UNIVERSIDAD SANTO TOMS

SEDE OSORNO

INFORME
EXTRACCION DE ADN VEGETAL.

MARIA PAZ FERNANDA VEGA BENZ

PROFESOR: ROBERTO SAAVEDRA
CARRERA DE
OSORNO, CHILE
30 de octubre de 2015

INTRODUCCION.

La extraccin de ADN requiere hacer varias series de etapas bsicas. En primer lugar
tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al
ncleo de la clula. Despus debe romperse igual la membrana nuclear para dejar libre
el ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan disminuirlo y para
aislarlo hay que hacer que se precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero
cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol
y el agua. Adems de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros
componentes celulares, los cuales son dejados en la solucin acuosa. La sal evita la
unin de las protenas al ADN.

MATERIAL.

Espinaca.
Agua Destilada.
Sal.
Detergente (Liquido).
Jugo de Pia.
Alcohol.
Licuadora.
Colador.
Vaso Precipitado.
Tubo de Ensayo (2).
Microscopio ptico.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
Aceite de Inmersin.
Azul de Metileno.

PROCEDIMIENTO.
1. Extraccin (Espinaca + H2O + Sal + Vaso Precipitado)

2. Agregar Detergente

3. Reposar 10 minutos (Rotular tubos).

4. Vaciar en Tubos de Ensayo (1/3 del Tubo).
5. Agregar Jugo de Pia (Poco).
6. Agitar Suavemente.
7. Agregar Alcohol (1/3).

8. Reposar 10 minutos.
9. Observar Hilos Blancos.

10. Extraer Hilos y colocar en Portaobjetos.

11. Teir con Azul de Metileno.
12. Observar en Microscopio 100x Ms Aceite de Inmersin.

DISCUSION.

La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas: En primer lugar tiene que
romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la
clula. A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el
ADN. Los jabones utilizados como lavavajillas emulsionan los lpidos de las
membranas celulares y las rompen.
La sal evita la unin de las protenas al ADN.
Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua,
pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el
alcohol y el agua. Adems de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros
componentes celulares, los cuales son dejados en la solucin acuosa.
El producto filamentoso obtenido de la extraccin no es ADN puro, ya que,
entremezclado con l, hay fragmentos de ARN. Una extraccin profesional se realiza
aadiendo enzimas que fragmentan las molculas de ARN y que impiden que se unan al
ADN.
En este caso el Detergente cumple la funcin de deshacer las membranas para dejar salir
en ADN y la sal (NaCI) cumple la funcin de evitar la unin de las protenas al ADN.
Las hojas de la espinaca contienen clulas que a su vez contienen ncleos con ADN. Al
triturar las hojas, las rompemos y separamos las clulas que las forman. Pero el ADN
sigue protegido por las membranas y es necesario romperlas para poder extraerlo, para

ello utilizamos el detergente, que se une a la grasa y protenas que forman estas
membranas y las rompe y separa, entonces, el DNA se libera del ncleo y se disuelve en
el agua que hemos utilizado para triturar las hojas. El siguiente paso es liberar el DNA
de las protenas que lo rodean y lo protegen dentro del ncleo, y para eso podemos
utilizar zumo de pia! (el zumo de pia contiene un enzima llamado betaina que rompe
dichas protenas). Una vez liberado el ADN y disuelto en agua, necesitaremos
precipitarlo (hacerlo no soluble) para poder verlo a simple vista y para ello utilizamos
alcohol. Veremos aparecer pequeos filamentos que son el ADN!! No es increble que
toda la informacin que te hacen nico y diferente est contenida en unas molculas tan
pequeas?

CONCLUSION.
Al realizar el procedimiento adecuadamente, resulta que las fibrillas de ADN
comenzaron a salir, de un color blanco precipitado por sobre el alcohol (mezcla
Heterognea). Con un alambre doblas y obtenemos y sacamos del tubo de ensayo el
ADN. Si quieres conservar el ADN puede dejarse secar sobre un papel de filtro.
En caso de que el ADN de la Muestra Vegetal no se pueda apreciar muy claramente.
Tenemos que agitar el tubo un poco para poderlo apreciarlo mejor.
Si se tiene problemas con el filtro, que no est bien hecho y que no filtra bien, por lo
tanto hay que hacer otro. Tambin puede haber complicaciones con la forma de poner el
alcohol de manera que cayera por las paredes del tubo de ensayo.
Con esto podemos saber cmo es el procedimiento del extracto del ADN, as como si
estructura de una forma fcil y sencilla.