N 175 Noviembre de 2013

Corporacin Centro de Investigacin en Palma de Aceite - Cenipalma ISSN 0123-8353

Efecto de la micorrizacin arbuscular sobre el crecimiento y

desarrollo de plntulas de palma de aceite en etapa de previvero
Introduccin

Yurany D. Rivera Mndez1, Elizabeth Cristina Acevedo1, Hernn Mauricio

Romero1, 2 *

Los hongos formadores de micorrizas arbusculares (HFMA) son microorganismos del suelo que forman simbiosis con el 80% de las
plantas terrestres, formando arbsculos, vesculas (en algunas especies) e hifas, dentro de las clulas corticales de las plantas que
colonizan (Phosri et al, 2010). Esta asociacin simbitica entre el
hongo y la planta, acta como un complemento de la raz en la
toma de nutrientes, especialmente en la absorcin de fsforo (Cenipalma, 1995), aumento de la tolerancia a condiciones de estrs
bitico y abitico (Harris et al, 2009), mejoramiento de la calidad
del suelo, fijacin de nitrgeno, agilizacin de crecimiento en etapas
tempranas de desarrollo (Galindo y Romero, 2010) y aumento en la
productividad de las plantas en un ecosistema determinado (Barrer,
2009). Por su parte, los hongos adquieren fotoasimilados de las
plantas de forma directa y efectiva a travs del contacto celular
entre las hifas y las clulas de la raz (Schultz, 2001).

Notas del Director

Cenipalma busca dar respuesta con sus investigaciones a los
principales problemas tecnolgicos del cultivo y en esta ocasin
presenta los avances del estudio de la micorrizacin arbuscular
y sus efectos sobre el crecimiento y desarrollo de plntulas de
palma de aceite en etapa de previvero, desarrollado por el proyecto de Fisiologa, del Programa de Biologa y Mejoramiento
de la Palma de Aceite.
La fertilizacin constituye uno de los rubros de mayor peso dentro de la estructura de costos del cultivo de la palma de aceite,
por lo que es imperativo buscar tecnologas que hagan ms eficiente este proceso y el uso de las micorrizas podra convertirse
en una alternativa para la nutricin biolgica de las palmas.

Desde el punto de vista nutricional, el crecimiento de la planta debido a la mayor absorcin de fsforo es el principal beneficio que
se obtiene del HFMA (Phosri et al, 2010), por la baja disponibilidad
de este elemento en los suelos tropicales (Barrer, 2009). Sin embargo, si el fsforo no es un elemento limitante en el suelo, la simbiosis
puede llegar a ser reducida o hasta inhibida si se encuentran altos
niveles (Galindo y Romero, 2010).

Los hongos formadores de micorrizas arbusculares (HFMA) son

microorganismos del suelo que forman simbiosis con la planta,
actuando como un complemento de la raz en la toma de nutrientes, especialmente en la absorcin de fsforo, influenciando
tambin la tolerancia a condiciones de estrs bitico y abitico,
la calidad del suelo, fijacin de nitrgeno, crecimiento en etapas
tempranas y la productividad de las plantas.

Una alta proporcin del cultivo de palma de aceite (Elaeis guineensis o E. oleifera x E. guineensis), en Colombia, se encuentra en
suelos de baja fertilidad que limitan la productividad. Adicionalmente, los altos requerimientos nutricionales y el elevado costo de
los fertilizantes hacen que la fertilizacin sea uno de los rubros
de mayor peso dentro de la estructura de costos de la agroindustria. Por lo anterior, se justifica buscar tecnologas que hagan ms
eficiente la fertilizacin e identificar fuentes de nutrimentos que
sustituyan los fertilizantes inorgnicos, y el fenmeno de las micorrizas es una alternativa para la nutricin biolgica de las palmas
(Motta y Munvar, 2005). El limitado desarrollo del sistema radical de la palma junto con el alto nivel de micorrizacin, sugieren
que la especie puede beneficiarse en gran medida de la simbiosis
(Phosri et al, 2010). No obstante, el nivel de conocimiento sobre
las micorrizas en palma de aceite, tanto en los mbitos nacional
como internacional es muy precario. Por ello, este estudio busca
conocer el efecto de la micorrizacin arbuscular sobre el crecimiento y desarrollo de plntulas de palma de aceite en etapa de
previvero, vivero y primeros meses de trasplante a sitio definitivo,
incluyendo el efecto de HFMA en la toma de fsforo disponible. A
continuacin se presentan los principales avances de investigacin
en la etapa de previvero.

El experimento busca conocer el efecto de la micorri

zacin
arbuscular sobre el crecimiento y desarrollo de plntulas de
palma de aceite en las etapas de previvero y vivero (ya terminado) y primeros meses de trasplante a sitio definitivo. Este
Ceniavances presenta los resultados de las evaluaciones en la
etapa de previvero, donde las plntulas de E. guineensis y del
hbrido interespecfico OxG respondieron a especies especficas
de HFMA con aumento en el crecimiento, bajo las condiciones
edafoclimticas dadas.
Que este resultado parcial sea un buen augurio para una futura
utilizacin de micorrizas arbusculares como herramienta de mejorar la fertilizacin y por ende el desarrollo y la productividad
del cultivo de la palma de aceite.
Jos Ignacio Sanz Scovino, PhD.
Director Ejecutivo de Cenipalma

Programa de Biologa y Mejoramiento de la Palma, Cenipalma.

Departamento de Biologa, Universidad Nacional de Colombia.
*
Autor para correspondencia E-mail: hromero@cenipalma.org
1
2

Ceniavances N 175
Metodologa

lanceoladas completamente abiertas (estadio 109). Posteriormente,

se trasplantaron a bolsas de 20 kg con el mismo sustrato, se efectu
una reinoculacin de los productos y se sembraron al tres bolillo a
90 cm y sin polisombra (Figura 2). En esta etapa estuvieron hasta
que la hoja nmero 18 diferenci todos los foliolos completamente y
la hoja flecha mostr 70% de apertura (estadio 149).

El estudio se est realizando en el Campo Experimental El Palmar

de La Vizcana (CEPV) en Barrancabermeja Santander (Colombia), a una altitud de 125 metros sobre el nivel del mar, temperatura media de 34 C, humedad relativa de 70,5%, una precipitacin
anual de 2.852 mm. Independientemente se evala la respuesta
de dos genotipos de palma de aceite: Elaeis guineensis y un hbrido
interespecfico (E. olefera x E. guineensis) en tres etapas: previvero, vivero y sitio definitivo, a dos productos micorrizgenos A y B
(Tabla 1), y un testigo sin micorriza. En las etapas de vivero y sitio
definitivo adicionalmente se trabaja otro factor: la fertilizacin con
fsforo en tres niveles (25%, 50% y 100%).

Tabla 1. Caractersticas de los productos micorrizgenos empleados

Presentacin

Contenido

Especies
presentes

Dosis

Producto A

Producto B

Con base en suelo

Esporas, micelio vegetativo y races infectadas de
HFMA.
pH: 5,0-6,0
% de races: 0,40%
# de propgulos/
g: 50 - 150
Glomus fasciculatum,
Scutellospora heterogama,
Glomus mosseae, Glomus
manihotis, Acaulospora
rugosa, Entrophospora
colombiana

Suspensin concentrada
Esporas, micelio vegetativo y races infectadas de
HFMA cultivados in vitro
pH: 6,5 7,0
# de propgulos/
ml: > 2.000

Previvero: 50 g/palma
Vivero y sitio definitivo:
100 g/palma

Glomus intraradices

Preparar una suspensin:

50 ml del producto en
800 ml agua, y aplicar
Previvero y vivero: 2 ml
suspensin/palma
Sitio definitivo: 4 ml suspensin/palma
Figura 1. Labores del establecimiento del ensayo en el previvero: (a)
Estado de las semillas de E. guineensis y el hbrido OxG sembradas; (b)
Llenado de las bolsas de 1 kg; (c) Alineacin y ahoyado de las bolsas
en el previvero; (d) Inoculacin con el producto B; (e) Inoculacin con el
producto A; (f) Apariencia de los bancos de crecimiento.

Las etapas de previvero y vivero ya concluyeron y, actualmente,

las plantas se encuentran recin trasplantadas en sitio definitivo.
En el previvero, el diseo fue completamente al azar (DCA) con
tres tratamientos (Productos A, B y sin micorriza), cinco repeticiones
y la unidad experimental estuvo constituida por 30 palmas. En el
vivero, el diseo fue completamente al azar en arreglo de parcelas divididas, donde la parcela principal fue el producto micorrizgeno y la subparcela, la dosis de fsforo, con cinco repeticiones;
la unidad experimental estuvo constituida por diez palmas. En sitio
definitivo, el diseo es el mismo que en vivero (DCA en arreglo de
parcelas divididas), pero con tres repeticiones tres palmas por
unidad experimental en el genotipo E. guineensis y cuatro palmas
en el hbrido OxG.

La siembra de la semilla para el previvero se llev a cabo directamente en bolsas plsticas de 1 kg (Figura 1) llenas con el suelo
previamente seleccionado por su pobre contenido nutricional, especialmente de fsforo (5,43 ppm). Previo a la siembra, se inocularon
los productos micorrizgenos en las dosis mostradas en la Tabla 1.
Las plntulasen el previvero estuvieron bajo el sombreamiento de
una polisombra de 60% hasta que mostraron cinco o ms hojas

Figura 2. (a) Distribucin de las plntulas en el vivero; (b) Apariencia de las plantas a trasplantar en sitio definitivo.
2

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El programa de fertilizacin para el ltimo periodo del previvero
(una vez la plntula dej de alimentarse del endospermo de la
semilla), toda la etapa de vivero y el primer ao en sitio definitivo
fue organizado por el Grupo de Suelos de Cenipalma, en funcin
del requerimiento de cada genotipo (Tabla 2). El suministro de nitrgeno, potasio, calcio, magnesio y boro permanece constante y
nicamente se vara la dosis de fsforo segn el tratamiento (25%,
50% o 100%). En vivero se efectuaron diez fracciones mensuales
que se iban incrementando en el tiempo y en sitio definitivo se realizarn tres fracciones iguales (1/3) durante el primer ao: al mes de
trasplante, a los 6 meses y al ao.

tuaron mediciones de intercambio de gases (fotosntesis, transpiracin y uso eficiente del agua) con el sistema porttil de fotosntesis
LICOR 6400; contenido nutricional (N, P, B, K, Ca, Mg) en el Laboratorio de Anlisis Foliares y de Suelos de Cenipalma; crecimiento
radical empleando el escner y software Winrhizo (Pro 3.5); porcentaje de colonizacin de las races mediante la tcnica de Campo
intercepto; y actividad fosfatasa en hojas y raz, empleando el
Protocolo Operativo Estandarizado del Laboratorio de Bioqumica
de Cenipalma. Para la ltima etapa en sitio definitivo, se proyecta
evaluar el intercambio de gases y el contenido foliar de nutrientes
al cabo del ao de siembra.

Tabla 2. Requerimientos nutricionales de cada genotipo en las etapas de vivero y sitio definitivo

Los datos generados en el previvero fueron sometidos a un anlisis de

varianza y la comparacin de medias se efectu mediante la prueba
de Tukey utilizando el programa estadstico SAS versin 9.1. Lo mismo se har con los datos generados en vivero y en el sitio definitivo.

Genotipo

Tiempo
1 ao

10 meses

Etapa
Vivero
Sitio
definitivo

g/palma/tiempo

E.
guineensis
Hbrido
OxG
E.
guineensis
Hbrido
OxG

P2O5

K2O

MgO

B2O3

30

30

35

18

0.4

30

22,5

18

0,5

300

600

600

100

50

380

400

500

200

40

Resultados y discusin
A continuacin se presentan nicamente los resultados de las determinaciones ecofisiolgicas realizadas en la etapa de previvero.
Actualmente, las plantas se encuentran recin trasplantadas en el
sitio definitivo y los resultados de la etapa de vivero estn en proceso de anlisis.
En el previvero, el crecimiento de las plntulas (rea foliar, peso seco
total, altura) del hbrido interespecfico OxG mostr efecto de la inoculacin de micorrizas (p<0,05); mientras que en plntulas de E. guineensis, el rea foliar fue la nica variable que present diferencias
estadsticamente significativas por efecto del producto micorrizgeno
aplicado. En el hbrido OxG, el crecimiento de la parte area se
increment con la aplicacin del Producto A, de modo que con la
aplicacin de micorrizas en base suelo, el aumento en altura, rea
foliar y peso seco dependiente de la expansin y la divisin celulares
fue mayor, mientras que con las micorrizas en suspensin y la ausencia
de inoculacin se presentaron los valores ms bajos (Tabla 3). Por
su parte, el crecimiento en trminos de rea foliar de las plntulas
de E. guineensis fue estadsticamente diferente entre los tratamientos,
siendo el Producto A el nico que estimul el tamao de la superficie
fotosinttica. Finalmente, el nmero de hojas de ambos genotipos, la

Despus del estadio fenolgico 102 (segunda hoja lanceolada), se

registraron las variables de crecimiento vegetativo: altura, rea foliar, nmero de hojas y masa seca total. La altura se midi con una
regla desde el punto de insercin de las races hasta la base de
la hoja nmero 1. El nmero de hojas correspondi a la cantidad
de hojas completamente expandidas al momento del muestreo. La
parte area y las races se separaron, se lavaron con agua destilada y se secaron en un horno a 85 oC durante 24 horas y, luego, se
estableci con una balanza electrnica el peso seco total. Antes del
secado, con el escner LI-3100 (LICOR Bioscience) se determin el
rea foliar de cada plntula.
Adems de las variables de crecimiento evaluadas en el previvero,
en el estadio 149 (previo al trasplante en el sitio definitivo) se efec-

Tabla 3. Media desviacin estndar del crecimiento vegetativo de las plntulas de palma de aceite en etapa de previvero inoculadas
con micorrizas
Variable
Altura (cm)

# Hojas

rea foliar (cm2)

Peso seco total (g)

Micorriza
Producto A
Producto B
Testigo
Producto A
Producto B
Testigo
Producto A
Producto B
Testigo
Producto A
Producto B
Testigo

Media
22,64
20,72
20,71
3,1
2,9
3,1
80,46
58,15
58,31
1,39
1,06
1,04

E. oleifera x E. guineensis

Desviacin

3,55

2,65

2,05

0,3

0,4

0,3

15,0

13,1

16,2

0,21

0,17

0,28

Promedios con letras distintas son significativamente diferentes, segn Tukey (p<0,05).

Tukey
a
b
b
a
a
a
a
b
b
a
b
b

Media
19,61
19,01
19,35
3,5
3,2
3,5
64,44
50,36
60,46
1,19
1,17
1,22

E. guineensis
Desviacin
2,18
2,28
1,80
0,5
0,6
0,5
13,4
10,8
9,6
0,19
0,18
0,17

Tukey
a
a
a
a
a
a
a
b
ab
a
a
a

Ceniavances N 175
acumulacin de masa seca y la altura en E. guineensis fueron similares
entre los tratamientos con inoculacin de HFMA y el testigo.

sealar que tal como lo encontraron Motta y Munvar (2005), los

efectos de la aplicacin de micorrizas podran ser ms evidentes al
finalizar la etapa de vivero, por lo que la informacin analizada de
esta etapa permitir clarificar el efecto real y total de HFMA en el
crecimiento y desarrollo de plntulas de palma de aceite.

Con respecto a lo anterior, Galindo y Romero (2010a) sealan que

cuando las plntulas no son inoculadas desde previvero con HFMA, su
respuesta fisiolgica en el vivero en trminos de dimetro de bulbo,
altura, nmero de hojas, tasa fotosinttica y uso eficiente del agua,
no presenta diferencias estadsticas significativas, pero cuando se
aplican productos micorrizgenos previo al trasplante a vivero, existen efectos positivos sobre la diferenciacin foliar. Por ello, y dadas
las diferencias en el crecimiento de las plntulas de los genotipos de
palma de aceite, por efecto del Producto A, particularmente por la
accin de las especies de micorrizas que contiene, se puede concluir
que las plntulas de E. guineensis y el hbrido OxG respondieron a
especies especficas de HFMA y, por tanto, hubo un aumento en el
crecimiento de los mismos bajo las condiciones edafoclimticas dadas. Resultados similares fueron reportados por Chu (1997), quien
al trabajar con plntulas de palma de aceite y diferentes especies
de HFMA, encontr que Gigaspora sp. promovi la mayor absorcin
de nutrientes y el mayor crecimiento de las plantas, independiente
del nivel de fertilizacin. Motta y Munvar (2005) al trabajar con
palmas en edad de vivero, encontraron que la inoculacin con una
mezcla de esporas de Gigaspora sp. y Glomus sp., aument los contenidos de nutrientes (N, Cu, P, K y B) y la acumulacin de masa seca
area 305% (ms que en plantas no inoculadas), a los 19 meses de
inoculacin. Asimismo, Schultz (2001) utilizando plntulas de palma
de aceite micropropagadas in vitro bajo condiciones de invernadero,
encontr que once cepas de HFMA ocasionaron los mayores incrementos en parmetros de crecimiento y toma de fsforo, siendo las
ms eficientes Glomus manihotis, Entrophospora colombiana, Acaulospora mellea y Acaulospora appendicula.

Agradecimientos
Esta investigacin es cofinanciada por Fedepalma-Fondo de Fomento Palmero (FFP) y por el Departamento Administrativo de Ciencia, Tecnologa e Innovacin (Colciencias). Los autores agradecen
el apoyo en la medicin de las variables y el mantenimiento del
experimento a Pedro Parada, Adriana Amado, Carolina vila y Arley Fernando Caicedo.

Bibliografa
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Galindo T, Romero H (2010a) Laboratorio de Microbiologa del
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Motta D, Munvar F (2005) Respuesta de plntulas de palma de
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Phosri Ch, Rodrguez A, Sanders I, Jeffries P (2010) The role of
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Schultz C (2001) Effect of (vesicular) Arbuscular mycorrhiza on survival
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guineensis Jacq.). En: http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/2002/
schultz/schultz.pdf. Consultada: Noviembre 10 de 2012.

Segn varios autores (Barrer, 2009; Galindo y Romero, 2010b; Harris et al, 2009; Schultz, 2001), aunque la relacin HFMA-planta no
es considerada especfica, algunos hongos pueden beneficiar mejor o
en mayor grado un determinado hospedero bajo ciertas condiciones
edafoclimticas, y los beneficios que obtenga una especie o variedad vegetal dependern de la especie de HFMA que est asociada
(Phosri et al, 2010). De esta manera, especies de Acaulospora han
sido reportadas en un rango de pH entre 3,8 y 8,0 y se adaptan a
diversos niveles de fertilidad, especies de Glomus se adaptan a casi
cualquier tipo de suelo y condiciones edafoclimticas (Galindo y Romero, 2013), los gneros Scutellospora, Gigaspora y Entrophospora
son altamente diversos en los trpicos (Galindo y Romero, 2010b),
mientras que Glomus intraradices es una especie nitroflica, encontrada con mayor frecuencia en plantas leguminosas con alto contenido
de nitrgeno (Barrer, 2009). As, aunque Galindo y Romero (2013),
sealan que el establecimiento de la simbiosis entre G. intraradices y
E. guineensis se inicia al mes de la inoculacin en semillas, ello no garantiza per se el crecimiento de la planta, ya que habr un beneficio
real, si la simbiosis estimula la asimilacin de nutrimentos y elimina el
costo de transferir carbono al hongo (Harris et al, 2009).

Conclusin

El pH, la humedad del suelo y la disponibilidad de nutrientes, entre

otros factores pudieron haber influido la colonizacin micorrzica de
las diferentes especies de HFMA inoculadas en el previvero, siendo
el pool de HFMA del Producto A, el ms eficiente y afn en la simbiosis, al estimular un mayor crecimiento de las plntulas como respuesta a una adaptacin ms amplia a las condiciones ambientales
en comparacin con Glomus intraradices. Asimismo, es importante

Director:
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Impresin:
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