UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS

UNIDADE ACADMICA CENTRO DE TECNOLOGIA

PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA
MESTRADO

ESTUDO DO PROCESSO DE PRODUO DE BIODIESEL DE

LEO DE COCO CATALISADO ENZIMATICAMENTE

por

LIVIA MARIA DE OLIVEIRA RIBEIRO

Dissertao apresentada Universidade Federal de Alagoas para obteno do

grau de mestre

Macei-AL Maro, 2010.

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ESTUDO DO PROCESSO DE PRODUO DE BIODIESEL DE

LEO DE COCO CATALISADO ENZIMATICAMENTE.

LIVIA MARIA DE OLIVEIRA RIBEIRO

DISSERTAO APRESENTADA AO CURSO DE PSGRADUAO EM ENGENHARIA QUMICA COMO PARTE

DOS REQUISITOS PARA OBTENO DO TTULO DE
MESTRE EM ENGENHARIA QUMICA.

REA DE CONCENTRAO: DESENVOLVIMENTO E PESQUISA DE

PROCESSOS REGIONAIS

LINHA DE PESQUISA: PROCESSOS BIOQUMICOS

ORIENTADORA: Profa. Dra. RENATA MARIA ROSAS GARCIA ALMEIDA

MACEI-AL
2010
ii

Catalogao na fonte
Universidade Federal de Alagoas
Biblioteca Central
Diviso de Tratamento Tcnico
Bibliotecria Responsvel: Helena Cristina Pimentel do Vale
R484e

Ribeiro, Livia Maria de Oliveira.

Estudo do processo de produo de biodiesel de leo de coco catalisado
enzimaticamente / Livia Maria de Oliveira Ribeiro, 2010.
72 f. : il., tabs., grafs.
Orientadora: Renata Maria Rosas Garcia Almeida.
Dissertao (mestrado em Engenharia Qumica) Universidade Federal de
Alagoas. Centro de Tecnologia. Macei, 2010.
Bibliografia: f. 67-72.
1. Biodiesel. 2. leo de coco. 3. Transesterificao enzimtica. I. Ttulo.
CDU: 662.756.3

iii

iv

Aos meus pais, Amadeu e Zelda, meus maiores

incentivadores, por toda dedicao e amor.

AGRADECIMENTOS

A DEUS por tudo de maravilhoso que ele proporciona em minha vida e por
mais uma batalha vencida;
A minha irm, Kalina, por ter me ajudado, mediante suborno, nas horas de
cansao e nervosismo;
Ao meu noivo, Diego, pela ateno, pelo amor e, principalmente, pela
pacincia;
A professora Renata pela orientao e por ter acreditado no meu trabalho;
Ao professor Joo Incio pela pacicia incansvel e apoio dado em todos os
momentos;
Ao professor Wagner por ter me ajudado a usar o softawe Statistica 7.0;
A professora Luciana por ter aceitado participar desta banca;
Ao Ramiro por sempre acreditar em mim e estar sempre pronto para ajudar;
A minha amiga Albanise, por dividir comigo os momentos de agonia na reta
final do mestrado;
Ao pessoal do LTBA, em especial a Margarete, por sempre ter uma palavra de
conforto;
A SOCOCO Indstria Alimentcia de coco pela gentileza de fornecer o leo
de coco utilizado nessa pesquisa;
FAPEAL Fundao de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas, pelo
suporte financeiro, imprescindvel para a realizao deste meu objetivo profissional;

A todos que, de alguma forma, me ajudaram e me apoiaram para a realizao

de mais uma etapa da minha vida.

vi

RESUMO
Atualmente a procura por combustveis renovveis tem aumentado muito. Assim
sendo, o biodiesel surge como alternativa em relao ao petrleo e seus derivados, j que sua
produo mais barata e a emisso de poluentes diminui muito, alm de ser uma fonte de
energia renovvel. A utilizao dos leos vegetais no Brasil tem um futuro promissor, uma vez
que o Brasil um dos maiores produtores mundiais de soja e possui grandes perspectivas para
a produo de outras sementes. Entre as vrias oleaginosas pode-se destacar as sementes
oleaginosas de soja, amendoim, coco, girassol, milho, mamona e algodo. O objetivo deste
trabalho foi o estudo das variveis que interferem na reao de transesterificao do leo de
coco para produo de biodiesel catalisada por lipase imobilizadas. As reaes de
transesterificao foram conduzidas em erlenmeyers fechados, mantendo-se a agitao fixa
em 200rpm e catalisadas pela lipase comercial imobilizada Novozym 435, os experimentos
4

foram realizados de acordo com um planejamento experimental 2 , sendo as variveis

estudadas: temperatura (40 60C), concentrao de enzimas (3 7%), razo leo:etanol (1:6
1:10) e foi variado o tipo de lcool utilizado (metanol etanol). O melhor resultado, 80,5% de
converso, foi obtido na condio de maior temperatura, maior razo molar, maior
concentrao de enzimas e etanol como lcool. Os rendimentos obtidos mostraram que os
resultados com etanol foram mais significativos quando comparado ao metanol.

vii

ABSTRACT
Nowadays the search for renewable fuel has increased a lot. That way, the biodiesel
emerges as an alternative in relation to the petroleum and its derivatives since its production is
cheaper and the emission of pollutant decreases very much, besides being a source of
renewable energy. The utilization of vegetable oil in Brazil has a future, once that Brazil is one
of the biggest worldwide producers of soybean and has big expectations for the production of
other seeds. Among the many oil derivates one can highlight the seeds of soybean, peanut,
coconut, corn, sunflower and cotton. The objective of this work was the study of variables that
interfere in the transesterification of coconut oil in the production of biodiesel in catalytic
systems of immobilizes enzymes. The transesterification reactions were conducted in closed
erlenmeyers, maintaining the stable agitation in 200rpm and catalyzed by commercial lipase
Novozym 435. The experiment were accomplished according to a experimental planning 2

where the variables studied were temperature (40-60C), enzyme concentration (3-7%) reason
oil-ethanol (1:6-1:10) and was varied the alcohol type used (methanol-ethanol). The best result,
80,5% of conversion, was obtained in the condition of highest temperature, higher molar
reason, higher enzyme concentration and ethanol as alcohol. The income obtained showed that
the results with ethanol were more significant when compared to methanol.

viii

SUMRIO
LISTA DE FIGURAS

XI

LISTA DE TABELAS

XII

1. INTRODUO

2. REVISO BIBLIOGRFICA

2.1. BIODIESEL

2.1.1. MERCADO DE BIODIESEL NO BRASIL E NO MUNDO

2.1.2. VANTAGENS DO BIODIESEL NO BRASIL

2.2. MATRIAS PRIMAS PARA OBTENO DE BIODIESEL

2.3. MTODOS PARA OBTENO DO BIODIESEL

2.3.1. CRAQUEAMENTO

2.3.2. ESTERIFICAO

2.3.3. TRANSESTERIFICAO

10

2.4. LEO DE COCO

12

2.5. ENZIMAS

13

2.6. LIPASES

15

2.7. IMOBILIZAO DE ENZIMAS

16

2.8. TRANSESTERIFICAO ENZIMTICA

18

3. OBJETIVOS

21

3.1. OBJETIVO GERAL

21

3.2. OBJETIVOS ESPECFICOS

21

4. METODOLOGIA

22

4.1. AMOSTRA

22

4.2. PR TRATAMENTO DO LEO DE COCO

22

4.3. CARACTERIZAO DO LEO DE COCO

22

4.3.1. NDICE DE ACIDEZ

22

4.3.2. NDICE DE IODO PELO MTODO DE WIJS

24

4.3.3. NDICE DE SAPONIFICAO

25

4.3.4. NDICE DE REFRAO

26

4.3.5. VISCOSIDADE

27

4.3.6. MASSA ESPECFICA

28

4.3.7. UMIDADE

29

4.3.8. PONTO DE CONGELAMENTO

30

4.3.9. COMPOSIO EM CIDOS GRAXOS

31

4.4. ENZIMAS UTILIZADAS COMO CATALISADORES

33

ix

4.5. DETERMINAO DA ATIVIDADE LIPOLTICA

33

4.6. REAES DE TRANSESTERIFICAO ENZIMTICA

34

4.7. CARACTERIZAO DOS PRODUTOS OBTIDOS A PARTIR DAS REAES DE

35

TRANSESTERIFICAO
4.8. PLANEJAMENTO EXPERIMENTAL PARA A PRODUO DO BIODIESEL DE

35

COCO
5. RESULTADOS E DISCUSSES

38

5.1. AMOSTRAS

38

5.2. PR TRATAMENTO DO LEO DE COCO

38

5.3. CARACTERIZAO DO LEO DE COCO

38

5.4. DETERMINAO DA ATIVIDADE LIPOLTICA

40

5.5. REAES DE TRANSESTERIFICAO

41

6. CONCLUSO

51

7. SUGESTES PARA TRABALHOS ANTERIORES

52

8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

53

LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Percentual de leo de algumas oleaginosas.

Figura 2. Craqueamento trmico ou pirlise.
Figura 3. Reao de esterificao.
Figura 4. Alcolise.
Figura 5. Transesterificao de triglicerdeos: seqncia de trs reaes
consecutivas e reversveis.
Figura 6. Reao de saponificao.
Figura 7. Mtodos para imobilizao de enzimas.
Figura 8. Refratmetro utilizado na determinao do ndice de refrao.
Figura 9. Sistema para determinao da viscosidade.
Figura 10. Sistema para determinao da massa especfica.
Figura 11. Esquema do procedimento experimental para a reao de
transesterificao enzimtica.
Figura 12. Pr tratamento do leo de coco.
Figura 13. Estudo da atividade enzimtica em funo da temperatura.
Figura 14. Confiana entre o modelo e os dados experimentais com 95% de
confiana.
Figura 15. Distribuio dos resduos.
Figura 16. Diagrama de Pareto com nvel de significncia de 5%.
Figura 17. Influncia da razo molar, tipo de lcool e temperatura na varivel de
resposta.
Figura 18. Influncia da razo molar, tipo de lcool e concentrao de enzimas na
varivel de resposta.
Figura 19. Influncia do tipo de lcool, concentrao de enzimas e temperatura na
varivel de resposta.
Figura 20. Superfcie de resposta para o rendimento em biodiesel em funo da razo
molar e temperatura.

xi

LISTA DE TABELAS

Tabela 1. Identificao das matrias primas para produo de biodiesel

Tabela 2. rea plantada, colhida e produo de frutos - 2000
Tabela 3. Principais classes de enzimas
Tabela 4. Vantagens e desvantagens dos processos qumico e enzimtico na
produo de biodiesel
Tabela 5. Alguns exemplos de transesterificao encontrados na literatura
Tabela 6. cidos graxos saturados presentes nos leos e gorduras
Tabela 7. cidos graxos insaturados presentes nos leos e gorduras
Tabela 8. Principais tcnicas utilizadas para planejamento experimental
Tabela 9. Valores extremos e intermedirios das variveis
Tabela 10. Quadro de experimentos
Tabela 11. Propriedades fsico-qumicas do leo de coco
Tabela 12. Composio em cidos graxos do leo de coco
Tabela 13. Rendimentos obtidos na transesterificao do leo de coco
Tabela 14. Coeficientes de regresso para o rendimento em biodiesel
Tabela 15. Anlise de varincia (ANOVA)

xii

INTRODUO
As crescentes preocupaes econmicas e com o meio ambiente, alm das previses

que as reservas de energia no renovveis cheguem ao fim nos prximos 50 anos tem
incentivado a busca de novas fontes de energia tais como, energia solar, energia elica e os
biocombustveis.
No Brasil, 39,7% da energia gerada proveniente da queima de combustveis
derivados do refino do petrleo. bem conhecido que o setor petroqumico responsvel por
grandes danos ambientais [MME, 2005]. A extrao, transporte e os processos industriais de
transformao do petrleo so responsveis por derramamentos de leo cru, pela gerao de
resduos e efluentes txicos de difcil degradabilidade e pela contaminao dos lenis
freticos por gasolina e seus aditivos. Alm disso, a queima de combustveis derivados do
petrleo resulta no acmulo de dixido de carbono na atmosfera, intensificando o efeito estufa.
Finalmente, as atividades industriais baseadas no petrleo no so auto-sustentveis e seus
produtos no tem como caracterstica principal a biodegradabilidade.
Atualmente a procura por combustveis renovveis tem aumentado muito. Assim
sendo, o biodiesel surge como alternativa em relao ao petrleo e seus derivados, j que sua
produo mais barata e a emisso de poluentes diminui muito, alm de ser uma fonte de
energia renovvel.
As matrias primas para a produo de biodiesel so: leos vegetais, gordura animal e
leos e gorduras residuais. leos vegetais e gorduras so basicamente compostos de
triglicerdeos, steres de glicerol e cidos graxos. Das vrias metodologias descritas na
literatura para obteno do biodiesel, a transesterificao de leos vegetais atualmente o
mtodo de escolha, principalmente porque as caractersticas fsicas dos steres de cidos
graxos so muito prximas daquelas do diesel [GERIS, et al., 2007].
Transesterificao um processo de converso de triglicerdeos a steres de cidos
graxos e glicerina, atravs da reao com lcoois, podendo ter a presena de um cido, uma
base ou uma enzima, como catalisadores. Geralmente, para o caso da produo de biodiesel,
os triglicerdeos usados so gorduras ou leos animais e vegetais, os lcoois so etlicos ou
metlicos, as bases so hidrxido de sdio ou potssio, o cido o sulfrico e a enzima a
lipase, gerando como produto final os steres metlicos ou etlicos (biodiesel) e a glicerina
[WOLFF, et al., 2008].
A metodologia comercial de obteno de biodiesel utiliza frequentemente meios
alcalinos para a transesterificao do leo ou gordura, na presena de um lcool, produzindo
steres metlicos de cidos graxos e glicerol. Entretanto, esta metodologia apresenta alguns
inconvenientes, como a dificuldade na recuperao do glicerol, o uso de catalisador alcalino
que permanece no meio o tratamento posterior dos efluentes alcalinos, a natureza fortemente
energtica do processo, a interferncia dos cidos graxos livres e a presena de gua na
reao [www.biodieselbr.com].

Recentemente, foi observado que a catlise enzimtica sintetiza especificamente

steres alqulicos, permite a recuperao simples do glicerol, a transesterificao de
glicerdeos com alto contedo de cidos graxos, a transesterificao total dos cidos graxos
livres, a reutilizao do catalisador quando usada a lipase imobilizada, e o uso de condies
brandas no processo, tornando-se uma alternativa bastante atraente.

REVISO BIBLIOGRFICA

2.1

BIODIESEL
Aps a crise do petrleo iniciada no final de 1973, todos os pases importadores de

petrleo foram prejudicados, principalmente aqueles em desenvolvimento como o Brasil. Essa

crise causou uma necessidade de se obter novas fontes alternativas de energia. Uma das
alternativas colocada em questo foi a utilizao de leo vegetal em substituio ao leo
diesel, pois estes leos poluem menos e tm o poder calorfico bastante elevado. No Brasil, a
opo para enfrentar esta crise se iniciou com a criao do Programa Nacional do lcool
(PROALCOOL), porm os veculos de cunho comercial, como caminhes, ainda continuaram a
utilizar o diesel como combustvel [ARAUJO et al., 2009].
Nos dias atuais, a procura por combustveis renovveis tem sido bastante intensificada,
de forma que o biodiesel surge como alternativa em relao aos derivados de petrleo, visando
reduzir emisses de poluentes na atmosfera.
Biodiesel o nome de um combustvel de queima limpa, produzido de recursos
domsticos renovveis. O biodiesel no contem petrleo, mas pode ser adicionado a ele
formando uma mistura [ZHANG et al., 2003]. Pode ser usado em um motor de ignio a
compresso (diesel) sem necessidade de modificao. O biodiesel simples de ser usado,
biodegradvel, no txico e essencialmente livre de compostos sulfurados e aromticos.
Existem as seguintes definies para biodiesel [www.biodiesel.com]:
Definio geral
Combustvel natural usado em motores diesel, produzido atravs de fontes renovveis,
que atende as especificaes da Agncia Nacional do Petrleo - ANP.
Definio estendida
Combustvel renovvel derivado de leos vegetais, como girassol, mamona, soja,
babau e demais oleaginosas, ou de gorduras animais, usado em motores a diesel, em
qualquer concentrao de mistura com o diesel. Produzido atravs de um processo qumico
que remove a glicerina do leo.
Definio tcnica
Combustvel composto de mono-alquilesteres de cidos graxos de cadeia longa,
derivados de leos vegetais ou de gorduras animais e designado B100.
Definio da legislao brasileira
Biocombustvel derivado de biomassa renovvel para uso em motores a combusto
interna com ignio por compresso ou, conforme regulamento, para gerao de outro tipo de
energia, que possa substituir parcial ou totalmente combustveis de origem fssil.
Para se produzir biodiesel, o leo retirado das plantas misturado com lcool (etanol
ou metanol) e depois estimulado por um catalisador. Este processo qumico denominado de
transesterificao, onde a glicerina separada da gordura ou do leol. O processo gera dois
produtos, steres (o nome qumico do biodiesel) e glicerina (produto valorizado no mercado de
sabes). Depois, o leo separado da glicerina e filtrado.

O biodiesel de qualidade deve ser produzido seguindo especificaes industriais

restritas. Em nvel internacional tem-se a ASTM D6751. Nos EUA, o biodiesel o nico
combustvel alternativo a obter total aprovao no Clean Air Act de 1990 e autorizado pela
Agencia Ambiental Americana (EPA) para venda e distribuio [SALVADOR et al.,2009] .
O biodiesel pode ser usado puro ou em mistura com o leo diesel em qualquer
proporo. Tem aplicao singular quando em mistura com o leo diesel de ultra baixo teor de
enxofre, porque confere a este melhores caractersticas de lubricidade.
Mundialmente passou-se a adotar uma nomenclatura bastante apropriada para
identificar a concentrao do biodiesel na mistura. No caso de misturas a concentrao de
biodiesel informada atravs de nomenclatura especfica, definida como BX, onde X refere-se
percentagem em volume do biodiesel. Assim, B2, B5 e B20 referem-se, respectivamente, aos
combustveis com uma concentrao de 2%, 5% e 20% de biodiesel adicionado ao diesel
[FANGRUI et al., 1999].
At hoje, a produo de energia sempre esteve nas mos das grandes potncias
mundiais. Agora, pela primeira vez na histria, tem-se a possibilidade concreta de que
pequenos produtores e pequenas empresas possam fazer parte desta indstria, inclusive nos
centros urbanos.
A descentralizao da produo de energia, incluindo as pequenas usinas produtoras,
que cumpriram objetivos scio-econmicos de incluso social, desenvolvimento tecnolgico,
diminuio da dependncia energtica, todos importantes para o pas, serve de estmulo para a
produo entre mais produtores e diferentes matrias-primas, contribuindo para tornar o
mercado mais livre e competitivo.
Atravs do seu efeito multiplicador, o biodiesel representar no mercado futuro uma
nova etapa para a agroindstria, por envolver a produo de leos vegetais, lcool e mais os
insumos e co-produtos da produo dos steres.

2.1.1

Mercado de biodiesel no Brasil e no mundo

0

A Lei n 11.097 de 13 de janeiro de 2005 preve que, em 2013, todos os veculos de

transporte de cargas do Brasil sero obrigados a usar o combustvel conhecido como B5, ou
seja, uma composio de 95% de leo diesel e 5% de biodiesel. Para essa adequao, as
mudanas sero graduais. Nos primeiros trs anos, a proporo de biodiesel no leo diesel
ser de 2% em carter experimental, sendo posteriormente ampliada at a obrigao do uso,
em 5%. Essas projees fazem parte do Programa Nacional de Biodiesel, que foi criado
juntamente com a lei.
A quantidade de matria-prima para o biodiesel brasileiro extremamente grande. As
regies mais quentes do pas so propcias para o cultivo de mamona, dend (palma), babau,
amendoim, pinho manso, girassol, algodo, coco e soja. Todos esses frutos podem ser
transformados em biodiesel. Entre as plantas cultivadas no Brasil, o dend e o pinho manso
tm a melhor produtividade de leo por hectare [SALVADOR, 2009].

O dend (tambm conhecido como palma), produz de 3 a 6 toneladas de leo por

hectare cultivado. O pinho manso, 1 a 6 toneladas de leo por hectare. As duas plantas, junto
com a mamona (cuja produtividade de 0,5 a 0,9 t/ha), so as principais alternativas do
programa. O sucesso no s pelo timo desempenho produtivo, mas tambm porque tais
plantas so cultivadas por mdios e pequenos agricultores espalhados pelo pas. Assim,
incentivando a produo do biodiesel, o governo deseja manter as populaes no campo e
aumentar a renda dessas famlias.
Para as contas nacionais, o biodiesel pode ser uma alternativa para diminuir a
dependncia brasileira do leo diesel, j que o pas importa cerca de 10% de todo o leo que
consome o que custa US$ 800 milhes ao ano. E o leo diesel, usado tanto em caminhes
como em carros de passeio, o combustivel mais consumido no pas, registrando 56% do
mercado [SALVADOR et al., 2009].
Com o biodiesel, o Brasil tambm quer gerar dividendos ecolgicos financeiros,
participando mais efetivamente do mercado de certificados de carbono, ou seja, de ttulos
financeiros voltados para a diminuio da emisso de carbono na atmosfera, um dos principais
causadores do efeito estufa.
Entretanto, existem alguns pesquisadores que considera que o biodiesel, assim como o
etanol, pode vir a tornar-se ameaa ambiental, j que o grande aumento de reas cultivadas
forar a diminuio das reservas naturais e provocar possveis modificaes no solo.

2.1.2

Vantagens do biodiesel no Brasil

Estratgicas
o

Biodiesel um substituto do leo diesel, principal combustvel consumido pelo pas

(mais de 36 bilhes de litros em 2002), [www.biodieselbr.com];

Pode gerar a substituio de um combustvel fssil (diesel) por um renovvel

(Biodiesel);

A utilizao do biodiesel reduz a dependncia externa do Brasil em relao ao seu

combustvel de maior consumo (cerca de 20% do leo diesel consumido importado
diretamente como derivado);

O biodiesel pode fortalecer o agronegcio e promover o crescimento regional

sustentado.

Econmicas e Socias
o

O biodiesel um combustvel renovvel, cujo processo produtivo gera um grande

nmero de empregos na rea rural;

A reduo das emisses gasosas com o uso do biodiesel, principalmente nas grandes
cidades, representa significativa melhora para a sade pblica.

Ambientais e Energticas
o

A utilizao do biodiesel representa ganho ambiental significativo, tanto no que se

refere a reduo das emisses, ao uso em motores ciclo diesel, quanto ao balano de
CO2 emitido na queima e absorvido pela biosfera;

A utilizao do biodiesel apresenta reduo de emisses de CO2, reduzindo o efeito

estufa: 1 tonelada de biodiesel significa uma reduo de 2,5 toneladas de CO 2
[PRADO, et al., 2006].

A utilizao do biodiesel apresenta diluio de contaminantes quando usado em

mistura com o leo diesel, como por exemplo, o teor de enxofre.

Tecnolgicas
o

O biodiesel, misturado com o leo diesel, tende a melhorar as caractersticas deste

derivado de petrleo aumenta a lubricidade (importante para o leo diesel de baixo
teor de enxofre), reduz o teor de enxofre e eleva o nmero de cetano.

2.2

MATRIAS PRIMAS PARA OBTENO DO BIODIESEL

A crescente preocupao em relao ao meio ambiente e a rpida diminuio das

reservas de combustveis fsseis no mundo, alm do aumento do preo do petrleo, levaram

explorao de leos vegetais na produo de combustveis alternativos.
As principais origens e obteno dessas matrias primas so descritas na Tabela 1 a
seguir.

Tabela 1. Identificao das matrias primas para produo de biodiesel

Grupo
leos e gorduras animais

Origens

Obteno

Matadouros, frigorficos,

Extrao com gua e vapor

curtumes

leos e gorduras vegetais

leos e residuais de fritura

Agriculturas temporrias e

Extrao mecnica, com

permanentes

solventes e extrao mista

Coces comerciais e

Acumulaes e coletas

industriais
Fonte: SALVADOR, 2009

A utilizao dos leos vegetais no Brasil tem um futuro promissor, uma vez que o Brasil
um dos maiores produtores mundiais de soja e possui grandes perspectivas para a produo
de outras sementes. Entre as vrias oleaginosas que se tm conhecimento na literatura, as que
apresentam um alto teor de leo na semente so favorveis produo de biodiesel. Dentre
estas, pode-se destacar as sementes oleaginosas de soja, amendoim, coco, girassol, milho,
canola (colza), mamona e algodo (Figura 1) [VARGAS et al., 1998].

Figura 1. Percentual de leo de algumas oleaginosas.

Dentre as principais matrias primas para o biodiesel no Brasil, destaca-se o dend ou

palma. O dend se apresenta como uma das mais importantes culturas sob o ponto de vista
de produo de leo, pois atinge o extraordinrio patamar de 5.000 kg de leo por hectare por
ano, ndice este, por exemplo, cerca de 25 vezes maior que o rendimento de produo de leo
da soja. As maiores dificuldades se referem as limitaes de tempo inerentes as culturas
permanentes, pois so requeridos a realizao de investimentos que somente comeam a
retornar cinco anos contados a partir do plantio.
O pinho manso produz o biodiesel mais eficiente do mundo, embora no seja muito
explorado no Brasil. Concentra em seus frutos at 40% de leo, e ocorre espontaneamente em
reas de solos pouco frteis e de clima desfavorvel a maioria das culturas alimentares
tradicionais. O pinho manso pode ser considerado uma das mais promissoras oleaginosas do
sudeste, centro-oeste e nordeste do Brasil.
Dentre as gorduras e leos animais com potencial para produo de biodiesel,
destacam-se o sebo bovino, os leos de peixes, o leo de mocot, a banha de porco, entre
outros. Os leos e gorduras de animais possuem estruturas qumicas semelhantes as dos
leos vegetais, sendo moleculas triglicerdicas de cidos graxos. As diferenas esto nos tipos
e distribuies dos cidos graxos combinados com o glicerol.
Tambm so surpreendentes os volumes ofertados de sebo de animais, especialmente
de bovinos, nos pases produtores de carnes e couros, como o caso do Brasil. Tais matrias
primas so ofertadas, em quantidades substantivas, pelos curtumes e pelos abatedouros de
animais de mdio e grande porte. O sebo bovino a matria prima mais barata dentre as
disponveis atualmente para a produo de biodiesel no Brasil.

Os leos e gorduras residuais, resultantes de processamento domstico, comercial e

industrial tambm podem ser utilizados como matria prima. As possveis fontes de leos e
gorduras residuais so: as lanchonetes, cozinhas industriais, comerciais e domsticas, onde
so praticadas as frituras de alimentos, indstrias nas quais processam frituras de produtos
alimenticios, os esgotos municipais, onde a nata sobrenadante rica em materia graxa,
possvel de extrair leos e gorduras, e guas residuais de processos de certas indstrias
alimentcias, como as indstrias de pescados, de couro, etc.

2.3

MTODOS PARA OBTENO DO BIODIESEL

O biodiesel, um combustvel biodegradvel derivado de fontes renovveis, pode ser

obtido por diferentes processos tais como: craqueamento, esterificao e transesterificao.

2.3.1 Craqueamento
O craqueamento trmico ou pirlise o processo que provoca a quebra de molculas
por aquecimento a altas temperaturas, isto , pelo aquecimento da substncia na ausncia de
ar ou oxignio a temperaturas superiores a 450C, formando uma mistura de compostos
qumicos com propriedades muito semelhantes s do diesel de petrleo [WEISZ et al., 1979].
Em algumas situaes esse processo auxiliado por um catalisador para a quebra das
ligaes qumicas, de modo a gerar molculas menores (Figura 2).

)n
O
H

C
O
(

)n

C
)n

Catalisador ou temperatura
(

)n
O

)n

OH

CO2

H 2O

Figura 2. Craqueamento trmico ou pirlise. Fonte: SUAREZ, 2007.

O craqueamento no um mtodo muito utilizado para a produo de biodiesel, pois

este processo tem custos elevados para uma produo em pequena escala e o rendimento
baixo se comparado com os da transesterificao e esterificao.

2.3.2 Esterificao
A reao de esterificao um processo reversvel, obtendo como produto principal um
ster especfico. Entre os diversos mtodos que podem ser utilizados para sintetizar os
steres, um bom exemplo a reao de esterificao de Fischer (1895), na qual, sob
aquecimento, um cido carboxlico reage com um lcool, produzindo ster e gua (Figura 3).

O
R

R1

OH

OH

(H+)
Esterificao

O
R

+ H2O
O

R1

Figura 3. Reao de esterificao. Fonte: SILVA, 2008.

Esta reao, quando processada em temperatura ambiente, lenta, mas pode ser
acelerada com o emprego de aquecimento e/ ou catalisador (exemplo, o cido sulfrico
H2SO4).
Conforme esquema global da reao, em um dado tempo, os produtos e reagentes
entram em equilbrio qumico e, nesse momento, as velocidades das reaes de formao dos
produtos e de formao dos reagentes se mantm constantes. O emprego de um catalisador
e/ou o aumento da temperatura se tornam teis para que o equilbrio seja estabelecido mais
rapidamente.
No entanto, o ster obtido pode reagir com a gua (reao de hidrlise), gerando
novamente cido carboxlico e lcool; porm, a reao inversa mais lenta. A hidrlise do
ster em meio bsico denominada saponificao - do latim, sapo = sabo.
O processo de esterificao ocorre preferencialmente com lcoois de baixo peso
molecular, sendo metanol o mais usado devido ao seu baixo custo de aquisio. O etanol
utilizado na esterificao no necessita ser anidro uma vez que, geralmente a gua pode ser
retirada do sistema reacional. Entretanto, h uma grande dificuldade de encontrar na literatura
dados termodinmicos para a esterificao com os cidos graxos, de alto peso molecular, e
dos steres envolvidos nessas reaes, importantes para a produo do biodiesel
[www.biodiesel.gov.br].

2.3.3 Transesterificao
Das vrias metodologias descritas na literatura para obteno do biodiesel, a
transesterificao de leos vegetais atualmente o mtodo de escolha, principalmente porque
as caractersticas fsicas dos steres de cidos graxos so muito prximas daquelas do diesel
[MEHER et al., 2004; MA et al., 1999].
Alm disso, este processo relativamente simples reduz a massa molecular para um
tero em relao aos triglicerdeos, como tambm reduz a viscosidade e aumenta a volatilidade
[SCHUCHARDT et al., 1998].

Transesterificao um termo geral usado para descrever uma importante classe de

reaes orgnicas onde um ster transformado em outro atravs da troca do resduo alcoxila
[SCHUCHARDT et al., 1998; PINTO et al., 2005]. Quando o ster original reage com um lcool,
o processo de transesterificao denominado alcolise (Figura 4). Esta reao reversvel e
prossegue essencialmente misturando os reagentes. Contudo, a presena de um catalisador
(cido, base ou enzima) acelera consideravelmente esta converso, como tambm contribui
para aumentar o rendimento da mesma [MEHER et al., 2004].

Figura 4. Alcolise. Fonte: GERIS, 2007.

Na transesterificao dos leos vegetais, um triglicerdeo reage com um lcool na

presena de um catalisador, que pode ser um cido, uma base forte ou uma enzima,
produzindo uma mistura de steres alqulicos de cidos graxos e de glicerol. O processo total
uma sequncia de trs reaes consecutivas e reversveis, em que di - e monoglicerdeos so
formados como intermedirios (Figura 5). Para uma transesterificao estequiometricamente
completa, uma proporo molar 3:1 de lcool por triglicerdeo necessria.
Entretanto, devido ao carter reversvel da reao, o agente transesterificante (lcool)
geralmente adicionado em excesso contribuindo, assim, para aumentar o rendimento do
ster, bem como permitir a sua separao do glicerol formado.
A reao de transesterificao uma reao reversvel, e necessita de excesso de
lcool para deslocar o equilbrio para direita. Os lcoois de cadeia curta (de 1 a 4 carbono) so
os mais utilizados na reao, sendo no Brasil, o uso do etanol o mais vantajoso, pois este
produzido em larga escala para ser misturado gasolina, alm de ser um produto obtido
atravs da biomassa, tornando o processo totalmente independente de petrleo e totalmente
agrcola [FERRARI et al., 2005].

10

O
CH2 O C R`
O
CH O

C R
O

``

CH2 OH
catalisador

ROH
lcool

CH2 OH

Monoster

R```

CH2 OH

O
C R`` +
O

catalisador

ROH

O
CH

OH

``
RO C R

lcool

R```

CH2 O C R```

Monoster

Monoglicerdeo

Diglicerdeo

CH2 OH
CH

``
RO C R

Diglicerdeo

Triglicerdeo

CH2 O C

C R`` +
O

CH2 O C

CH2 O C R```

CH O

CH O

CH2 OH
catalisador

OH

+
O

ROH

O
CH

OH

``
RO C R

lcool

CH2 O C R```

CH2 OH

Monoster

Glicerol

Monoglicerdeo

Figura 5. Transesterificao de triglicerdeos: seqncia de trs reaes consecutivas e

reversveis. Adaptado de MA, 1999.

A reao de transesterificao pode ser realizada tanto em meio cido como em meio
bsico ou utilizando enzimas [SALVADOR, 2009].
Entre os catalisadores bsicos esto os hidrxidos de metais alcalinos, carbonatos e
alcxidos de metais alcalinos (metxido de sdio, etxido de sdio, propxido de sdio e
butxido de sdio). A maior parte dos trabalhos descritos na literatura emprega catalisadores
bsicos, tais como KOH e NaOH onde foram observados maior rendimento e seletividade
[FREDDMAN et al., 1986].
cido sulfrico, cidos sulfnicos e cido clordrico so geralmente empregados como
catalisadores cidos [GERIS, 2007].
A converso enzimtica de leos vegetais em biodiesel oferece uma opo
ambientalmente mais atrativa que os processos convencionais [MODI et al., 2006].
Recentemente, o uso de lipases como catalisadores para produo de biodiesel vem
apresentando grande interesse devido s suas condies operacionais ambientalmente
amigveis. Entretanto, alguns lcoois, tais como metanol, podem diminuir a estabilidade das
lipases e/ou inativ-las.

11

Vale ressaltar que a reao utilizando catalisador bsico com o lcool leva formao
de gua e poder levar hidrlise de algum ster produzido, com conseqente formao de
sabo (Figura 6). Esta saponificao indesejvel reduz o rendimento do ster e dificulta
consideravelmente a recuperao do glicerol, devido formao de emulso. Alm disso, o
consumo do catalisador reduz a eficincia da reao.
Portanto, para uma transesterificao catalisada por bases, ambos os leos e lcool
devem ser isentos de gua [MA et al., 1999]. Um baixo teor de cidos graxos livres no leo
tambm necessrio se o processo de alcolise ocorrer por catlise bsica. leos vegetais
que contenham alto teor de cidos graxos livres ou gua devem ser processados via catlise
cida.

O
R`

O
OR

+ H 2O

R`

O
R`

ROH

+
OH
O

+ NaOH
R`

OH

H 2O

ONa

R`= Cadeia Carbonica do cido Graxo

R = Grupo Alquil do lcool

Figura 6. Reao de saponificao.

2.4

LEO DE COCO
Cultura tpica de clima tropical, o coqueiro vem sendo cultivado em cerca de 90 pases.

No Brasil, o cultivo do coco se desenvolve principalmente ao longo do litoral, sendo encontrado

em reas desde o Estado do Par at o Esprito Santo. As estatsticas atuais demonstram que
o Brasil possui mais de 266 mil hectares implantados com a cultura, praticamente em quase
todas as Unidades da Federao. Em 2007, conforme dados do IBGE, a Bahia figurava como o
maior produtor brasileiro, com 405.842 mil frutos, seguido pelo Cear, com produo de
202.128 frutos e o Par, com 173.846 mil frutos colhidos (Tabela 2).
Nesse mesmo ano, trs estados nordestinos (Bahia, Cear e Sergipe) chegaram a
concentrar juntos, 52,9% da produo nacional de coco, evidenciando, portanto, o destaque da
Regio Nordeste nesse segmento agrcola.

12

Tabela 2. rea plantada, colhida e produo de frutos 2007.

Estados

rea Plantada (ha)

rea Colhida (ha)

Produo (mil frutos)

Bahia

101.380

87.886

405.842

Cear

48.427

48.427

202.128

Par

28.195

27.947

173.846

Esprito Santo

10.996

10.895

152.487

Sergipe

56.831

56.830

101.996

Brasil

377.688

375.422

1.804.522

Fonte: IBGE

O coqueiro (Cocos Nucifera L.), originrio do Sudeste asitico, foi introduzido no Brasil
em 1553, onde se apresenta naturalizado em longas reas da costa nordestina,
proporcionando abundante matria-prima tanto para as agroindstrias regionais quanto para
uso alimentcio.
O contedo de leo na polpa superior a 60%, o que equivale a uma produo de 500
a 3000 Kg de leo/ha [MAZZANI, 1963]. Quanto aos cidos graxos, o endosperma do fruto do
coqueiro a principal fonte mundial de cido lurico usado na indstria de alimentos,
cosmticos, sabes e na fabricao de lcool [BALACHANDRAN et al., 1985].

2.5

ENZIMAS
Todas as reaes qumicas buscam o equilbrio, mas a velocidade frequentemente

baixa. Para acelerar estas reaes, as clulas possuem substncias chamadas enzimas. As
enzimas funcionam como agentes catalticos e so especficas a uma reao qumica
particular. Algumas so capazes de aumentar a velocidade de uma reao qumica em mdia
9

12

10 a 10

vezes a velocidade da reao, transformando de 100 a 1000 molculas de substrato

em produto por minuto de reao. Atuam em concentraes muito baixas e em condies

suaves de temperatura e pH.
Diferente dos catalisadores inorgnicos, as enzimas so substncias orgnicas
produzidas

por

clulas

vivas.

Tambm

diferem

dos

catalisadores

inorgnicos

em

especificidade; isto , uma enzima particular somente catalisa um certo tipo de reao. Em
contraste, cada catalisador inorgnico participa de muitos tipos diferentes de reaes.
A velocidade de uma reao enzimtica influenciada pela concentrao do substrato,
pH, concentrao da enzima, temperatura e presena de ativadores ou inibidores. Esses
fatores afetam a atividade e podem dificultar a converso de reagentes em produtos
[SALVADOR, et al., 2009]. O aumento da quantidade de enzima favorece o aumento da
velocidade da reao, entretanto existe um limite onde com o acrscimo da enzima a taxa de
formao de produto permanece constante.

13

As enzimas possuem um stio ativo, onde se processam as reaes qumicas. Este

constitudo de alguns resduos de aminocidos da cadeia da protena que se encontram em
ntima e mtua proximidade espacial. Acredita-se que os aminocidos que constituem o centro
ativo formam na superficie da enzima uma espcie de fenda, na qual o substrato pode justarse. Esta fenda deve possuir um formato definitivo, que acomoda algumas molculas, como os
substratos e inibidores, mas rejeita outras espcies e impea-os de entrar em contato ativo
com a enzima. Esta mais uma explicao para a especificidade enzimtica e a razo por que
as estruturas secundrias e tercirias so importantes para a atividade da enzima. Elas
determinam a forma global da molcula, e em particular, geram o centro ativo, que de outra
maneira seria uma fileira uniforme de resduos de aminocidos [NELSON, et al., 2000].
As enzimas no alteram o equilbrio das reaes, mas atuam reduzindo a energia livre
de ativao. Alguns inibidores combinam-se com estas atravs de grupos funcionais fora do
centro ativo, dificultando o acesso do substrato, causando mudanas na conformao da
protena e reduzindo a habilidade em diminuir a energia de ativao. Estes efeitos no so
revertidos pelo aumento da concentrao do substrato [NELSON, et al., 2000].
Embora existam milhares de tipos de enzimas, elas podem ser agrupadas em seis
classes principais, dependendo do tipo geral de reao que catalisam. Essas classes so:
Oxirredutases, Transferases, Hidrolases, Liases, Isomerases e Ligases. O nome de qualquer
enzima sempre tem o sufixo ase e usualmente baseado na reao qumica particular que
ela catalisa (Tabela 3).
Como o mecanismo celular dos sistemas vivos, animais, vegetais e microrganismos,
dependem das enzimas, a fonte primria destas so tecidos animais (glndulas,
principalmente), tecidos vegetais (sementes, frutas) e culturas de microrganismos, quer se
fazendo uso de cultivo total, quer extraindo as enzimas do meio de cultura de bactrias, fungos
e leveduras.
No de admirar, portanto, que a maior parte das enzimas produzidas industrialmente
tenha aplicao na produo, conservao e modificao de produtos animais e vegetais
(principalmente alimentos), na produo de medicamentos (vitaminas, hormnios) e na
produo de derivados de matrias primas animais e vegetais. Em todos os casos de aplicao
citados, se trata, fundamentalmente, de imitar tecnologicamente o que feito na natureza,
embora em escala condicionada necessidade e vontade do homem.

14

Tabela 3. Principais classes de enzimas.

Nome da

Algumas Subclasses

Tipos de Reaes Catalisadas

Classe

Oxirredutases

Transferases

Desidrogenases

Formao de ligao dupla por eliminao de H2

Oxidases

Oxidao

Redutases

Reduo

Quinase

Transferncia de um grupo fosfato

Transaminase

Transferncia de um grupo amino

Nucleases

Hidrlise de um grupo fosfato

Lipases

Hidrlise de um grupo ster

Proteases

Hidrlise de um grupo amido

Descarboxilases

Eliminao de CO2

Desidrases

Eliminao de H2O

Isomerases

Epimerases

Isomerizao de um centro estereognico

Ligases

Carboxilases

Adio de CO2

Sintetases

Formao e clivagem de ligaes C-O, C-S, C-N,

Hidrolases

Liases

C-C.

2.6

LIPASES
Lipases so enzimas hidrolticas presentes em diversos organismos, incluindo animais,

plantas, fungos e bactrias. Em seu ambiente natural, estas enzimas possuem a funo de
catalisar a hidrlise de triglicerdeos aos cidos graxos correspondentes e glicerol [HOSHINO
et al., 1990].
Antigamente, elas eram predominantemente obtidas a partir do pncreas de animais e
usadas como auxiliar digestivo para consumo humano. Atualmente, as lipases so produzidas,
preferencialmente, a partir de microorganismos devido s facilidades de controle e de aumento
da capacidade produtiva dos processos fermentativos, alm da reduo do seu custo de
obteno. Em geral, os microorganismos mais utilizados para produo de lipases so fungos
dos gneros Rhiziopus, Aspergillus, Geotrichum, Mucos, Candida Rugosa e Candida Antarctica
[FACCIO,et al., 2003].

15

Quanto s propriedades fsico-qumicas, as lipases so usualmente estveis em

solues aquosas neutras temperatura ambiente. A maioria delas apresenta atividade tima
na faixa de temperatura de 30 a 40C, sendo que sua termoestabilidade varia
consideravelmente em funo da origem [CASTRO, et al., 2004].
Em geral, as lipases so ativas em uma ampla faixa de valores de pH, apresentando
uma alta atividade da faixa de pH 5-9 [MACRAE e HAMOND, 1985; FACCIO, 2004].
Mais de 95% dos processos enzimticos empregados atualmente utilizam hidrolases
(proteases, carbohidrolases e lipases), sendo que 5-10% cabem as lipases. As lipases so
extremamente versteis, pois catalisam vrias reaes e diversos substratos, quando
comparadas s outras hidrolases [GANDHI, 1997; FACCIO, 2004].
A utilizao de lipases e de enzimas em geral em escala industrial apresenta diversas
vantagens relativamente a catlise qumica e aos catalisadores em geral [VILLENEUVE, 2007;
SOO et a.l, 2004; WATANABE et al., 2001]. Dentre elas, pode-se citar a sua elevada
seletividade; a diminuio de riscos para a sade, quando utilizadas na indstria alimentcia; os
baixos nveis de ocorrncia de reaes laterais e as condies reacionais brandas, que
permitem um menor consumo energtico e evitam a degradao ou decomposio de produtos
e reagentes. Alm disso, lipases so aceitas ecologicamente, no esto limitadas a seu papel
natural e podem catalisar um grande espectro de reaes. Entretanto, algumas desvantagens
podem limitar a utilizao destes catalisadores, como o alto custo de isolamento e purificao,
a possibilidade de causar alergias, a instabilidade da sua estrutura uma vez isolada do meio
natural (aquoso), e sua sensibilidade s condies reacionais: enzimas podem ser inibidas por
substncias que esto presentes no meio reacional, desnaturadas por solventes orgnicos ou
por temperaturas relativamente elevadas [FABER, 2004]. Muitos mtodos tm sido propostosa
fim de minimizar estes incovenientes, sendo um deles a imobilizao de enzimas sobre
suportes slidos. No futuro, as lipases sero os catalisadores escolhidos para produo de
biodiesel [AKOH et al., 2007].

2.7

IMOBILIZAO DE ENZIMAS
A imobilizao de enzimas tem se mostrado, nos ltimos tempos, uma poderosa

ferramenta para melhorar quase todas as propriedades enzimticas, como a alta atividade e
seletividade [MATEO et al., 2007]. Imobilizao um termo genrico empregado para
descrever a reteno de uma biomolcula no interior de um reator ou de um sistema analtico.
A imobilizao de enzimas apresenta diversas vantagens sobre a utilizao de enzimas livres
em soluo, entre as quais destacamos: a utilizao de pequenos volumes de amostra;
aumento do tempo de vida e da estabilidade da enzima em relao temperatura, aos
solventes orgnicos e variao de pH sem perda considervel da atividade cataltica;
reutilizao; pequeno manuseio da amostra, evitando contaminaes; fcil separao da
enzima dos produtos da reao [ZHANG et al., 1998; GIRELLI et al., 2007]. O uso das enzimas
na sua forma imobilizada permite o reuso desse biocatalisador vrias vezes, reduzindo custos
e ainda melhorando a qualidade do produto obtido.

16

A imobilizao pode ocorrer de diferentes maneiras. No caso de lipases, numerosos

mtodos de imobilizao so viveis, cada um envolvendo diferentes graus de complexidade e
eficincia.
Os vrios mtodos usados podem ser subdivididos em duas categorias principais:
mtodo qumico, quando ligaes covalentes com formao de ligao cruzada so formadas
com a lipase, e o mtodo fsico, quando interaes fracas ou reteno mecnica utilizada
(Figura 7). No mtodo fsico a lipase pode ficar retida ou microencapsulada no interior de um
gel insolvel, fibras porosas ou materiais adsorventes [DALLA-VECCHIA et al., 2004].
As atividades catalticas e outras caractersticas das enzimas podem mudar
dependendo do tipo de reteno (qumica ou fsica), da fora da interao entre a enzima e o
suporte utilizado que pode, em alguns casos, causar distores estruturais na protena. Ainda,
a atividade cataltica da enzima em um determinado suporte pode ser alterada, aumentando ou
diminuindo devido fragmentao do suporte pela interao do sistema de agitao e o
suporte [DABDOUB, et al., 2009].
Assim, durante a reao, a enzima pode ser removida do suporte devido a essa
interao promovendo a perda de atividade no reuso, devido lixiviao e no inativao
da enzima [YADAV e JADHAV, 2005]. Por outro lado, se essa lixiviao no ocorrer e a enzima
permanecer ligada ao suporte, o aumento da superfcie de contato poder ajudar no aumento
da transferncia de massa, aumentando consequentemente a eficincia da enzima como
catalisador.

Figura 7. Mtodos para Imobilizao de Enzimas. Fonte: COSTA NETO, 2002; DALLAVECCHIA, 2004.

17

Lipases de diversas fontes tm sido imobilizadas e usadas na produo de biodiesel,

porm as mais utilizadas pela maioria dos pesquisadores foram obtidas de Candida antarctica e
Thermomyces lanuginosus [JEGANNATHAN et al., 2008].

2.8

TRANSESTERIFICAO ENZIMTICA
A obteno de biodiesel por meio da catlise enzimtica ocorre atravs da

transesterificao dos triglicerdeos a partir da reao com um lcool, que pode ser metanol ou
etanol, na presena de um catalisador enzimtico (lipases), resultando na produo de
alquilsteres dos cidos graxos presentes na mistura que compe o leo vegetal ou a gordura
animal utilizada.
Atualmente, o processo de produo comercial de biodiesel por via qumica, mas a
enzimtica tem despertado o interesse da comunidade cientfica. Embora os processos de
transesterificao enzimtica para obteno de biodiesel, ainda no sejam comercialmente
desenvolvidos, novos resultados tem sido reportados em artigos e patentes. O aspecto comum
desses estudos consiste na otimizao das condies de reao (solvente, temperatura, pH,
tipo de microorganismo que gera a enzima, novas tecnologias em imobilizao, etc.), a fim de
estabelecer as caractersticas para aplicaes industriais [COSTA NETO, 2002; SHIMADA et
al., 2002; ZHANG et al., 2003].
Entretanto, uma vez otimizado o processo enzimtico, este poder apresentar algumas
vantagens em relao ao qumico (Tabela 4).

Tabela 4. Vantagens e desvantagens do processo qumico e enzimtico na produo de

biodiesel.
Processos

Qumico

Vantagens

Desvantagens

- Simplicidade

- Dificuldade de separao do catalisador;

- Alto rendimento

- Impossibilidade de reutilizao do catalisador;

- Curto tempo de reao

- Dificuldade de utilizao do etanol hidratado;

- Obteno de produtos com menor grau de
pureza.

Enzimtico

- Facilidade de separao do

- Longo tempo de reao;

catalisador (suporte);

- Custo das enzimas;

- Obteno de produtos com

- Baixo rendimento.

maior grau de pureza;

- Possibilidade de utilizar etanol
hidratado na reao.
Fonte: DALLA-VECCHIA, et al., 2004

18

Dos exemplos mais recentes encontrados na literatura, para obteno do biodiesel

oriundos da transesterificao de leos ou gorduras utilizando lipases, observa-se que a
maioria dos estudos utiliza metanol como receptor do grupo acila, isto porque ele mais
reativo, produz steres mais volteis e, no mercado internacional, mais barato, quando se
comparado a outros lcoois de cadeia curta.
Entretanto, devido a sua toxicidade e devido ao fato do metanol ser produzido a partir
do petrleo, alguns autores esto estudando outros lcoois como o etanol, propanol,
isopropanol e butanol para a produo de steres componentes do biodiesel. O etanol tem
maior preferncia, pois considerado renovvel [AKOH et al., 2007].
Os steres componentes do biodiesel so produzidos, em sua grande maioria,
utilizando enzimas comerciais [AKOH, et al., 2007]. Os tempos de reao encontrados na
literatura esto entre 8 a 24h para converses acima de 70%. Os principais fatores que afetam
o rendimento destas reaes so: razo molar leo:lcool, tipo do lcool, temperatura de
reao, quantidade de gua e pureza do leo ou da gordura.
Alguns exemplos de transesterificao (etanlise ou metanlise) de leos e gorduras
catalisada por lipases podem ser encontrados na Tabela 5.

Tabela 5. Alguns exemplos de transesterificao encontrados na literatura.

Tipo de leo

Catalisador

lcool utilizado

Rendimento (%)

Referncia

PPL e CRL*

Metanol

25 (PPL), 40

SAGIROGLU,

(CRL) 3h

2008.

93,6 (8h)

CHEN, et al.,

ou gordura
Girassol

Girassol

Aspergilus Oryzae

Metanol

2008.
Gordura

Candida sp.

Metanol

87,4 (10h)

LI, et al., 2007.

Candida antartica

Metanol

97 (24h)

ROYON, et al.,

animal
leo de
semente de

2007.

algodo
leo de soja

Candida antartica

Etanol

59 (1h)

BERNARDES, et
al., 2007.

leo de
mamona
leo de soja

Candida antartica
(Novozym 435)

Etanol

82 (6h)

FACCIO, 2004.

Pseudomonas
cepacia

Metanol

67 (1h)

NOUREDDINI, et
al., 2005.

*PPL: Lipase do pncreas do porco, CRL: lipase de Candida Rugosa.

19

A natureza do solvente orgnico um fator importante a ser considerado na catlise

enzimtica em meio no aquoso, pois o solvente no apenas afeta a atividade e estabilidade
da enzima, como tambm modifica a sua especificidade. Altas quantidades de lcool tm
inibido ou desnaturado lipases nos processos de transesterificao para obteno de steres
etlicos ou metlicos. Os solventes menos nocivos as enzimas so aqueles hidrofbicos, pois
interagem menos com a gua necessria para o funcionamento da enzima [FACCIO, 2004].
Os fatores quantidade de gua e temperatura, nestas e em outras reaes com
transferncia de grupos acila, mais dependente do tipo de enzima. Valores em porcentagens
0

de gua (de 4 a 30%) e temperaturas entre 30 e 60 C so relatados para reaes de

transesterificao para produo de steres componentes do biodiesel [AKOH et al., 2007].
A gua , talvez, o componente mais importante quando o biocatalisador usado em
meio orgnico. Embora a atividade de gua em um sistema enzimtico tpico em meio orgnico
seja muito baixa (em torno de 0,01% p/v), pequenas variaes no contedo de gua pode
provocar vrias modificaes na atividade enzimtica, pois o excesso de gua facilita a
agregao das enzimas provocando assim o decrscimo da atividade.
As enzimas so praticamente inativas em sistemas completamente anidros. Admite-se
que a enzima requer uma pequena camada de gua, que atua como componente primrio do
microambiente da mesma, atuando como um tampo entre a superfcie da enzima e seio do
meio reacional, assim sendo, a biocatlise em meio orgnico possvel desde que se conserve
esta pequena quantidade de gua indispensvel a enzima [DALLA-VECCHIA et al., 2004;
FACCIO, 2004].
Com relao a pureza do leo ou da gordura, a literatura relata que leos de fritura,
bruto e de refinarias contm cidos graxos livres, fosfolipdeos e outras impurezas que podem
inativar a lipase durante a transesterificao. WATANABE et al. (2001) compararam a
transesterificao de um leo de soja no degomado e degomado. A lipase de Candida
antarctica no catalisou a reao para o primeiro caso e para o leo degomado, a converso
foi de 94% aps 24h.

20

OBJETIVOS

3.1

OBJETIVO GERAL

Este trabalho tem como objetivo estudar a produo de biodiesel catalisada pela
enzima imobilizada de Candida antarctica a partir de leo de coco.

3.2

OBJETIVOS ESPECFICOS
o

Caracterizao do leo de coco usado como matria prima;

Realizar reaes de transesterificao, obtendo assim o biodiesel;

Fazer um estudo do processo de produo de biodiesel a partir do leo de coco

utilizando-se a ferramenta Statistica 7.0.

21

METODOLOGIA

4.1 AMOSTRA
As amostras do leo bruto de coco foram gentilmente cedidas pela SOCOCO S/A
Indstria Alimentcia de Coco, localizada na cidade de Macei-AL.
Segundo a empresa fornecedora, a extrao do leo de coco foi feita por prensagem
mecnica, sendo este leo extrado da polpa desidratada. Os cocos existentes nessa empresa
so de diferentes variedades, tais como: coco ano, coco gigante e coco hbrido.

4.2 PR TRATAMENTO DO LEO DE COCO

O pr-tratamento para purificao do leo de coco adquirido foi realizado atravs do
processo de filtrao, utilizando fibra vegetal (algodo) como meio filtrante, com o objetivo de
reter os resduos slidos em suspenso.

4.3 CARACTERIZAO DO LEO DE COCO

Foram realizadas anlises no sentido de caracterizar o leo de coco, com o intuito de
utiliz-los como matria prima para a produo de biodiesel.
Os seguintes parmetros foram determinados atravs de anlises fsico-qumicas:
o

ndice de acidez;

ndice de iodo;

ndice de saponificao;

ndice de refrao;

Viscosidade;

Densidade;

Umidade;

Ponto de congelamento;

Composio em cidos graxos.

4.3.1 Indice de Acidez

O ndice de acidez definido como o nmero de mg de hidrxido de potssio
necessrio para neutralizar um grama da amostra. A determinao da acidez pode fornecer um
dado importante na avaliao do estado de conservao do leo. Um processo de
decomposio, seja por hidrlise, oxidao ou fermentao, altera quase sempre a
concentrao dos ons hidrognio.
Os resultados desse tipo de anlise so frequentemente expressos em termos de
ndice de acidez, podendo expressar tambm em mL de soluo normal por cento ou em g do
componente cido principal, geralmente o cido olico. Os regulamentos tcnicos costumam
adotar esta ltima forma de expresso da acidez.
O mtodo aplicvel a leos brutos e refinados, vegetais e animais, e gorduras animais.

22

O procedimento adotado para determinao do ndice de acidez descrito a seguir de

forma simplificado estando de acordo com o mtodo oficial da AOCS (Cd 3d-63) [AOCS, 1997].

Reagentes:
Soluo 1:1 de lcool etlico e tolueno P.A.;
Fenolftalena a 1%;
Biftalato de Potssio;
Hidrxido de potssio ou de sdio 0,1mol/L ou 0,01 mol/L (padronizado).

Procedimento:
O ndice de acidez foi determinado pesando cerca de 1 grama do leo em dois
erlenmeyers com capacidade de 125 mL.
Adicionou-se 10 mL da soluo (1:1) lcool etlico e tolueno nos erlenmeyers contendo
leo e a um terceiro sem amostra (para que se faa a prova em branco).
Em seguida, adicionou-se 4 gotas de fenolftalena 1% (indicador de viragem), em todos
os erlenmeyers.
A soluo pode ser titulada com hidrxido de sdio (NaOH) ou hidrxido de potssio
(KOH) numa concentrao de 0,01 mol/L ou 0,1 mol/L.
A titulao foi finalizada quando se formar uma cor rsea, onde essa cor deve persistir
por, no mnimo, 30 segundos.

Clculos:
Para o clculo de ndice de acidez foi utilizado a seguinte expresso:
Em % de cido lico:

V M f 0,282 100
I . A.(%)
m

(1)

Onde:
V = volume de NaOH ou KOH gasto pela amostra (mL);
M = molaridade do NaOH ou KOH;
f = fator de correo: 1,4;
m = massa pesada da amostra (g);

O resultado obtido em % de cido olico foi utilizado neste trabalho, afim de comparar
este com os valores da literatura,

23

4.3.2 Indice de Iodo pelo Mtodo de Wijs

O ndice de iodo de um leo ou gordura a medida do seu grau de insaturao dos
cidos graxos presentes e expresso em termos do nmero de centigramas de iodo absorvido
por grama da amostra (% iodo absorvido).
Uma molcula de triglicerdeos, com uma dupla ligao na cadeia hidrocarbonada do
cido olico, absorver 1/3 (um tero) do iodo absorvido pela molcula, que apresenta trs
duplas ligaes na cadeia do cido linolnico.
Para cada leo existe um intervalo de tempo caracterstico do valor do ndice de iodo
esperado. Este valor tambm est relacionado com o mtodo empregado na sua
determinao. Geralmente determinado pelo mtodo de Wijs, que usa a soluo de tricloreto
de iodo, mas pode ser determinado pelo mtodo de Hanus que utiliza brometo de iodo, e pelo
mtodo de Hubl, empregando uma soluo de iodo e cloreto de mercrio.
O mtodo de Wijs aplicvel a todos os leos e gorduras normais que no contenham
ligaes duplas conjugadas.

Reagentes:
Soluo de Wijs (iodo, cido actico);
Soluo de iodeto de potssio 10%;
Clorofrmio;
Soluo indicadora amido 1%;
Soluo de tiossulfato de sdio 0,1mol/L, padronizado.

Procedimento:
A amostra foi inicialmente filtrada com papel de filtro (agente dessecante), afim de reter
alguma impureza presente.
Em seguida, 0,05g da amostra foi pesada em trs erlenmeyers de 125mL.
Adicionou-se 3 mL de clorofrmio para solubilizar as amostras nos erlenmeyers
contendo leo e a um terceiro sem amostra (para que se faa a prova em branco).
Com o auxlio de uma pipeta volumtrica, adicionou-se 10 mL de soluo de Wijs.
Aps agitao, os frascos foram reservados em local escuro, com temperatura entre 20
e 30C. (o tempo de repouso das amostras de 2 horas se o ndice de iodo esperado for acima
de 150, e de 1 hora se for abaixo de 150).
Decorrido o tempo, os frascos foram removidos do local de repouso e, adicionou-se 8
mL de iodeto de potssio (KI) 10% e 60 mL de gua destilada para que sejam feitas as
titulaes com a soluo de tiossulfato de sdio 0,1 mol/L, sob vigorosa agitao at que a
colorao da amostra quase desaparea.
Aps a colorao amarelada ter se tornado mais clara, adicionou-se aproximadamente
1 mL de indicador amido e a titulao continuou-se at que a fase inferior mudasse de
colorao rosa para incolor.

24

Clculos:
Para se calcular o ndice de iodo na amostra, foi utilizada a seguinte expresso:

(V V ) M f 12,69
I .I B
m

(2)

Onde:
VB = volume gasto na prova em branco;
V = volume gasto do titulante;
M = Molaridade [0,1 mol/L de tiossulfato de sdio (Na2S2O3)];
f = fator de correo;
m = peso da amostra de leo;

4.3.3 ndice de Saponificao

O ndice de saponificao definido como o nmero de mg de hidrxido de potssio
(KOH), necessrios para saponificar os cidos graxos, resultantes da hidrlise de 1 grama da
amostra (leo ou gordura).
O valor obtido indica indiretamente a quantidade em peso de cidos graxos, obtidos
aps a saponificao, pois inversamente proporcional ao peso molecular mdio dos cidos
graxos dos triglicerdeos presentes. importante para demonstrar a presena de leos e
gorduras de alta proporo de cidos graxos, de baixo peso molecular, em misturas com outros
leos e gorduras. Quanto menor o peso molecular do cido graxo, maior ser o ndice de
saponificao.
Para as gorduras vegetais, quanto mais altos os ndices de saponificao mais se
prestam

para

fins

alimentcios

[MORETTO

FETT,

1998].

Um equivalente qumico de triglicerdeo equivale a 3 equivalentes de KOH (PM= 56).

PesoMedio

3 56 1000
I .S .

(3)

Reagentes:
Soluo de cido clordrico 0,5 M;
Hidrxido de potssio;
Soluo de fenolftalena 1%;
Soluo alcolica de hidrxido de potssio a 4% m/v.

Procedimento:
A amostra foi filtrada, a fim de reter algumas impurezas existentes;

25

Pesou-se uma quantidade de amostra em 2 erlenmeyers de 250 mL, de tal modo que a
titulao corresponda de 45 a 55% da titulao do branco. Esta massa normalmente de 4 a 6
gramas;
Adicionou-se 50 mL da soluo alcolica de KOH.
Um branco foi preparado simultaneamente com a amostra.
Os erlenmeyers foram conectados a um sistema de refluxo, mantendo-os a um perodo
de 2 horas ou at a completa saponificao da amostra (aproximadamente uma hora, para
amostras normais).
Aps o trmino do refluxo e resfriamento do frasco, o erlenmeyer foi desconectado do
condensador. Em seguida, foi adicionado 1 mL do indicador e titulado com a soluo de cido
clordrico 0,5 M at o desaparecimento da cor rsea.

Clculo:
Para o clculo de ndice de Saponificao, a seguinte expresso foi utilizada:

I .S .

(VB V ) f 28,05
m

(4)

Onde:
VB = Volume gasto na titulao do branco;
V = volume gasto na titulao da amostra;
f = Fator da soluo de HCl 0,5 M;
m = nmero de g da amostra.

4.3.4 ndice de Refrao

A principal forma de deteriorao dos leos consiste na oxidao, que ocorre quando o
oxignio atmosfrico dissolvido no leo e reage com os cidos graxos insaturados, que so
tanto mais reativos quanto maior nmero de insaturaes em suas cadeias.
Dentre os mtodos utilizados para verificar os nveis de oxidao esto o ndice de
perxido e o ndice de refrao.
A determinao do ndice de refrao tem grande utilidade no controle dos processos
de hidrogenao, no s para os leos, mas, tambm para as gorduras, cuja temperatura
indicada de 40C.
O ndice de refrao de leos e gorduras muito usado como critrio de qualidade e
identidade pois, quando referente a um leo, este ndice aumenta com o indice de iodo e pode
ser usado no controle de processos de hidrogenao de leos insaturados.
Para a medio do ndice de refrao utiliza-se o refratmetro. Este aparelho pode
identificar tanto o ndice de refrao de uma substncia quanto seu percentual de brix
(quantidade de slidos solveis em uma soluo). Com o valor do brix pode-se calcular o valor
do ndice de refrao.

26

Equipamento:
Refratmetro ATAGO Hando Refractometer equipado com escala-padro e algodo
(Figura 8).

Procedimento:
O refratmetro deve ser ajustado previamente com gua, fazendo circular uma corrente
de gua pelo aparelho;
Em seguida, deixou-se estabilizar;
Foram colocadas no prisma inferior algumas gotas da amostra. Fechou-se os prismas,
travando-os firmemente.
Esperou-se 1 a 2 minutos at que a amostra atingisse a temperatura do aparelho.
Ajustou-se o instrumento e a luz para obter a leitura mais distinta possvel e, ento,
0

determinou-se o ndice de refrao ou o brix.

Figura 8. Refratmetro utilizado na determinao do ndice de refrao.

4.3.5 Viscosidade
A viscosidade mede-se por meio de viscosmetros, aparelhos em que geralmente se
determina o tempo que um certo volume de lquido leva a escoar atravs de um orifcio de
pequeno dimetro.
Pode ser encarada como o atrito interno de um fluido provocado essencialmente pela
interaco entre as molculas deste. Devido viscosidade deve-se exercer uma fora para que
uma camada de fluido deslize ou escorregue sobre outra. Tanto os lquidos como os gases so
viscosos, embora os primeiros sejam muito mais que os gases. Constata-se tambm que o
coeficiente de viscosidade para os lquidos decresce com o aumento da temperatura.

Materiais:
Viscosmetro com banho;
Termmetro de preciso;
Cronmetro.

27

Procedimento:
Foram colocados cerca de 7 mL de amostra no viscosmetro, afim de determinar o
tempo (t) de escoamento desta amostra (em segundos) atravs de um capilar (Figura 9) . A
o

temperatura deve ser controlada em 40 C.

Para uma melhor preciso, o experimento foi realizado em triplicata.

Clculo:
Para o clculo da viscosidade, foi feita uma mdia aritmtica dos 3 tempos multiplicada
pela constante do viscosmetro (k). A constante do viscosmetro utilizada neste experimento foi
de 0,1125.

Mt k

(5)

Onde:
= viscosidade
M = Mdia dos tempos

Figura 9. Sistema para determinao da Viscosidade.

4.3.6 Massa Especfica

Densidade absoluta ou massa especfica uma caracterstica prpria de cada material,
por isso classificada como sendo uma propriedade especfica. O termo densidade absoluta
geralmente atribudo para representar a razo entre a massa e o volume de objetos slidos
(ocos ou maicos) e massa especfica definido para representar a razo entre a massa e o
volume de lquidos e substncias.
Em geral, a densidade dos slidos maior que a dos lquidos e esta, por sua vez,
maior que a dos gases.

28

Os lquidos so substncias com densidades bem menores em relao aos slidos,

pois, as partculas de suas molculas se encontram mais distanciadas umas das outras. Suas
massas especficas variam um pouco e para se medir a massa especfica de lquidos e fluidos,
existem dois tipos de um equipamentos: o picnmetro e o densmetro (este ltimo mais
utilizado por fornecer a leitura direta da densidade, alm de ser mais preciso).

Materiais:
Densmetro com banho;
Aquecedor.

Procedimento:
Uma pequena quantidade de amostra do leo foi colocada em um tubo de ensaio. Com
o

o auxlio de uma aquecedor, a amostra foi aquecida at uma temperatura de 40 C, afim de

obter a leitura diretamente no visor do densmetro.
Atualmente a leitura da massa especfica est sendo feita utilizando densmetros
digitais, como por exemplo o densmetro digital da Anton Paar, modelo DMA 35n (Figura 10).
o

Deve-se fazer anlises a 40 C e 20 C, dependendo do tipo do leo.

Figura 10. Sistema para determinao da massa especfica.

Cculo:
Para o clculo da massa especfica a essas temperaturas, basta-se resolver a mdia
aritmtica dos valores adquiridos no visor do densmetro.

4.3.7 Umidade
Todos os alimentos, qualquer que seja o mtodo de industrializao a que tenham sido
submetidos, contm gua em maior ou menor proporo. Geralmente a umidade representa a
gua contida no alimento, que pode ser classificada em: umidade de superfcie, que refere-se
gua livre ou presente na superfcie externa do alimento, facilmente evaporada e umidade

29

adsorvida, referente gua ligada, encontrada no interior do alimento, sem combinar-se

quimicamente com o mesmo.
A umidade corresponde perda em peso sofrida pelo produto quando aquecido em
condies nas quais a gua removida. Na realidade, no somente a gua a ser removida,
mas outras substncias que se volatilizam nessas condies. O resduo obtido no aquecimento
direto chamado de resduo seco. O aquecimento direto da amostra a 105C o processo
mais usual.

Materiais:
Estufa;
Balana Analtica;
Dessecador com slica gel;
Cpsula de porcelana ou de metal.

Procedimento:
2 a 10 g da amostra foram pesadas em cpsula de porcelana ou de metal, previamente
tarada.
Essas amostras foram aquecidas durante 3 horas. Em seguida, esperou resfriar em
dessecador at a temperatura ambiente;
Pesou-se novamente;
A operao de aquecimento e resfriamento foi repetida at peso constante.

Clculo:

(100 n)
Umidade
m

(6)

Onde:
n = n de gramas de umidade (perda de massa em g)
m = n de gramas da amostra

4.3.8 Ponto de Congelamento

0

Na tentativa de se obter a densidade a 20 C, viu-se a necessidade de determinar o

ponto de congelamento do leo de coco.

Materiais:
Tubo de Ensaio;
Termmetro

30

Procedimento:
Uma certa quantidade do leo foi colocada em um tubo de ensaio;
Em seguida, foi introduzido ao tubo um termmetro preciso;
O tubo foi resfriado at o aparecimento dos primeiros pontos de cristalizao;
Anotou-se esta temperatura.

4.3.9 Composio em cidos Graxos

Os leos e gorduras de origem animal, vegetal ou mesmo microbiana, so substncias
insolveis em gua (hidrofbicas), formadas predominantemente de produtos de condensao
entre glicerol e cidos graxos chamados triglicerdeos [MORETTO e FETT, 1998].
Um aspecto particularmente importante dos triglicerdeos na atualidade refere-se a sua
origem renovvel como, por exemplo: plantas oleaginosas, peixe, etc. Na sua molcula, a
poro referente aos cidos graxos corresponde cerca de 90% de seu peso e a glicerina
representa os 10% restantes.
Os cidos graxos podem ser insaturados e saturados. Possuem uma cadeia linear
formada por tomos de carbono ligadas diretamente entre si (ligao carbono-carbono), em um
nmero que varia de 6 a 22 tomos sendo particularmente importante os cidos graxos com 10
a 18 tomos.
Estes diferem basicamente um do outro pelo comprimento da cadeia do hidrocarboneto
e pelo nmero e posio das duplas ligaes. As ligaes duplas dos cidos insaturados esto
localizadas na cadeia de forma no conjugada (sistema 1,4-dinico), freqentemente separada
por grupos metilnicos (-CH2-). No entanto, tanto as insaturaes quanto o comprimento da
cadeia carbnica afetam diretamente a viscosidade dos leos. Sendo assim, a viscosidade dos
leos aumenta com o comprimento das cadeias dos cidos graxos dos triglicerdeos e diminui
quando aumenta a insaturao destes.
Os cidos graxos que ocorrem com mais frequncia na natureza so conhecidos pelos
seus nomes comuns, conforme mostra as tabelas 6 e 7 [MORETTO, et al., 1998].

31

Tabela 6. cidos graxos saturados presentes nos leos e gorduras.

Representao

Frmula

Nome Sistemtico

Nome Trivial

C4:0

CH3-(CH2)2-COOH

Butanico

Butrico

C6:0

CH3-(CH2)4-COOH

Hexanico

Caprico

C8:0

CH3-(CH2)6-COOH

Octanico

Caprlico

C10:0

CH3-(CH2)8-COOH

Decanico

Cprico

C12:0

CH3-(CH2)10-COOH

Dodecanico

Lurico

C14:0

CH3-(CH2)12-COOH

Tetradeconico

Mirstico

C16:0

CH3-(CH2)14-COOH

Hexadecanico

Palmtico

C18:0

CH3-(CH2)16-COOH

Octadecanico

Esterico

C20:0

CH3-(CH2)18-COOH

Eicoisanico

Araqudico

C22:0

CH3-(CH2)20-COOH

Docosanico

Behnico

C24:0

CH3-(CH2)22-COOH

Tetracosanico

Lignocrico

Tabela 7. cidos graxos insaturados presentes nos leos e gorduras.

Representao

Nome Sistemtico

Nome Trivial

C 16:1(9)

9- Hexadecenoico

Palmitoleico

C 18:1(9)

9- octadecenico

Olico

C 18:1(11)

11- octadecenico

Vacnico

C 18:2(9,12)

9,12 octadecadienico

Linolico

C 18:3(9,12,15)

9,12,15 octadecatrienico

Linolnico

C 20:4(5,8,11,14)

5,8,11,14 eicosatetraenico

Araquidnico

De uma maneira geral, os cidos graxos com cadeia inferior a 10 tomos de carbono
so lquidos a temperatura ambiente e aqueles com 10 ou mais so slidos, ocorrendo
aumento progressivo do ponto de fuso com aumento no comprimento da cadeia carbnica.
cidos graxos saturados com mais de 24 tomos de carbono, raramente ocorrem em leos
comestveis [MORETTO, et al., 1998].
A composio em cidos graxos foi determinada por cromatografia gasosa aps
utilizao da tcnica de derivatizao, onde esta tcnica consiste em transformar os leos em
seus respectivos steres de forma analtica para possibilitar sua deteco por cromatografia
(ISO 5509-78), usando uma coluna polar. A aparelhagem e as condies cromatogrficas
foram: Cromatgrafo 3400 CX da VARIAN, com coluna cromatogrfica capilar Stabilwax da
VARIAN. A coluna possui comprimento de 30 m e 0,25 mm de dimetro. A temperatura do
injetor utilizada foi de 240 C e a temperatura do detector de 250 C. O volume de amostra
injetado foi de 0,5 L.

32

4.4 ENZIMAS UTILIZADAS COMO CATALISADORES

Neste trabalho foi utilizada a lipase comercial do tipo Candida antartica (Novozym
435), produzida por fermentao submersa e adsorvida sobre resina acrlica macroporosa
numa concentrao de 3% m/m. Consiste de partculas com dimetro na escala de 0,3 0,9
mm, contendo 1,4% de gua [FACCIO et al., 2003].

4.5 DETERMINAO DA ATIVIDADE LIPOLTICA

A determinao da atividade enzimtica envolve a medida da velocidade de reao.
Uma unidade (U) de atividade a quantidade de enzima que catalisa a transformao de 1
micromol de substrato ou a formao de 1 micromol de produto por minuto, nas estabelecidas
condies do ensaio (temperatura, pH, concentrao de substrato).
A

atividade

lipoltica

da

enzima

imobilizada

deve

ser

determinada

espectrofotometricamente acompanhando-se o aumento na absorbncia a 410nm, devido

liberao de p-nitrofenol resultante da hidrlise do p-nitrofenil-laurato (p-NPL), segundo mtodo
descrito por Pinto et al (2005).
Ser estudada a atividade lipoltica da enzima imobilizada em trs temperaturas
diferentes, 40C, 50C e 60C em pH 7,0.
Equipamento:
Espectrofotmetro BEL SP 2000 UV.

Preparo da Soluo:
Para preparar 100mL de soluo, deve-se inicialmente pesar 0,018g de p-nitrofenil
laurato (pNL) e dissolver em 1mL de dimetilsulfxido (DMSO). Em seguida adicionar 99 mL de
tampo fosfato de potssio 50 mM a pH 7.

Tcnica:
Aps o preparo do reagente, deve-se adicionar 30mL em um bcker, colocar sob
agitao e adicionar 0,03g da enzima imobilizada. A reao ser acompanhada atravs da
retirada de 2 mL da amostra a cada 1,5 minutos de reao durante 7,5 minutos. A absorbncia
dever ser lida imediatamente aps a retirada da alquota.

Clculo:
Para se calcular a atividade, pode-se utilizar a equao 7:

Abs D f VR
t m A

(7)

Onde:
A = atividade da enzima (U/Kg), onde uma unidade (U) de atividade enzimtica
hidroltica foi definida como a quantidade de enzima que liberou 1 mol de p-nitrofenol por
minuto nas condies propostas;

33

abs = variao de absorbncia no intervalo de tempo t (em minutos) transcorrido

durante a fase de aumento linear dos valores de absorbncia;
D = diluio da amostra realizada para a leitura da soluo enzimtica;
f = fator de converso dos valores de absorbncia para a concentrao de p-nitrofenol.
t = tempo decorrido de anlise;
VR = volume reacional;
mA = massa de enzima imobilizada utilizada no ensaio, em Kg;
Abs/ t = coeficiente angular da reta obtida.

4.6 REAES DE TRANSESTERIFICAO ENZIMTICA

As reaes em escala laboratorial foram realizadas em erlenmeyers de 250mL
fechados com tampa de vidro. A lipase comercial, em concentraes pr estabelecidas, foi
adicionada a mistura leo-lcool e os frascos foram incubados em uma cmara rotativa a 200
rpm com temperatura controlada. A quantidade de leo de coco utilizada foi mantida fixa em
25g.
Aps decorrido o tempo de reao, a amostra foi filtrada (com o objetivo de reter as
enzimas para posterior recuperao e reutilizao) e ento levada para evaporao do lcool
em um evaporador rotativo 90C numa rotao de 40 rpm.
Adotado este procedimento, a mistura reacional resultante foi levada a um funil de
separao, onde a fase superior, concentrada em steres etlicos ou metlicos (biodiesel), foi
separada da fase inferior que continha os demais produtos da reao (mono e diglicerdeos,
glicerol e impurezas), bem como os substratos no reagidos (lcool e leo).
A Figura 11 representa de forma clara a reao de transesterificao enzimtica.

Figura 11. Esquema do procedimento experimental para a reao de transesterificao

enzimtica.

34

4.7 CARACTERIZAO DOS PRODUTOS OBTIDOS A PARTIR DAS REAES DE

TRANSESTERIFICAO
Para determinao do rendimento (%) em biodiesel, a caracterizao dos steres
metlicos ou etlicos foi efetuada empregando a tcnica de cromatografia gasosa (CG). Os
produtos obtidos da reao de transesterificao foram analisados por cromatografia gasosa
usando um instrumento VARIAN CP-3800 equipado com um detector FID (Flame Ionization
Detection) e uma coluna capilar curta de 2,3 m. A temperatura do detector foi de 250 C e a do
injetor de 240 C. A temperatura do forno foi programada de 150 at 260 C a uma taxa de
aquecimento (rampa) de 10 C/min. O trioctanoato de glicerila (tricaprilina) foi usado como
padro interno e o gs Hidrognio, de alta pureza (99,95 %), usado como gs de arraste.
A amostra a ser analisada foi preparada a partir da mistura de 0,15 mL do biodiesel
previamente purificado com 1 mL de soluo padro (tricaprilina mais hexano em dessecador).
Uma alquota de 1 L da amostra foi ento injetada no cromatgrafo, com o auxlio de uma
seringa de vidro de 10 L.
O clculo do rendimento em steres foi efetuado com base nas massas e nas reas
sob os picos correspondentes aos steres etlicos ou metlicos e ao padro interno, atravs da
equao 8:

Rendimento (%)

m p Ab f
mb Ap

100

(8)

Onde:
mp = peso do padro interno (0,08 g)
Ab = soma das reas dos picos referentes aos steres contidos na amostra (picos
detectados entre 8 min e 13 min);
f = e o fator de resposta (0,78);
Ap = rea do pico referente ao padro interno (Tricaprilina mais hexano - pico detectado
entre 15 min e 18 min);
mb = peso da amostra (0,15 g).
As anlises de converso foram feitas em duplicata, sendo em seguida calculada a
converso mdia de cada experimento.

4.8 PLANEJAMENTO EXPERIMENTAL PARA A PRODUO DO BIODIESEL DE COCO

O planejamento experimental uma ferramenta muito utilizada para pesquisas em
laboratrio. Esta ferramenta possibilita que as pesquisas com vrias variveis possam ser
realizadas e que os efeitos das variaes sejam encontrados facilmente, j que um dos
problemas mais frequentes para quem realiza experimentos determinar a influncia de uma
ou mais variveis sobre as outras variveis de interesse [BARROS, et al., 1996].

35

O planejamento experimental tem como funo entender melhor o processo em estudo

e dessa forma melhorar (otimizar) as condies de operao.
O principal objetivo do planejamento de experimentos , atravs de princpios
estatsticos, extrarem do sistema em estudo, o mximo de informao til, realizando o mnimo
de experimentos possveis e assim determinar a interao entre variveis de forma racional e
econmica. O principal aspecto a ser definido no planejamento que tipo de informao deve
ser buscada, isto , ao final dos experimentos o que se quer saber. Dependendo do que se
queira, algumas tcnicas sero mais vantajosas, enquanto outras sero simplesmente incuas
[BARROS, et al., 1996]. A Tabela 8 mostra as principais tcnicas utilizadas para o
planejamento experimental.

Tabela 8. Principais tcnicas utilizadas para planejamento experimental.

Objetivo

Tcnica

Triagem de variveis

Planejamento fracionrio

Avaliao da influncia de variveis

Planejamento fatorial completo

Construo de modelos empricos

Modelagem por mnimos quadrados

Otimizao

RSM, simplex

Fonte: BARROS, SCARMINIO e BRUNS, 1996

Para determinao das condies experimentais que maximizassem a sntese do

biodiesel resultante da reao e para avaliar a influncia das variveis escolhidas, foi realizado
um planejamento experimental fatorial completo com 2 nveis e 4 variveis.
As variveis estudadas nessa etapa foram: razo molar lcool-leo, temperatura,
percentagem de enzimas e tipo do lcool. Baseado em estudos realizados preliminarmente, a
agitao foi mantida constante, uma vez que foi verificado no haver nenhuma alterao no
rendimento do processo variando a mesma de 200 a 500 rpm [OLIVEIRA e ALVES, 2000]. O
tempo de reao foi fixado em 24 horas. Os limites associados a cada varivel esto
representados na Tabela 9.

Tabela 9. Valores extremos e intermedirios das variveis.

Variveis

Extremos

Extremos

Negativos (-1)

Positivos (+1)

1:6

1:10

Temperatura [T] ( C)

40

60

Percentagem de Enzimas [E] (%p/p)

Tipo de lcool

Etanol

Metanol

Razo Molar lcool-leo [R]

0

36

A matriz experimental para o planejamento fatorial 2 apresentada na Tabela 10.

Tabela 10. Quadro de Experimentos.
Ensaio
Tipo

R (O:lcool)

T (C)

E (%p/p)

Etanol/-1

1:6/-1

40/-1

3/-1

Etanol/-1

1:6/-1

40/-1

7/+1

Etanol/-1

1:6/-1

60/+1

3/-1

Etanol/-1

1:6/-1

60/+1

7/+1

Etanol/-1

1:10/+1

40/-1

3/-1

Etanol/-1

1:10/+1

40/-1

7/+1

Etanol/-1

1:10/+1

60/+1

3/-1

Etanol/-1

1:10/+1

60/+1

7/+1

Metanol/ +1

1:6/-1

40/-1

3/-1

10

Metanol/ +1

1:6/-1

40/-1

7/+1

11

Metanol/ +1

1:6/-1

60/+1

3/-1

12

Metanol/ +1

1:6/-1

60/+1

7/+1

13

Metanol/ +1

1:10/+1

40/-1

3/-1

14

Metanol/ +1

1:10/+1

40/-1

7/+1

15

Metanol/ +1

1:10/+1

60/+1

3/-1

16

Metanol/ +1

1:10/+1

60/+1

7/+1

Atravs dos dados experimentais obtidos, foi elaborado um modelo emprico com as
variveis estudadas codificadas pela letra x. Este modelo servir para estimar o rendimento do
biodiesel de coco usando valores codificados das variveis estudadas no presente trabalho.
Estes valores codificados devem pertencer ao intervalo -1 x +1, o qual foi considerado
neste trabalho.
Sendo assim, foi adotado o modelo matemtico para a previso das respostas
desejadas:
x

j 1

i j

y 0 j x j ij x j xi

(9)

Onde:
y = varivel de interesse (rendimento) em percentagem;
x = varivel que apresenta os fatores em escalas codificadas. Como no presente trabalho est
sendo considerado apenas os nveis baixo e alto, x assume os valores -1 e +1;
= parmetros cujos valores sero determinados.
Para fins prticos, a estimativa de 0 a mdia geral das respostas e, as estimativas
dos demais parmetros foram obtidas atravs da tabela de Regresso dada pelo software
utilizado, neste trabalho o STATISTICA 7.0.

37

RESULTADOS E DISCUSSES

5.1

AMOSTRAS
Como pr-determinado, as amostras de leo de coco foram fornecidas pela SOCOCO

S/A Indstria Alimentcia de Coco, localizada na cidade de Macei-AL.

5.2

PR TRATAMENTO DO LEO DE COCO

As amostras obtidas foram submetidas a filtrao, utilizando fibra vegetal (algodo)

como meio filtrante, com o objetivo de reter os resduos slidos em suspenso. A Figura 12
mostra o processo de filtrao e a amostra filtrada.

Figura 12. Pr tratamento do leo de coco.

5.3

CARACTERIZAO DO LEO DE COCO

A Tabela 11 apresenta o resultado das propriedades fsico-qumicas do leo de coco

utilizado para a realizao deste trabalho.

38

Tabela 11. Propriedades fsico-qumicas do leo de coco

Propriedades
Valores
ndice de Acidez (g de c. olico/100g)

Literatura

0,30

Mximo 5,0*

18

5 30**

256,2

248 265*

1,448

1,448 1,450*

27,2

24,85***

Densidade (g/cm ), 40 C

0,905

0,908*

Umidade

0,35

0,53****

Ponto de Congelamento

22 C

ndice de Iodo (g I2/100g de leo)

ndice de Saponificao
ndice de Refrao (n D

40

Viscosidade (cst)
3

--

*www.anvisa.gov.br, ** www.institutobiosantos.com.br, *** JITPUTTI et al, 2006, **** ARAUJO

et al, 2009.

Como se pode perceber pela Tabela 11, os valores encontrados neste trabalho para a
caracterizao do leo de coco esto de acordo com os valores descritos na literatura. Em
particular, observa-se que as amostras de leo de coco apresentaram um baixo ndice de
acidez, provavelmente devido a algum processo de refino ou degomagem acontecido na
indstria fornecedora do leo. Esta suposio baseia-se no aspecto visual das amostras que
apresentaram cor clara e quase nenhuma presena de slidos em suspenso.
Para se obter resultados satisfatrios na reao de transesterificao com
catalisadores bsicos, o ideal que o teor de cidos graxos livres seja inferior a 3% de cido
olico (aproximadamente 6mg KOH/ g da amostra), pois os cidos graxos livres podem reagir
com o catalisador formando produtos saponificados, diminuindo ento a eficincia do processo
reacional [FERRARI et al., 2005]. Portanto, o resultado apresentado pelo leo de coco mostra
que este pode ser utilizado para a obteno do biodiesel, pois alm dos valores estarem
inferior a 3% de cido olico, a reao de transesterificao deste trabalho foi catalisada por
enzimas, no apresentando risco de formao de sabo durante a reao.
Uma vez determinado o ndice de saponificao do leo, e certificando que o resultado
se encontra dentro dos parmetros fornecido na literatura, fica fcil determinar seu peso
molecular. Como o peso molecular inversamente proporcional ao ndice de saponificao e
fazendo uso da equao 4, foi obtido para o leo de coco: PM = 654,97g/mol.

39

O ndice de refrao caracterstico para cada tipo de leo e est relacionado com o
grau de insaturao das ligaes, compostos de oxidao e tratamento trmico. Este ndice
aumenta com o nmero de duplas ligaes, conjugaes, tamanho da cadeia hidrocarbonada e
ndice de iodo. O leo de coco composto, em sua maioria, por cidos graxos saturados
(cerca de 47% de cido lurico e 18% de cido miristico). Na composio dos principais leos
vegetais, o leo de coco uma exceo, pois os cidos graxos saturados esto presentes em
quantidades muito maiores que os insaturados. Essa composio explica o baixo valor
encontrado para o ndice de refrao.
A composio de cidos graxos para leo de coco apresentada na Tabela 12, onde
os resultados obtidos esto de acordos com os da literatura.

Tabela 12. Composio em cidos graxos do leo de coco

cido Graxo

Nomenclatura

Valores obtidos (%)

Literatura

C 6:0

caprico

0,4 0,6

C 8:0

caprlico

7,186792

5,0 10,0

C 10:0

cprico

5,826097

4,5 8,0

C 12:0

lurico

48,398725

43,0 - 51,0

C 14:0

mirstico

20,216485

16,0 - 21,0

C 16:0

palmtico

9,76259

7,5 10,0

C 18:0

esterico

2,893973

2,0 4,0

C 18:1

olico

8,31455

5,0 10,0

C 18:2

linolico

2,282234

1,0 2,5

C 18:3 - C 24:1

< 0,5

Fonte: www.anvisa.gov.br

5.4

DETERMINAO DA ATIVIDADE LIPOLTICA

Para determinao da temperatura tima para a atividade lipoltica da enzima

imobilizada estudada (Novozym 435), foram realizados testes experimentais variando-se a

temperatura para pH 7. Os resultados so apresentados na Figura 13.

40

Figura 13. Estudo da atividade enzimtica em funo da temperatura.

Os resultados indicados na Figura 13 mostram que a atividade enzimtica aumentou

com o aumento da temperatura dentro da faixa estudada. Porm o aumento da temperatura
no garante o aumento da converso em biodiesel, pois outros fatores podem influenciar nessa
atividade.

5.5

REAES DE TRANSESTERIFICAO
Os dados experimentais obtidos na transesterificao enzimtica do leo de coco

utilizando a lipase comercial Novozym 435 como catalisador so apresentados na Tabela 13.
Os dados apresentados de rendimento referem-se a um tempo de 24 horas de reao. Cabe
ressaltar que os experimentos foram feitos com rplica em cada ponto.
Uma anlise na Tabela 13 observa-se que o maior rendimento (80,5%) foi obtido na
0

condio de maior temperatura (60 C), maior concentrao de enzima (7%), maior razo leolcool (1:10) e utilizando etanol como lcool.

41

Tabela 13. Rendimentos obtidos na transesterificao do leo de coco

Ensaio

Tipo

T (C)

(O:lcool)

Rendimento

(%p/p)

Corrida

Corrida

(%)

Etanol

1:6

40

48

50,2

49,1

Etanol

1:6

40

61

62,8

61,9

Etanol

1:6

60

61,5

65,1

63,3

Etanol

1:6

60

76,9

75,3

76,1

Etanol

1:10

40

79,3

76,7

78

Etanol

1:10

40

72,2

75,5

73,8

Etanol

1:10

60

77,6

70,6

74,1

Etanol

1:10

60

84

77,1

80,5

Metanol

1:6

40

58,4

55,9

57,1

10

Metanol

1:6

40

68,4

59,7

64

11

Metanol

1:6

60

19,2

19,6

19,4

12

Metanol

1:6

60

14,2

13,8

14

13

Metanol

1:10

40

68,2

67,2

67,7

14

Metanol

1:10

40

77,9

78,1

78

15

Metanol

1:10

60

10,3

10,6

10,4

16

Metanol

1:10

60

12,5

11,4

12

Uma vez determinado o rendimento do processo, um modelo estatstico foi construdo,

com o objetivo de representar os dados experimentais e verificar a significncia das variveis,
bem como avaliar possveis interaes entre elas.
O modelo estatstico para o clculo do rendimento de biodiesel de coco pode ser
representado pela equao 10:

y 54,97 2,57 x1 11,24 x2 4,35x3 14,64 x4 3,82 x2 x3 15,14 x2 x4 2,66 x3 x 4

Onde:
Os parmetros de regresso 2,57; -11,24; 4,35; -14,64; -3,82; -15,14; -2,66 foram obtidos a
partir da Tabela 14, e o parmetro 54,97 a mdia de todas as respostas obtidas dos
experimentos;
y a estimativa do rendimento (resposta) em percentagem;
x1 a varivel codificada da concentrao de enzimas e que pertence ao intervalo -1 x 1;
x2 a varivel codificada da temperatura e que pertence ao intervalo -1 x 1;
x3 a varivel codificada da razo molar e que pertence ao intervalo -1 x 1;
x4 a varivel codificada do tipo de lcool e que pertence ao intervalo -1 x 1;

42

(10)

Os

experimentos

realizados

seguindo

deliniamento

experimental

previsto

apresentaram um rendimento mdio de 55% com um intervalo entre 53,3% e 56,6%. Pode-se
observar que a interao tipo de lcool e temperatura apresentou o maior efeito, em mdulo,
no rendimento. A Tabela 14 apresenta os coeficientes de regresso para a resposta, ou seja,
para o rendimento.

Tabela 14. Coeficientes de regresso para o rendimento em biodiesel

Fatores

Coef. de

Erro

Regresso

Padro

Limite de

Limite de

confiana de

confiana de

-95%

+95%

Mdia

54,97

0,79

69,42

0,0000

53,32

56,62

(1)E%

2,57

0,79

3,25

0,004

0,93

4,22

-11,24

0,79

-14,2

0,0000

-12,89

-9,6

4,35

0,79

5,49

0,0000

2,7

5,99

(4) Tipo

-14,64

0,79

-18,48

0,0000

-16,28

-12,99

1x2

-0.65

0,79

-0.83

0,4166

-2,3

0,99

1x3

-0.81

0,79

-1,07

0,3165

-2,46

0,83

1x4

-0,91

0,79

-1,15

0,2621

-2,56

0,73

2x3

-3,82

0,79

-4,82

0,0000

-5,46

-2,17

2x4

-15,14

0,79

-19,12

0,0000

-16,79

-13,5

3x4

-2,66

0,79

-3,36

0,0029

-4,31

-1,02

(2)Temperatura
(3) R molar

A anlise de varincia (ANOVA) (Tabela 15) mostra que o modelo utilizado neste
trabalho estatisticamente significativo e adequado para representar a relao entre a
resposta e as variveis significativas, pois o valor do coeficiente de determinao satisfatrio
2

(R = 0,98). Este valor indica que 98% da variao do rendimento pode ser atribuda a variveis
independentes e somente 2% da variao total no podem ser explicados pelo modelo, o que
sugere que houve um bom ajuste do modelo aos dados experimentais

43

Tabela 15. Anlise de varincia (ANOVA)

Fonte de Variao

Soma dos

Quadrado

Quadrados

Mdio

(1)E%

212,18

212,18

10,57

0,0038

(2)Temperatura

4045,50

4045,50

201,62

0,0000

(3) R molar

605,52

605,52

30,18

0,0000

(4) Tipo

6856,21

6856,21

341,7

0,0000

2 by 3

466,65

466,65

23,26

0,0000

2 by 4

7338,66

7338,66

365,74

0,0000

3 by 4

226,85

226,85

11,31

0,0000

Erro

421,36

20,065

Total

20234,48

R = 0,98

A linearidade e boa concordncia do modelo podem ser observadas na Figura 14 com

um intervalo de confiana de 95%.

90

80

70

60

50

40
Valores Preditos

30

20

10

0
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Valores Observados

Figura 14. Confiana entre o modelo e os dados experimentais com 95% de confiana

Outra forma de avaliar o modelo estatstico utilizado na anlise de varincia atravs

dos erros de ajustamento, que devem ser independentes e normalmente distribudos. Tais
verificaes foram contempladas quando se analisa a relao entre o nmero de ensaios e os
resduos, onde se observa uma distribuio aleatria entre os resduos de todos os ensaios,
sugerindo resduos independentes (Figura 15).

44

8
6
4

Resduos

2
0
-2
-4
-6
-8
-10
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Valores Observados

Figura 15. Distribuio dos resduos

Para um nvel de significncia de 5%, os resultados obtidos indicam que a
concentrao de enzima, temperatura, razo molar, tipo do lcool e interaes entre
temperatura e razo molar, temperatura e tipo de lcool e razo molar e tipo de lcool so
significativas. Esses valores significativos (p < 0,05) podem ser melhores visualizados atravs
do diagrama de Pareto na Figura 16:
Diagrama de Pareto
2by4

-30,29

(4)Tipo

-29,27

(2)Temperatura

-22,49

(3)R molar

8,7

2by3

-7,64

3by4

-5,32

(1)E%

5,15

1by4

-1,82

1by3

-1,62

1by2

-1,31
p=,05
Estimativa do efeito padronizado (Valor Absoluto)

Figura 16. Diagrama de Pareto com nvel de significncia de 5%.

45

Os valores presentes no diagrama de Pareto representam a influncia que cada

varivel estudada exerce, isoladamente, sobre a resposta do sistema (neste caso, o
rendimento), e so interpretados da seguinte maneira:

Variveis significativas:
o

O rendimento da reao diminui 30,29%, em mdia, quando a temperatura passa de

0

seu nvel inferior (40 C) para o seu nvel superior (60 C) e quando trocado etanol
(nvel inferior) por metanol (nvel superior);
o

O rendimento da reao diminui 29,27%, em mdia, quando utilizado metanol (nvel

superior) ao invs de etanol (nvel inferior);

O rendimento da reao diminui 22,49%, em mdia, quando a temperatura passa de

0

seu nvel inferior (40 C) para seu nvel superior (60 C);
o

O rendimento da reao aumenta 8,7%, em mdia, quando a razo molar passa de seu
nvel inferior (1:6) para seu nvel superior (1:10);

O rendimento da reao diminui 7,64%, em mdia, quando a temperatura passa de seu

0

nvel inferior (40 C) para o seu nvel superior (60 C) e a razo molar passa de seu nvel
inferior (1:6) para seu nvel superior (1:10);
o

O rendimento da reao diminui 5,32%, em mdia, quando a razo molar passa de seu
nvel inferior (1:6) para seu nvel superior (1:10) e quando trocado o tipo de lcool
utilizado, etanol (nvel inferior) por metanol (nvel superior);

O rendimento da reao aumenta 5,15%, em mdia, quando a concentrao de

enzimas passa de seu nvel inferior (3%) para seu nvel superior (7%).

Variveis no significativas:
As interaes entre concentrao de enzima e tipo do lcool, concentrao de enzima
e razo molar e concentrao de enzima e temperatura no tiveram efeitos significativos, j
que p > 0,05. Esse resultado mesmo no sendo significativo nos fornece uma informao
bastante interessante e atrativa. Um dos problemas na utilizaco de catlise enzimtica so os
custos das enzimas utilizadas no processo, onde para tornar esse meio vivel, uma menor
quantidade de enzima utilizada tornaria o processo mais atrativo. O resultado encontrado neste
trabalho mostra que o rendimento no sofre muita influncia quando utilizado 7% ou 3% de
enzima, ou seja, o biodiesel de leo de coco pode ser produzindo utilizando concentraes de
enzima abaixo de 7% fornecendo bons rendimentos
As Figuras 17, 18 e 19 mostram qual o melhor limite (-1 ou +1) que influencia
positivamente no rendimento do processo.

46

Figura 17. Influncia da razo molar, tipo de lcool e temperatura na varivel de

resposta.

Figura 18. Influncia da razo molar, tipo de lcool e concentrao de enzimas na

varivel de resposta.

47

Figura 19. Influncia do tipo de lcool, concentrao de enzimas e temperatura na

varivel de resposta.

Analisando as Figuras 17 a 19, observa-se que os maiores rendimentos ( 76,706%;

79,3%; 76,344%) ocorrem, na maioria dos casos, nos extremos positivos das variveis
independentes, ou seja, para se obter altos rendimentos deve-se utilizar uma quantidade
0

mxima da razo molar (1:10), alta temperatura (60 C), mxima concentrao de enzimas (7%)
e etanol como lcool.

*Influncia da Concentrao de enzimas:

Quanto maior a concentrao de enzima, maior o rendimento da reao [OLIVEIRA
et al., 2004; JOO et al., 2008]. Neste trabalho a concentrao de enzimas apresentou um
efeito positivo, apresentando um maior rendimento quando utilizado uma maior quantidade de
enzima 7%. Entretanto, quando se utilizou 3% de enzima este rendimento no diminuiu to
significamente, podendo-se ainda otimizar essa varivel em estudos futuros mantendo-se as
outras variveis nas melhores condies.

*Influncia da Razo molar:

A razo molar do substrato uma varivel com grande influncia na reao da sntese
do biodiesel. lcool em excesso na razo estequiomtrica 3:1 usado para assegurar uma alta
taxa de reao e minimizar as limitaes de difuso. Entretanto, nveis excessivos de lcool
podem inibir a atividade da enzima e diminuir, assim, sua atividade cataltica ao longo da
reao de transesterificao. Assim, uma alta razo leo:lcool significa uma maior polaridade

48

do meio, produzida pelo lcool e pela gua. Isso inativa a enzima e por consequncia o
rendimento de alquil steres [SALVADOR et al., 2009].
Como neste trabalho foram utilizados dois tipos de lcool, essas influncias foram
avaliadas separadamente.
Quando utilizado etanol, a razo molar apresentou efeito positivo, demonstrando, neste
caso, no haver inibio das enzimas por excesso do lcool. Este resultado corrobora o obtido
por FACCIO (2004) onde observou-se efeitos semelhantes quando da utilizao do leo de
mamona.
Em relao ao metanol, a razo molar apresentou efeito negativo, demonstrando que a
menor razo molar (1:6) apresentou melhores resultados. Isso pode ser explicado devido ao
fato de ocorrer maior desativao das enzimas pelo lcool de menor nmero de tomos de
carbono [BERNARDES et al.,2007].

*Influncia da Temperatura:
A taxa de reao aumenta com a temperatura. Neste trabalho foi utilizada uma faixa de
0

temperatura entre 40 C e 60 C, onde dentro desta faixa, a atividade da enzima aumentou com
o aumento da temperatura. Este aumento j foi comentado na determinao da atividade
lipoltica (Figura 13).
Porm, quando a temperatura interage com um lcool, esse comportamento no pode
ser generalizado. A temperatura influencia de maneira diferentes para cada tipo de lcool.
Neste trabalho foram utilizados metanol e etanol como agentes alcolicos. Essa interao pode
ser vista na Figura 16.
Quando utilizado etanol como lcool, a temperatura apresentou um efeito positivo,
demonstrando no haver inibio da enzima por altas temperaturas.
Quando o etanol trocado por metanol, percebeu-se uma queda bastante significativa
no rendimento. Isso pode ocorrer provavelmente devido a temperatura de ebulio do metanol
0

estar bem prxima da temperatura mxima utilizada (60 C), j que o metanol um lccol
0

bastante voltil, evaporando a 64,7 C.

*Influncia do Tipo de lcool:

O metanol utilizado como lcool na reao de transesterificao no apresentou bons
rendimentos quando comparado ao etanol. O resultado obtido para este lcool neste trabalho
corroboram o obtido por outros pesquisadores. O metanol um solvente altamente hidroflico
e, portanto, capaz de solubilizar e de remover a camada de gua essencial que envolve as
enzimas, o que pode causar a perda da atividade cataltica da lipase [BERNARDES et
al.,2007]. Segundo CHEN e WU (2003) os baixos resultados obtidos com metanol pode ser o
fato de que o material usado para imobilizar as enzimas (resina acrlica) pode adsorver
compostos polares como o metanol. Quando a concentrao de lcoois na mistura grande,
os lcoois formam pequenas gotas que se ligam as resinas das partculas.

49

A ligao desses lcoois nas enzimas bloqueia a reao (entrada) com os

triglicerdeos, causando baixos rendimentos.
A utilizao do etanol em reaes de transesterificao para obteno do biodiesel de
coco apresentou efeito positivo. Este resultado bastante interessante e atrativo, pelo fato do
etanol possuir algumas vantagens de uso em relao ao metanol, das quais podemos citar:
menor toxicidade, renovvel, e pode ser facilmente obtido aqui na regio.
Uma vez descobertas as melhores condies para a produo de biodiesel dentro da
faixa estudada neste trabalho, foi possvel obter a superfcie de resposta para o rendimento
utilizando-se a razo molar e a temperatura como variveis independentes (Figura 20). As
outras duas variveis estudadas (concentrao de enzimas e tipo de lcool) foram fixadas em
seus melhores resultados (7% e etanol). Analisando a Figura 20, percebe-se que utilizando o
etanol como lcool e 7% de enzima, o rendimento aumenta quando se utiliza uma razo molar
0

de 1:10 (+1) a 60 C (+1).

Figura 20. Superfcie de resposta para o rendimento em biodiesel em funo da razo molar e
temperatura.

50

CONCLUSO
Neste trabalho foram realizados estudos das principais propriedades fsico-qumicas do

leo de coco, como ndice de acidez, ndice de iodo, ndice de saponificao, ndice de
refrao, viscosidade, massa especfica, umidade, ponto de congelamento e composio em
cidos graxos. A importncia de se determinar estas propriedades, antes da realizao das
reaes de transesterificao analisar a qualidade do leo para obteno do biodiesel.
Atravs dos resultados obtidos, referentes a essas propriedades, possvel constatar que o
leo de coco analisado est numa faixa aceitvel de utilizao, visto que todos os valores
encontrados na caracterizao vo ao encontro aos valores descritos na literatura.
A obteno do biodiesel de coco foi conduzida por catlise enzimtica, na presena de
metanol ou etanol, como agentes de alcolise. As condies de processo; temperatura, razo
molar leo:lcool, concentrao de enzimas e tipo de lcool, foram variadas afim de se verificar
4

a influncia destas. Para tal, foi realizado um planejamento fatorial completo 2 .

Esse planejamento experimental mostrou-se eficiente no estudo da influncia das
varivies de processo. Os efeitos do tipo de lcool, temperatura, razo molar, concentrao de
enzima e interaes entre temperatura e razo molar, temperatura e tipo de lcool e razo
molar e tipo de lcool foram bastante significativos. O modelo encontrado se apresentou
ajustado s respostas do planejamento fatorial apresentando caractersticas de um modelo
significativo sob o ponto de vista estatstico e tambm preditivo dentro dos intervalos estudado
para cada varivel.
O melhor rendimento obtido neste trabalho (80,5%) foi adquirido nas condies de
0

60 C, utlizando 7 % de enzima, razo molar leo:lcool 1:10 e etanol como lcool. Os

resultados obtidos quando utilizado metanol no foram to relevantes quando comparados ao
etanol. Os resultados adquiridos utilizando etanol mostraram-se bastante atrativo, devido ao
etanol ser renovvel e facilmente obtido na regio de estudo deste trabalho.

51

SUGESTES PARA TRABALHOS FUTUROS

o

Determinar as propriedades fsico-qumicas do biocombustvel obtido, tais como:

viscosidade, massa especfica, ndice de acidez e ndice de saponificao;

Utilizar menores quantidades de enzimas, pois pde ser observado que a utilizao de
menores quantidades destas no diminui to significamente o rendimento;

Estudar a influncia da gua como varivel independente;

Reutilizar a enzima utilizada, lipase Candida Antarctica (Novozym 435), a fim de avaliar
seu rendimento. Esse se torna um dos tpicos mais interessantes, pois sabendo que
uma das desvantagens dos processos enzimticos o alto custo das enzimas, um bom
rendimento obtido com a reutilizao destas poder tornar o processo mais atrativo.

52

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