AGAR CEREBRO CORAZN (BHI)

Es un medio de uso general adecuado para el cultivo de una amplia variedad de

tipos de organismos, incluidos las bacterias, levaduras y hongos filamentosos, a
partir de muestras clnicas (Flores et al., 1992).

El medio de infusin de cerebro corazn es una modificacin de las formulaciones

desarrolladas por Rosenow y Hayden en las que se adiciono infusin de cerebro
de ternera y difosfato de sodio. El medio de infusin cerebro corazn est
especificado en varios procedimientos estndares para la industria alimenticia y el
anlisis de aguas. Tambin es recomendado por la NCCLS para preparar el
inoculo para las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana (Sutton, D. 2003).
Este medio de infusin de carne de corazn y de cerebro de ternera as como la
peptona provee la fuente de carbono, nitrgeno, sulfuro y vitaminas. La dextrosa
acta como fuente de energa. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico
del medio. El fosfato disdico acta como buffer (Sutton, D. 2003).
Formula
Infusin de cerebro de
ternera
Infusin de corazn de
res
Peptona de gelatina
pH 7.4 0.2

200.0

Cloruro de siodio

250

Fosfato disodico

2.5

10.0

Dextrosa

2.0

Preparacin
Mtodo:
Suspender 37g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin
suave hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Dispensar en
tubos e vidrio, tapar y estelarizar en autoclave a 121C (15 libras de presin)
durante 15 minutos.
Procedimiento:
Inocular los tubos con una o dos gotas de la muestra en una pipeta estril. Los
hisopos pueden ser insertados dentro de los tubos. Para su utilizacin en las
pruebas de susceptibilidad, consultar las referencias apropiadas.
Siembra
De acuerdo a los fines de empleo
Incubacin
El tiempo, la temperatura y la atmosfera de incubacin, sern optimas y
dependern del microorganismo que se est investigando.
Caractersticas del medio
Medio preparado: mbar claro
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35C
Medio preparado: 2-8C
Resultados
Cepas
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305
Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533
Candida albicans ATCC 60193
Listeria monocytogenes atcc 19112
Shigella flexneri ATCC 12022
Sin inocular

Resultado del crecimiento

Crecimiento de bueno a excelente
Crecimiento de bueno a excelente
Crecimiento de bueno a excelente
Crecimiento de bueno a excelente
Crecimiento de bueno a excelente
mbar claro

AGAR DE LACTOSA
BD Drigalski Lactose Agar es un medio selectivo y de diferenciacin para el
aislamiento de Enterobacteriaceae y determinados organismos no fermentadores
a partir de muestras clnicas.

Fundamento
BD Drigalski Lactose Agar es un medio selectivo de diferenciacin similar al agar
MacConkey y los medios basados de desoxicolato. Se utiliza como medio de
diferenciacin selectivo para bacilos gram negativos (Enterobacteriaceae y
determinados organismos no fermentadores) e
inhibe las bacterias gram
positivas. Se recomienda su uso con muestras clnicas que probablemente
contengan flora microbiana mixta, tales como las procedentes de orina, vas
respiratorias y heridas, porque permite una agrupacin preliminar de las bacterias
gram negativas entricas y de otras clases (Dupeyron et al., 1986).
El medio tambin se ha utilizado para el aislamiento de Salmonella y Shigella a
partir de muestras fecales como medio con baja selectividad. En BD Drigalski
Lactose Agar, la peptona, el extracto de carne y el extracto de levadura
proporcionan nutrientes. El desoxicolato de sodio, el cristal violeta y el tiosulfato
inhiben las bacterias gram positivas. La diferenciacin de microorganismos
entricos gram negativos en fermentadores de lactosa (color amarillo) y no
fermentadores de lactosa (color azul) se logra gracias a la combinacin de lactosa
y el indicador azul de bromotimol (Zajc et al., 1987).
Formula por litro de agua destilada
Peptona
Extracto de carne
Extracto de levadura
Desoxicolato de sodio
Tiosulfato sdico

15,0g
3,0
3,0
1,0
1,0

Lactosa
Cristal violeta
Azul de bromotimol
Agar
pH 7,3 0,2

15,0
0,005
0,08
11,0

Procedimiento de anlisis
Extender las muestras tan pronto como sea posible despus de recibirlas en el
laboratorio. La placa de extensin se utiliza principalmente para aislar los cultivos
puros de las muestras con flora mixta.
Si, por el contrario, el material se cultiva directamente empleando una torunda,
hacerla girar en una seccin pequea cercana al borde, extendiendo luego a partir
de esta rea inoculada.
Para aislar toda la gama de patgenos presentes en la muestra, incluir
BD Columbia Agar with 5% Sheep Blood. Incubar en atmsfera aerobia a 35 37
C durante 18 24 h.
Resultados
En BD Drigalski lactose agar, la apariencia caracterstica es la siguiente:
E. Coli, Kelbsiella, Enterobacter

Colonias amarillas rodeadas de medio

amarillo
Providencia,
Hafnia, Colonias azul grisceas a azul verdoso,
Serratia,
Alcaligenes, medio de azul a azul verdoso

Proteus,
Salmonella,
Pseudomonas
Enterococci, Staphylococci

Inhibido

AGAR MAC CONKEY

El agar Mac Conkey es un tipo de gelatina que se produce de unas algas rojas. Se
usa ampliamente en microbiologa por sus propiedades al utilizarse para el
aislamiento y cultivo de bacilos Gram negativos de fcil desarrollo, aerobios y
anaerobios facultativos.

Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla
de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el
desarrollo
de
gran
parte
de
la
flora
Gram
positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las
colonias, y la precipitacin de las sales biliares (Conkey M. 1905).
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Formula (g/litro)
Peptona
Pluripeptona
Lactosa
Mezcla de sales billares
Cloruro de sodio
Agar
Rojo neutro
Cristal violeta
pH final: 7,1 0,2

17.0
3.0
10.0
1.5
5.0
13.5
0.03
0.001

Procedimiento
Suspender 50 g / litro de agar y Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar.
Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta disolver.
Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 minutos.
Uso en medio a analizar
Para su utilizacin se necesita insertar en el medio a analizar a relacin 1-15 esto
es, se debe aadir 1 ml de muestra y agregar aproximadamente 15 ml de medio
de cultivo a 45-50 C.
Incubacin
Durante 18-48 horas, a 35-37 C, en atmsfera aerbica.
Resultados
Microorganismo
Escherichia coli ATCC 25922
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Samonella typhimurium ATCC 14028
Shigella flexneri ATCC 12022
Proteus mirabilis ATCC 43071
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Caractersticas del medio
Medio preparado: rojo prpura
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.

Colonias
Rojas con halo turbio
Rosadas mucosas
Incoloras, transparentes
Incoloras, transparentes
Incoloras, transparentes
Diminutas, incoloras, opacas

AGAR PARA EL MTODO ESTANDAR

Segn los mtodos de la APHA se recomienda para el recuento de bacterias de
inters sanitario presentes en lcteos, agua y diversos alimentos para determinar
el grado de contaminacin o carga microbiana. Como medio preparado listo para
usarse (Catlogo 1020-P) en la cuenta total de microorganismos en lquidos.

Fundamento
La presencia de peptona de casena proporciona al medio aminocido y otros
complejos nitrogenados, sustancias necesarias como soporte de crecimiento, el
extracto de levadura aporta vitamina B. La dextrosa es la fuente de energa. La
frmula de este medio se ha diseado por APHA (American Public Health
Asociation) a manera de obtener un recuento de bacterias mesoflicas aerobias
que pueden desarrollarse en presencia de un conjunto de ingredientes con
capacidad nutricional uniforme de manera que los resultados de cuenta en placa
proporcionan una informacin estandarizada sobre la poblacin microbiana en un
ambiente o material en estudio, lo cual permite obtener valores tiles para
evaluacin sanitaria. Utilizar el medio de cultivo de acuerdo a la tcnica de ensayo
(Gray L. 1995).
Formula en gramos por litro de agua destilada
Agar
Dextrosa
Extracto de levadura
Peptona de casena
pH 7.0 0.2
Preparacin

15.0
1.0
2.5
5.0

Rehidratar 23.5 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15

minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1
minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121C (15 lbs de
presin) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45C antes de usarlo.
Resultados
Microorganismo
Escherichia coli

Cepa
ATCC 25922

Staphylococcus aureus

ATCC 25923

Enterococcus faecalis

ATCC 29212

Lactobacillus casei

ATCC 7469

Salmonella typhimurium

ATCC 14028

Crecimiento
Colonias
medianas
crema
Colonias
medianas
crema
Colonias
pequeas
blancas
Colonias
pequeas
blancas o crema
Colonias grandes crema

Refrencias bibliograficas

Barnes Ella M. and Goldberg H. S. (1962) J. Appl. Bact. 25(1). 94-106..

Dupeyron, C.M, G.A. Guillemin, and G.J. Leluan. 1986. Rapid diagnosis of gram
negative urinary infections: identification and antimicrobial susceptibility testing in
24 hours.J. Clin. Pathol.39: 208-11.

Flores, M., D. Welch, Smith J. 1992. Section 6. Mycology: culture media, p.6.7.16.7.3. In: H.D. Isenberg (ed.), Clinical microbiology procedures handbook, vol. 1.
American Society for Microbiology, Washington, D.C.

Gray, L.D. 1995 Escherichia, Salmonella, Shigella and Yersinia, p450-456. In P.R.
Murray, E.J. Baron, M.A. Pfaller, F.C. Tenover, and R.H. Yolken (ed.), Manual of
clinical microbiology, 6th ed. American Society for Microbiology
Mac Conke , A.1905.Lactose-fermenting bacteria in feces. J. Hyg. 5:333379BIBLIOGRAFA
Sutton, D.A. 2003. Specimen collection, transport, and processing: mycology. In:
Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.).
Manual of clinical microbiology, 8thed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
Zajc-Satler J., and A.Z. Gragas.1987. Xylose lysine deoxycholate agar for the
isolation of Salmonella and Shigella from clinical specimens. Zentralbl. Bakteriol.
Orig A 237: 196-200.