ANLISIS DE VITAMINAS

Universidad Nacional Mayor de San Marcos Ctedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional

2015-II

PRCTICA N10

ANLISIS DE VITAMINAS
ANLISIS CUALITATIVO Y CUANTITATIVO DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Mara Caparachin Gonzles, Xiomara Gernimo Pez, Ana Flores Mamani,
Jimy Prez Escalante, Joel Candela Rojas1.1. Alumnos de la Ctedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional de la Facultad de Farmacia y Bioqumica.
Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima, Per. 2015.

RESUMEN

INTRODUCCIN: Las vitaminas tienen una vital importancia en la alimentacin

de los seres humanos tal es el caso que su ausencia produce desnutricin una
problemtica ampliamente trata en nuestro pas.
Las vitaminas liposolubles A, D, E y K son factores esenciales en el metabolismo
humano. Tradicionalmente se han utilizado mtodos para la cuantificacin de
vitaminas liposolubles que utilizan cromatografa de lquidos por fase normal y
cromatografa de gases.
MTODOS: Se realiz reacciones de coloracin (Reaccin de Carr-Price, de
Liebermann, de Tiocromo, entre otros) a partir de diversas muestras que contenan vitamina A, vitamina D, vitamina C, complejo B, vitamina B2 y vitamina B6;
adems se cuantific la cantidad de miligramos vitamina C de una muestra ctrica
por el mtodo de xido - reduccin.
RESULTADOS: En el anlisis cualitativo de vitaminas hidrosolubles, la reaccin
de Carr Price, fue positivo ; mientras que la reaccin de Lieberman, negativo.
En el anlisis de vitaminas liposolubles, casi todas las reacciones nos salieron
positivos, con excepcin en la reaccin de Fehling. Finalmente se determin
cuantitativamente, 16,461 mg de vitamina C en nuestra muestra problema.
CONCLUSIONES: Se identific experimentalmente a las vitaminas hidrosolubles y liposolubles .Se determin cuantitativamente, la cantidad de miligramos
de cido ctrico que hay dentro de la muestra problema, la cual fue 16,461

PALABRAS CLAVES: vitaminas, liposolubles, ctrica.

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ABSTRACT

INTRODUCTION: The vitamins are vital in feeding humans as is the case with their
absence malnutrition is largely a problem in our country.
Fat-soluble vitamins A, D, E and K are essential factors in human metabolism. Traditionally used methods for quantifying soluble vitamin using liquid chromatography
on normal phase and gas chromatography.
METHODS : staining reactions (Carr-Price reaction, Liebermann, of thiochrome,
among others) was performed from several samples containing vitamin A, vitamin
D, vitamin C, B complex, vitamin B2 and vitamin B6; reduction - plus the number of
milligrams of vitamin C by the method shown citrus rust was measured.
RESULTS: In the qualitative analysis of water-soluble vitamins, -Price Carr's reaction was positive; while reaction Lieberman negative. In the analysis of fat-soluble
vitamins, almost all they left us positive reactions, except in the Fehling reaction.
Finally determined quantitatively, 16,461 mg of vitamin C in our sample.
CONCLUSIONS: a water-soluble and fat-soluble vitamins will be quantitatively determined experimentally .It identified, the number of milligrams of citric acid that's in
the sample, which was 16,461

KEYWORDS: vitamins, soluble, citrus.

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INTRODUCCIN
Las vitaminas tienen una vital importancia en la alimentacin de los seres humanos
tal es el caso que su ausencia produce desnutricin una problemtica ampliamente
trata en nuestro pas (1).
La desnutricin por micronutrientes es una amenaza global que actualmente afecta
a ms de un tercio de la poblacin mundial. Con el inters creciente en dietas balanceadas y consumo de alimentos saludables, mejorar la calidad nutricional de alimentos y bebidas a travs de la fortificacin con vitaminas. Estas vitaminas fueron
incluidas y muchos productos farmacuticos adems creando tambin suplementos
alimenticios (2).
ANLISIS DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Las vitaminas liposolubles A, D, E y K son factores esenciales en el metabolismo
humano. Por razones nutricionales y econmicas es importante tener un mtodo
analtico sensible y robusto. Tradicionalmente se han utilizado mtodos para la
cuantificacin de vitaminas liposolubles que utilizan cromatografa de lquidos por
fase normal y cromatografa de gases (3).
ANLISIS DE VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Las vitaminas hidrosolubles son ms inestables por eso hallar un mtodo de anlisis
que permita el anlisis de todas las vitaminas de este grupo es complejo pero los
mtodos de anlisis que cumplan con los requisitos de linealidad, exactitud, precisin, selectividad, lmites de deteccin y cuantificacin, adecuacin del sistema y
estabilidad de las soluciones son usados como vlidos y permiten su cuantificacin
(4).

Figura 1. Vitaminas liposolubles

Fuente: botanic online, 2012
Figura 1.Fuente de vitaminas

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II.
I.

MATERIALES Y MTODOS

Manual de laboratorio de Farmacognosia II. (Jurado, 2015)

Manual de laboratorio de Farmacognosia II. (Jurado, 2015)

II.I. ANLISIS CUALITATIVO

Materiales de metal:

Gradilla de 12 tubos
Esptula
Materiales de vidrio:
Tubos pirex 10 ml
Beaker pirex 50 ml, 100ml, 250
ml
Matraz pirex 100ml

Reactivos generales:

Reactivo de Carr Price

Reactivo de Cloroformo
Reactivo SbCl3
Reactivo de Liberman
Reactivo de Benedict
Reactivo cido silitungstinico
Reactivo FeCl3
HCl
NaOH

Titulacin

Reactivo valorante : 2.6-diclorofenol-indofenol

Solucin extractora: cido metafosfrico y cido ctrico
Analito : Vitamina C

Equipos:

Bao serolgico para laboratorio

PROCEDIMIENTO

VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Tabla 1. Procedimiento de vitaminas liposolubles

VITAMINAS
BLES
Vitamina A

Vitamina D

LIPOSOLUReaccion
de Carr
Price , evaporar 3 ml
del extracto
etreo ,disolver en
cloroformo
y adicionar
gotas
de
S.R SbCl3
R, de Liebermann
,evaporar
0.5 ml del
extracto
etreo ,adicionar 1 ml
de
cloroformo , 1 ml
de anhidro
actico
y
gotas
de
H2SO4 CC
en zona

Metodologa:

Fuente: Jurado, 2015

Reaccin de coloracin
Volumetra

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VITAMINAS
BLES

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HIDROSOLUII.II. ANLISIS
TIVO

Tabla 2. Procedimiento de vitaminas hidrosolubles

COMPLEJO B

VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Tratar V gotas de filtrado con V gotas de
S.R. Fehling o Benedict, calentar
VITAMINA
Diluir 1ml de acido asC
crbico al 2% con pocos ml de 2,6 diclorofenolindofenol
Tratar V gotas de filtrado con S.R. yodo
R. tiocromo: disolver
mg de la muestra en
VII gotas de NaOH
0,5 N, adicionar 1ml
de ferrocianuro de potasio al 10%, 1ml de
alcohol isobutilico y
agitar por 2 minutos
Precipitacion con el
acido silicotungstico:
Tratar mg de muestra
con agua, adicionar
HCl diluido y calentar
ligeramente, adicionar
gotas de S.R. acido
silicotungstico.
Tratando una solucin
de vit B1 con HgCl2
Tratando una solucin
de Vit B2 con S.R.
yodo
Disolver mg de muesVITAMINA
tra con agua, de una
B2
coloracin amarillenta.
Tratar 1ml de solucin
VITAMINA
e vit B6 con S.R. de
B6
FeCl3

CUANTITA-

Determinacin de cido ascrbico

MUESTRA Y
BLANCO: 2ml de
jugo de limn

ESTANDAR

Tomar 2ml de solucin de cido ascrbico 25mg/100ml

5ml de solucin de cido metafosforico al 5%

Cerrar hermticamente

AGITAR BIEN

TITULAR: 2,6 diclorofenol indofenol

Grfico 1. Procedimiento para la determinacin de

cido ascrbico
Fuente: propia, 2015

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III.RESULTADOS
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
III.I. ANLISIS CUALITATIVO

VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Tabla 4. Resultados de la identificacin de Vitaminas Hidrosolubles.

-VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Tabla 3. Resultados de la identificacin de Vitaminas Hidrosolubles.

REACCIONES
DE VITAMINAS
LIPOSOLUBLES
R. DE CAR PRINCE
R.DE LIEBERMANN

RESULTADO

++
-

Leyenda: - negativo, + poco, ++ abundante.

Fuente: Jurado, 2015

Figura2. A: Reaccin de Carr-Pierce en

Vitamina A; B: Reaccin de Liebermann
en Vitamina D

VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Precipitado
rojo de oxido
cuproso (Fig
1)
VITAMINA
Decoloracion
C
de reactivo
(Fig 2)
Decoloracion
de reactivo
(Fig 3)
Fluorescencia
azu (Fig 4)l
Precipitado
caracterstico
(Fig 5)
COMPLEJO
B
Precipitado
blanco (Fig 6)
Precipitado
rojo pardo
(Fig 7)
Fluorescencia
VITAMINA
verde (FIg
B2
8A)
Coloracin roVITAMINA
sada que
B6
pasa a rojo
(Fig 8B)

RESULTADO
-

+++

++
++

++
++

++

++

Leyenda: - negativo, + poco, ++ abundante.

Fuente: Jurado, 2015

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Figura 3. Resultado
negativo coloracin
turquesa

Figura 4. Resultado
positivo, desaparece el
color

Figura 9. Resultado positivo, Precipitado pardorojizo.

Fuente: propia, 2015

Fuente: propia, 2015

Fuente: propia, 2015

Figura 5. Resultado
positivo, desaparece
el color

Figura 6. Resultado positivo, fluorescencia azul.

Fuente:
2015

propia,

Fuente: propia, 2015

Fig. 10A. Coloracin amarilla (Vit. B2)

B. Coloracin roja (Vit. B6)
Fuente: propia, 2015

III.II. ANLISIS CUANTITATIVO

Figura 7. Resultado
positivo, Precipitado
caracterstico.

Figura 8. Resultado positivo, Precipitado

blanco.
Fuente: propia, 2015

Fuente:
2015

propia,

Determinacin de cido ascrbico

Gasto del blanco (Gb): 0.05 ml

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Gasto de la muestra (Gm): 5,4ml

Gasto de estandarizacin (Gst) :
0,7ml
=

5,4 0.05
=
2
0.7 0,05

= 16,461

Fig. 11: Titulacin con 2,6 diclorofenol indofenol

(color azul) A: incoloro B: coloracin ligeramente
rosada
Fuente: propia, 2015

IV.

: DISCUSIN

Las vitaminas son sustancias orgnicas, no relacionadas estructuralmente

entre s, que precisan ser ingeridas en
.

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pequeas cantidades con la dieta.

Aunque la dieta es la principal fuente,
existen otras fuentes: por ejemplo, la
vitamina D se sintetiza en la piel expuesta a la luz ultravioleta y la vitamina
K se sintetiza por la flora bacteriana.
Las vitaminas son micronutrientes
esenciales para el mantenimiento de
funciones vitales del organismo, pudiendo actuar como coenzimas, antioxidantes u hormonas. Al no tener relacin estructural bsicamente la identificacin como su cuantificacin es diversa y cada tcnica tiene que ser validada y acepta segn los requerimientos que esta pueda presentar. Por eso
la bsqueda de estandarizar mtodos
para poder cuantificar las vitaminas
genera problemas por su gran diversidad y por diferentes caractersticas fisicoqumicas que presenta3
El cido ascrbico contenido en la
muestra del limn pudo ser determinado cuantitavamente mediante titulacin con solucin volumtrica de diclorofenolindofenol, que a la vez sirve
como indicador, durante la titulacin,
el color azul de la solucin de diclorofenolindofenol desaparece por la accin reductora del cido ascrbico,
cuando se llega al punto final se imparte un color rojizo permanente debido al ligero exceso del agente titulador, podemos explicar la reaccin de
esta manera5

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IV.
CONCLUSIN
Se identific experimentalmente por
medio de la reaccin de Car-Prince , a
la vitamina A
Se identific experimentalmente por
medio de las reacciones cualitativas
especficas de vitaminas hidrosolubles, al Complejo B .B6 y B2

Fig. 12: Reaccin del poder reductor de 2,6 diclorofenolindofenol

Se determin experimentalmente, por

medio de la volumetra, la cantidad de
mg de cido ctrico que se encuentra
en la muestra problema, el cual fue
,16.461 miligramos

Fuente: propia, 2015

Se determin la cantidad de vitamina

C por el mtodo de xido - reduccin
de una muestra ctrica, cuyo resultado
fue 16,461 mg. Sin embargo, segn
Rosales y Arias (2015), esa cantidad
puede variar; ya que en un estudio, el
contenido de vitamina C de los compuestos nutritivos de un arbusto andino fue determinado por el mtodo
espectrofotomtrico, cuyos resultados
mostraron una amplia variacin con diferencias significativas en frutos (p <
0,05), y el estado maduro present el
mayor contenido (181,86 4,45
mg/100 g de fruto); sin embargo, la
cantidad de vitamina C descendi en
el estado sobre maduro. Esto quiere
decir, que el estado de madurez podra influenciar la cantidad de vitamina
C presente en un fruto, siendo dicho
contenido proporcional al estado de
madurez del fruto, pero sin llegar a la
sobre maduracin6.

V.

1.

2.

3.

4.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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Health Care Professional USP
DI 15 ed. United States Pharmacopeial Convention, Inc.
Rockville:
Mack
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1995:2802
United States Pharmacopeia
USP 23. United States Pharmacopeial Convention, Inc.
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Mack
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1995:2143-6,2162-8
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Normas, Buena Fabricacin y
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1989:8,38,43-44,57,61.
Pasteelnick LA: Analtycal
Methods Validation. En: Loftus
Bernard T, Nash RA, eds

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5.

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Genaro A. Remington Farmacia. Edicion medica panamericana. Madrid. 2003. 567.
Rosales A, Arias G. Vitamina
C Y parmetros fisicoqumicos
durante la maduracin de Berberis lobbiana untusha. Revista Sociedad Qumica del
Per, 2015. 81(1).

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