Informe de Prctica de Laboratorio

LABORATORIO DE ANALISIS
INSTRUMENTAL

FACULTAD
DE
INGENIERIA

Determinacin de cafena y acido benzoico en la bebida energizante

Ana Melisa Castao S.801314075 Silvana Ruiz Q.801220243
Fecha de presentacin

14/10/2015

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Resumen
Se realizo la cuantificacin de cafena y cido benzoico en bebidas energizantes (peak) mediante la tcnica de espectroscopia de
Ultravioleta-visible. El anlisis se realizo a partir de una muestra de bebida energizante adecuada tanto para el anlisis de cafena
como para el anlisis de acido benzoico, con la ayuda de cinco estndares preparados a partir de una solucin madre de concentracin
conocida de acido benzoico (10mg/L) y cafena (1000mg/L), para el anlisis se realizo un barrido espectral para determinar la longitud
de onda de trabajo (cafena=273nm, acido benzoico=230nm), despus de tener claridad con las longitudes de onda para cada uno de
los anlisis en el espectrofotmetro se midi los valores de la absorbancia de los estndares para realizar curva de calibracin
grafiando absorbancia vs concentracin, de esta se deba calcular por medio de una regresin lineal la concentracin de estos dos
compuestos en la bebida. Los resultados de sta prctica
Palabras Clave: Acido benzoico; Barrido espectral; Cafena; Estndares
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1.

INTRODUCCIN

La espectrometra UV-Vis es una tcnica eficaz para identificar

o asignar una estructura a los compuestos qumicos (orgnicos
o inorgnicos) y medir sus concentraciones, ya sean en sistemas
de uno o ms componentes absorbentes. La espectrometra
UV-VIS es probablemente la herramienta ms til para las
determinaciones cuantitativas en diversas reas. Esto es debido
a su versatilidad, precisin y sensibilidad. Se puede utilizar para
la determinacin directa de un gran nmero de especies
orgnicas, inorgnicas y bioqumicas con precisin en
concentraciones bastante bajas; es decir, de 10-4 a 10-5 incluso
inferior.

Seleccin de la longitud de onda de medicin.

En ausencia de sustancias que interfieren, las mediciones se
realizan a la longitud de onda mxima (max) del pico ms
grande en el espectro de absorcin. En esta longitud de onda la
absorbancia es ms sensible a la concentracin. Adems, en
muchos casos el pico de absorcin se ensancha en un intervalo
de longitudes de onda cercanas al mximo ( max), por lo cual no
hay ningn cambio apreciable en el valor de la absorbancia, es
decir, la medicin no es muy sensible a la longitud de onda.

Validacin de la ley de Lambert-Beer.

Para calcular la concentracin de un analito conocido se mide
su absorbancia a una o ms longitudes de onda y
posteriormente se emplea su coeficiente de absortividad ()
junto con la ley de Lambert-Beer. Sin embargo, generalmente el
valor de no se conoce con precisin para las especies que se
determinan en las condiciones de la medicin. Por lo tanto, en
la mayora de los mtodos este parmetro se puede obviar, al
construir una funcin analtica o curva de calibracin analtica.
Esta ltima se obtiene graficando la absorbancia medida a una
longitud de onda fija, de diferentes soluciones de referencia
(tambin llamadas soluciones estndar o soluciones patrn) del
analito en cuestin, contra sus concentraciones conocidas. Si la
ley de Lambert-Beer se aplica al graficar la absorbancia vs. la
concentracin se produce una lnea recta que pasa por el origen.
La primera lectura es la absorbancia de la muestra sola y la
segunda lectura es la absorbancia de la muestra del analito a la
cual se le adicion una cantidad conocida del mismo analito y
as sucesivamente. Las lecturas obtenidas de este modo se
trazan para obtener la curva de calibracin. Si la ley de Beer se
cumple, es decir, se obtiene una lnea recta; entonces puede
obtenerse la concentracin desconocida de la solucin, a travs
de la extrapolacin de la curva de calibracin.

Bebidas energizantes
Tambin hipertnicas son bebidas sin alcohol y con algunas
virtudes estimulantes que desde hace ms de una dcada han
salido al mercado mundial ofreciendo al consumidor supuestas
virtudes regeneradoras de la fatiga y el agotamiento, adems
de aumentar la habilidad mental y desintoxicar el cuerpo.
Estn
compuestas
principalmente
por cafena,
varias vitaminas, y otras sustancias naturales orgnicas como
la taurina, que eliminan la sensacin de agotamiento de la
persona que las consume.

Cafena
La cafena es un alcaloide del grupo de las xantinas, slido
cristalino, blanco y de sabor amargo, que acta como
una droga psicoactiva, levemente disociativa y estimulante por
su accin antagonista no selectiva de los receptores
de adenosina.
La cafena es una sustancia amarga que se encuentra en el
caf, el t, bebidas gaseosas, chocolate, nueces de cola y
ciertas medicinas. Tiene muchos efectos en el metabolismo del
cuerpo, incluyendo la estimulacin del sistema nervioso
central. sta puede hacerlo sentirse ms alerta y aumentar su
energa.
Acido benzoico
El cido benzoico es un compuesto qumico integrante del
grupo de los cidos carboxlicos, formado, entre otros, por los
cidos oleico, lctico y esterico. La principal aplicacin del
cido benzoico y sus derivados es como conservante de
alimentos de pH cido. Son eficaces para proteger los
alimentos contra la aparicin de fermentaciones no deseadas y
moho. Si se usa el cido benzoico junto con dixido de azufre
o algunos otros sulfitos, sirve para atacar microorganismos de
espectro ms amplio.
Se utiliza tambin como conservante en bebidas refrescantes,
en zumos para uso industrial, en cierto tipo de productos
lcteos, en repostera y galletas, en conservas vegetales como
el tomate, en mermeladas, margarinas y salsas, as como en
crustceos frescos o congelados.
2.

MATERIALES Y REACTIVOS

2.1 Materiales
Bao mara
Espectrofotmetro
Celdas de cuarzo
Balones volumtricos de 5 y 100 ml
Tubos de ensayo

2.2 Reactivos
Bebida energizante peak
Solucin de Benzoato de sodio 10mg/L
Solucin de cafena 1000mg/L
acido clorhdrico 0.010 M

3.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

V 1=

C 2 V 2
C1

V 1=

50 mg/ L 5 ml
=0.25 ml
1000 mg/L

V 2=

75 mg /L 5 ml
=0.375 ml
1000 mg/L

V 3=

100 mg/L 5 ml
=0.5 ml
1000 mg/ L

V 4=

125 mg /L 5 ml
=0.625 ml
1000 mg/L

V 5=

150 mg/L 5 ml
=0.75 ml
150 mg/L

3.1Preparacin de la muestra (por triplicado )

a) Se tom 15 ml de bebida energizante
b) Se puso al bao mara hasta eliminar el CO2
c) Se dejo enfrial y se tom 10 ml y se puso en matraz
aforado de 50 ml
d) Se le agrego 10 ml de HCl y

se aforo con agua

destilada hasta 50ml

3.2 Preparacin estndares para la construccin de la

curva de calibracin de Cafena
a) De una solucin madre de cafena de concentracin
1000mg/L se prepar estndares de 50,75,100,125 y
150 mg/L en matraz aforado de 25ml(Tabla 1)
b) Se les agrego 10 ml de HCl 0,01 M
c) Se aforo con agua destilada hasta 25ml
3.3 Preparacin estndares para la construccin de la
curva de calibracin de Acido benzoico
a) De una solucin madre de acido benzoico de
concentracin 10mg/L se prepar estndares de
2,4,6,8y10mg/L en matraz aforado de 25ml(Tabla 2)
b) Se les agrego 10 ml de HCl 0,01 M
c) Se aforo con agua destilada hasta 25ml

Patrn

Concentracin
Volumen a tomar
ppm
(ml)
1
50
0.25
2
75
0.375
3
100
0.5
4
125
0.625
5
150
0.75
Tabla 1: Datos para la preparacin de los patrones de la
curva de calibracin de cafena
4.2 Construccin de la curva de calibracin para cafena
Para la construccin de la curva de calibracin para
concentracin de cafena se usaron los siguientes datos .

4.

RESULTADOS

4.1 Patrones de la curva de calibracin de cafena

Utilizando la siguiente formula se obtuvieron los volmenes
para la preparacin de los patrones de cafena
C1V1=C2V2
Donde:
C1= concentracin de la solucin madre de cafena
V1= volumen a tomar para preparar los estndares
V2=5 ml
C2=concentracin de los estndares

Concentraci
n ppm

Absorbancia a 273nm
A1

A2

A3

50

3,18

3,17

3,18

3,18

75

3,19

3,20

3,21

3,20

100

3,22

3,22

3,23

3,22

125

3,25

3,25

3,24

3,25

150

3,27

3,27

3,26

3,27

Mp

3,23

3,22

3,23

3,23

4.3 Curva de calibracin

concentracin de cafena

MTC

cuantificacin

de

En la siguiente curva se grafic absorbancia vs concentracin y

por interpolacin se obtuvo la concentracin (mg/L) de cafena
en la bebida PEAK

V 1=

2 mg/ L 5 ml
=1 ml
10 mg/L

V 2=

4 mg/ L 5 ml
=2 ml
10 mg/ L

V 3=

6 mg/ L 5 ml
=3 ml
10 mg/ L

V 4=

8 mg/L 5 ml
=4 ml
10 mg/ L

V 5=

10 mg /L 5 ml
=5 ml
10 mg/ L

Curva de calibracion para concentracion de cafeina

Absorbancia 273nm

40 60 80 100 120 140 160

concentracion (mg/L)

Por el metodo de regresin lineal se obtuvo la concentracin de

cafena teniendo en cuenta la siguiente formula:
A = 0,0009 C+3,1305
Donde:
A= absorbancia de las muestras de peak
C= contenido de cafena en la bebida energizante peak (mg/L)

C=

C=

A3,1305
0,0009

3,233,1305
0,0009

C=110,6mg/L
4.4 Patrones de la curva de calibracin para acido benzoico
Utilizando la siguiente formula se obtuvieron los volmenes
para la preparacin de los patrones de acido benzoico
C1V1=C2V2

Patrn

Concentracin
Volumen a
ppm
Tomar (ml)
1
2
1
2
4
2
3
6
3
4
8
4
5
10
5
Tabla 2: Datos para la preparacin de los patrones de la
curva de calibracin de acido benzoico

4.5 Construccin de la curva de calibracin para acido

benzoico
Para la construccin de la curva de calibracin para cido
benzoico en la bebida energizante peak se usaron los
siguientes datos.
Absorbancia a 230nm
Concentraci
n ppm
A1
A2
A3
MTC
2

3,16

3,15

3,15

3,15

3,30

3,30

3,31

3,30

3,44

3,45

3,45

3,45

Donde:

3,59

3,60

3,60

3,60

C1= concentracin de la solucin madre de acido benzoico

V1= volumen a tomar para preparar los estndares
V2=5 ml
C2=concentracin de los estndares

10

3,75

3,76

3,74

3,75

Mp

3,58

3,57

3,58

3,58

C 2 V 2
V 1=
C1

4.6 Curva de calibracin

concentracin de cido benzoico

cuantificacin

de

Curva de calibracion para concentracion de acido benzoico

3.80
f(x) = 0.07x + 3
R = 1

3.60
3.40

Absorbancia a 230nm

3.20
3.00
2.80

8 10 12

Concentracion de acido benzoico (mg/L)

Por el metodo de regresin lineal se obtuvo la concentracin de

cafena teniendo en cuenta la siguiente formula:
A = 0,0743 C+3,0041
Donde:
A= absorbancia de las muestras de peak
C= contenido de acido benzoico en la bebida energizante peak
(mg/L)

C=

C=

A3,1305
0,0009

3,583,0041
0,0743

C=7,75mg/L
5.

2,46 % este error no es significativo pero este pudo ser

ocasionado por algunos factores de gran importancias
como lo son el contenido de CO2 no fue totalmente
eliminado y pudo producir burbujas pequeas que desvio
los resultados por ello es tan importante eliminarlo
totalmente ,el control del tiempo de preparacin, la
preparacin de los patrones el cual se le atribuye a un
error del analista .

ANALISIS DE RESULTADOS

Segn las curva de calibracin las cuales se realizaron

teniendo en cuenta el anlisis espectrofotomtrico en el
UV-VIS.Para la curva de calibracin para la cafena en la
bebida energizante peak se obtuvo un factor de correlacion
del 0,9988 en relacin con la absorbancia indicndonos
que no hay variacin significativa en relacin lineal con la
concentracin .El contenido encontrado de cafena a una
longitud de onda de 273 nm encontrado por interpolacin
para la bebida
es de 110,6 ppm este resultado
comparado con el valor teorico de 113,6 mg/L encontrado
en la etiqueta del energizante se obtuvo un error de

Para la curva de calibracin para hallar la concentracin

del cido benzoico para la bebida Peak se obtuvo un
factor de correlacin del 0,999 en relacin con la
absorbancia indicndonos que hay mucha correlacin
entre la absorbancia .A una absrobancia de 3,58 en la
curva de calibracin se obtuvo una concentracin de
acido benzoico para la bebida energizante peak de 7,75
mg/L

6.

CONCLUSIONES

Por medio de un barrido espectral se puede determinar a qu

longitud de onda, una muestra evaluada absorbe mayor las
radiaciones electromagnticas, representada en picos altos.
La concentracin es la que juega el papel ms importante
dentro de la solucin, puesto que si tiene concentraciones
bajas, va ser una absorbancia baja, porque se absorben
aquellas frecuencias que son capaces de producir excitacin
electrnica, pero luego desciende debido a que ya no existe un
equilibrio en la solucin que le permita mucho ms que la
absorbancia.
La absorbancia tiene un comportamiento directamente
proporcional con la concentracin de las soluciones. Esto
afirma que dentro de las concentraciones de trabajo se cumple
con la Ley de Lambert- Beer
La espectrofotometra de absorcin en las regiones ultravioleta
y visible del espectro electromagntico es, posiblemente, la
ms utilizada en la prctica del anlisis cuantitativo de todas
las tcnicas espectroscpicas. Asimismo, puede resultar de
utilidad como tcnica auxiliar para la determinacin de
estructuras de especies qumicas

BIBLIOGRAFA:

RUBINSON, Kenneth y RUBINSON, Judith.

Anlisis Instrumental. Pag.282- 287, 302- 305, 355.
ISBN: 84-205-2988-5. Edit Prentice Hall, Madrid.
2001.(28/102014)

HARRIS, C. Daniel. Anlisis qumico cuantitativo.

Editorial Revert, 3a Edicin. Barcelona - Espaa,
2007. Pag. 413.

SKOOG, A. Douglas; HOLLER, F. James; CROUCH,

Stanley R. Principios de anlisis instrumental.
Editorial Cengage, Sexta Edicin. Mxico, 2008. Pag.
336 -342