BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Normas y Procedimientos
Se define Bioseguridad como un conjunto de medidas preventivas
destinadas a proteger la salud de los trabajadores frente a riesgos por
agentes biolgicos, fsicos o qumicos en el laboratorio, as como
tambin indirectamente la proteccin del medio ambiente.
Las normas de seguridad han sido diseadas para reducir, a niveles
aceptables, los riesgos inherentes a la utilizacin de materiales
peligrosos. Se han seleccionado normas estrictas para agentes
peligrosos y menos estrictos para agentes que producen problemas
leves. Por tanto, las normas de seguridad son compromisos diseados
para permitir que el trabajo necesario se realice con una exposicin
de mnimo riesgo, tanto para las personas que lo realizan como para
las dems.
El jefe de laboratorio y el encargado de bioseguridad, en
representacin de la institucin son los responsables de velar por el
cumplimiento de las medidas de bioseguridad, sin embargo el
trabajador es, en ltima instancia, el responsable de cumplirlas. Es
por esto que es importante que todo el personal que realice trabajo
en el laboratorio, deba estar consciente de los riesgos involucrados en
el manejo de agente infecciosos; conocer los mecanismos prcticos
por los cuales se pueden producir infecciones y respetar
estrictamente los procedimientos y tcnicas especialmente diseadas
para este.
Situaciones de riesgo
El personal se puede ver expuesto a distintas situaciones de riesgo,
por agentes biolgicos, fsicos o qumicos presentes en un laboratorio.
Estas situaciones se clasifican internacionalmente de acuerdo al
grado de patogenicidad y peligrosidad de los microorganismos con
los que se trabaja a diario.
Clasificacin de riesgo segn su origen:
Riesgo por agentes fsicos
Ruidos
Vibraciones: Actan sobre tejidos y rganos por efecto
crnico
Temperatura (quemaduras)
Luz
Electricidad
Riesgo por agentes qumicos

Milisen Barrios Mamani Internado Microbiologa

Polvos
Humos
Vapores
Gases: va respiratoria, piel, vas digestivas y mucosas

Riesgo por agentes biolgicos

Es el riesgo de mayor importancia, que incluye a virus, bacterias
y hongos, capaces de causar accidentes y enfermedades, las causas
mas frecuentes son:
Accidentes al manipular muestras de forma no segura
Al no cumplir normas al manipular agentes infecciosos
Al no tener medios de proteccin adecuados
Personal no entrenado
Segn la peligrosidad que posean estos microorganismos se les
clasific
por grupo de riesgo. Esta clasificacin es de utilidad
exclusiva para el trabajo desarrollado en laboratorios.
Grupo de riesgo 1
(riesgo individual y poblacional
escaso o nulo)

Grupo de riesgo 2
(riesgo individual moderado,
riesgo poblacional bajo)

Grupo de riesgo 3
(riesgo individual elevado, riesgo
poblacional bajo)

Grupo de riesgo 4
(riesgo individual y poblacional
elevado)

Microorganismos que tienen

pocas probabilidades de provocar
enfermedades en el ser humano
o los animales. (Ej. E.coli)
Agentes patgenos que pueden
provocar enfermedades humanas
o animales pero que tienen pocas
probabilidades de entraar un
riesgo grave para el personal de
laboratorio, la poblacin, el
ganado o el medio ambiente. La
exposicin en el laboratorio
puede provocar una infeccin
grave, pero existen medidas
preventivas y teraputicas
eficaces y el riesgo de
propagacin es limitado. (Ej. S.
tiphy, virus de la hepatitis B o C)
Agentes patgenos que suelen
provocar enfermedades humanas
o animales graves, pero que de
ordinario no se propagan de un
individuo a otro. Existen medidas
preventivas y teraputicas
eficaces.(Ej. Chlamydia, M.
tuberculosis)
Agentes patgenos que suelen
provocar enfermedades graves
en el ser humano o los animales
y que se transmiten fcilmente

Milisen Barrios Mamani Internado Microbiologa

de un individuo a otro, directa o

indirectamente. Normalmente
no existen medidas preventivas y
teraputicas eficaces. (Ej. Ebola)

Niveles de bioseguridad
La bioseguridad depende bsicamente de la mantencin de buenas
prcticas de laboratorio, para esto es necesario realizar una
combinacin de hbitos de trabajo seguros, equipos de contencin
(primarios o secundarios) y un diseo adecuado para la realidad local
del laboratorio.
Con este objetivo se definen la contencin necesaria para proteger al
personal y al medio ambiente.
NIVEL DE
BIOSEGURIDA
D (NB)
NB BASICO 1

NB BASICO 2

NB
CONTENCIN
3

NB
CONTENCIN
MAXIMA 4

GRUPO
DE
RIESGO

PRACTICAS DE
LABORATORIO

Tcnicas
microbiolgicas
bsicas.

Tcnicas
microbiolgicas
bsicas y ropa
protectora, seal de
riesgo biolgico.

Practicas iguales que

NB-2 con ropa
especial, acceso
controlado y flujo
direccional del aire.

Practicas que nivel 3

mas cmara de
entrada con cierre
hermtico, salida con
ducha y eliminacin
especial de residuos.

EQUIPO DE
SEGURIDAD
Ninguno,
trabajo en el
mesn al
descubierto.
Trabajo en el
mesn al
descubierto y
cmara de
seguridad
biolgica (CBS).
CBS adems de
otros medios de
contencin
primaria
disponible
CBS de traje III
o trajes
pasteurizados
junto con CSB
de clases II
Autoclave de
buena puerta (a
travs de la
pared) aire
filtrado.

Milisen Barrios Mamani Internado Microbiologa

Precauciones estndar
Es el conjunto de medidas bsicas destinadas a proteger al personal
de salud, en la prctica clnica, y a los pacientes, de la exposicin a
productos biolgicos contaminados (sangre u otros fluidos corporales
contaminados).
Estas medidas se deben aplicar:
En la atencin directa de todos los pacientes (independiente
del diagnstico). En cualquier mbito de atencin de salud.
En la aplicacin de las precauciones estndares es importante que el
operador no slo se preocupe de su propia persona, sino tambin de
proteger a las personas a la cual se le presta una atencin directa,
adems del entorno.
En la aplicacin de estas medidas se consideran los siguientes
puntos:
Lavado de manos: Las manos y otras superficies de la piel, se
deben lavar lo ms pronto posible si se contamina con sangre y/o
fluidos corporales. El uso de guantes no excluye ni reemplaza el
lavado de manos.
Las manos deben lavarse:
Antes y despus de atender un paciente.
Siempre que exista contaminacin visible con sangre o lquidos
biolgicos.
Despus de completar el trabajo y antes de abandonar el
trabajo.
Despus de sacarse los guantes.
Antes y despus del uso de servicios higinicos.
Antes de cualquier otra actividad en la exista contacto con
membranas mucosas, ojos, piel con lesiones.
Barreras de contencin: Estas se clasifican en primarias y
secundarias.

Barrera de contencin primaria: Enfocadas a la proteccin del

personal y del ambiente del laboratorio mediante la utilizacin
de buenas tcnicas de trabajo y el uso de equipos de seguridad
apropiados. Las que incluyen el uso de:
Guantes
Gafas
Mascarillas
Pecheras

Milisen Barrios Mamani Internado Microbiologa

Barrera de contencin secundaria: Proteccin del ambiente

exterior al laboratorio de la exposicin a materiales infeccioso
mediante la combinacin del diseo de las instalaciones y
hbitos de trabajo seguros. Se incluyen en este grupo equipos
como autoclave, mesones con superficies lavables, lavamanos,
separacin fsica de los pasillos de acceso.

Acceso restringido al laboratorio: En la puerta de ingreso debe

estar el signo internacional de riesgo biolgico. El control de acceso
requiere que la puerta est errada mientras se trabaja.
HBITOS DE TRABAJO SEGURO
En el laboratorio existen diversos elementos nocivos o
potencialmente peligrosos para los trabajadores y el ambiente que lo
rodea, como productos biolgicos provenientes de los pacientes y los
reactivos qumicos de distinta naturaleza.
Los objetivos son entonces, proteger al personal frente a la exposicin
de agentes infecciosos, prevenir la contaminacin ambiental y
proporcionar un lugar de trabajo seguro. Tener conocimiento de estos
objetivos y llevarlos a cabo, sern de gran utilidad en la prevencin
de situaciones de riesgo.
Es de esta manera que existirn conductas que pondrn en riesgo el
trabajo y la seguridad del personal y de los pacientes, como otras que
favorecern la seguridad de ellos, denominndose como hbitos de
trabajos seguros.
Para esto es necesario conocer los distintos fluidos corporales a los
que nos podemos ver expuestos y el nivel de riesgo que representa
cada uno de ellos para el personal, pacientes y el entorno.
Los fluidos corporales son todas las secreciones o lquidos biolgicos,
fisiolgicos o patolgicos, que se producen en el organismo.
a. Fluidos corporales de alto riesgo:
Sangre
Fluidos corporales que contengan sangre visible
Semen
Secrecin vaginal
Liquido pleural, cefalorraquideo, sinovial, pericardico,
amnitico.
rganos y tejidos
b. Fluidos corporales de bajo riesgo:
Deposiciones
Secrecin nasal y tica
Expectoracin

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Lagrimas
Orina
Vmito
Excepto cualquiera de ellos que contenga sangre visible.

Independiente del tipo de fluido con el que se trabaje, un concepto

que debe estar siempre presente en cada momento y en cada uno de
los funcionarios del laboratorio, es el siguiente:
TODA MUESTRA O RECIPIENTE QUE CONTENGA FLUIDOS BIOLOGICOS
Y MICROBIOLOGICOS DEBE CONSIERARSE COMO POTENCIALMENTE
INFECTADO POR UNO O MAS AGENTES INFECCIOS (VIRUS DE LA
HEPATITIS B o C, HIV, OTROS AGENTES DE TRANSMISION
SANGUINEA)
NORMAS DE SEGURIDAD APLICADAS AL LABORATORIO DE
BACTERIOLOGA
Cabe recordar que los agentes microbiolgicos son invisibles al ojo
humano y que estos microorganismos estn en todas partes, que
pueden ser saprofitos o potencialmente patgenos. Y que en el
laboratorio existen fenmenos que sobresalen por los riesgos de
contaminacin que estos implican tanto en su presencia como en su
manejo.
Aerosoles:
Son el mayor problema de contaminacin en el laboratorio, es por
esto que cualquier procedimiento tcnico debe realizarse de tal forma
que se minimice la formacin de estos.
Los aerosoles son pequeas partculas desprendidas de las muestras
suspendidas en el aire (cerca del lugar de manipulacin), que pueden
ser potencialmente infecciosas.
Se producen de dos formas principalmente por atomizacin de
suspensiones lquidas o por rotura de fragmentos de sustancias
slidas.
Una de las casas mas comunes son las malas practicas como por
ejemplo enfriar las asas calientes en el agar, centrifugas no
hermticas, oler las placas, entre otras.
Los procedimientos de mayor riesgo son:
MANIOBRA
Apertura de un agitador
inmediatamente, despus de
agitar
un cultivo
Mezcladora abierta de inmediato
Cada de cultivo

COLONIAS
Incontables
1x 106
3 x 105

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Derrame en motor de centrifuga

1x105
(NOTA: Bacterias recogidas en muestras de aire a 60 cm. Del sitio de
la tcnica
se emplearon cultivos con 1010 grmenes/ml. los
equipos se utilizaron por 10
minutos.)
Aunque se ha destacado los riesgos microbiolgicos no se debe
olvidar que los productos qumicos tambin se encuentran en los
aerosoles y en este caso el resultado es acumulativo en el tiempo.
Aparte de estos existen equipos e instrumentos ue sobresalen por los
riesgos de contaminacin que implica su manejo.
1. Asa de siembra: El riesgo mayor ocurre en el proceso de
flameo en los mecheros. Los aerosoles caen en los mesones de
trabajo y en el operador. Para minimizarlos es esencial una
buena tcnica de flameo, empezando a incinerar la parte distal.
Adems no debe superar los 5 cm de longitud pues vibran si
son mayores lo que provoca salpicaduras.
2. Jeringas: Pueden ser peligrosas cuando se ocupan en lugar de
pipetas para dispensar soluciones bacterianas. La expulsin de
burbujas de aire produce aerosoles. Este riesgo debe tomarse
en consideracin cuando se utilizan jeringas en la reparacin de
analizadores.
3. Cultivos slidos: Las placas de Petri despus de su
inoculacin representan un gran riesgo de contaminacin,
especial cuidado con el agua de condensacin de las placas de
petri inoculadas. La rotura de las placas y tubos por cada
puede constituir un serio riesgo de contaminacin, que puede
ser favorecida por heridas y/o erosiones producidas al recoger
los fragmentos. No olvidar que adems de los aerosoles, la
proyeccin de material de cultivo contamina ropa y calzado del
personal. Otro mecanismo de difusin de microorganismos
patgenos es por cultivos de largo tiempo en los mesones y, por
otro lado, la invasin de insectos y artrpodos.
4. Centrfugas: Los aerosoles se producen en las centrfugas
cuando
Los tubos estn demasiado llenos.
Los bordes y el exterior del tubo estn contaminados.
Los tubos no estn cerrados o no tienen tapn
Ruptura de tubos (situacin de alto riesgo)
5. Tapones y sistemas de cierre: La apertura de tubos con
cultivos lquidos, independiente del sistema de cierre (tapn de
algodn o plstico, tapa rosca, etc.) puede producir aerosoles.
Este riesgo aumenta cuando se ha agitado el cultivo, aun sin
abrirlo. Si el interior del envase tiene presin negativa como el

Milisen Barrios Mamani Internado Microbiologa

caso de liofilizados, la entrada brusca del aire produce

turbulencias y la salida de partculas al exterior.
Higiene en el laboratorio
Se recomienda la limpieza diaria al final del trabajo y mantenerlo en
orden para disminuir los riesgos potenciales de accidentes o por
acumulacin de contaminantes; recoger basuras en bolsas plsticas,
limpiar fuentes de iluminacin, ventiladores, etc., utilizando paos
hmedos con limpiador, limpiar lavamanos, limpiar manchas en
muros, limpieza de pisos con paos con solucin detergentedesinfectante.
Conceptos generales

Esterilizacin: Es el empleo de agentes fsicos o qumicos para

erradicar todos los microorganismos y sus formas de resistencia
(virus,
bacterias,
hongos,
esporas)
sobre
superficies
inanimadas.
Desinfeccin: Es un procedimiento destinado a destruir
microorganismos patgenos pero no necesariamente sus
esporas.
Los
germicidas qumicos formulados como
desinfectantes se utilizan sobre superficies inanimadas y no
deben ser usadas en piel o tejidos.
Descontaminacin: Es un procedimiento destinado a eliminar
o reducir la contaminacin a un nivel de manipulacin sin
riesgo con respecto a la transmisin de la infeccin.
Limpieza: Conjunto de procedimientos destinados a la
disminucin de la carga bacteriana mediante el arrastre
mecnico con agua y jabn (detergente) de la suciedad visible.

Normas de higiene
1. Se usarn en todo momento batas o uniformes especiales para
el trabajo en el laboratorio.
2. Se usarn guantes protectores apropiados para todos los
procedimientos que puedan entraar contacto directo o
accidental con sangre, lquidos corporales y otros materiales
potencialmente infecciosos o animales infectados. Una vez
utilizados, los guantes se retirarn de forma asptica y a
continuacin se lavarn las manos.
3. El personal deber lavarse las manos despus de manipular
materiales potencialmente infecciosos, as como antes de
abandonar las zonas de trabajo del laboratorio.
4. Estar prohibido usar las prendas protectoras fuera del
laboratorio.
5. En las zonas de trabajo estar prohibido comer, beber, fumar,
aplicar cosmticos o manipular lentes de contacto.

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6. Estar prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo

humano en las zonas de trabajo del laboratorio.
Disposicin de material contaminado
Muchos de los desechos que se eliminan en el laboratorio son
potencialmente contaminantes. Por eso es importante adoptar
medidas de proteccin para el personal que all trabaja. De este modo
es necesario implementar un sistema adecuado de manejo de ellos
sabiendo de antemano que el personal de salud esta conciente que
una buena practica en su eliminacin, ser beneficioso tanto para
ellos como para toda la comunidad .Por tal motivo hay que hacer un
tratamiento de estos residuos infecciosos antes de ser eliminados al
alcantarillado o la basura.
Se considera desecho todo aquello que debe descartarse. En los
laboratorios, la descontaminacin y la eliminacin de desechos son
operaciones estrechamente relacionadas. En el trabajo cotidiano, son
pocos los materiales contaminados que es preciso retirar del
laboratorio o destruir. La mayor parte de la cristalera, los
instrumentos y la ropa del laboratorio vuelve a utilizarse o se recicla.
El principio bsico es que todo el material infeccioso ha de ser
descontaminado, esterilizado en autoclave o incinerado en el
laboratorio.
Descontaminacin
El tratamiento en autoclave de vapor constituye el mtodo de
eleccin para todos los procesos de descontaminacin. El material
destinado a la descontaminacin y eliminacin debe introducirse en
recipientes (por ejemplo en bolsas de plstico resistentes al
tratamiento en autoclave) que tengan un cdigo de color para indicar
si el contenido ha de pasar a la autoclave o a la incineracin
Deber adoptarse un sistema de identificacin y separacin del
material infeccioso y sus recipientes. Se seguirn las normas
nacionales e internacionales y se tendrn en cuenta las siguientes
categoras:

Desechos no contaminados (no infecciosos) que puedan

reutilizarse o reciclarse o eliminarse como si fueran basura en
general.
Objetos cortantes y punzantes contaminados (infecciosos):
agujas hipodrmicas, bisturs, cuchillas, vidrio roto; se
recogern siempre en recipientes a prueba de perforacin
dotados de tapaderas y sern tratados como material
infeccioso.
Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave
que despus pueda lavarse y volverse a utilizar o reciclarse.

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Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave y a

la eliminacin.
Material contaminado destinado a la incineracin directa.

Descontaminacin de mesones de trabajo y otras superficies

Estas superficies de trabajo siempre se deben limpiar con un
desinfectante ya sea hipoclorito de sodio (al 0,1% y 0,5%) o alcohol
al 70% despus de haber trabajado con agentes infecciosos o
muestras clnicas o despus de derrames, salpicaduras u otra
contaminacin por materiales infecciosos.
Objetos cortantes y punzantes
Las agujas hipodrmicas no se deben volver a tapar o cortar despus
de utilizarlas. El conjunto completo debe colocarse en un recipiente
de eliminacin especfico. Las jeringas desechables, utilizadas con o
sin aguja, se introducirn en recipientes de eliminacin apropiados y
se incinerarn, esterilizndolas previamente en autoclave si fuera
necesario.
Los recipientes de eliminacin de objetos cortantes y punzantes sern
resistentes a la perforacin y no se llenarn por completo. Cuando
estn llenos en sus tres cuartas partes se colocarn en un recipiente
de desechos infecciosos y se incinerarn, esterilizndolos primero
en autoclave si la prctica del laboratorio lo exige. Los recipientes de
eliminacin de objetos cortantes y punzantes no se desecharn en
vertederos.
Material contaminado (potencialmente infeccioso)
No se efectuar limpieza alguna de ningn material contaminado
(potencialmente infeccioso) que vaya a ser tratado en autoclave y
reutilizado. Cualquier limpieza o reparacin que se revele necesaria
se realizar siempre despus del paso por la autoclave o la
desinfeccin.
Aparte de los objetos cortantes y punzantes, todo el material
contaminado (potencialmente infeccioso) debe ser introducido en
recipientes impermeables y tratado en autoclave antes de proceder a
su eliminacin. Despus de pasar por el autoclave, el material puede
colocarse en recipientes apropiados para ser transportado al
incinerador. Si se dispone de un incinerador, no es necesario el
tratamiento en autoclave. Los recipientes de transporte reutilizables
deben ser impermeables y tener tapas que ajusten debidamente. Se
desinfectarn y limpiarn antes de devolverlos al laboratorio para un
uso posterior.

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En cada puesto de trabajo deben colocarse recipientes, tarros o

cubetas para desechos, de preferencia irrompibles (por ejemplo, de
plstico). Los recipientes para desechos habrn de ser
descontaminados y lavados antes de su reutilizacin.

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