2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

La Microbiologa es la ciencia que se dedica
al
estudio de los microorganismos,

observados con la ayuda de un
microscopio, ya que escapan a nuestra
capacidad visual. Sobre la faz de la Tierra
hay una gran cantidad de especies
diferentes de microogranismos, estamos
poblados por una enorme cantidad de
ellos; de hecho en nuestro propio cuerpo,
la cantidad de organismos alojados en l
supera en nmero al de nuestras propias
clulas, siendo la mayora organismos
unicelulares.
Dentro de
tenemos:

estos

Aqu se observan fotografas de

representantes de cada grupo mencionado
(fotografas de microscopia electrnica de
barrido).
La bacteria que ms se ocupa como modelo
de estudio de las clulas procariontes, y
por ende la ms conocida es la Escherichia
coli. Tambin hay ciertos procesos de
clulas eucariontes que se estudian en esta
bacteria. Esta bacteria est presente en la
mayora de los seres humanos y algunos
animales, particularmente en el intestino
grueso, y por consecuencia se encuentra en
la materia fecal.

microorganismos

Una manera de verificar el nivel sanitario

de las comidas, es buscando la presencia o
no de esta bacteria, si se encuentra, se dice
que el alimento est contaminado con
materia fecal.

Bacterias: clulas procariontes

Virus:
parasito
intracelular
obligado
Hongos: eucariontes, pudiendo ser
uni o pluricelulares e incluso
macroscpicos.
Parsitos: eucariontes, uni o
pluricelulares
e
incluso
macroscpicos como gusanos.

E. coli
Virus influenza: causante de la mayora
de los brotes de infecciones respiratorias
en invierno

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

derivados de la penicilina para

contrarrestar una gran variedad de
bacterias.

Virus influenza
Recordando materia del ao pasado, los
virus no son seres vivos, son parsitos
intracelulares que toman como husped a
la clula. Tambin tienen un menor tamao
que las clulas, y estn formados por
material gentico y protenas. En algunos
casos puede presentar hidratos de carbono
o lpidos en su parte ms externa. El virus
puede tener ADN o ARN como material
gentico. Los que contengan ARN, tambin
tienen la enzima transcriptasa reversa, la
cual sirve para sintetizar ADN a partir de
un molde de ARN. Otro dato a considerar,
es que los virus son tan pequeos que se
necesita un microscopio electrnico para
visualizarlos, lo que los convierte en una
entidad submicroscpica.
Penicilium: Gnero bastante comn,
representante de los hongos, ya que tiene
relacin con la penicilina. Un hecho
histrico dentro de la microbiologa fue el
descubrimiento de los antibiticos, cuyo
primer representante fue justamente la
penicilina, la cual se descubri
casualmente, por Alexander Fleming.
Alexander trabajaba con el Staphylococcus
aureus, y se le contamin con un hongo
proveniente de esta familia, y se dio cuenta
que el hongo produca algo que mataba la
bacteria. Hoy en da hay una gama de

Hay tambin enfermedades producidas

por hongos, una de estas es la candidiasis,
enfermedad comn en las mujeres o en las
guaguas, el hongo que lo produce es la
Candida.

Hongo del
gnero penicilium
Trypanosoma
cruzi:
Ser
vivo
representante de los parsitos, es una
especie de protozoo, o sea, un parsito
unicelular y produce la enfermedad de
Chagas, la cual es propia de Amrica
Latina. Esta enfermedad tambin es un
ejemplo de transmisin a travs de
vectores, en este caso particular un insecto
llamado vinchuca.

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

morfologa el treponema pallidum, que es

el agente causal de la sfilis.

Trypanosoma cruzi

Ahora veremos algunos hechos histricos

que fueron claves para la microbiologa.
Anton van Leeuwenhoek: invent el
primer microscopio, es el padre de la
microbiologa.
Describi
con
su
microscopio a los animculos.
El microscopio de Leeuwenhoek, que tena
una pequea platina con un lente y un
tornillo para poner la muestra, era un
tamao tan pequeo que se poda tomar en
la palma de la mano. Los microorganismos
que el observo en su microscopio ,
llamados en ese tiempo por l como
animaculos clasificados de acuerdo a su
morfologa esferica o alargada, fueron los
estreptococcus (cadena de celulas
esfricas), como el streptococus nomeae
que produce meningitis con alta tasa de
mortalidad, el coccus (clulas esfricas no
agrupadas), bacilos (clulas alargadas),
como la escherichia coly presente en las
heces de los seres humanos, estafilococcus
(clulas esfericas agripadas en racimos) en
donde uno muy conocido es el
estafilococcus aereus el cual produce gran
cantidad de infecciones de la piel como la
esceptisemia. Hay personas que lo tienen
dentro de la microbiota normal (bacterias
que conviven normalmente con nosotros).
Y espiroquetas, donde se destaca bajo esta

Por eso es Leewenhoek considerado el

padre de la biologa, gracias a su invencin,
se desarrollo la microbiologa como ciencia
independiente de la biologa.

Otro investigador muy importante en
microbiologa clnica es Louis Pasteur, que
fue el primero en hacer una asociacin o
identificacin de los microorganismos
como agentes patgenos. Si bien
Leeuwenhoek los observ, no hizo un link
entre ese microorganismo y alguna
enfermedad. Pasteur dijo algunos
microorganismos pueden ser agente causal
de enfermedad, tambin hizo otros
aportes a la medicina; como la generacin
y creacin de una de las primeras vacunas:
la vacuna de la rabia (agente viral).
Robert Koch fue otro investigador
importante, quien creo los llamados
postulados de Koch, que aun se usan para
determinar si un agente patgeno es el
causal de una enfermedad infecciosa
determinada.
Para establecer sus postulados Koch hizo
un experimento:
Se tienen dos ratones, uno sano y otro
enfermo. Al ratn enfermo se le saca una
muestra de sangre, la cual se sembrara o
inoculara en una placa de cultivo. Luego se
observa con el crecimiento qu tipo de
bacteria creci all (en las colonias del
patgeno sospechoso que crecieron en la
placa de cultivo). Situacion que
respondera al primer postulado El
3

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

microorganismo debe estar presente en
todos
los individuos con la misma

enfermedad. Es decir, en todos los
animales que se han muerto por la misma
causa o que presenten la misma
sintomatologa.
Recordar que las bacterias son organismos
procariontes y se reproducen por fisin
binaria (se divide de forma exponencial), y
de tal manera, que al cabo de cierto tiempo
van a haber millones de bacterias que
provienen de una misma bacteria. Por lo
tanto van a existir algunas bacterias muy
parecidas y que se van a comportar de una
manera muy similar. Esa colonia tiene un
comportamiento determinado que se
puede estudiar y a partir de eso saber de
cual especie se trata.

aisladas) tomo una bacteria, la suspendo en

un tubo de ensayo que tenga suero
fisiolgico, y ese suero fisiolgico lo voy a
inocular a un animal sano, este animal se va
a enfermar y va a quedar como el primero. Y
desde este segundo animal debo de tener el
mismo microorganismo que el primero. Se
comprueba tomando una muestra, se
siembra en el mismo medio de cultivo y se
obtiene la misma colonia con las mismas
caractersticas. De esta manera, si se
cumplen estas cuatro etapas se puede decir
que este microorganismo que fue aislado de
manera pura, es el agente causal de esa
enfermedad infecciona

Postulados de Koch
1. El microorganismo debe de estar
presente en todos los individuos
con la misma enfermedad.
2. El microorganismo debe ser
recuperado del individuo enfermo
y poder ser aislado en medio de
cultivo.
3. El microorganismo proveniente de
ese cultivo debe acusar la misma
enfermedad cuando se lo inocula a
otro hospedero.
4. El individuo experimentalmente
infectado debe de contener el
microorganismo.
Imagen: en la primera placa se logra aislar
este microorganismo, desde el primer
individuo enfermo, si yo tomo ahora una de
esas colonias (de esas que se ven ms

Estos postulados hoy en da tienen

modificaciones porque no todos los
microorganismos tienen el mismo
comportamiento, hay algunos que no se
pueden aislar en medio de cultivos, como
los virus (parsitos intracelular obligados).
En la placa de petri no los vemos porque
no se pueden multiplicar solos.
4

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Las clamidias son importantes para el ser
humano porque produce enfermedades de

transmisin sexual. En la mujer producen
enfermedades EPI (enfermedades plvicas
inflamatorias) que pueden causar
esterilidad.
Microbiologa: es una disciplina con un
enorme impacto hoy en da por que han
habido muchos avances a lo largo de este
desarrollo y muchos y varias agentes y
bacterias son considerados micro no
solamente estn los patgenos para el ser
humano y este curso solo va a estar
concentrado en una pequea proporcin el
mnimo de bacteria son las patgenas para
el hombre y el mximo son beneficiosas
para el planeta en general.
Nosotros nos enfocaremos en las bacterias
patgenas para el ser humano, que pueden
tener efectos dainos para el hombre
Se estudiar:
- Microbiologa bsica: estudia la
naturaleza y propiedades de los
microorganismos: morfologa, fisiologa,
bioqumica, gentica, ecologa y taxonoma.
Todo lo que respecta al microorganismo,
como
se
comporta,
como
est
estructurado, etc. Para que uno sea capaz,
luego,
saber
cmo
tratar
ese
microorganismo.
- Microbiologa aplicada: utiliza los
conocimientos
generados
por
la
microbiologa bsica para resolver
problemas.

Microbiologa ambiental
Microbiologa industrial
Biotecnologa.

Para saber cmo son realmente las

bacterias es necesario el uso del
microscopio y las tinciones es posible la
observacin de ellas a travs del
microscopio ptico.
-
-
-

Esfricas o cocos
Alargadas o bacilos
Enroscadas o espiroquetas.

Las ms patgenas son los cocos y bacilos.

NOTA: una espiroqueta muy famosa es el
Treponema Palidum porque es el agente
causal de la sfilis.
Antes del descubrimiento de la penicilina
las principales causas de muertes eran las
infecciones como tuberculosis, neumona,
sfilis, etc. Hoy en da la muerte no es tan
comn, excepto algunas que no tienen el
tratamiento adecuado. Depende del agente
infeccioso, su resistencia y el antibitico
que se use.
El uso de antibitico no ha erradicado las
enfermedades infecciosas, por el contrario
a travs de los mecanismos de
recombinacin se han generado bacterias
multi resistentes, como las enfermedades
infecciosas intrahospitalarias.

Microbiologa clnica
Microbiologa de los alimentos
5

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

DIVISION FILOGENTICA
ORGANISMOS

DE

LOS

Al microscopio se observa su material

gentico
disperso,
sin
organelos
membranosos, ribosomas.

Caractersticas de las bacterias con
respecto a las clulas eucariontes es la
ausencia de la membrana nuclear. No tiene
organelos membranosos, est delimitada
por una membrana plasmtica y sobre ella
una pared celular (no todos los
procariontes la tienen, con importancia
clnica), tambin pueden tener flagelos, y
pili, diferentes a los cilios ya que las
bacterias no tienen citoesqueleto, por lo
que estn formados por filamentos
proteicos diferentes.
Las vas metablicas son conservadas y se
mantienen como la glicolisis, ciclo de
Krebs, fosforilacin oxidativa, vas de
sntesis, reacciones de fermentacin. tiles
para determinar qu tipo de bacteria es la
presente en las muestras, se usa su
metabolismo segn los medios de cultivos
en los que se desarrolla.

Las archeas no se consideran patgenas
para el ser humano, y son utilizadas para
fines industriales.
El material gentico de las bacterias es
circular de doble hebra, por lo general con
excepciones de hasta 5 cromosomas
mximo.
Adems del material gentico circular las
bacterias NO tienen histonas y para
condensar su material gentico se ocupan
los iones divalentes de Magnesio y Calcio,
los cuales ayudan a compactar el material
gentico junto con unas protenas
parecidas a las histonas llamadas histonas
like (funcin anloga pero distinta
estructura).
Otro elemento en las bacterias es la
presencia de PLSMIDOS, cabe destacar
que no todas las bacterias tienen
plsmidos e incluso algunas pueden tener
varios tipos de plsmidos o varias copias
de un mismo tipo. Estos elementos tienen
6

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

una gran importancia en la conjugacin
(transferencia
gentica horizontal) y hoy

en da pueden ser incorporados de manera
artificial para poner un gen especfico en la
bacteria (ingenera bacterial), o tambin en
la terapia gnica en organismos
eucariontes.
La pared de las bacterias es distinta a la de
los
hongos,
est
formada
por
PEPTIDOGLICN, formado por cadenas de
azcares unidas entre s por pptidos.
Los ribosomas son ms pequeos en las
bacterias que en clulas eucariontes,
teniendo un tamao de 70s (s: coeficiente
de sedimentacin).
En el caso de las bacterias existen un solo
tipo de RNA polimerasas y en promedio las
clulas procariontes miden entre 1 a 10
micrometros, el ojo humano no tiene la
capacidad para ver ste tipo de tamao y
para esto se necesita un microcopio ptico
generalmente, y el aumento mximo en el
microscopio es de 1.000x.
Tipos de microscopios:

ptico de campo claro: a la

muestra se le atraviesa un haz de
luz.
ptico de campo oscuro: el haz de
luz tiene una refraccin y no pasa
completamente.
ptico de fluorescencia: se
necesitan
fluorforos
para
distinguir ciertas diferencias.
Electrnico: equipo ms sofisticado
y llega hasta los mnimos detalles
como
los
ncleos,
poros,

membranas, organelos, virus, etc

ya que el aumento es hasta de
1.000.000x.
TINCIONES
Para el uso de un microscopio de campo
claro se necesita casi siempre la utilizacin
de tinciones ya que las bacterias
generalmente no tienen color, siendo
transparentes naturalmente como las
bacterias patgenas y las tinciones son de
dos tipos: Tinciones simples y
diferenciales.
- Tinciones simples: un solo colorante si
un microorganismo esta presente o no.
Adems, nos permite ver la morfologa de
la bacteria si es esfrica o es alargada.
- Tinciones Diferenciales: En el caso de
las tinciones diferenciales, se ocupa ms
de un colorante, por lo general 2
colorantes, y adems, unas soluciones de
lavado. Permitindonos ver distintos tipos
de bacterias o nos permiten distinguir
algunas estructuras determinadas dentro
de las bacterias.
La tincin ms utilizada en
microbiologa es la Tincin de Gram.

la

MICROSCOPIOS
Campo Oscuro:
- Permite distinguir ciertas caractersticas
de algunas bacterias
- Mucho menos usado que el de Campo
claro.

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

- Ayuda en el diagnstico de algunas
bacterias
como: Treponema Pallydum

(espiroqueta), la cual no se puede ver en el
M. Campo Claro debido a que es una
bacteria muy delgadita y finita. Aunque se
realice una tincin de Gram y esta quede
rosada (Gram -). No se puede observar
porque existe mucha luz.
- En cambio en el M. Campo Oscuro, todo el
fondo se ve negro y la clula se ve mas
brillante. Y adems en este caso se ve al
fresco, sin teir nada (bacterias vivas).
- Bacterias se ven con una alta movilidad.
- La bacteria no se tie.
- Ejemplo, Espermatozoides. (forma de
evaluarlos, por su capacidad de
movimiento)

Electrnico, dos tipos:

a) Transmisin:
- Que permite ver cortes de algn tejido o
de alguna clula, con las estructuras
correspondientes. (2D)
b) Barrido
- Permite ver al organismo completo con
volmenes, como en 3 dimensiones (3D)
- Se hace un barrido por el exterior de la
bacteria o microorganismo, para verlo
tambin en su comportamiento.
Los virus solo se ven con el microscopio
electrnico.

Fluorescencia:

Tincin de GRAM: Permite la clasificacin

en 2 grandes grupos (GRAM + y -), adems
permite ver la morfologa de la bacteria y
la agrupacin de la bacteria.

- Utiliza fluorforos (componentes

qumicos), los cuales emiten luz cuando
son excitados por la luz del microscopio.

Fin: lograr identificar cul es la bacteria

que est produciendo una infeccin
determinada en un paciente.

- Todos los lugares donde se encuentra la

protena marcada(protena fluorescente
verde) en la bacteria , por lo tanto en todos
los lugares donde esta la protena se ve de
coloracin verde.

Tiene 4 etapas:

- En general esta microscopia sirve para

ver a la bacteria cuando ya esta dentro de
una clula eucarionte o cuando ya ha
invadido a un tejido y queremos
identificarlo.

2) Agregar solucin de YODURO (I-/I-),

comnmente se le llama lugol o solucin
mordiente. El objetivo de agregar esto, es
que estos tomos formen un complejo con
el cristal violeta, que va a quedar retenido
en la pared celular de algunas bacterias
(las GRAM+).

1) Agregar el colorante primario (se agrega

en primer lugar a la muestra), se llama
CRISTAL VIOLETA (de carcter bsico).

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

3) Agregar solucin de lavado, que es una
mezcla
de Etanol con Acetona (ambos

solventes orgnicos), esta solucin
tambin se llama solucin decolorante,
sta es la etapa ms importante de la
tincin o etapa limitante, debido a que
algunas bacterias se van a descolorar, van
a perder el cristal violeta con el lugol, pero
otros grupos no lo pierden, quedan con el
colorante retenido en la pared celular.
4) Etapa de contraste. Se agrega
ZAFRANINA (tambin de carcter bsico)
Aquellas bacterias que quedaron incoloras,
se colorean rojo o rosado.
Finalmente se ven algunas bacterias azules
(GRAM +, las que fueron capaces de
retener el colorante primario a pesar del
lavado con etanol y acetona) Y veremos
bacterias rosadas (GRAM- que se tien al
final con safranina).
Desde el punto de vista estructural,
significa que la pared celular de las
bacterias es diferente.
GRAM+Tiene Pared celular GRUESA
(Varias capas de peptidoglicn), y por
fuera de la pared no hay nada ms.
GRAM - Tiene Pared celular DELGADA
(Pocas capas de peptidoglicn) y por fuera
tiene una membrana externa.

Como ya sabemos, las bacterias estn

compuestas desde adentro hacia afuera
por una membrana plasmtica, que es
similar a cualquier membrana plasmtica
de otras clulas.
Hacia el exterior vamos a encontrar una
pared celular compuesta por peptidoglicn
que es una molcula formada por pptidos
y azucares. Es importante saber que en el
caso del gram (+) es una pared muy
gruesa, es decir, tiene muchas capas de
peptidoglicn. Y por fuera de la pared no
hay nada ms, es en esta donde qued
retenido el cristal violeta. En el caso de las
gram (-) tienen lo mismo pero lo que las
diferencia de las gram (+) es el grosor de la
pared, que en las gram (-) ser mucho
menor, es decir, ser una pared celular ms
delgada.
La otra diferencia fundamental consiste en
que las bacterias gram (-) poseen una
membrana externa, que est por fuera del
peptidoglicn y que se encuentra
totalmente ausente en las bacterias gram
(+). Por lo tanto las gram (-) van a tener
una membrana plasmtica, una pared
celular delgada y una membrana externa,
que tiene las mismas caractersticas que
cualquier membrana biolgica, es decir,
est
formada
principalmente
por
fosfolpidos y protenas. Para este caso, la
membrana plasmtica tradicional de la
bacteria pasa a llamarse membrana
interna y la membrana que queda fuera
de la pared celular externa, sta bicapa,
es asimtrica porque en una de las
caras (cara externa) hay unos
fosfolpidos especiales denominados
9

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

LPS (lipopolisacaridos) que estn
formados
por un lpido y un polisacrido,

como su nombre lo dice.
Adems de estas molculas, vamos a
encontrar unas protenas denominadas
porinas (que no transportan solo agua,
sino
tambin
otras
molculas).
Recordemos entonces que la bacteria gram
(-) no va a tener la capacidad de retener el
cristal violeta debido a que su delgada capa
de pptidoglican se va a degradar con la
solucin de lavado (etanol + acetona) y
luego quedar teido con safranina, que es
un colorante capaz de teir cualquier
membrana biolgica.
Desde el punto de vista de la microscopa
electrnica cuando hacemos cortes y
miramos bacterias gram (+) veremos un
borde ms grueso por su pared celular, por
otra parte, las bacterias gram (-) se vern
con un contorno ms delimitado y con su
doble membrana (externa e interna).
Continuando
con
las
tinciones
diferenciales, debemos decir que no todas
las bacterias se pueden teir con la tincin
de gram, la gran mayora si, tanto las
bacterias patgenas como las ambientales,
pero hay algunas excepciones, en las cuales
el cristal violeta no entra a la bacteria, por
lo tanto no se teir nada, esa gran
excepcin desde el punto de vista clnico
(pueden existir ms excepciones, pero la
profesora da hincapi en un gnero) es el
gnero
mycobacterium
,
fundamentalmente la mycobacterium
tuberculosis, que es la bacteria causante de
la tuberculosis humana. Por lo tanto esta
queda fuera de la clasificacin de las gram

y se va a llamar bacteria acido-alcohol

resistente, se llama as porque se utiliza
otra tincin diferencial para observar esta
bacteria que es la tincin de Ziehl-
Neelsen.
Por qu esta bacteria es diferente?
Estructuralmente esta se compone de una
membrana plasmtica y por fuera una
pared celular de pptidoglican delgada,
pero adems esta bacteria no va a tener
una membrana externa por fuera de la
pared, sino que vamos a encontrar una
gran cantidad de molculas lipdicas (cido
miclico, ceras B, etc.) que formarn una
cubierta grasa sobre la bacteria que va a
impedir la entrada del cristal violeta.
Para esta bacteria vamos a utilizar otra
tincin diferencial (Ziehl-Neelsen), en
donde el colorante primario corresponde a
la fucsina, entonces se le agrega la fucsina
y la muestra se calienta con el mechero
para que este colorante ingrese a la
bacteria. Posteriormente se hace un lavado
con una solucin de etanol + cido
clorhdrico. Qu sucede despus de esto?
Aquellas bacterias que no son de este
gnero, es decir, no son alcohol-resistentes
pierden este colorante como resultado del
lavado, pero aquellas que son del gnero
mycobacterium van a quedar con la fucsina
retenida en su pared celular, por lo tanto
las veremos de color rosado o fucsia.
Un paciente con tuberculosis, tendr una
tos con expectoracin importante, por lo
que la muestra que vemos es de esputo, el
paciente tose y se toma la muestra, por eso
hay un fondo amarillento donde hay
clulas epiteliales, mucosa amarillenta, etc.
10

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Eso que se ve entremedio ah como unas
cosas
alarga rosadas es el micobacterium

tuberculosis si lo vemos en la muestra del
paciente se tiene una alta sospecha de que
este paciente tendr tuberculosis, es lo que
se llama bacilescopia y es lo que se le
pide a un paciente con sospecha de
tuberculosis.
En la tincin despus de que se hizo la
decoloracin con esta mezcla de cido y
alcohol se debe hacer una tincin de
contraste para teir otras bacterias que
hayan quedado entremedio, este se hace
con azul de metileno.
El resultado es que las bacterias acido-
alcohol
resistentes
del
genero
micobacterium quedan rosadas (Como
vemos en la foto), el resto de las clulas
pueden quedar de color azul por el
contraste.
Aqu tenemos una de las tinciones que nos
permite distinguir una caracterstica
estructural de algunas bacterias, cuando
hablamos de bacterias patgenas no todas
necesariamente tienen que tener cpsula.

La cpsula es la capa de la bacteria que

esta por fuera de todo lo dems,
independiente de que la bacteria sea gram
+ o gram - , o micobacterium. Adems
podra tener una cubierta de azcares (por
lo general) que quedan pegadas a la
bacteria.
Para teir esta cpsula ocupamos lo que se
llama tincin negativa, se llama as porque
tambin agregamos dos colorantes pero
que van a teir todo menos la capsula (por
eso negativo), todo el fondo se ve rosado
(tambin se podra ver negro porque se
tie con tinta china) posteriormente se
agrega un colorante de contraste que se
llama fucsina o zafranina, este colorante
tie la bacteria.
Por ejemplo esta que esta solita, la bacteria
alrededor tiene un aro incoloro y todo el
fondo se ve oscuro. Esto blanco son los
polisacridos que forman la capsula. Esto
se llama tincin negativa que puede ayudar
tambin en identificar algunas bacterias y
para precisar si la bacteria cuenta o no con
esta estructura.
Para qu le sirve la capsula a una bacteria?
Le ayuda a camuflarse del sistema inmune,
son capaces de resistir varios mecanismos
de fagocitosis (primera que acta en el
sistema inmune innato).
Qu es la fagocitosis?

Es una clula que se come a otra (en este

caso a la bacteria) para fragmentarla y
para activar todo el resto del sistema
inmune.

11

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Aqu no estamos viendo mayores detalles,
pero
estamos viendo como la podramos

distinguir en el microscopio.
La ltima tincin especial se puede
emplear para ayudar a la identificacin de
ciertas bacterias, es la identificacin de
esporas.

Las esporas en el caso de las bacterias son
distintas a las esporas de otros organismos
porque estas la bacteria las va a generar.
Se parece al ncleo de una clula, la espora
contiene al material gentico de la bacteria
totalmente compactado pero ahora
cubierto con una cantidad de molculas
que la van a proteger del medio ambiente,
entonces se va a compactar el material
gentico, se van a generar capaz o
cubiertas en este material gentico y el
resto de la bacteria (que por esta tincin se
ve rosado) desaparecer y solo quedara la
espora en el ambiente por cientos de aos.
La espora bacteriana es una de las formas
de vida ms resistentes que se conoce
(incluso a los 100C la espora resiste) y es
por eso que muchas infecciones
intrahospitalarias estn producidas por
esporas que se adquieren del ambiente que
resisten todos los mtodos de desinfeccin
y esterilizacin.

Aqu queremos ver que esta espora cuando

se ha generado se puede teir con verde de
malaquita.
Se pone la muestra, se agrega el colorante,
se calienta la muestra y este colorante
penetra en la espora y despus agregamos
un colorante de contraste, que se llama
zafranina, la que tie todo el resto. Cuando
la espora est dentro de la bacteria lo que
se llama endoespora, si lo vemos en una
etapa ms avanzada en el tiempo, todo lo
rosado va a desaparecer y solo veremos los
puntos verdes.
Aqu por ejemplo ah un bacilo que se ve
rosado por el contorno y al centro se le ve
un centro verde, esa pelotita es la espora
donde est concentrado todo el material
gentico de la clula. Tambin puede servir
en la identificacin de algunas bacterias
porque no todas esporulan solo algunas en
particular.
Dentro de las tinciones, ya revisamos las
simples y las diferenciales donde la tincin
diferencial ms importante es la tincin de
Gram, porque clasifica a las bacterias en
dos grandes grupos dejando muy pocas
bacterias fuera de esta clasificacin.
Mycobacterium es el nico gnero (dentro
del inters clnico) que no se puede teir
por Gram, por lo que se usa la tincin
cido-alcohol resistente.
Tambin vimos tinciones especiales, que
permiten distinguir alguna estructura que
tengan algunas bacterias (cpsula,
esporas).

12

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Tincin de esporas: permite distinguir
cuando
una bacteria ha esporulado y ha

producido una estructura al interior de la
clula de la bacteria que se ve de color
verde por el colorante verde de malaquita,
que es el colorante primario en esta
tincin. Posteriormente se agrega un
colorante de contraste que se llama
safranina, que tie todo el resto de la
bacteria rosada.
MORFOLOGA BACTERIANA
Adems de poder distinguir estructuras,
las tinciones nos permiten ver la
morfologa de la bacteria en el
microscopio.
Cuando vemos las bacterias redondas son
cocos o cocceas, las cuales pueden estar
agrupadas de distintas formas: coco (una),
diplococos (dos), streptococo (en cadena,
tambin da el nombre a gnero bacteriano
particular), tetracocos o ttradas (cuatro),
octetos y stafilococo (en racimo).

muy cortos (con un eje levemente ms

largo que el otro), alargados, fusiformes
(en forma de huso) y tambin pueden
tener esporas que en algunos casos son
ms grandes que el dimetro de la bacteria.
Hay bacilos que se pueden curvar: vibrio
(con forma de coma, tambin hay un
gnero bacteriano con este nombre). El
Vibrio cholerae es el ms famoso, produce
el clera en el ser humano.
Adems, pueden haber bacilos con ms de
una curvatura (en el vibrio hay solo una):
espirilo (mltiples curvas) y espiroqueta
(como un espiral).
Todas estas formas son observables al
microscopio mediante tinciones como la
tincin de Gram o azul de metileno, pero la
tincin de Gram se usa porque nos permite
adems de ver la forma, clasificarla en uno
de los dos grupos segn la estructura de su
pared celular, que es lo primero a
distinguir en una infeccin bacteriana para
elegir el tratamiento.
La
morfologa
bacteriana
est
determinada por la pared celular. La
pared celular es la responsable de darle la
morfologa a la bacteria, ya que las clulas
procariontes no tienen citoesqueleto.
Los tamaos de las bacterias varan entre
especies.

La otra morfologa posible es la de bacilos,
que es una bacteria con un eje ms largo
que el otro. Pueden ser de distinto tamao:

En esta imagen se observan fotografas

reales, a la izquierda de microscopa
electrnica de barrido y a la derecha de
microscopa ptica despus de hacer la
tincin de Gram. Esto se utiliza en los
13

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

laboratorios de microbiologa para hacer
diagnstico.

Pero en el microscopio electrnico se

puede visualizar bien el vibrio.
*Nota: Bacilo: un eje ms grande que el
otro. Dentro de este hay agrupaciones;
recto o curvados y dentro de los curvados
puede que tenga una curva y ser vibrio, el
espirilo tiene tres y la espiroqueta tiene
varias curvas, es como un espiral.
La espiroqueta treponema pallidum que es
Gram -, tampoco se distingue su forma en
microscopia ptica de campo claro porque
es muy delgada, pero si en la de campo
oscuro.

Como ejemplo tenemos al staphylococcus
aureus, es una de las bacterias ms
conocidas y de distribucin universal ya
que puede producir una amplia gana de
enfermedades. Su morfologa es coco
porque es esfrica y se determina porque
al mirarla se ven varios circulitos.
Como segundo ejemplo est el bacillus
cereus que es una bacteria ambiental que
puede producir esporas y en ser humano
produce intoxicaciones por alimento, su
forma es alargada por lo que es un bacilo.
El vibrio cholerae es un bacilo pero que
tiene una curvatura que le da la forma de
vibrio. En la microscopia ptica es difcil
distinguir la forma de vibrio, se ve solo
como un bacilo y tampoco se puede
distinguir el flagelo a menos que se use una
tincin muy especial que permite verlo.

La morfologa filamentosa es una especie

de bacilo pero mucho ms alargado, los
hongos tambin se ven parecidos a ellos
pero son especies distintas. El gnero
actinomices es una bacteria que se
encuentra en la boca y es el nico que tiene
una forma filamentosa y alargada. Se ve
distinto a un bacilo comn y corriente
porque se ven como pelos entrecruzados y
cada uno de esos filamentos es una
bacteria.
El escherichia coli es un bacilo muy corto,
hay algunas especies de su misma familia
que son as y son llamados cocobacilos
porque igual tienen un eje ms largo que el
otro.
Agrupaciones bacterianas
Es
importante
aclarar,
que
no
necesariamente todas las bacterias tienen
que tener alguna agrupacin. En cuanto a
morfologa si (una puede ser coccea, otra
puede ser bacilos, y dentro de estos ms
cortos, ms largos, etc). Pero en la
14

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

agrupacin no necesariamente todas estn
en
vitro, en cadena o en racimo, hay

algunas que estn de a una, y no
necesariamente van a estar pegadas la una
a la otra.
A qu se debe que unas queden en cadena
y las otras en racimo por ejemplo? Al plano
de divisin. Recordar que las bacterias se
dividen por fisin binaria, eso quiere decir
que su material gentico se duplica, se
genera un septum debido a que la
membrana plasmtica se va hacia
adentro, y se generan dos clulas hijas
iguales, del mismo tamao. En ese sentido,
cuando esa divisin ocurre en un solo
plano de la clula, se va a generar la
agrupacin de diplococo o de
estreptococo (de cadena). Pero adems
hay otros factores de la superficie de las
clulas que hacen que vayan quedando
unidas. En cambio en las ttradas, en los
octetos, estafilococos o racimos, lo que
ocurre es que hay distintos planos de
divisin.

que adquieren distintos tipos de

agrupaciones, en diplo, en cadenas o en
racimos.
En los bacilos es mucho menos habitual.
Ellos, principalmente los bacilos Gram -, se
encuentran separados o al azar. En los
bacilos Gram + es ms comn encontrar
agrupaciones, principalmente en cadena.
Aqu tenemos ejemplos de agrupaciones.
Cadena: Streptococcus pyogenes

Es una bacteria bastante comn, de

distribucin universal, muy habitual ya que
es quien produce la faringitis bacteriana y
la amigdalitis.
Este Streptococcus pyogenes es una coccea
y en la muestra predomina la agrupacin
en cadena. Hay cadenas de distintos
tamaos.
Racimo: Staphylococcus aureus

Dentro de las bacterias patgenas, lo ms
comn es que los cocos (esfricas), son los

15

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Es una bacteria en forma de coccea, del
tipo
gram + porque se ve azul.

En la muestra predomina el racimo,
aunque pueden haber algunas que se
suelten del racimo.
Esta bacteria produce una gran variedad
de enfermedades como infecciones de
heridas, sinusitis, neumonia, infecciones de
la va urinaria, septisemia, etc. Es una de
las pocas bacterias que tiene un amplio
rango de especificidad, es decir, que tiene
una cantidad de receptores en la superficie
que le permiten unirse practicamente a
cualquier tipo de clula. Es por esto que
produce una amplia variedad de
infecciones, que pueden ir de leves a
graves.
Pares (diplos): Neisseria gonorrhoeae

Sarcina lutea es un gnero muy habitual en

el ambiente y en el aire. Si se deja una
placa de petri abierta con un medio de
cultivo y luego se observa al microscopio,
vamos a encontrar muchas bacterias de
este gnero. No son patgenas para el ser
humano.
Hasta ahora tenemos que las bacterias
tienen distintas morfologas determinadas
por su pared celular: cocceas y bacilos.
Dentro de los bacilos, dependiendo de la
curvatura que tengan, podemos encontrar
vibrios, espiroquetas, etc.
Dentro de la agrupacion, determinada por
la divisin celular, podemos tener cadenas,
racimos, diplos, ttradas, octetos.

Esta bacteria es coccea, con forma circular

pero no circular perfecta, es un tanto
amorfa. Es un gram -.
Es el agente causal de la gonorrea,
enfermedad de transmisin sexual.
Agrupaciones pequeas y empacadas
(ttradas, octetos): Sarcina lutea

Esto nos sirve porque la primera etapa en

el diagnstico microbiolgico es, luego de
examinar al paciente, la muestra clnica.
Esta se mira al microscopio. Esto no dura
mas de 10 minutos: se toma la muestra, se
hace el frotis en el portaobjeto, se tie con
el gram durante 6 minutos, se pone al
microscopio y se mira.
Se manda inmediatamente la respuesta en
esos 10-20 minutos, de qu tipo de
bacteria se trata. Por ejemplo si fuera una
neisseria, igual como la que vimos hace un
rato atrs, una neisseria gonorrea, pero en
16

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

este caso sera una neisseria meningitidis.

Tambin
la vamos a ver como un diplococo
gram negativo. Pero si est tomada desde
lquido cefalorraqudeo, lo ms probable es
que sea meningitidis y en ese caso con esta
etapa basta para hacer el diagnostico de
inmediato y despus se corrobora
obviamente para empezar un tratamiento.

Al final de todas las etapas se va a poder
identificar cual es el agente etiolgico,
que es el microorganismo responsable de
una enfermedad infecciosa, que puede ser
una bacteria, un virus, un hongo o un
parasito.
Y para que nos sirve eso? Para determinar
la causa de la enfermedad, buscar
inmediatamente el tratamiento ms
apropiado, ya que si por ejemplo es un virus,
no le vamos a dar un antibitico al paciente,
ya que el antibitico se da cuando es
bacteria, pero no cualquier antibitico, va a
depender si es un gram- , gram +, de que sea
una microbacteria, y dentro de los gram+
cul gram +?, y si es gram - cul gram-?
Por lo tanto si es virus le vamos a dar un
antiviral, si es que hay algn antiviral para
ese virus, sino vamos a tratar simplemente
los sntomas.

Adems de un tratamiento apropiado, hay
que hacer estudios epidemiolgicos, que
quiere decir, determinar en un pas o
regin determinada el nmero de casos
por ejemplo que se dan al ao de
meningitis por cierta bacteria, o de
neumona por cierta bacteria. Porque eso

permite adems tomar medidas de salud

pblica, como por ejemplo evitar los brotes
en invierno y tomar las medidas de
precaucin, decidir cuales vacunas
deberan entrar en el programa de
vacunacin nacional.
Por ejemplo hoy en da estamos hablando
de la neisseria meningitidis, el ao pasado
se tom la medida de vacunar a todos los
nios desde los dos aos por el brote
epidmico que hubo desde el ao pasado
con esa bacteria.
Por tanto es sumamente importante no
solo dar un tratamiento en el momento al
paciente, sino que adems evaluar la
incidencia que tiene esta bacteria en los
pacientes durante un periodo de tiempo
determinado.

Dentro de las etapas siguientes, ya que
dijimos que la primera etapa era mirar al
microscopio y saber clasificar a la bacteria
segn estos tres criterios que tenemos:
- tincin de gram.
- morfologa
- agrupacin.

Ahora tenemos que cultivarla, eso quiere
decir tomar la muestra y colocarla en un
medio de cultivo apropiado, en un medio
que tiene nutrientes para que la bacteria se
reproduzca in vitro. Se multiplique y as
poder estudiar en mayor detalle las
caractersticas de esta bacteria, esto es lo
que se llama la siembra y el aislamiento,
sembrar quiere decir, tomar la muestra del
paciente colocarla en este medio de cultivo.
17

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

El medio de cultivo como vemos ac se

puede
manejar en tubos de ensayo, o en
placas de Petri y estos medios pueden ser
lquidos, como en el tubito y se llama un
caldo, el que tiene agua y fuente de
nitrgeno y carbono. En contraste vemos el
medio slido. Para hacer que sea slido a
este mismo caldo le agregamos un
polmero que se llama agar-agar, el que se
obtiene de algas marinas y es muy eficiente
para solidificar los medios de cultivo,
queda con la consistencia de una jalea, lo
podemos en poner en placa o en tubo y el
tercero que se muestra , que se ve un poco
ms turbio que el medio liquido es un
media que se llama semislido , que
tambin tiene agar-agar, pero que lo tiene
en la mitad de la concentracin, de manera
que queda como una jalea ms blandita

Usamos el medio lquido solo para cuando
queremos aumentar la biomasa de
bacterias, es decir, pasar de una o dos
bacterias a millones y as poder

estudiarlas. En el medio slido, lo que se

quiere lograr, sobre todo cuando la
tenemos en placa, es que la bacteria se
organice
en
colonias,
algo sumamente importante, ya que la
formacin de colonias, que solo ocurre en
medio solido, permite estudiar algunas
caractersticas tpicas de las bacterias de
una manera ms sencilla, ya que lo
hacemos a simple vista, vemos
caractersticas macroscpicas, ya que una
colonia est compuesta por millones
bacterias y no requerimos del microscopio.
Cuando pusimos la muestra, pusimos solo
una bacteria, esta por fisin binaria se
empieza a dividir sucesivamente de
manera exponencial hasta que se forma
una colonia.

La colonia se ve distinta segn el tipo de
bacteria que es, tienen aspectos
macroscpicos diferentes. Y eso tambin
constituye una de las etapas del
diagnstico microbiolgico.
Las personas con la experiencia, con tan
solo ver la colonia pueden saber de qu
bacteria se trata, incluso hay personas que
pueden reconocer el olor y lo distinta que
pueden ser unas de otras.
La placa no se tie, pero a veces tienen un
color distintivo dependiendo de los
reactivos que se agregan al medio de
cultivo, porque vamos a ver que hay
distintos tipos de medios de cultivo, en
este caso; tenemos un medio que se ve
amarillento, porque es un medio bsico,
vamos a ver el color de la colonia segn si
18

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

la bacteria tiene algn color o no , pero hay

otros
medios que son de color, por ejemplo
hay uno que es rojo y que se llama agar-
sangre, al que le agregamos sangre por la
utilidad que tiene. Porque dentro de las
bacterias patgenas, una caracterstica
bien importante es lo que se llama la
hemolisis.

Colonias:
Agrupacin
bacteriana
producida por la divisin sucesiva de una
bacteria original. La colonia se observa a
simple vista.

Siembra y aislamiento:
Aislamiento: vamos a tener colonias
aisladas, para poder determinar sus
caractersticas.

Observacin Microscpica: Ac se toma

una colonia de bacterias o puede ser
menos de una colonia, despus se tie y se
pone en un portaobjeto y podemos ver la
bacteria en el microscopio, en la imagen
cada
puntito
es
una
bacteria.

Observacin Macroscpica: Se describen

las caractersticas de esa colonia

Bacterias teidas con Tincin Gram. Se

observan microscpicamente.

Algunas bacterias de staphylococcus
pueden hacer hemolisis como la
staphylococcus aureus.


19

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Morfologa de colonias:

ir bien escritos los nombres. Tiene

mucha importancia seguir las reglas
internacionales de nomenclatura para
nombrar seres vivos. Es vlido para todos
los microorganismos (bacterias, virus,
hongos, los parsitos, etc..). Gnero con
mayscula, especie con minscula y todo el
nombre cursiva y en latn.
Para clasificar y nombrar a las bacterias
segn su taxonoma, se usan dos
indicadores. Se estudia el fenotipo de las
bacterias y tambin el genotipo cuando es
necesario. Pero se comienza siempre por el
fenotipo. Es lo ms prctico, rpido y
barato. En todos los hospitales hay un
laboratorio de microbiologa que contiene
como mnimo todos los elementos
necesarios para hacer taxonoma
convencional, que significa poder estudiar
el fenotipo de las bacterias.

Taxonoma bacteriana:
- CLASIFICACIN: Ordenamiento de los
microorganismos en grupos (taxa) en base
a semejanzas o interrelaciones
- IDENTIFICACIN: Uso prctico de un
esquema de clasificacin en base a
distintas propiedades del M.O.
- NOMENCLATURA: Nombrar un
microorganismo segn sus caractersticas
siguiendo las reglas internacionales.
(ATCC)

Escritura de nombres de bacterias en
cursiva. Importante en el caso de
publicaciones e informes. Deben siempre

Algunas caractersticas fenotpicas son la

morfologa, la agrupacin, la tincin de
Gram, si tiene capsula o no, si tiene
esporas, si la sembramos en un medio de
cultivo slido y observamos cmo es la
colonia,
tambin
corresponde
a
caractersticas fenotpicas. Pero existen
casos que con la observacin fenotpica, no
es suficiente para establecer la especie de
la bacteria y tambin casos que se requiere
llegar a un nivel ms especfico que la
especie y que significa establecer el
serotipo, o el serovar de la bacteria. Y que
corresponde a revisar el genotipo de la
bacteria y detectar pequeas diferencias
en genes de estas bacterias. Para esto se
utilizan herramientas biomoleculares.
Tales como un PCR para aumentar la
20

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

cantidad de algn gen en especfico o hacer
un
Southern Blot para buscar alguna

secuencia especifica.
En el anlisis fenotpico, adems de las
pruebas que ya hemos visto, se hacen otros
tipo de pruebas, llamadas Pruebas
Bioqumicas. Y estas consisten en analizar
el producto final de alguna va metablica
o el producto intermediario. Y esto se hace
porque dependiendo de las enzimas que
tenga la bacteria, tendr un genotipo
determinado, y esto nos permitir
establecer con mayor exactitud y
especificidad cual es la bacteria, para decir
que gnero es, que especie, y ms all
todava, que serovar, que serotipo o que
cepa es.
Por otro lado, existe la Filogenia, que
estudia solamente el genotipo. La filogenia
busca establecer relaciones evolutivas
entre microorganismos y varios tipos de
organismos. Se estudian las secuencias de
genes que se conserven en todos los
organismos que corresponden a los genes
de los RNA Ribosomales.
La filogenia clasifica desde lo ms amplio a
lo ms especfico, y el primer nivel
corresponde al Sper reino o Dominio
bacteria, que luego se divide en 3 Phylum:
Cianobacteria,
Proteobacterias
y
Actinobacteria.
Se
estudiarn
en
Microbiologa las Proteobacterias ya que
este Phylum contiene todo el grupo de
bacterias patgenas para el ser humano.
Luego del Phylum viene la Clase, es decir,
dentro de las proteobacterias existen
distintas Clases, y luego de esta vienen

varios rdenes, es decir, dentro de una

clase hay distintos rdenes.
Despus del filum viene la clase, es decir
que dentro de las proteobacterias
tendremos distintas clases de bacterias,
como por ejemplo la clase gama
proteobacteria. Dentro de la clase de
bacterias tenemos varios rdenes de
bacterias, como el orden enterobacterial.
Entero corresponde a todas las bacterias
que pasan por el intestino del ser humanos
y de otros animales, ya sea las que viven en
el intestino o las que pasan su ciclo
infectivo a travs de l.
Tenemos luego de esto, la familia. Una de
las familias ms abundantes, conocidas y
de mayor importancia clnica, es la familia
enterobacteriaceae. Al hablar de familias
siempre podremos renocerlas por el sufijo
por el cual termina ceae, debido a que
todas las familias se nombran con esa
terminacin.
Las clasificaciones siguientes desde familia
hacia abajo, son las que se utilizan en el
lenguaje clnico habitual. Las categoras
anteriores se utilizan para agrupaciones
evolutivas ms que para la interaccin
normal de los mdicos.
Al seguir con las clasificaciones, dentro de
las familias encontramos los gneros. Por
ejemplo las bacterias mencionadas con
anterioridad que pasan por el intestino,
slo encontraremos bacilos Gram +, los
cuales pasan por el intestino del ser
humano.

21

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Dentro de aquella familia, existen 10
gneros
diferentes, los cuales son los ms

comunes
en
enfermedades
gastrointestinales e infecciones urinarias.
Dentro de los gneros, cada uno tiene
distintas especies, un ejemplo de especia
de la enterobacteriaceae, es la salmonella.
Esta agrupa enfermedades conocidas como
salmonelosis, que por lo general son
gastroenteritis. Por esto es que las
personas se auto limitan, ya que presentan
vmitos, diarrea, malestar, etc. Aun as, es
poco comn que acudan a la consulta
mdica.
Estas bacterias usualmente provienen de
alimentos, ya que tambin tienen su origen
en el intestino de otro animal. Por ejemplo
tenemos la salmonella enteritidis, es
aquella que est en los huevos. Es por esto
que muchas veces no es recomendable
comer mayonesa casera o cosas que
contengan el huevo crudo, porque
comenzamos a presentar sntomas como la
diarrea.

Dependiendo del gnero de bacteria

podemos encontrar determinado nmero
de especies. Por ejemplo el gnero
salmonella posee 2 especies, una de ella es
la entrica. Por esto podemos ir
abreviando al describir la bacteria, ya que
quedara como S (salmonella) entrica, es
decir, S.entrica. stas son todas aquellas
que infectan el intestino del ser humano.
En algunas ocasiones slo basta con llegar
a la especie para una identificacin
satisfactoria, de que se est produciendo
en el paciente. Pero en otras ocasiones se
requiere entrar en una categora ms
especfica que es la de serovar o serotipo.
La diferencia entre un serovar y otro es un
pequeo porcentaje de su genoma. Aun as
podemos encontrar serovares con una
similitud de 99.9% de su genoma. Son
similares, aunque ese 0.01% de diferencia
de genoma, es el que marca la diferencia de
patogenicidad de la bacteria.

Una familia como por ejemplo la

enterobacteriaceae que incluye a todos
aquellos Gram negativos que pasan por el
intestino, ya sea para quedarse a vivir ah o
slo temporalmente por su ciclo infectivo.
Otro de los gneros dentro de las
enterobacteriaceae
que
podemos
encontrar es el de la escherichia, donde la
ms conocida es la escherichia coli, la cual
vive en nuestro intestino a diferencia de la
salmonella que n slo pasa por su ciclo
infeccioso.

22

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

Un ejemplo de esto en la Salmonella
entrica
senovar tifi, puede diferenciarse

en un 0.01% de la S.entrica serovar
enteritidis. Esta ltima se caracteriza por
generar una inflamacin en las clulas
epiteliales del intestino.
En cambio la tifi tambin ingresa por lo
alimentos e infecta los epitelios, pero pasa
a la sangre del individuo, circulando por
ella y atacando a los monocitos, lo que
progresivamente va a ir generando una
inflamacin del vaso, del hgado, etc.
Generando una serie de complicaciones
que van a requerir que el paciente sea
hospitalizado.
Por lo que podemos apreciar claramente
los cuadros infecciosos diferentes de cada
bacteria con tan slo una pequea
diferencia de genoma. Cuando esto ocurre
es necesario llegar a la identificacin del
serovar.

colonia, el uso de sustratos como la

tolerancia al oxgeno a las vas metablicas
que contenga una bacteria.
Para poder llegar a una clasificacin
satisfactoria de una bacteria, se hace un
anlisis dicotmico, un anlisis a travs de
caminos de clasificacin, el resultado
final correspondera a un anlisis exacto de
la bacteria, segn su naturaleza de
membrana, forma, origen de su energa,
etc. As
Un anlisis dicotmico, debe hacerse
independiente de la sospecha de infeccin,
se debe seguir un protocolo para saber a
ciencia a cierta el tipo de microorganismo
que infecta al paciente.
En este caso, se observa la clasificacin
dicotmica de una bacteria, se ocupan
criterios segn el anlisis macroscpico,

En otras ocasiones tambin es

necesario no slo el estudio del
fenotipo, sino que tambin el del
genotipo, para identificar algn gen
en particular.
Para poder ordenar todas las
categoras de bacterias, siempre se
har de lo ms general a lo particular
hasta llegar a la especie, serovar o
cepa que en algunas ocasiones
tambin se denomina.
La taxonoma convencional utiliza
todas las caractersticas fenotpicas
como la morfologa donde se ve si
tiene o no cpsula por ejemplo, como es la

microscpico y bioqumico de la bacteria.

23

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

En este caso estudiado, se observan
pruebas
de fermentacin, para identificar

posibles vas energticas aparte de la va
de la glucosa. Se van eliminando opciones
dentro de la raz que se form, hasta
llegar a un resultado positivo. En el
ejemplo, se observa un metabolismo
anaerbico facultativo, que termina con la
produccin de indol como producto
metablico. Debido a esto se llega a una
hiptesis final sobre la identidad de esta
bacteria (Escherichia Coli).
NOTA: Para la aplicacin de un anlisis de
dicotoma, todos los resultados deben
estar tabulados, para poder compararlos
con un punto en comn, y as discernir
entre una bacteria y otra.
En el caso de E. Coli, se observan distintos
serotipos, para estos casos, se realiza una
subtipificacin. Se emplean 2 tipos de
pruebas:
a) Anlisis
serolgicos:
Se
estudian antgenos de la
bacteria estudiada en su
superficie.
b) Anlisis gentico molecular:
Amplificacin de un gen,
secuenciacin de un gen, etc.
Criterios moleculares y subtipificacin
Para llegar con mayor exactitud al
reconocimiento del patgeno. Se deben
hacer estudios moleculares en casos como:
a) Reclasificacin de especies.
b) Muchas especies nuevas.
c) Anlisis de especies que no han
podido ser cultivadas.

d) Importancia
epidemiolgica:
Brotes epidmicos.
e) Enfermedades infecciosas de
declaracin obligada.
Un ejemplo de criterios moleculares y
pruebas para la identificacin de un
microorganismo, es el % G-C. Esto debido a
que el %G-C est secuenciado, y es
caracterstico de cada especie que se haya
estudiado.
Otro estudio que se realiza, es la
identificacin de genes de RNA
ribosomales (subunidad menor 16S), con
el fin de la reclasificacin ms exactas de
algunas especies.
NOTA: Para el estudio de un
microorganismo, lo PRIMERO que debe
hacerse, es la vista a travs de un
microscopio, para tratar de identificar el
tipo de bacteria, virus, etc.
Porcentaje Guanina- Citosina
Este porcentaje es una caracterstico de
cada especie, y puede ser utilizado para
clasificar las bacterias, pero solo en sepas
cuyo genoma este secuenciado.
Genes de RNA Ribosomal
Otra secuencia que puede ser objeto de
estudio con objeto de clasificar una especie
bacteriana es la del gen de la sub- unidad
menor de los ribosomas bacterianos (16s).
Resumen de un estudio microbiolgico
Se comienza con una muestra biolgica de
un paciente, del cual se sospecha algn
brote infeccioso. Para corroborar la
24

2014

[MICROBIOLOGA] taxonoma bacteriana

bacteria que est generando la enfermedad
nosotros
seguimos los siguientes pasos:

1. Visualizamos en una primera
instancia
la
muestra
al
microscopio.
2. Luego con la muestra buscamos
obtener un cultivo puro, esto
quiere decir que vamos a sembrar
la muestra en una placa de cultivo
de Petri ( cuando se habla de puro
quiere, decir que todas las colonias
que se visualicen deben ser
iguales).
3. Cuando existe ms de un tipo de
colonia se debe resembrar cada
una de las colonias para obtener as
solo cultivos puros.
4. Obtenido el cultivo puro se va a
estudiar la morfologa de la
bacteria y se proceder a realizar la
tincin de Gram que nos va a
permitir visualizar si es Gram
positivo o negativo o incluso si
queda fuera de esta clasificacin.
5. Luego se va a ver la agrupacin de
la bacteria, caractersticas de
crecimiento y propiedades tanto
bioqumicas como antignicas.

Dato 1: Infecciones polimicrobianas, son

aquellas infecciones producidas por ms
de una especie bacteriana.

Dato 2: El tener colonias distintas no

significa que existan dos tipos de especies
bacterianas en la muestra sino que puede
haber un agente externo por mal manejo
de la muestra.

25