UNIVERSIDAD CENTRAL DEL

ECUADOR
Direccin General de Investigacin y Posgrado
-Centro de BiologaEstudiantes:
Eduardo Daz Lega
Celular
Melanie Loyola
Samanta Ramos
Maria Elisa Vaca

Asignatura:

Carrera: Qumica de Alimentos Ciclo:

mayo de 2014

1er Sem.

1.

Biologa

Fecha:

09

de

Tema: Cultivo

celular
bacteriano,
sus
procesos
laboratoriales de campo con fines prcticos y educativos en
la qumica de alimentos.

Objeto de investigacin: Cultivo celular bacteriano

Variable dependiente:
procesos laboratoriales y de
campo
1.3.
Variable independiente: fines prcticos y educativos en la
qumica de alimentos
1.1.
1.2.

2.

Problema

Deficiencia en el conocimiento del cultivo celular bacteriano, sus

procesos laboratoriales y de campo, con fines prcticos y educativos
en la qumica de alimentos, en relacin con el
crecimiento
microbiano, cultivo de microorganismos, medios de cultivo, sus
causas, desarrollo y consecuencias.
3.

Objetivo general

Conocer el concepto y la tcnica de un cultivo celular bacteriano, sus

procesos laboratoriales y de campo, con fines prcticos y
educativos, mediante el dominio de teoras y metodologas
biolgicas, con el propsito de integrarlos a la formacin de
profesionales qumicos de alimentos.
4.

Objetivos especficos
1

Recopilar teoras sobre la metodologa y tcnica de cultivo

celular bacteriano, en relacin con la biologa celular-molecular, sus
procesos laboratoriales y de campo, con fines orientadores para el
entendimiento,
aplicaciones
y contribucin
al
aprendizaje
significativo en la qumica de alimentos.

4.1.

Aplicar las tcnicas de observacin y experimentacin como

estrategias metodolgicas investigativas cuali-cuantitativas en el
aprendizaje de procesos biolgicos celulares como lo es el cultivo
celular microbiano.

4.2.

Elaborar el informe correspondiente segn normas y

lineamientos acadmicos - didcticos, presentando la solucin
parcial al problema planteado, en relacin con la qumica de
alimentos.

4.3.

5.

Justificacin

El tema planteado es factible, necesario y actual; es parte de la

programacin curricular bsica por competencias de la asignatura
de biologa celular-molecular, cuyos objetivos especficos implican
la presentacin de antecedentes sucedidos, descubiertos e
innovados, marco terico, tcnicas observacionales-experimentales
y una propuesta alternativa de solucin a la problemtica planteada,
cuyos beneficiarios directos somos estudiantes de la carrera
profesional qumica de alimentos.
6.

Marco terico

6.1.

Cultivo celular bacteriano

Actualmente se entiende por cultivo celular bacteriano al conjunto

de tcnicas que permiten el mantenimiento de las clulas 'in vitro',
consiste en mantener las condiciones fsicas, qumicas y nutritivas
adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada,
manteniendo al mximo sus propiedades fisiolgicas, bioqumicas y
genticas. (MONTOYA, 2008)
El medio de cultivo
El cultivo celular se realiza en medios artificiales preparados
mediante la mezcla de componentes purificados o de soluciones
orgnicas complejas, pudiendo ser lquidos o slidos (si se aade
algn agente solidificante que no sea consumible por los
microorganismos normalmente agar), en el interior de instrumentos
2

que mantienen las condiciones fsico-qumicas adecuadas y sobre

soportes o recipientes que los contienen y aslan del medio exterior.
(GAMAZO, 2010)
Por ello consideraremos que el medio de cultivo estar formado por
tres elementos:

6.2.

La naturaleza del sustrato o fase en que crecen las clulas.

Las condiciones fsico-qumicas y fisiolgicas del medio.
Las condiciones de incubacin, especialmente la humedad y
la temperatura.

Procesos laboratoriales y de campo

-Los procesos laboratoriales en el laboratorio de biologa, nos

permiten dar a conocer al estudiante, medidas de seguridad, as
como las precauciones que deben tenerse en el laboratorio
1.- El estudiante conocer las reglas del laboratorio
2.- Reconocer el uso y manejo del material de cristalera
3.- Conocer el manejo adecuado de sustancias usadas en el
laboratorio
4.- Conocer el uso y utilidad de cada una de las partes del
microscopio
-Los procesos de campo son experiencias que docentes y alumnos
pueden utilizar como estrategia didctica para desarrollar destrezas
y aumentar la motivacin al abordar el tema ciencias.
A partir del trabajo de campo se puede evidenciar la importancia de
ste tipo de actividades, para el desarrollo de actitudes y destrezas,
tales como la organizacin de tareas, colaboracin en grupo,
redaccin de informes cientficos, para la observacin y anlisis del
ambiente en estudio. (GALBANEZ, 2009)

6.3.

Fines prcticos y educativos en qumica de alimentos

La biologa es una rama de las ciencias naturales que tiene como

objeto de estudio a los seres vivos y, ms especficamente, su
origen, su evolucin y sus propiedades: gnesis, nutricin,
morfognesis, reproduccin, patogenia, etc.
3

Se ocupa tanto de la descripcin de las caractersticas y los

comportamientos de los organismos individuales como de las
especies en su conjunto, as como de la reproduccin de los seres
vivos y de las interacciones entre ellos y el entorno.
De este modo, trata de estudiar la estructura y la dinmica
funcional comunes a todos los seres vivos, con el fin de establecer
las leyes generales que rigen la vida orgnica y los principios
explicativos fundamentales de sta. (DERGAL, 2011)

7. Metodologa
7.1.

Tipo y diseo de investigacin

Este tema es
biblionetgrfica
7.2.

una

investigacin

analtica,

experimental

Hiptesis

La investigacin biolgica celular, sus procesos laboratoriales y de

campo en el estudio, diseo y elaboracin del cultivo celular
bacteriano, con fines prcticos y educativos en la qumica de
alimentos.
7.3.

Unidad de estudio

Esta investigacin se la realiz en el laboratorio 03 de biologa

celular del Centro de Biologa de la Direccin General de
Investigacin y Posgrado de la Universidad Central del Ecuador.
7.4.

Poblacin y muestra

Poblacin: suelo y agua de la columna y superficie de la placa de

agar
Muestra:
Especies microbianas encontradas en el cultivo.
7.5.

Materiales, equipos y reactivos

4

Materiales
Caja Petri
Portaobjetos
Cubreobjetos
Lmparas
incandescentes (6075 Watt)
Marcador
Azar de impulacion
Hisopo
Tubo de ensayo
Gotero

7.6.

Reactivos
Caldo de la columna de
Winogradsky

Agua de chochos
Muestras orgnicas
corporales
- Agar
-

Equipos
Incubadora
Estereomicroscopi
o
Microscopio

Violeta de gerciana
Lugol
Decolorante(alcohol+acet
ona)
Safranina
Aceite de inmersin

Procedimiento
Cultivo celular bacteriano (AGUA DE CHOCHOS)

7.6.1. Esterilizamos en azar de impulacin pasndolo por el mechero

encendido

7.6.2. Lo sumergimos en el agua de chocos para tomar una muestra

7.6.3. Frotamos la superficie de la placa agar con la muestra tomada,

realizando movimientos verticales y horizontales sobre ella.

7.6.4. Tapamos el cultivo y llevamos a la incubadora (36C) para el

desarrollo de bacterias.

Cultivo celular bacteriano (CALDO DE LA COLUMNA DE

WINOGRADSKY)

7.6.5. Con ayuda de un gotero tomamos una muestra de la columna

de winogradsky

7.6.6. Colocamos unas gotas dentro del tubo de ensayo(hacer el

procedimiento cerda del mechero encendido)

7.6.7. Cubrimos en tubo, y llevamos a la incubadora (36C) para el

desarrollo de bacterias.

Cultivo celular bacteriano (MUESTRAS ORGNICAS

CORPORALES)

7.6.8. Utilizando un hisopo tomamos muestras corporales de un

individuo, frotando sobre la superficie (piel, boca etc...)

7.6.9. Frotamos el hisopo sobre la superficie

de la placa agar,
realizando movimientos verticales y horizontales sobre ella
(hacer el procedimiento cerda del mechero encendido).
7

Cubrimos el cultivo y llevamos a la incubadora (36C)

para el desarrollo de bacterias.

7.6.10.

Observacin de comunidades microbianas

Trascurridos
3 das, retiramos los cultivos de la
incubadora
7.6.12.
Mediante
el frotis y utilizando colacin Gram
procedemos a la identificacin de seres vivos bacterianos
7.6.11.

Con ayuda del azar esterilizado tomamos una muestra de

cualquiera de los tres cultivos y lo colocamos en un porta
objetos

Realizar un frotis con ayuda de una lmpara de alcohol

 Aadimos
violeta de genciana durante 10 segundos y
enjuagamos.
Agregamos lugol durante por 10 segundos y enjuagamos.
Adicionamos decolorante por 5 segundos y enjuagamos.
Vertimos safranina por 10 segundos y enjuagamos

Secamos la muestra con ayuda de la lmpara de alcohol

Agregamos una gota de aceite de inmersin a la muestra
Colocar al microscopio y observamos con el lente (100x)
Identificamos los microorganismos que se desarrollaron
dentro de la muestra.

7.6.13.

7.7.

Resultados e interpretacin

El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza,

en la mayora de los casos, mediante la produccin de colonias
aisladas en cultivos slidos (utilizando agar).
El crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran
nmero de ellas a partir de una nica clula inicial tomada de las
muestras antes mencionadas, tras un periodo de incubacin en las
condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia
observable a simple vista y formada por individuos iguales (un clon
bacteriano).
Cuando una clula aislada e inmvil comienza a crecer sobre un
substrato slido, el resultado del crecimiento al cabo del tiempo es
una colonia.

Colonias bacterianas

Existen procedimientos de enriquecimiento del nmero de bacterias

de ambientes naturales para facilitar su aislamiento. Uno de ellos es
la Columna de Winogradski que crea un microcosmos para
enriquecer el nmero de ciertos tipos de microorganismos
presentes en ambientes naturales
con objeto de facilitar su
aislamiento

Colonias bacterianas observadas

en el laboratorio 100X

8. Conclusiones y discusin
8.1.
En
esta investigacin analtica y
experimental hemos
comprobado cmo los distintos cultivos bacterianos se desarrollan
de acuerdo con sus tolerancias medioambientales, condiciones
fsicas, qumicas y nutritivas, contribuyendo al aprendizaje
significativo en la carrera de qumica de alimentos.
8.2.
Al aplicar las tcnicas de observacin y experimentacin, se
identific una gran variedad de colonias bacterianas aisladas en
cultivos slidos, gracias a la utilizacin de agar que favoreci la
proliferacin de las bacterias, que tuvieron lugar dentro de una
incubadora donde se desarroll el crecimiento del cultivo celular
microbiano.
10

8.3.
Se elabor el informe tomando en cuenta las normas y
lineamientos acadmicos-didcticos, compensando la deficiencia del
conocimiento de la
investigacin en cuanto al cultivo celular
microbiano, sus procesos laboratoriales y de campo, centrado a la
qumica de alimentos (crecimiento, medios de cultivo, factores
fsicos y qumicos que influyen en la proliferacin bacteriana).

9. Autoevaluacin
9.1.
La temperatura optima que debe tener la incubadora para el
desarrollo de bacterias es de?
a. 36C
b. 8C
c. 60C
9.2.

La tincin Gram positiva se distingue por el color:

a. Rojo
b. Morado
9.3.

La tincin Gram negativa se distingue por el color:

a. Rojo
b. Morado

9.4.

El agar es:

a. Medio de cultivo liquido

b. Una gelatina obtenida de la pared celular de varias especies
de alga muy usada en el cultivo celular.
c.
Un caldo para observa crecimiento celular.
9.5.
Para observar las clulas cultivadas en el microscopio con el
lente de 100x se debe:
a. Realizar un frotis y aplicar la tincin de Gram
b. Aadir nicamente aceite de inmersin a la muestra
c. Fijar la muestra al porta objetos
9.6.

El Cultivo Celular es:

11

a. Movimientos intracelulares de sustancias y seales asociadas

a los diferentes procesos fisiolgicos.
b. Es el mecanismo mediante el que clulas, procariotas o
eucariotas, pueden cultivarse en condiciones controladas.
c. Estudio de las condiciones ambientales responsables del
mantenimiento de la funcionalidad celular
9.7.
Los materiales ms usados para realizar cultivos bacterianos
con fines educativos son:
a. Caja Petri
b.
Matraces y buretas
c.
Pipetas y Termmetros
9.8.

Los medios de cultivo celular pueden ser:

a. En un medio seco (agar)

b. En incubadora
c. En un medio solido (agar) o medio liquido (caldo)
9.9. Para evitar contaminar el cultivo se debe manipular:
a. Cerca de una fuentes de calor como un mechero
b. Lejos de una fuentes de calor como un mechero
c. Con guantes de calor
9.10.
Cuando una clula bacteriana aislada e inmvil comienza a
crecer sobre un substrato slido, el resultado es una :
a. Colonia Bacteriana
b. Poblacin Celular
c. Regin celular bacteriana

10.

Biblionetgrafa

DERGAL, S. (2011). Quimica de Alimentos. Bumaco: Owen.

GALBANEZ, D. (2009). Investigacin Cientfica. Mexico: Antos.
GAMAZO, C. (2010). Manual practico de Microbiologa. Barcelona:
Mazzon.
MONTOYA, H. (2008). Microbiologia Basica Aplicada. Colombia:
Antioquia.

12

 http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/Cultivos
%20Celulares/Aplica_Cultivos_Celulares_2007.pdf
http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.%20Cultivo
%20de%20microorganismos.pdf
http://bases.bireme.br/cgibin/wxislind.exe/iah/online/?
IsisScript=iah/iah.xis&src=
e&base=LILACS&lang=p&nextAction=lnk&exprSearch=61292&inde
xSearch=ID
http://www.scai.uma.es/servicios/ciencias_vida/cce/cce.html

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