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PRUEBAS DE LABORATORIO
Las protenas constituyen un grupo numeroso de compuestos nitrogenados naturales. Comprenden, con ADN,
ARN, polisacridos y lpidos, cinco clases de complejas biomolculas que se encuentran en las clulas y en los tejidos.
Son los principales elementos de construccin (en forma de aminocidos) para msculos, sangre, piel, pelo, uas y
rganos internos, entran a formar parte de hormonas, enzimas y anticuerpos, y sirven como fuente de calor y de energa.
Las protenas son compuestos nitrogenados en los cuales entra tambin a formar parte el carbono, el oxgeno, el
hidrgeno y a veces el azufre o el yodo. Son coagulables por el calor y por los aminocidos minerales.
Son insolubles en ter y en alcohol.
I.
Determinacin de protenas2
Determinacin de protenas3
Polipptidos
Las uniones peptdicas se establecen entre los grupos amino y los carboxilo de otro aminocidos, formando
dipptidos--> tripptidos--> tetrapptidos--> POLIPPTIDOS. Cada enlace forma un plano
Algunos polipptidos funcionan per se como hormonas (Insulina y glucagn -->> regulan la glucosa en sangre) o
neurotransmisores (colecistoquinina--> sensacin de hambre)
La estructura primaria viene determinada por la secuencia de aminocidos en la cadena proteica, es decir, el
nmero de aminocidos presentes y el orden en que estn enlazados. La conformacin espacial de una protena se
analiza en trminos de estructura secundaria y estructura terciaria. La asociacin de varias cadenas polipeptdicas
origina un nivel superior de organizacin, la llamada estructura cuaternaria. Por ltimo, la asociacin de protenas
con otros tipos de biomolculas para formar asociaciones supramoleculares con carcter permanente da lugar a la
estructura quinaria. Las protenas tienen mltiples niveles de estructura. La bsica es la estructura primaria.
La estructura primaria de una protena es simplemente el orden de sus aminocidos. Por convencin el orden de
escritura es siempre desde el grupo amino-terminal hasta el carboxilo final. Como consecuencia del establecimiento
de enlaces peptdicos entre los distintos AA que forman la protena se origina una cadena principal o "esqueleto" a
partir del cual emergen las cadenas laterales de los aminocidos. Una protena que permanece con su estructura
primaria inmodificable pero funcional es la insulina, cuya secuencia de aminocidos se conoci por primera vez a
principios de la dcada de 1950.
La estructura secundaria de una protena es la que adopta espacialmente. Existen ciertas estructuras repetitivas
encontradas en las protenas que permiten clasificarlas en dos tipos: hlice alfa y lmina beta.
Una hlice alfa es una apretada hlice formada por una cadena polipeptdica. La cadena polipetdica principal forma
la estructura central, y las cadenas laterales se extienden por fuera de la hlice. El grupo carboxlo (CO) de un
aminocido n se une por puente hidrgeno al grupo amino (NH) de otro aminocido que est tres residuos ms all
( n + 4 ). De esta manera cada grupo CO y NH de la estructura central (columna vertebral o "backbone") se encuentra
unido por puente hidrgeno. Las lminas beta son el otro tipo de estructura secundaria. Pueden ser paralelas o
antiparalelas. Existe un tipo especial de modelo molecular para resaltar la estructura secundaria de las protenas.
Este tipo de modelo de protena representa los segmentos de lmina-beta como cintas en flecha (ribbons) y las alfa
hlices como como cintas en espiral.
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Determinacin de protenas4
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hormona colecistocinina, que estimula la liberacin de muchas enzimas pancreticas cuya actividad cataltica se realiza
entre 7 y 8 unidades de pH. El jugo pancretico secretado al intestino delgado aporta los zimgenos de tripsina,
quimotripsina, tripsingeno, carboxipeptidasas A y B y elastasa.
Por ejemplo, el quimotripsingeno da origen a la quimotripsina por separacin de 2 dipptidos. Este precursor es una
cadena de 245 aminocidos que se mantiene unida por dos puentes disulfuro intracatenarios. Su conversin a alfaquimotripsina se debe a la hidrlisis enzimtica de 4 enlaces peptdicos por accin de la tripsina y quimotripsina
consecutivamente:
La pancreatitis, condicin dolorosa y a menudo fatal, se caracteriza por la activacin prematura de proteasas
secretadas por el pncreas.
La quimotripsina hidroliza enlaces peptdicos que contiene grupos carbonilo de aminocidos aromticos.
El tripsingeno, da origen a la tripsina por separacin de un hexapptido del amino-terminal por accin de la
enterocinasa. La tripsina hidroliza enlaces en los que intervienen Arg y Lys.
Carboxipeptidasa A, contiene Zn2+, hidroliza casi todos los tipos de enlaces peptdicos en los cuales intervengan
carboxilos terminales.
Como resultado de la accin de la pepsina en el estmago seguida de la accin de las proteasas pancreticas, las
protenas se convierten en pptidos cortos de diversos tamaos y aminocidos libres. Los pptidos se degradan para
dar aminocidos libres por accin de las peptidasas de la mucosa intestinal, particularmente la leucin-amino-peptidasa,
que tambin contiene Zn2+, y separa los restos amino-terminales de los pptidos. Los aminocidos libres resultantes,
son excretados al torrente sanguneo, de ah alcanzan el hgado en donde tiene lugar la mayora del metabolismo
ulterior, incluida su degradacin.
Las protenas endgenas tambin tienen que degradarse, al parecer despus de un tiempo (que depende de la
velocidad con la que catalizan su reaccin y dependiendo si son o no enzimas constitutivas), poco a poco adquieren
seales como desaminacin o metilacin que indican a las proteasas el momento de la degradacin.
Casi todas las protenas del organismo estn en una constante dinmica de sntesis (1-2% del total de protenas), a
partir de aminocidos, y de degradacin a nuevos aminocidos. Esta actividad ocasiona una prdida diaria neta de
nitrgeno, en forma de urea, que corresponde a unos 35-55 gramos de protena. Cuando la ingesta diettica compensa
a las prdidas se dice que el organismo est en equilibrio nitrogenado.
El balance nitrogenado puede ser positivo o negativo. Es positivo cuando la ingesta nitrogenada supera a las prdidas,
como sucede en crecimiento, embarazo, convalecencia de enfermedades. Es negativo si la ingesta de nitrgeno es
inferior a las prdidas, tal como ocurre en: desnutricin, anorexia prolongada, postraumatismos, quemaduras,
deficiencia de algn aminocido esencial.
Determinacin de protenas8
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La funcin fundamental de la GPT o ALAT en el transporte de grupos amino desde los tejidos hasta el hgado para la
sntesis de la urea (forma de excrecin del amino) ha quedado manifiesta.
La funcin fundamental de la GOT o ASAT en la conexin entre el ciclo de la urea y el ciclo de Krebs ha quedado
manifiesta. El nivel de ambas enzimas en plasma puede ser un ndice de lesiones en cualquiera de estos tejidos;
fundamentalmente son indicativas de la funcionalidad heptica.
Desaminacin oxidativa
Proceso, realizado en las mitocondrias, y en el que la enzima cido glutmico-deshidrogenasa elimina el grupo amino
del cido glutmico. Se forma amonaco que entra en el ciclo de la urea y los esqueletos carbonados vienen a ser
productos intermedios glucolticos y del ciclo de Krebs.
Sntesis de aminocidos
La sntesis de los aminocidos, con excepcin de cistena y tirosina, est unida al ciclo del cido tricarboxlico (TCA),
bien por transaminacin o bien por fijacin de amonio. El grupo alfa-amino es central a toda sntesis de aminocidos
y deriva del amonio de los grupos aminos del L-glutamato. De stos se sintetizan glutamina, prolina y arginina. El
cido glutmico es la principal fuente de los grupos amino para la transaminacin.
La cistena se forma, en el citosol celular, a partir de serina y del aminocido esencial metionina.
La tirosina se forma mediante hidroxilacin del aminocido esencial fenilalanina por la fenilalanina hidroxilasa.
Determinacin de protenas10
II.
Hiperaminoaciduria
Anomalas congnitas de las protenas plasmticas
Anomalas del metabolismo de las purinas y pirimidinas
Anomalas congnitas de la sntesis hormonal
Tubulopatas congnitas
1. Hiperaminoaciduria
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3. Albinismo: falta de pigmentacin en la piel debido a que la tirosina no puede ser transformada en melanina
debido a la falta de la enzima tirosinasa.
Un fallo en el transporte de aminocidos: puede ser tanto a nivel renal (falla la reabsorcin tubular), como a
nivel intestinal (falla la absorcin). La alteracin ms conocida es la cistinuria que consiste en que alguno
aminocidos al no ser reabsorbidos en el tbulo pasan a orina, uno de ellos, la cistina puede precipitar formando
clculo renales
AMINOACIDURIAS MS SIGNIFICATIVAS
Alteracin del metabolismo de la fenilalanina. Es un aminocido esencial que debe ser aportado por la alimentacin.
En hgado se oxida a tirosina. Tirosina y fenilalanina permiten la sntesis de:
Catecolaminas suprarrenales
Hormonas tiroideas
Melanina cutnea
La alteracin metablica produce anomalas congnitas:
o Alcaptonuria
o Albinismo
o Fenilcetonuria u oligofrenia fenilpirvica
o tirosinuria
Sospecha diagnstica de aminoaciduria, Reaccin positiva del cloruro de hierro (de Millon) del indicn o nitroprusiato
sdico. Se puede confirmar con cromatografa
Alteraciones del metabolismo de otros aminocidos
Leucinosis: orina de olor a jarabe de arce
Analbuminemia
Bisalbuminemia
Anhaptoglobulinemia
Atranferrinemia
Agammaglobulinemia
Abetalipoproteinemia
Dficit de alfa1-antitripsina
5. Tubulopatas congnitas
Diabetes inspida renal adiuretnresistente
Diabetes de Hartnup
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III.
Albmina
Regin alfa-1: antitripsina, HDL lip., glicoprotena cida u orosomucoide, protrombina, tiroglobulina.
Regin alfa-2: alfa 2 macroglobulina o antiplasmina, haptoglobina, ceruloplasmina
Regin beta: transferrina, beta-lipoprotenas,C3 y C4 del complemento, C1 activador, hemopexina, prot. C
reactiva
Regin gamma: inmunodeficiencias primarias y secundarias
Las bandas que se visualizan en la electroforesis de protenas definen unos patrones caractersticos. Alteraciones de
estos patrones se asocian a toda una serie de condiciones y enfermedades diferentes. Por ejemplo, en el mieloma
mltiple (un tipo de cncer de las clulas plasmticas sanguneas) el crecimiento y la divisin descontrolados de las
clulas plasmticas malignas conducen a la produccin de grandes cantidades de un nico tipo de inmunoglobulina
monoclonal.
ALBUMINA: Su principal funcin es la estabilizacin del volumen sanguneo y la regulacin del intercambio de fluidos
vasculares. Es responsable del 75% de la presin osmtica, transporta pigmentos, colorantes y drogas,
contribuyendo a su excrecin, solubilidad y difusin a los tejidos. Casi todas las enfermedades muestran cierto
grado de depresin de albmina. Valores marcadamente bajos indican enfermedad heptica, renal o sistmica
significativa.
ALFA 1 ANTITRIPSINA: Normalmente responsable por 70% de la fraccin Alfa-1 Inhibe a la tripsina; cuando est
deprimida, los pacientes sufren enfisema pulmonar y cirrosis juvenil
ALFA - 1 GLICOPROTEINA ACIDA. Normalmente es responsable por menos del 30% de la fraccin Alfa 1pero
generalmente es responsable de la elevacin de esta fraccin. Se encuentra elevada en enfermedades inflamatorias
crnicas y degenerativas y muy elevadas en varias enfermedades malignas.
ALFA - MACROGLOBULINA ( 2 M): Responsable del 25% del valor de la fraccin alfa-2 elevada en sndrome
nefrtico, gastroenteropatas con prdida de protenas, cirrosis heptica y diabetes mellitus.
HAPTOGLOBINA: Normalmente responsable por 25% del valor de alfa -2. La anormalidad observada ms
comnmente es una elevacin de su valor. Es una protena de fase aguda, y se eleva inespecficamente en presencia
de inflamacin, necrosis o destruccin tisular. Sin embargo por evaluacin del grado de elevacin, cambios en otras
fracciones e historia clnica, se pueden inteligentemente considerar un diagnstico diferencial. Valores bajos se
observan en anemias hemolticas.
TRANSFERRINA: Normalmente un 60% de beta-1 importante en el transporte de hierro y en la regulacin y control
de su absorcin
BETA LIPOPROTEINA: Normalmente responsable por 60% de beta -2 Transporta la mayor parte de lpidos sricos.
Debido al bajo contenido proteico (25%), marcados cambios reflejan poca alteracin en el valor de Beta- 2
IgA: Normalmente responsable del 12% del valor de gamma. Esta fraccin puede estimarse observando el grado de
depresin entre beta-2 y gamma. Sus componentes mejor conocidos son antitoxina, aglutininas, antibacterianas,
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Hiperinmunizacin
Infeccin aguda
Macroglobulinemia de Waldenstrom
Enfermedad heptica crnica
+ = Aumento
- = Descenso
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Urea
Se determina el BUN , nitrgeno ligado a urea
Urea en mg = 2,14. BUN
Creatinina
Constituye un buen ndice de valoracin de la funcin renal especialmente del filtrado glomerular
Se determina la depuracin o aclaramiento:
Acl Cr = U. V/P. se necesita la orina de 24 horas y se determina sobre una alcuota.
U = concentracin de creatinina en orina
P= concentracin de creatinina en plasma
V= volmen de orina en 24 horas
En humanos el amonio libre es txico, sobre todo para el cerebro, luego el grupo amino procedente de la
degradacin de los AA debe de ser transportado convenientemente al hgado, donde se convertir en urea. Estos
grupos amino debern ser transportados al hgado en una forma distinta de NH4+ para que la concentracin de ste
en sangre no se eleve; generalmente se transportan como GLN o como ALA segn se recoge en el siguiente
esquema.
En la mayora de los tejidos el amonio se almacena en forma de GLN a partir del GLU y actuando la glutamina
sintetasa; esto conlleva gasto de energa, 1 ATP por grupo amino que se almacena.
La GLN transporta estos grupos aminos hasta el hgado y all los libera mediante la actuacin de la glutaminasa.
En el msculo los aminocidos liberan amonio que:
1.- Capta el alfa-cetoglutarato para formar GLU con la catlisis de la glutamato deshidrogenasa,
2.- El GLU formado cede el grupo amino al piruvato que se transforma en ALA en una reaccin de transaminacin
catalizada por la GPT o ALAT. El piruvato se forma constantemente en el msculo como producto de la glucolisis.
3.- La ALA se transporta hasta el hgado y alli se transamina de nuevo con el a-cetoglutarato por accin de la GPT o
ALAT heptica; el piruvato liberado en hgado se convertir fcilmente en glucosa por la va gluconeognica. Este
conjunto de reacciones en msculo e hgado, que intercambian ALA y glucosa entre ambos tejidos, es lo que se
denomina:
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CICLO ALANINA-GLUCOSA
El transporte de grupos amino desde los msculos hasta el hgado se realiza fundamentalmente en forma de ALA,
segn se aprecia en el esquema anterior y se representa en los siguientes. El hgado aporta glucosa a los msculos
que lo degradan por la va glicoltica hasta piruvato. ste capta un grupo amino por transaminacin y en forma de
ALA lo transporta hasta el hgado donde lo libera para que se transforme en urea. El piruvato en el hgado puede
entrar en la gluconeognesis para formar glucosa de nuevo.
CICLO DE LA UREA
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