UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMERICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA

ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN
ATMICA CON LLAMA
Mesa: 2
Curso: Qumica Analtica Instrumental
Docente: Mg. Norma Anglica Carlos Casas
Alumnos:
Acua Alayo, Manuel Antonio-13040089
Castro Rojas, Elizabeth-13040129
Hijar Lpez, Julio Armando- 13040011
Miranda Zevallos, Wilfredo Daniel-13040110
Palma Albino, Cleni Teodora- 13040019
Santa Cruz, Luca del Pilar- 13040062
Vsquez Quispe, Kelly Lizbet - 13040030
Da de Laboratorio: viernes
Hora: 10.00 am-2.00 pm
Ciclo acadmico: lV-Semestre

Lima-Per

2014

OBJETIVO

Determinar la concentracin de plomo en agua potable

Elaborar la curva de calibracin

MARCO TERICO 1
En la espectroscopia de emisin de llama, la llama se utiliza para reducir iones
metlicas a tomos metlicos libres. Algunos de los tomos metlicos absorben
energa de la llama y llegan a ser excitados. Cuando estos tomos vuelven a su
estado fundamental, emiten energa radiante. La longitud de onda de la energa
radiante emitida, es caracterstica del metal que la emite; es decir, se necesita una
lmpara de un mismo metal para analizar dicho metal en una muestra problema.
La espectroscopia de emisin de llama tiene un amplio intervalo de aplicacin para
metales. En condiciones favorables, el lmite de deteccin, est en el intervalo de
dcimas de parte por billn (ppb). En el campo de los anlisis, los elementos ms
interesantes son el sodio, potasio, plomo, litio, etc.
Sistema bsico del equipo de absorcin atmica
Fig 1. Sistema de absorcin atmica

Para hacer las medidas en el equipo de Absorcin Atmica es necesario obtener

una poblacin de tomos en estado basal, primero se enciende una fuente de
radiacin que es una lnea con una longitud de onda caracterstica para cada
elemento, esta lnea pasa a travs que quemador, y a travs de la llama se roca
una niebla fina de la muestra a analizar. La regin del espectro que se mide es
seleccionada por el monocromador. La lnea espectral aislada cae en el
fotomultiplicador y por ltimo se enva a un dispositivo de lectura ya sea digital o
anlogo, a travs de un sistema de proceso de datos de un computador.

PROCEDIMIENTO
Muestra: plomo en agua potable
Mtodo: horno de grafito
Capacidad mxima del horno de grafito: 2000C con refrigerante
Estndares
5 ug/ml
10 ug/ml
20 ug/ml
30 ug/ml

Absorbancia
0,1512
0,2607
0,5381
0,7232

Concentracin de la muestra problema: 9,21 ug/mL . 0,2476

Dilucin
De la muestra de 1000 ppm se cogi 100 uL a una fiola 100mL, la nueva
concentracin ser de 1 ppm, luego se extrae 100uL y se lleva a una copa de 900
uL, luego se mezclaron estos 900 uL de MP con 900 uL de modificador de plomo.
Primero se seca la muestra, luego se seca para producir la sal, luego se lleva a
atomizacin, cada elemento tiene su propia lmpara, cuando llegue al tomo en
estado neutral este se excitara y luego querr regresar a su estado fundamental,
esta diferencia en el cambio de energa de un estado a otro es lo que se mide.
Proceso
Secado
Mineralizado
Sistema refrigerante Chiler
Ebullicin del plomo

Temperatura
130
700
200
1700

Se usa la atomizacin por horno de grafito cuando se analizan muestras de

concentraciones muy bajas, para ello se usa el argn como gas.
Modificador de plomo: nitrato de plomo/ triton 0.5%
Proporcin: 2:200
Longitud de onda en horno: 217 nm

RESULTADOS
Primero

nm

%T

Absorbancia

98,24

Concentracin
[ ] g/dL
0

217
217

82.04

0.1512

217

58.38

10

0.2607

217

26.91

20

0.5381

217

14.07

30

0.7232

0.0175

debemos validarla grfica Absorbancia vs concentracin con el Excel

X2

Y2

XY

0.0175

0.00030

0.1512

25

0.02286

0.756

10

0.2607

100

0.06796

2.607

20

0.5381

400

0.28955

10.762

30

0.7232

900

0.52301

21.696

= 65

= 1.6907

= 1425

= 0.94259

= 35.821

A vs C
0.8
f(x) = 0.02x + 0.03
R = 0.99

0.6
Absorbancia

0.4

Linear (y)

0.2
0
0

10 15 20 25 30 35
Concentracion

Validacin para la grfica por mnimos cuadrados (mtodo estadstico, regresin

lineal simple). Ver grfica Absorbancia vs Concentracin

y= bx +a
N X i Y i X i Y i
b=

b=

N X i2 ( X i)

a=

5 ( 35.821 )(65)(1.6907)
5 ( 1425 )(65)2

b=0.02386

a=

X i2 Y i X i Y i X i
2
2
N X i ( X i )

( 1425 )( 1.6907 ) (35.821)(65)

5 ( 1425 )(65)2

(Valor del intercepto) a= 0.02789

Por ajustes de mnimos cuadrados, se obtuvo la siguiente ecuacin:

y= 0.02386x + 0.02789
De la curva
de
calibracin
podemos inferir la concentracin de dicha absorbancia para la muestra problema
(que es la misma sustancia, con la que se hizo la curva de calibracin).
0,2476= 0.02386x + 0.02789
C= y= 9,2082

Pero lo obtenido es de la dilucin, ahora hallamos de la muestra problema sin

diluir.
De la muestra de 1000 ppm se cogi 100 ul a una fiola 100ml, la nueva
concentracin ser de 1 ppm, luego se extrae 100ul y se lleva a una copa de 900
ul, luego se mezclaron estos 900 ul de MP con 900 ul de modificador de plomo.
Cmp=9,2082

g 9 /1000 mL
g
x
x 1=82,87
dL 1 /1000 mL
dL

Pero esto se extrajo de otra dilucin de la que se tom 1 ppm de 1000 ppm, por
tanto:
82,87

g 1000 ppm
1 mg
1 dL
mg
x
x
x
=8,287
dL
1 ppm
1000 ug 10 L
L

DISCUSIN
La preparacin del estndar juega un rol importante para la determinacin de agua
potable Se utiliza un estndar de plomo (II) acetato 3- Hidrato Pb
(CH3COO)2.3H2O, con una concentracin de 1000 mg/L 0,02. Se toman cinco
mililitros de dicho estndar y llevndolos a 500 ml, agregando posteriormente 2 ml
de cido Ntrico concentrado, de esta manera la solucin madre presenta una
concentracin de 10 ppm. (Ospina y col, 2012)2
La determinacin de plomo en muestras sometidas a contaminacin ambiental,
como aguas naturales y productos alimenticios es de creciente inters debido a los
efectos fisiolgicos de la ingestin de plomo. La Espectrofotometra de Absorcin
Atmica no tiene suficiente sensibilidad para la determinacin de plomo a nivel de
ppb y es necesario utilizar la atomizacin electrotrmica mediante horno de grafito.
No obstante, los iones cloruro constituyen una grave interferencia en este mtodo.
La extraccin del plomo a pH=4,0 con 1-pirrolidin-ditiocarbamato amnico en
cloroformo, proporciona un mtodo de preconcentracin y la simultnea
eliminacin de la interferencia del cloruro. El mtodo propuesto alcanza un lmite
de deteccin de 0,5 g. L-1 de plomo con respuesta lineal en el intervalo de 5
hasta 100 g. L-1 de plomo para inyecciones de 20 L del extracto clorofrmico en
el horno de grafito.obstante, los iones cloruro constituyen una grave interferencia
en este mtodo (Aznares y col, 1982)3
En la prctica en Cemprofarma, se tom una alcuota de una muestra de 1000
ppm y al realizar la serie de diluciones de esta muestra y de terminar el anlisis,

se concluy que exista una concentracin de 8,287 ppm que no est dentro de los
lmites dados por la OMS en cuanto a la concentracin de plomo (10 ppb) por
tanto esta agua no es para uso sanitario. Aunque tuvimos una pequea
incertidumbre al momento de realizar los clculos, debido a que la asistenta de
Cemprofarma nos indic que estaba trabajando la muestra con concentraciones
de ppm, y la teora claramente dice que se debe trabajar en ppb en horno de
grafito, por ello, bien se podra afirmar con nuestro criterio ha sido un error por
parte de la chica al indicarnos la concentracin y se trabaj en ppb, lo cual hara
que si entre la concentracin de la muestra dentro del margen sanitario de la
OMS.
Segn Harold Walton, generalmente, los metales disueltos en disolventes
orgnicos presentan mucha mayor absorcin en la llama de la que dan en solucin
acuosa. Una causa de este efecto es la mayor temperatura de la llama, pues as
como el agua, aspirada en una llama, la enfra, un disolvente orgnico combustible
hace que la llama sea ms caliente. Otra causa es que muchos disolventes
orgnicos tienen una tensin superficial ms baja que el agua, por lo que la
solucin aspirada se dispersa ms fcilmente en gotitas finas. El disolvente puede
tambin ser menos viscoso que el agua y afluir ms rpidamente al quemador.
Para correlacionar la absorcin con la concentracin en disolventes no acuosos
conviene preparar soluciones patrn de las sales metlicas en dichos disolventes. 4
La causa ms comn de interferencias es la presencia en la muestra de aniones
que forman con el analito compuestos poco voltiles, que disminuyen por tanto el
grado de atomizacin. Un ejemplo es la interferencia provocada por el PO 43- en la
determinacin de Ca, pues forma fosfato clcico que es poco voltil a la
temperatura de la llama. Un modo de eliminar esta interferencia es aadiendo a la
muestra un agente liberador de manera que el fosfato reaccione preferentemente
con l, en lugar de con el Ca. Como agente liberador, en este caso, se puede
aadir La(III).
En otros casos se pude presentar una interferencia qumica debido a la excesiva
ionizacin del analito en la llama. De acuerdo con el equilibrio
M

M+ + e -

si este equilibrio est desplazado hacia la derecha se producirn resultados bajos,

pues el espectro de absorcin de M+ es diferente del de M, que es la especie
absorbente que nos interesa. Se combate esta interferencia aadiendo a la
muestra un supresor de ionizacin, es decir, un elemento que se ionice fcilmente
aportando una concentracin relativamente alta de electrones a la llama que
desplacen el equilibrio anterior hacia la izquierda.

Finalmente habr que procurar que las disoluciones de muestras y de los patrones
tengan una composicin lo ms parecida posible, pues de lo contrario poda haber
variaciones en la velocidad de aspiracin y en la temperatura de la llama,
provocando errores en las medidas.5
CONCLUSIN

Se determin la concentracin de plomo en agua potable con

espectrofotometra de absorcin atmica de horno de grafito.
La longitud de onda empleada ha sido de 217,0 nm por la que la
sensibilidad de la determinacin es mxima.
La AAS es una tcnica excelente para el anlisis de trazas metlicas. Cada
elemento tiene un intervalo de concentraciones caracterstico en el que se
cumple la ley de Beer.
El corrector de fondo fue la lmpara de deuterio que ayud a eliminar las
interferencias que pudieron haber en el anlisis.

BIBLIOGRAFIA
(1) Bender. Mtodos Instrumentales de Anlisis en Qumica Clnica. 1era ed.
Zaragoza: Editorial ACRIBIA, S.A; 1897. p. 103-105.
(2) Ospina, Zapata. Validacin de la Metodologa de la deteccin de los metales
niquel, plomo, cadmio en agua tratada por absorcin atmica de llama en el
laboratorio de anlisis de agua y alimentos de la Universidad Tecnolgica de
Pereira. (Tesis Doctoral). Colombia: Universidad Tecnolgica de Pereira; 2012.
(3) Aznares, Palacios, Vidal. Determinacin de plomo por espectrofotometra de
absorcin atmica con atomizacin electrotrmica despus de la extraccin con 1pirrolidin-ditiocarbamato amnico: aplicacin al anlisis de agua natural y materia
vegetal. 1era ed. Zaragosa: Departamento de qumica analtica, facultad de
ciencias; 1982. p. 46-54.
(4) Frederic W. Anlisis qumico e instrumental moderno. Editorial Reverte.
Espaa. 1983 .Pg 253-254
(5) Miones. Manual de tcnicas instrumentales espectrofotometras. 1era ed.
Barcelona. Editorial Crculo Universo: 1978.

CUESTIONARIO
1. Cul es el fundamento del mtodo usado?
Se utiliz el mtodo de espectroscopa de absorcin atmica en horno de grafito,
La tcnica se basa en el hecho de que los tomos absorben la luz en las
frecuencias o longitudes de onda caracterstica del elemento de inters (de ah el
nombre de la espectrometra de absorcin atmica).
Las muestras se introducen a este equipo por microjeringas o en una pequea
microcubeta, quedando colocada en la pared del tubo o en una pequea
plataforma que est suspendida en el fondo del tubo, se conecta la corriente y
dependiendo de la naturaleza de la muestra, el horno se calienta por etapas.
Primero se elimina el solvente y en una segunda etapa son carbonizados los
materiales orgnicos. El horno es calentado entonces a alta temperatura.
A elevadas temperaturas, las paredes de grafito del horno interactan con la
muestra. Esta interaccin desencadena la reduccin de los componentes
metlicos y la generacin del metal libre. A la temperatura de trabajo del horno, los
metales pasan a estado gaseoso y absorben parte de la energa emitida por la
fuente de radiacin. El argn fluye a travs del tubo mantiene el vaco y transporta
el vapor del metal fuera del tubo, pero mientras esto tiene lugar, la absorbancia, en
relacin con el tiempo, est siendo registrada por el instrumento. Una vez que la
nube de vapor metlico se ha eliminado del horno, ste puede ser enfriado para
introducir una nueva muestra.1
Cabe resaltar que este mtodo solo se utiliza para detectar elementos metlicos
en estado gaseoso.
2. Qu tipo de interferencia se puede producir en espectroscopia de
absorcin atmica?
A pesar de ser una tcnica muy selectiva, la AAS tiene una serie de interferencias
que conviene conocer. Las podemos agrupar en dos tipos: Interferencias
espectrales e interferencias qumicas.
Las interferencias espectrales se presentan bien cuando partculas procedentes
de la atomizacin dispersan la radiacin incidente de la fuente, o bien cuando la
absorcin o emisin de una especie interferente se solapa o est tan cerca de la
de medida del analito que no puede separarlas el monocromador.
Las interferencias qumicas se deben a diversos procesos qumicos que pueden
ocurrir durante la atomizacin y que alteran las caractersticas de absorcin del
analito. La causa ms comn de este tipo de interferencias es la presencia en la

muestra de aniones que forman con el analito compuestos poco voltiles, que
disminuyen por tanto el grado de atomizacin 2
3. Cul es la diferencia entre Fotometra de llama y espectroscopia de
absorcin atmica?
Los componentes instrumentales de un equipo de espectrofotometra de absorcin
atmica son similares a los de un fotmetro de llama, pero existen algunas
diferencias como:
-En fotometra de llama la sensibilidad es proporcional al nmero de tomos que
se han excitado, mientras que, en absorcin atmica la sensibilidad depende del
nmero de tomos que se encuentran en el estado fundamental. Normalmente,
tan slo un pequeo porcentaje de tomos se encuentran en estado excitado en la
llama. Por lo tanto, la absorcin atmica da lugar, en general, a una mayor
sensibilidad que la fotometra de llama para un gran nmero de elementos. 3
-La diferencia entre fotometra de llama y absorcin atmica radica principalmente
en los distintos mtodos de medida de las seales. Un espectrofotmetro de
absorcin atmica es bsicamente un espectrofotmetro de llama al que se le ha
aadido una fuente de radiacin. Para conseguir eliminar la seal de fotometra de
llama y recoger nicamente la de absorcin se modula la fuente de ctodo hueco.
-La fotometra en llama mide la luz emitida por la reducidsima proporcin de
tomos en el estado excitado en cambio en la E. Absorcin atmica, la luz es
absorbida por la amplia proporcin de tomos en el estado fundamental 4
-En la absorcin atmica, la relacin entre absorbancia y concentracin es casi
lineal, esto es, la ley de Beer se cumple en un amplio margen de concentraciones.
Ello no es cierto para la fotometra de llama: la intensidad de la luz emitida por los
tomos de sodio en una llama no es lineal en absoluto con respecto de la
concentracin; el grafico de la intensidad frente a la concentracin est
fuertemente curvado, siendo el aumento de la emisin con la concentracin tanto
menor cuanta mayor sta. Una razn de ello estriba en que la luz emitida por los
tomos situados en la parte central de la llama es absorbida, antes de que pueda
salir de sta, por otros tomos que se hallan en su estado fundamental. La
emisin de llama, por lo tanto, requiere un calibrado ms cuidadoso que la
absorcin atmica, y est ms sujeta a interferencias. 5
4. Desarrolle un ejemplo de curva de calibracin por el mtodo de
adiccin de estndar y utilice para cuantificar un analito.
Ejemplo6,7: A partir de una disolucin estndar de 200mg/L de cobre se prepar
una disolucin de 100mg/L a travs de una dilucin 1:2. Posteriormente partiendo
de esta disolucin se prepararon las disoluciones estndar. A cada disolucin se le
aadi 5mL de mezcal y se afor a 10mL.

Clculo de concentraciones para los estndares de Cu.

1000 mL
1L
( 200 mg Cu 5 mL 2.0 mL
) = 20.0 mg de Cu/L
(
)(
)
1000 mL
10 mL 10 mL
De la misma manera se realiz el mismo clculo para determinar la concentracin
de los dems estndares.

Tabla 1. Preparacin de disoluciones estndar de cobre a partir de una disolucin patrn 100mg/L
de cobre.

Tabla 2. Valores de absorbancias determinadas por el mtodo adicin estndar. Se utiliz agua
destilada como blanco.

y=0.065 x +0.019

Calculo de la concentracin de cobre en la muestra, al poner la ley de LambertBeer, en funcin del volumen del estndar aadido en el mtodo de adicin
estndar.
A=

k . l. V x C x
Vt

k .l .V c C c
Vt

A=
b

k . l. V x C x
Vt

k . l. C c

+ V c Vt
m

En donde k es una constante llamada absortividad, l es la anchura de la llama del

quemador del flujo laminar, V x son la alcuotas idnticas de la solucin problema
con una concentracin Cx que se transfieren a matraces aforados de un volumen
Vt.Vc son mL de solucin estndar del analito que tiene una concentracin
conocida Cc.

C x=

b C c (0.0191)(100 ppm)
=
=5.84 mg/ L
mV x
(0.0654)(5 mL)

Concentracin de cobre = 5.84 mg/L

5. En qu casos se utiliza el mtodo de adicin estndar?
El mtodo consiste en aadir sobre una serie de alcuotas, cantidades conocidas
del componente a determinar, y medir la magnitud de la propiedad analtica de
inters tras las diferentes adiciones.

Para llevar a la prctica el mtodo, usualmente se toman volmenes iguales de

disolucin problema, y se aaden cantidades conocidas y diferentes de analito a
todas las muestras, excepto a una, diluyendo, finalmente, todas al mismo
volumen8. Los volmenes deben ser pequeos, con el fin de no modificar la matriz
de la muestra problema en todo el proceso y que se pueda suponer que el
volumen total no ha sido modificado apreciablemente. El mtodo de adicin
estndar

funciona

mejor

cuando

la

cantidad

de

analito

agregado

es

aproximadamente del 50% al 200% de la cantidad original de analito problema 9.

Se utiliza para determinar la existencia de interferencias en una matriz, donde por
comparacin de las rectas de calibrado y adicin se puede determinar si existen
interferencias. Esto aplica para el anlisis de muestras complejas (suelos,
minerales, sangre completa, orina, etc.) ya que en este tipo de muestras,
usualmente, los componentes de la matriz afectan las medidas de la seal
analtica ya sea por exceso o por defecto10.

BIBLIOGRAFA
(1) Bender G. Mtodos instrumentales de anlisis en qumica clnica. Editorial
ACRIBIA, S.A. Zaragoza. 1992. Pg. 115-121
(2) Douglas A.Skoog. James H. Standley R. Principios de anlisis instrumental.
Editorial Cengage .Sexta edicin.Mexico.Pg 367-376
(3) Gomis Y .Espectroscopia de absorcin atmica. Institucional de la Universidad
de Alicante .Espaa .2008
(4)Connors A.Curso de anlisis farmacutico (ensayo del medicamento). Editorial
Reverte.Espaa.1981.
(5)Frederic W. Anlisis qumico e instrumental moderno.Editorial Reverte.Espaa.
1983 .Pg 253-254
(6) Castaeda A. Representaciones grficas de las relaciones propiedadconcentracin con fines cuantitativos. Universidad Autnoma del Estado de
Hidalgo. Mxico 2011.
(7) Pineda C., Sandoval V., Santiago M. Determinacin De Cobre (Cu) En Mezcal.
(Espectrometra De Absorcin Atmica) [Sede web]. UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTNOMA DE MXICO. Mxico. Disponible en:

http://depa.fquim.unam.mx/vmus/AEII/LQAI/Practicatipo.pdf
(8) Hernndez, L. Gonzlez, C. Introduccin al anlisis instrumental. 1 ed.
Barcelona: Editorial Ariel, S.A.; 2002. p. 22
(9) Torres, S. Gmez, C. Aragn, P. Marn, M. Tcnicas instrumentales: Manual de
laboratorio. Valencia: Editorial de la Universidad Politcnica de Valencia; 2006. p.
92
(10) Snchez, M. Mtodos de calibrado. Facultad de Ciencias. Departamento de
Qumica.

[Citado

en:

25

de

setiembre

del

2014]

Disponible

en:

http://webdelprofesor.ula.ve/ciencias/angelisa/Downloads/tecnicascalibracio_vr1.p
df.