data desde principios de los 90. Afortunadamente desde esa
poca a la fecha, se ha logrado un perfeccionamiento tanto de los instrumentos y
mecanismos, como la mejor definicin de los conceptos involucrados.
La tentativa ms antigua de utilizar la absorcin directa para medir la
demanda del oxgeno de las aguas residuales fue hecha por Adney en 1890. l
desarroll un tipo de aparato manomtrico de presin constante en el cual l
observaba el ndice de la absorcin del oxgeno por el agua contaminada. A una
presin constante, la disminucin del volumen, debido a la absorcin del oxgeno fue
observada por la distancia que una columna del agua asciende en un tubo vertical,
graduado, en forma de "U" que conectaba dos recipientes, uno llenado parcialmente
de la muestra, y el otro que contena un volumen igual de agua. El aparato entero
fue colocado a una temperatura constante en un bao de agua, y agitado
peridicamente para mantener un exceso del oxgeno disuelto en la muestra.
Aunque Adney encontr que este mtodo era exacto, l concluy que no era
conveniente para el trabajo rutinario.
Rideal y Burgess (1909) utilizaron el aparato, pero lo encontraron
insatisfactorio debido a los escapes que se producan en el curso de la agitacin.
Sugirieron que el mtodo de la dilucin, con la incubacin de las botellas cerradas
con la medida del oxgeno disuelto tanto antes como despus de la incubacin por
un mtodo modificado de Winkler era ms exacto. Este mtodo fue el precursor de
la prueba estndar DBO5. Sierp (1928) y otros revivieron y modificaron el aparato de
aireacin directa de Adney para reducir el dispendioso trabajo del mtodo de la
dilucin y para producir lecturas rpidas, directas y frecuentes.
esterilizada y sinttica.
4. Los
mtodos
respiromtricos
son
capaces
de
producir
resultados
2.2 Fundamentos
El mtodo respiromtrico para la determinacin de la DBO5 se basa en medir
el consumo de oxgeno, o la produccin de CO2, en una botella respiromtrica. Este
objetivo se logra entre otras formas (mtodo manomtrico) midiendo la variacin de
la presin en la botella, mediante un manmetro lo suficientemente sensible. Otros
mtodos respiromtricos propiamente dichos miden la produccin dentro de la
botella de CO2 u otros gases como metano, anhdrido sulfhdrico, etc.
El mtodo respiromtrico se puede usar tambin para medir la DBOU (DBO
carboncea ltima o total, mg/L). Con la respirometra podemos evaluar la actividad
biolgica del lodo activo en su relacin con la biomasa, el nivel de contaminacin del
agua residual, nitrificacin y toxicidad.
El consumo de oxgeno se mide principalmente bajo dos variantes:
A. La velocidad de consumo de oxgeno es igual a la tasa de respiracin o
captura de oxgeno.
(2.1)
2.4 Nitrificacin
La nitrificacin se refiere al proceso en el cual las bacterias nitrificantes
(microorganismos auttrofos: Nitrosomas y Nitrobacter) pasan a oxidar el nitrgeno
+
nitrato NO3 ).
Puede ocurrir una demanda adicional de oxgeno como consecuencia de la
oxidacin biolgica del amonio. Las reacciones simplificadas que definen este
proceso de nitrificacin son:
O2
NO2 + H2O + H+
(2.2)
G= -66,500 cal
NO2
O2
NO3
(2.3)
+ H+
G= -17,500 cal
Ambas reacciones son exergnicas; la primera consiste en la oxidacin del
nitrgeno de -3 a +3; la segunda es una oxidacin de dos electrones de +3 a +5.
Ambos grupos de organismos son auttrofos; es decir, sintetizan todos sus
componentes celulares de carbono (protenas, lpidos, carbohidratos) a partir de CO2
en
carbohidratos
requiere
energa.
En
la
fotosntesis,
dicha
energa
es
proporcionada, respectivamente, por la oxidacin del NH3 y el ion NO2 . Puesto que
los organismos obtienen la energa que requieren para crecer de la oxidacin de
compuestos inorgnicos simples, se denominan quimioauttrofos.
NO3 + H2O + H+
(2.4)
microorganismos despus de absorber el NO3 deben reducirlo hasta NH3 para que
pueda ser asimilado. Esta reduccin ocurre en dos etapas.
La primera etapa es catalizada por la enzima nitrato reductasa que se
encuentra en el citosol de las clulas vegetales y cataliza la siguiente reaccin:
NO3
NADPH + H+
NO2
+ NADP+
(2.5)
H2O
(2.6)
Esta enzima lleva a cabo la reduccin con seis electrones del NO2 en NH3.
Se encuentra en los cloroplastos de las plantas superiores, donde se halla asociada
a la membrana de los tilaciodes; en este sitio, tendra fcil acceso al agente reductor
NADPH producido por la accin de la luz. La nitrito reductasa posee una protena de
hierro hemo siroheme, que probablemente interviene en el proceso de reduccin. El
subtilis, reducen el NO3 en NH3 con otro propsito; utilizan el NO3 como aceptor
-
terminal de electrones en lugar de O2. El NO3 , con su alto potencial de xidoreduccin de 0.96 V a pH 7.0, acepta los electrones liberados durante la oxidacin
-
2.6 Respirmetros
Un respirmetro es un instrumento que consiste en un pequeo reactor
biolgico que sirve para medir velocidades de respiracin aerobia de una poblacin
microbiana en determinadas condiciones. El respirmetro determina la cantidad de
oxgeno consumida por unidad de tiempo y de volumen.
Algunos autores consideran al respirmetro como un sensor, ya que consiste
en una unidad fsica con una entrada de muestra externa y una salida de resultados
(OUR: Oxigen, Uptake,Rate u otros parmetros) obtenida despus de un
procedimiento interno. Por otra parte, y debido a su condicin de reactor biolgico,
los resultados son extremadamente dependientes de las condiciones de trabajo y,
por tanto, puede existir una variabilidad en la salida. Esta variabilidad cuestiona el
hecho de que se considere sensor al respirmetro y obliga a que los resultados de
las respirometras se acompaen de las condiciones de operacin:
2.6.1 Configuraciones
2.6.2 Clasificacin
Se emplean cuatro tipos de respirmetros: manomtrico, electroltico,
volumtrico y de entrada directa. La diferencia entre los respirmetros radica en la
forma como detectan los requerimientos de oxgeno y el mtodo empleado para
suplir esas necesidades de oxgeno. En el respirmetro manomtrico (p.ej.,
respirmetros Gilson y Warburg, precursores de los respirmetros modernos), el
oxgeno tomado se relaciona con un cambio de presin causado por el consumo de
oxgeno a volumen constante mediante el remplazo continuo del oxgeno consumido
por los microorganismos. El remplazo de oxgeno se realiza por medio de una
reaccin de electrlisis en la cual el oxgeno se produce como respuesta a cambios
en la presin. En los respirmetros volumtricos, el consumo de oxgeno se
relaciona con cambios de volumen debido a que el oxgeno se suministra a presin
constante. En respirmetros de entrada directa, el oxgeno puro se suministra por
medio de cambios de presin (Standard Methods, 1995).
se sumergen en un bao
1. Electrodo sensible al
O2
2. Termmetro
3. Cnula
4. Cmara hermtica con
buzo revestido de
tefln
5. Bao trmico
6. Registrador
Respirmetro de Laboratorio-Transportable
Un respirmetro que fcilmente se puede transportar e instalar en laboratorios
de distintas plantas de tratamiento adquiere importantes ventajas cuando se utiliza
como una herramienta de trabajo de una entidad o empresa dedicada al
mantenimiento, reformas, estudios y puesta a punto de varias plantas de
tratamiento.
Respirmetro de Proceso
Entendemos por respirmetro de proceso, aquel que lleva a cabo una serie de
medidas en continuo o en secuencia continua. Este tipo de equipos, normalmente no
pueden ser de naturaleza abierta y, por lo tanto, deben ceirse exclusivamente a los
parmetros para los que el analizador ha sido diseado.
La ventaja evidente de este tipo de analizadores es la facultad de poder medir
en los parmetros en proceso y, de este modo, poder adquirir un criterio de control o
proteccin sin retraso de tiempo.
En los respirmetros de proceso debemos distinguir dos grupos de
analizadores: los respirmetros que miden directamente en el licor-mezcla desde el
propio reactor biolgico (tanque de aireacin) de la planta de tratamiento y los que,
por medio de su propio sistema, realizan una mezcla de lodo con muestra para
poder llevar a cabo las medidas antes de que el agua residual entre en el reactor
biolgico para pasar a formar parte del licor-mezcla.
Las ventajas de los que realizan las medidas directamente desde el licormezcla son las medidas del efecto real y la mayor sencillez de infraestructura para
su instalacin. Existe, no obstante, la posible desventaja de que miden hechos
consumados y en muchas veces, este tipo de sistema de medida, no permite un
tiempo de reaccin suficiente como para formar un criterio de control y proteccin del
sistema.
Los equipos que realizan su propia mezcla y pueden detectar y medir la
contaminacin orgnica o txica mucho antes de que pueda entrar a formar parte del
biolgico obviamente presentan un importante beneficio al poder conceder al usuario
o sistema la ventaja de formar un criterio con tiempo suficiente para tomar medidas
para la proteccin y control del proceso de depuracin.
Estos analizadores, sin embargo, necesitan una mayor infraestructura de
instalacin debido principalmente al hecho de tener que transportar, por medio de
sistemas de bombeo, el lodo y la muestra hasta el equipo.