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Ctedra Patologa Clnica y

Enfermedades Mdicas
Prof. Titular: MV Graciela Alicia Mira

GUIA ANALISIS CLINICOS I


Docentes del rea:
- Vet
- MV
- MV
- MV
- MV
- Vet
- Vet
- Vet
- Vet
- MV
- Vet
- MV
- Vet
- Dra
- Vet
- MV
- Vet
- MV
- Vet

Brandi, G
Esarte. M
Fidanza, M
Gabriele, C
Gonzalez, A
Gonzalez, S
Juarez, M
Ldola, V
Mntica, F
Maubecin, E
Micciullo, V
Mira, G
Nosach, N
Pereira, M
Perez, M
Pretti, R
Regonat, M
Vartabedian. A
Vesco, C

TOMA DE MUESTRAS
El laboratorio tiene fundamental importancia en la complementacin del examen del paciente
veterinario. Los parmetros clinicopatolgicos normales y anormales rinden informacin
objetiva en el proceso del diagnstico diferencial, supervisin del tratamiento y formulacin de
un pronstico. Las muestras recolectadas en forma adecuada son un paso fundamental para
lograr confiabilidad en los datos generados y focalizan su interpretacin.
A - SANGRE:
Los puntos a tener en cuenta para lograr una muestra ptima son:
- El paciente debe estar tranquilo y para ello debe brindarse un ambiente calmo, y con la
cantidad suficiente de personal para poder manejarlo sin excitarlo.
- Un ayuno de slidos de 12 horas, ya que si no se genera una coloracin anormal del plasma
o suero, llamado lipemia que entorpece las reacciones bioqumicas (ya que muchas de ellas se
basan en mtodos colorimtricos). Si a pesar de que el animal tenga las 12 horas de ayuno, el
suero sigue estando lipmico, deber considerarse que realice un ayuno mayor, y si a pesar de
esto persiste el problema, se deber tener en cuenta que esto puede ser causa de alguna
alteracin preexistente.
- Se deber contemplar la posibilidad de realizar sedacin (con las drogas adecuadas, recordar
que el uso de acepromacina al generar esplenocontraccin altera el hemograma) en caso que
el paciente no colabore, ya que el estrs puede alterar algunos valores (por la liberacin de
corticoides endgenos y epinefrina) sobre todo en el caso de los felinos. Ej: los esteroides
generan neutrofilia, eosinopenia, monocitosis, linfopenia, y aumentos en los valores de
glucemia. La liberacin de epinefrina genera linfocitosis.
-Deben prepararse con anterioridad los materiales que van a utilizarse y tener de ms por
cualquier imprevisto. Para hematologa los tubos pueden ser de vidrio o de plstico. Para las
pruebas de coagulacin se prefiere que sean de plstico ya que el vidrio siempre presenta
alguna rugosidad que facilita el inicio de la cascada de coagulacin al activar ciertos factores.
Las muestras destinadas a las pruebas bioqumicas, deben recogerse preferiblemente en tubos
de vidrio, ya que logran una mejor retraccin del coagulo, y as, una mayor cantidad de suero.
Otros materiales a utilizar son: jeringas ( 3 ml 5 ml), agujas (preferiblemente 25/8), algodn,
cinta adhesiva, alcohol, peladora u hoja de afeitar, lazo, guantes, gradilla, bozal (segn el
animal), anticoagulantes.
-La sangre est formada por clulas inmersas en un medio de transporte llamado plasma. Entre
los elementos celulares se encuentran: glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas. Dentro del
plasma: agua, protenas, electrolitos y otras sustancias.
Antes de tomar cualquier muestra debe considerarse que determinaciones se van a solicitar.
Para realizar un hemograma o pruebas de coagulacin se utilizar un anticoagulante que evite
la activacin de los factores. Si lo que se desea es realizar pruebas bioqumicas, se recoge la
sangre en un tubo preferentemente de vidrio sin anticoagulante. El suero es el liquido que se
separa de las muestra una vez formado y retrado el coagulo. El suero se diferencia del plasma
en que no contiene varios de los factores de coagulacin.

MUESTRA DE SANGRE
Sin anticoagulante

Con anticoagulante

Suero
Hemograma
Plasma
(pruebas de coagulaci
coagulacin)

Cmo se obtiene el plasma y suero? (Figura 1)


Figura 1:

Obtenci
Obtencin de suero y plasma
SUERO

PLASMA

Sangre CON
anticoagulante

Sangre SIN
anticoagulante

Homogeneizar suavemente la muestra

Dejar coagular
Centrifugar 10
10a 1500rpm

Centrifugar 10
10a 1500rpm

Suero

Plasma +
Prot. coagulacin

Elementos formes +
protenas coagulacin

Elementos formes

ANTICOAGULANTES MS UTILIZADOS:
1) EDTA: ETILENDIAMINA TETRAACETICO ACIDO:
*Uso: hematologa
*Modo de accin: forma sales insolubles de calcio.
*Concentracin ptima: 0,02 ml (20ul) anticoagulante cada ml de sangre.
*Ventajas:
-Preserva la morfologa clulas
-Conserva la muestra al impedir el crecimiento bacteriano.
-No modifica el volumen de sedimentacin de la sangre
-Evita la agregacin plaquetaria.
-Puede usarse para determinar urea y fibringeno.
*Desventajas:
-A una mayor concentracin ejerce una presin osmtica importante extrayendo agua de los
glbulos rojos y dando una disminucin del VCM.
-No puede usarse para determinar electrolitos (sodio, potasio) dado que este anticoagulante se
presenta como sal potsica sdica.
2) HEPARINA:
*Uso: anlisis de gases sanguneos, pH sanguneo, electrolitos.
*Modo de accin: Impide la formacin y activacin de la trombina.
*Concentracin optima: se carga la jeringa a utilizar para la extraccin con heparina, luego se
reintroduce el anticoagulante en el frasco ampolla quedando las paredes de la jeringa
lubricadas con la heparina.
*Ventajas:
-Es muy difcil que se produzca la hemlisis o que se altere la presin osmtica.
*Desventajas:
-Costo.
-La coagulacin de la sangre se retrasa, no se evita.
-Puede producir amontonamiento de los leucocitos, no est indicado para hacer frotis porque
interfiere con la tincin y reduce la coloracin de los mismos.
3) FLUORURO DE SODIO Y OXALATO DE POTASIO:
*Uso: determinacin de la glucemia.
*Modo de accin: inhibe las enzimas glucolticas que desdoblan la glucosa de la sangre. Acta
combinndose con el calcio formando un compuesto insoluble, pero adems es txico
enzimtico, por lo cual se lo usa para determinar la glucemia.
*Concentracin ptima: 1 gota de anticoagulante por cada ml de sangre.
4) CITRATO DE SODIO:
*Uso: pruebas de coagulacin
*Modo de accin: se combina con el calcio para formar una sal insoluble de citrato de calcio.
*Concentracin ptima: 2 gotas de anticoagulante por cada ml de sangre.
Tambin existen tubos comerciales que ya contienen anticoagulante y una marca que indica
que cantidad de sangre se debe colocar para que la proporcin sangre anticoagulante sea la
correcta.

ELECCIN DE LA VENA A UTILIZAR:


Las venas a utilizar son:
-Caninos: ceflica antibraquial, safena externa, yugular.
- Felinos: ceflica antibraquial, femoral, yugular.
Recordar que para la bsqueda de Haemobartonela (Figura 2), la muestra de sangre se debe
obtener a partir de los capilares del pabelln auricular y realizar un extendido directo sobre un
portaobjeto. Recordar que las Haemobartonelas tienden a concentrarse en sangre capilar y
debe evitarse su contacto con el anticoagulante porque el mismo tiende a hacer que las
mismas se desprendan de la membrana del eritrocito dificultando su identificacin
Figura 2:

-Precauciones en la extraccin de sangre:


*trauma durante la toma de muestra, principalmente si se emplea una jeringa ya que puede
generarse turbulencia al extraer la sangre y provocar hemlisis
*agitacin excesiva.
*accin de compuestos qumicos (cidos, lcalis alcohol).
*cambios en la presin osmtica.
*conservacin de la sangre a altas temperaturas, antes o durante el transporte al laboratorio.
*la muestra de sangre se debe transferir a los tubos tan rpido como sea posible para evitar la
coagulacin, desacoplando la aguja de la jeringa y expulsando el contenido suavemente.
*mantener la muestra refrigerada hasta su envo al laboratorio. Nunca congelarla
-Tcnica:
1) se posiciona al animal de tal forma que se pueda trabajar en forma segura (tanto para el
propietario, animal, como el personal) y cmodamente. Colocar bozal.
2) preparar la piel del animal, la cual debe estar limpia, seca y libre de pelos. Colocar un
antisptico local, de rutina se utiliza alcohol, el cual tambin ayuda a visualizar mejor la vena a
punzar.
3) en el caso que la vena utilizada sea la v. yugular (Figura 3) se extender el cuello, se
aplicar presin sobre la vena en la entrada del trax con el dedo pulgar y con la otra mano se
insertar la aguja (por lo general se la curva previamente para facilitar el acceso a la vena)
acoplada a la jeringa (un ayudante deber sostener firmemente la cabeza del animal para
evitar accidentes, mientras que otro ayudante sostendr las patas del animal). Esta tcnica
podr realizarse tanto con el animal en decbito esternal como en decbito lateral.
Figura 3:

Extraccin vena yugular

En el caso de que la extraccin vaya a realizarse de venas ubicadas en los miembros, se


posicionar el animal en decbito esternal o lateral (Figura 4), se colocar el lazo o se
comprimirr la vena, para lograr ingurgitar la vena, tomar firmemente el miembro, insertar la
aguja paralela a la vena, con el bisel hacia arriba en sentido opuesto al de la corriente
sangunea, atravesando piel, fascia, subcutneo, y pared de la vena de un solo golpe. La
extraccin se puede realizar con jeringa y aguja o solo con la aguja por tcnica de goteo.
Vaciar el contenido de la jeringa en los tubos (quitar la aguja antes).
Figura 4:

Vena femoral interna


felino

Vena ceflica
antibraquial
canino

4) una vez colocada la muestra en el tubo correspondiente, recordar homogeneizar las


muestras con anticoagulante para evitar que coagulen.
5) Nunca olvidar rotular cada muestra.
-Conservacin de la muestra: una vez que se ha obtenido la muestra, sta debe ser
conservada en forma adecuada, ya que una incorrecta conservacin alterar los valores
hematolgicos y bioqumicos.

Para hematologa: Lo ideal es que la muestra sea procesada lo antes posible, de no ser as
debe conservarse en la heladera (4 C) hasta el momento del procesamiento. Nunca debe
congelarse la muestra de sangre ya que esto producira la crenacin de los eritrocitos. Si se
confeccionaran frotis en el momento de la toma de muestra los mismos deben ser remitidos,
enfrentados de a 2 envueltos en papel y conservados a temperatura ambiente (Figura 5)
Figura 5:

Cuando existe la posibilidad de separar el suero de la muestra sta puede ser conservada a
4C en heladera por 4 das, en el congelador por 1 semana y a menos temperatura (-15C, 20C) por ms tiempo.
Recordar que antes de comenzar a procesar la muestra esta debe ser llevada a temperatura
ambiente.
B - ORINA:
1) Toma de muestra:
Lo ideal es recolectar la primera orina de la maana ya que es la que tiende a estar ms
concentrada, pero en medicina veterinaria esto en general no se cumple
La muestra puede recolectarse de las siguientes formas:
-Cistocentesis (Figura 6): El animal puede ubicarse en decbito esternal o en estacin. Se
realiza la correcta antisepsia de la zona y se realiza la puncin vesical (pudiendo hacerse en
forma ecoguiada no ) y se recolecta la orina. De esta forma se obtiene una muestra estril ,
siendo sta la forma ideal de obtener orina para cultivo . Puede a veces contener algo de
sangre proveniente de la lesin que genera la aguja sobre la pared de la vejiga. Para poder
realizarla, el paciente debe estar tranquilo y tener un volumen suficiente de orina en la vejiga.
Es el mtodo que evita la presencia de contaminantes y clulas del tracto urinario bajo.
Figura 6:

PUNCION VESICAL

Adaptado de Osborne y col

-Cateterizacin sondaje: se coloca una sonda y se obtiene la muestra. Si es recolectada en


forma adecuada tambin se la puede utilizar para cultivar ya que es muy baja la contaminacin
que puede sufrir. Se debe colocar la sonda adecuada al tamao del animal y evitar introducir
demasiada longitud de sonda por el riesgo de que esta se anude en el interior y no se pueda
extraer. Tiene como desventaja que al introducir la sonda se produce un gran arrastre de

clulas del tracto urinario bajo que nos puede llevar a errores en la lectura del sedimento. Las
tcnicas varan segn especie (perro o gato) y segn sexo (macho hembra)
a) Sondaje uretral en canino macho (Figura 7): El mismo puede realizarse con el paciente en
estacin o en decbito lateral. Con una mano debe exteriorizarse el pene fijando el prepucio a
nivel del hueso peneano. Utilizar sonda K33 para perros chicos y K30 o 31 para perros
medianos o grandes. El desplazamiento de la sonda debe realizarse con mucho cuidado para
evitar daar la mucosa lo cual puede contaminar la muestra con clulas y sangre que no
constituan parte de la composicin de la orina del paciente. Los puntos crticos para el pasaje
de la sonda son el hueso peneano y la flexura hacia dorsocraneal para llegar a la vejiga. Una
vez que la sonda est en vejiga empieza a fluir orina por la misma la cual ser recolectada con
una jeringa acoplada en el extremo de la sonda o directamente puede recogerse en un
recipiente limpio para su envo al laboratorio.
Figura 7:

Sonda K33:
Perros chicos medianos

Sonda K30 31:


Perros grandes

b) Sondaje uretral en canino hembra (Figura 8): Esta tcnica es ms complicada que en el caso
del macho, dado que el orificio uretral externo se encuentra en el piso de la vagina, por lo cual
se debe emplear un vaginoscopio y adecuada iluminacin para visualizar el orificio.
Generalmente se utiliza una sonda K33 a la cual se le inserta un vstago metlico en la punta
para dar cierta resistencia a la misma y poder introducir con facilidad la punta de la sonda. Una
vez introducida el extremo de la sonda en el orificio uretral se retira el vstago metlico y sigue
introducindose la sonda hasta que comienza a fluir orina. Esta maniobra puede realizarse con
la perra en estacin o en decbito lateral.
Figura 8:

Orificio uretral
externo

c- Sondaje uretral en felino macho (Figura 9): para realizarlo debe exteriorizarse el pene y
utilizar una sonda PC 40 o una Tom Cat (que sirve para dejar fijada a la piel en caso de fludt).
Siempre debe trabajarse con sumo cuidado sobre todo ante la sospecha de una posible
obstruccin uretral, para no daar la misma. Con respecto a la hembra felina el sondaje no se
utiliza.
Figura 9

PC 40
Sonda Tom Cat

-Miccin espontnea: Se puede tomar la muestra directamente del suelo (previamente limpio)
o de la bandeja sanitaria (sin piedras) en el caso de los felinos La misma puede cubrirse con un
nylon donde el animal realizar la miccin. Esta muestra normalmente contiene contaminantes
y bacterias del ambiente, por lo que no puede ser usada para cultivo. Es importante aclararle al
dueo que no recoja la orina del piso con un algodn, ya que los elementos del sedimento
quedarn retenidos en el mismo.
Esperar a que el animal est por orinar y colocar un recipiente limpio recolectando la orina en
el tramo medio de la miccin (chorro medio), as se reduce la cantidad de contaminantes y esta
muestra puede ser utilizada para cultivo.
-Compresin vesical: Esta maniobra generalmente se realiza en felinos; se comprime
suavemente la vejiga para estimular al animal a que orine y que se venza la presin del
esfnter uretral interno y se recoje la muestra por chorro medio o desde la camilla. Tener
cuidado ya que una excesiva presin puede generar lesiones en la pared con sangrado o
producirse la ruptura total. Esta maniobra est contraindicada ante una sospecha de
obstruccin uretral.
2) Recipiente (Figura 10)
La muestra debe ser recolectada en un recipiente perfectamente limpio o en jeringa jeringa. Lo
ideal es que el recipiente sea estril (en el caso de solicitarse un cultivo) ya que as se reduce
la presencia de bacterias, las que pueden degradar sustancias (como por ejemplo la glucosa),
o modificar el pH.
Es ideal que el recipiente est bien cerrado, para evitar la prdida de CO2 que modificar el pH
y prevenir la evaporacin de sustancias voltiles como por ej. las cetonas.
Tambin es recomendable que el recipiente sea opaco para reducir la incidencia de la luz y
prevenir la fotodegradacin de elementos como la bilirrubina.
Evitar el uso de frascos reciclados que pueden contener contaminantes o residuos de jabn o
detergente los que alterarn las reacciones enzimticas y qumicas del examen qumico.

Conservaci
Conservacin y remisi
remisin de orina

Recipientes limpios y secos, jeringas


Para bacteriolog
bacteriologa = ESTERILES
Protocolo adjunto
CONSERVACION DE LA MUESTRA:
REFRIGERADA
REFRIGERADA

3) Conservacin:
La muestra una vez obtenida debe guardarse en la heladera hasta el momento de su
procesamiento (para evitar el sobrecrecimiento bacteriano que puede alterar algunos
parmetros de la muestra).
Cuando se va a procesar, debe llevarse a temperatura ambiente ya que el frio puede hacer
cristalizar algunas sustancias y pueden as aparecer cristales que no se observarn con la
orina temperatura ambiente.
Es ideal que la orina sea procesada dentro de las 24 hs de extrada para evitar cambios
qumicos y citolgicos.
4) Rotular la muestra, acompaarla con el protocolo correspondiente, indicando la forma de
obtencin de la muestra.
Figura 10:
C- MATERIA FECAL:
Para la realizacin de un buen estudio coproparasitolgico, lo que se debe hacer es lo
siguiente:
Juntar dentro de un frasco conteniendo formol al 5% una pequea porcin de cada deposicin
que realice el animal durante un perodo de 3 a 5 das. El formol 5% es uno de los fijadores ms
usados en donde los huevos y quistes se conservan por tiempos prolongados.
Preparacin del formol al 5%: se parte del formol al 40% (al cual se considera como 100%) y se
mezclan 5cc de formol al 40% con 95cc de agua de la canilla.
Utilizar un frasco de boca ancha y limpio. Es importante que el formol cubra la totalidad de la
materia fecal, ya que sino la muestra no cumple con las condiciones ptimas de conservacin
produciendo errores en el resultado.
Deben tomarse varias muestras y en diferentes momentos del da ya que la eliminacin de
huevos por materia fecal no se da en todas las deposiciones y puede variar el momento del da
en que son expulsados.
Rotular la muestra.
D- PUNCIN GANGLIONAR:
Todo linfondulo que est aumentado de tamao o con su consistencia modificada debe ser
punzado.
Debe evaluarse, en primera instancia, que ganglios se van a punzar. Si varios ganglios
aparentan ser patolgicos, se debera punzar por lo menos dos de ellos alejados entre s.
Cuando el ganglio est muy grande, ser mejor elegir otro de menor tamao, ya que
probablemente al estar tan aumentado la irrigacin no llegue al centro del mismo y comiencen
a producirse fenmenos de necrosis en la zona central que pueden perturbar la lectura
citolgica.
Se prefiere no elegir para punzar los ganglios submaxilares ya que normalmente al estar
relacionados con el drenaje linftico de la regin de la boca puede obtenerse material
inflamatorio o hiperplsico, ya que muchos de los pacientes presentan infecciones o lesiones
en la cavidad orofarngea.
Preparar el material a utilizar en forma previa: portaobjetos, agujas (25/8), jeringas (3ml, 5ml),
algodn,)
Colocar bozal y posicionar al animal segn el rea a punzar (estacin, decbito lateral, decbito
esternal, etc), si el animal presenta mucho pelo, puede depilarse previamente el rea.

Tomar firmemente el ganglio con una mano entre el dedo pulgar e ndice y con la otra mano
sostener la jeringa acoplada a la aguja y punzar el ganglio (Figura 11). Una vez insertada la
aguja, mover el mbolo de la jeringa (aspirando) y mover la aguja en forma de abanico dentro
del ganglio. Esto garantiza una mayor proporcin de clulas en el preparado.
Quitar la aguja, llenar la jeringa con aire, volver a colocar la aguja y expulsar el aire de la
jeringa empujando el mbolo, realizarlo apuntando el bisel de la aguja hacia un portaobjeto
apoyado en la mesa. As las clulas que se obtuvieron de la puncin aspiracin sern
expulsadas desde dentro de la aguja hacia el portaobjeto. Con otro portaobjeto se extender el
material y se secar al aire. Esto se denomina PAAF (puncin aspiracin con aguja fina).
Figura 11:

En el caso de que el material obtenido sea sangre o est contaminado con sangre, deber
repetirse, ya que en el extendido el material sanguneo nos dificultar el diagnstico.
Otra opcin es el PAF (puncin con aguja fina sin aspiracin). Solo se diferencia en que en
lugar de punzar con aguja ms jeringa, slo se punza con la aguja y se la mueve en forma de
abanico. Luego con una jeringa llena de aire se expulsa lo obtenido en la aguja sobre un
portaobjeto.
Una vez que el material est seco, se deber rotular y se puede o fijar y teir o acondicionar
para su envo al laboratorio.
E- HISTOPATOLOGA
Los tres pilares sobre los que asienta un correcto diagnstico histopatolgico son la toma de
muestra, la fijacin y el procesamiento de la misma.
1- Fijador utilizado: si bien no es el nico, el ms corriente es el Formol al 10%, que se
obtiene al agregarle a una parte de Formol al 40%, nueve de agua destilada. An no siendo el
mejor fijador, rene ciertas condiciones tales como bajo precio, fcil preparacin, gran poder de
penetracin, endurecimiento rpido de los tejidos y conservacin de los lpidos.

Lo ideal es usar el Formol bufferado al 10% en agua destilada para mejorar su


condicin de fijador.
Existen tambin las mezclas fijadoras, ya que no hay un fijador ideal. Las ms utilizadas son:
a- Lquido de Zenker, que es una mezcla de bicromato de potasio, cloruro de mercurio y
cido actico, que resulta ser un buen fijador nuclear y citoplasmtico.
b- Lquido de Helly, constituido por bicromato de potasio, cloruro de mercurio y formol.
c- Lquido de Bouin, que es una mezcla de cido pcrico, formol y cido actico, que es
un buen fijador citoplasmtico.
2- Recipiente: pueden usarse bolsas o frascos. Los frascos deben ser de boca ancha, con
tapa a rosca y cierre hermtico, preferentemente de plstico, para evitar las rupturas
accidentales.

En cuanto a las bolsas, se usan las de conservacin de alimentos para freezer, las que vienen
en varios tamaos y son tiles para enviar piezas completas de gran volumen. Como
desventajas pueden mencionarse que el cierre de las mismas no es hermtico y debe
asegurarse con tela adhesiva y tambin la poca estabilidad (equilibrio) que poseen.
3- Volumen del fijador: diez a veinte veces el de la muestra. Recordar que primero se
coloca el fijador y luego la muestra y no lo contrario, ya que debido a que el peso especfico de
las muestras es mayor que el del fijador, estas van a depositarse en el fondo del recipiente ,
demorando la fijacin en esa superficie de contacto. Una excepcin a esto son las piezas que
contienen tejido adiposo que tienden a flotar en el formol, por lo que es imprescindible
colocarles encima una gasa o algodn a modo de pesa.
4- Tamao de la muestra: el ideal es de 1 x 1 cm, dado que el formol tiene un poder de
penetracin de un centmetro en 24 horas. Sin embargo, en la prctica esto no siempre es
aconsejable, sobre todo en el caso de neoplasias de mayor tamao, donde adems del
diagnstico es fundamental conocer los limites de reseccin, por lo que se recomienda realizar
cortes transversales separados por una distancia de 1 cm y paralelos entre si para no retardar
el tiempo de fijacin.
5- Sitio de la toma: es uno de los puntos ms importantes, ya que la muestra tomada de un
sitio incorrecto proporcionar un diagnstico errneo, como por ejemplo el de tejido sin
anormalidades histopatolgicas. Esto reviste particular importancia en el caso de biopsias
cutneas donde lo ms conveniente es tomar varias muestras con sacabocado.
Cuando la muestra es muy grande es conveniente tomar muestras del centro, bordes y
periferia, que incluya tejido normal para que en caso de neoplasias pueda conocerse el margen
de reseccin.
6- Duracin de la fijacin: el tiempo mnimo de fijacin es de 24 horas, salvo para
muestras milimtricas que requieran urgencia en el diagnstico donde el tiempo puede
reducirse a 12 horas.No existe un tiempo mximo de fijacin en Formol, lo que se recomienda
es cambiar peridicamente el fijador si ha de conservarse la muestra por un tiempo
prolongado. Cabe recordar que no es necesario refrigerar las piezas que ya tienen un fijador.
7- Nmero de muestras: cada muestra debe ir en recipientes separados, si esto no es
posible habr que identificarlas, por ejemplo con material de sutura por ejemplo : si fueran 3
muestras a una no se la identifica, a la otra se le coloca un punto y a la otra dos puntos y esto
se anota en el protocolo.
Toda muestra debe ser acompaada por un protocolo donde deben constar los siguientes
datos:
- Propietario
- Profesional solicitante
- Datos del animal : especie, raza, sexo, edad
- Sitio preciso de la toma: importante en ciertas neoplasias y tambin en enfermedades
inmunomediadas que tienen predileccin por determinadas zonas anatmicas
- Fecha y hora de extraccin: en el caso de la hora para aquellas muestras milimtricas cuyo
diagnstico urge
- Fijador utilizado: recordar que el formol no es el nico fijador. Prestar atencin a la
concentracin del mismo, ya que podran estar en formol al 5 % en caso de emergencias
donde no se pudo disponer del fijador en la concentracin adecuada.
- Breve resea: tiempo de evolucin, caractersticas macroscpicas, tratamientos realizados,
cirugas previas, etc.
- Diagnstico presuntivo: es una forma de ver si hay correspondencia entre lo que se ve
clnicamente y los hallazgos histopatolgicos.
Como corolario de lo expuesto hasta ahora el profesional actuante recibir un informe donde
deben figurar:
- Descripcin macroscpica de la o las muestras recibidas: esto tiene una doble importancia,
por un lado la descripcin de las caractersticas visibles de las piezas y por otro la
correspondencia entre el nmero de muestras enviadas por el clnico o cirujano y el de las
procesadas por el patlogo (funcin de control).

Descripcin microscpica: de suma importancia en el caso de neoplasias donde


interesan datos como el grado de anaplasia celular, invasin vascular, infiltracin de tejidos,
ndice mittico, grado de reseccin, etc.
- Diagnstico histopatolgico: constituye el punto final en la tarea del patlogo.
Algunos elementos utilizados en la toma de muestras:
Bistur: con hojas N 23 o 24, son los de uso mas corriente. Practicamente la nica limitacin
son los tejidos muy duros ( seo, tumores mamarios calcificados)
Trefina: indicado para biopsias seas o tejidos calcificados
Aguja de Hamshidi: til para biopsias de tejidos profundos y para obtener muestras de buen
tamao
Trucut: se obtienen muestras cilndricas, con escaso dimetro, por lo que lo ideal es tomar
varias muestras para que sean representativas.
Dermtomo: son sacabocados de distintos dimetros: 4, 6 y 8 mm. Los hay duraderos,
metlicos, y descartables, con mango plstico. Son sumamente tiles para la toma de biopsias
cutneas, siendo el mas indicado el de 6 mm. Tambin pueden utilizarse para muestrear
linfonodulos.
Necropsias:
Hay que diferenciar entre una necropsia completa que se efectuar en un laboratorio de
Patologa y la que puede realizarse en la Practica Clnica diaria, sobretodo cuando se quiere
confirmar un diagnstico que es casi certero: ejemplo: canino o felino con antecedentes de
neoplasia mamaria maligna que presentaba signos respiratorios; cuerpos extraos con dao
macroscpico evidente del aparato digestivo, ruptura de vsceras abdominales asociadas a un
traumatismo. En estos casos, la necropsia puede ser acotada a los rganos involucrados,
siendo esto suficiente para llegar al diagnstico del deceso. Ahora bien, en caso de
desconocimiento de la causa de la muerte, y mas aun al no hallar lesiones macroscpicas se
impone muestrear todos los rganos posibles.
F- BACTERIOLOGIA
Las muestras destinadas a estudio bacteriolgico pueden ser tomadas desde distintos tejidos o
cavidades.
Es importante saber cmo debemos tomar la muestra en cada situacin para no cometer
errores y que finalmente el resultado del cultivo sea satisfactorio.
Todos los elementos que vayamos a utilizar deben ser estriles para no contaminar la muestra.
Si es posible, se deben obtener especmenes antes de la administracin de antimicrobianos, o
esperar por lo menos 48hs despus de la ltima dosis antes de recoger la misma.
La muestra debe tomarse del sitio donde se encuentre la infeccin, lo mas rpido posible en el
curso del proceso de la enfermedad, ya que a medida que esta progresa, se presenta necrosis
de tejidos y algunos de los microorganismos (m.o) causantes, pueden morir o ser
enmascarados por el crecimiento exagerado de otras bacterias.
Se debe obtener una cantidad adecuada de material y en caso de lesiones en varios sitios, que
sea de cada uno de los mismos.
Mantener al mnimo la contaminacin posible de rganos, tejidos o secreciones adyacentes.
Es probable que algunos especmenes se contaminen con flora autctona durante el proceso
de recoleccin. Se deben extremar los cuidados en el uso de tcnicas antispticas para reducir
la cantidad y probabilidad de contaminacin. El xito del diagnstico bacteriolgico estar
dado por la presencia en mayor nmero de m.o patgenos y el menor nmero de
contaminantes de la muestra obtenida.
Se necesitan dispositivos de recoleccin y sistemas de transporte apropiados para asegurar la
supervivencia del m.o patgeno y para un posterior aislamiento e identificacin de dicho
germen. Los mismos pueden ser recipientes estriles, con cierre hermtico, hisopos con medio
de transporte (Medio de Stuart, Cary-Blair) o hisopos embebidos en solucin fisiolgica estril.
Es muy importante identificar correctamente los recipientes, adjuntando un protocolo con:
1. datos del paciente, si esta recibiendo alguna medicacin y una breve anamnesis del
caso
2. tipo de muestra
3. forma de recoleccin.
Remitirla al laboratorio lo ms rpido posible.

Cuando tengamos que tomar una muestra desde una cavidad (torcica, abdominal) u rgano
(vejiga, pulmn, hgado) o realizar un hemocultivo deberemos:
realizar tricotomia de la zona en donde vamos a realizar la puncin (en forma amplia).

higienizar con pervinox jabonoso o clorexidina (3 veces).

colocar iodopovidona.

usar guantes estriles.

punzar con aguja acoplada a jeringa (en el caso de punzar la cavidad torcica deber
utilizarse una llave de tres vas).

El tamao de la aguja depender de que estemos punzando.


Luego de punzar y obtener la muestra, desacoplamos la aguja y colocamos una aguja nueva
estril.
La muestra podr ser conservada dentro de la jeringa en fri no ms de 12 horas, o ser
colocada en un frasco especial para hemocultivo.
Cuando lo que se quiere tomar es una muestra desde un odo, deber utilizarse un hisopo
estril. Se abrir bien los pliegues del odo y se introducir el hisopo tratando de no tocar la
superficie externa del pabelln auricular, sino que lo trataremos de introducir en profundidad,
realizaremos un movimiento rotatorio y lo sacaremos con cuidado. Luego lo colocamos en un
tubo estril que contenga medio de transporte de Stuart.
Cuando la muestra que se desea tomar es para urocultivo, la misma puede ser tomada de
diferentes formas: cistocentesis, chorro medio o sondaje. La toma de muestra ideal es por
cistocentesis.
G- MICOLOGIA:
En micologa, la toma de muestra difiere si se trata de micosis superficiales o profundas.
Micosis superficiales: cuando se toman muestras de pelos para cultivo de dermatofitos, se debe
limpiar, en especial la zona perifrica, con alcohol 70%, esto permite reducir la recoleccin de
contaminantes bacterianos y fngicos del medio ambiente.
El material se obtiene de la porcin marginal mas activa de la lesin, raspando los bordes con
bistur, arrancando pelos con el folculo piloso o con alicate en caso de tomar trozos de uas
afectadas.
Estas muestras se remiten a temperatura ambiente en seco, en un sobre de papel, entre dos
portaobjetos o en un tubo estril.
Micosis profundas: Generalmente se tratan de muestras de biopsias. Si fueran lesiones
abscedadas, fluidos o muestras de mdula sea, el material se obtiene por puncin aspiracin
previa desinfeccin de la zona, como ya fuera descripto anteriormente.
En el caso de bsqueda de micosis en muestras pulmonares, se puede realizar un lavado
bronquial o transtraqueal, o un cepillado bronquial.

TCNICAS HEMATOLGICAS
El hemograma es uno de los mtodos complementarios ms utilizados en la clnica veterinaria.
Consta de una serie de determinaciones, algunas de las cuales pueden realizarse con pocos
elementos en el consultorio (hematocrito, confeccin de frotis y tinciones), mientras que otros
deben ser realizados en el laboratorio (recuento leucocitario, dosaje de hemoglobina, ndice de
reticulocitos)
Hemograma:
- Hematocrito
- Hemoglobina
- Indice de reticulocitos
- Recuento leucocitario
- Confeccin de frotis y tinciones
- Recuento absoluto de eosinfilos (RAE)
En el consultorio, con pocos elementos el clnico puede realizar algunas de las tcnicas
includas en el hemograma (hematocrito, ndice de reticulocitos, frotis sanguneos) que pueden
permitirles una rpida aproximacin diagnstica a distintas patologas.
A) Hematocrito:
El hematocrito se utiliza para estimar la masa eritrocitaria y determinar el volumen celular
aglomerado (VCA).
El VCA nos aporta en forma directa el porcentaje de eritrocitos circulantes y depende tanto de
la cantidad y tamao de los glbulos rojos como as tambin del volumen plasmtico.
Hay dos formas de obtener el hematocrito:

Contadores celulares electrnicos.

Centrifugacin de sangre anticoagulada: para la realizacin de este mtodo se


necesitan microcapilares (MC), de 75mm de largo y 1mm de dimetro, que se llenan
por capilaridad, siendo ideal llenar tres cuartas partes de su capacidad.

Existen dos tipos de microcapilares:

Sin heparina: se utiliza sangre entera anticoagulada homogeneizada.

Con heparina: podemos tomar la muestra directamente del animal, ya sea del cono de
la aguja en la extraccin o realizando una puncin por ejemplo en oreja, almohadilla,
etc.

El MC se llena por capilaridad y luego debe sellarse el extremo que no fue utilizado para su
carga con plastilina o la llama de un mechero.

El MC debe centrifugarse en una microcentrfuga durante 5 a 12.000 rpm. Tambin se puede


utilizar una macrocentrfuga adaptando un tubo cnico como contenedor del MC de tal manera
que quede fijo. Como la velocidad de la macrocentrfuga es menor (3800 rpm) debe

aumentarse el tiempo de centrifugado. Como los MC no tienen lneas para identificar el valor de
lectura debe recurrirse al uso de un baco
Abaco para lectura de
microhematocrito

Qu

datos

podemos

obtener

partir

de

un

microhematocrito?:

HEMATOCRITO
DATOS A OBTENER:
OBTENER:
EVALUACIONDEL PLASMA
MICROFILARIAS
CAPA FLOGISTICA
VOLUMEN CELULAR
AGLOMERADO

Datos del plasma:


a- El plasma en caninos y felinos normalmente es transparente. Existen variaciones de
color principalmente por la dieta y la hemoconcentracin.
Plasmas ictricos: puede orientar hacia una enfermedad heptica, obstruccin
biliar o anemias hemolticas.
Plasmas lipmicos: por un ayuno fue inadecuado (lo ideal son 8 hs de ayuno
slido),o si persiste a pesar del ayuno se debe pensar en causas como la
Diabetes Mellitus, Pancreatitis Aguda, Hipotiroidismo, Hiperadrenocortisimo o
Enfermedad Heptica.
Plasmas hemolizados: suele deberse a la incorrecta toma o conservacin de la
muestra. En caso de persistir al repetir la toma de muestra investigar por
posible hemlisis intravascular

Datos que obtengo del plasma:


1) Color del plasma:

b- Partiendo el capilar y colocando el plasma en un Refractmetro


slidos totales.

podemos obtener los

Datos que obtengo del plasma:


2) Medicin protenas totales

Datos de la Capa Flogstica (Buffy coat): corresponde a la presencia de glbulos blancos


(GB) y plaquetas. Permite estimar grosso modo la cantidad de GB. Debido a que en la capa
flogstica se concentran los leucocitos, la misma es utilizada para buscar hemoparsitos
(especialmente Hepatozoon) los cuales se encuentran en muy pequea cantidad (1 cada 1000
leucocitos). Para realizar la bsqueda se corta el capilar a nivel de la capa flogstica y se hace un
extendido con este material , el cual luego se colorea con las tinciones habituales

Capa flogstica
Hepatozoon canis

Presencia de microfilarias:
Cuando los datos de la clnica hacen sospechar de un cuadro de filariasis, la bsqueda de
microfilarias puede hacerse colocando un microhematocrito al microscopio y focalizando la
zona del plasma en contacto con la capa flogstica. Se ubica la capa a menor aumento (10x) y
luego deben visualizarse las microfilarias a mayor aumento (40x) donde en caso positivo se las
podr ver en movimiento. Otra forma de visualizarlas es en el frotis teido con Giemsa o
Tincin 15
Tubo de microhematocrito para
buscar microfilarias

Microfilaria en frotis teido


con Giemsa

10x

40x

Volumen celular aglomerado (VCA):


En los cachorros, al momento del nacimiento pueden observarse valores similares al de los adultos,
pero inmediatamente sufre un descenso normal, llegando a los valores expresados para cachorros,
el que suele comenzar a aumentar con la incorporacin de dieta slida, observndose ya entre los
8 y 10 meses de vida valores correspondientes a los adultos.
El valor del hematocrito depende tanto de la cantidad y tamao de los eritrocitos, en relacin al
plasma. Por lo tanto pueden observarse valores que superan los valores mximos normales en
casos de: Policitemia vera, o en casos en casos donde el volumen plasmtico se encuentra
reducido (hemoconcentracin, deshidratacin).
La obtencin de valores inferiores a los normales se observa en todas las anemias donde el valor
del hematocrito se utiliza como uno de los elementos para determinar los ndices hematimtricos
que nos permitirn clasificar las anemias.
Valores de Referencia:
Caninos Adultos 37-55%
Caninos < 1ao: 30-50%
Felinos Adultos y Cachorros 28-45%.
B) Hemoglobina:
Como en esencia toda la hemoglobina (Hb) est presente dentro de los eritrocitos, generalmente el
recuento eritrocitario, el hematocrito (Ht) y el contenido de hemoglobina son paralelos entre s,
excepto en ciertas patologas donde existen alteraciones en la produccin de hemoglobina.
El contenido de hemoglobina se determina por mtodos colorimtricos cuya lectura se realiza con
un espectrofotmetro; el mtodo mas utilizado es el de la CIANOMETAHEMOGLOBINA, donde el
reactivo de trabajo (FERROCIANURO) en combinacin con la hemoglobina da una solucin
coloreada, donde la intensidad del color resultante es proporcional a la concentracin de
Hemoglobina. Se utilizan los siguientes volmenes:
5 ml reactivo (Ferrocianuro) + 20 ul sangre
Para la obtencin de valores confiables se utiliza un testigo con concentraciones de hemoglobina
conocida.
VALORES DE REFERENCIA:
CANINOS 12 a 18 g/dl
FELINOS 8 a 15 g/dl
Con el valor de la hemoglobina y el hematocrito podemos calcular la Concentracin de
hemoglobina corpuscular media ( CHCM) La CHCM representa la concentracin de Hb promedio
dentro de los eritrocitos sea que parte del eritrocito est ocupada por hemoglobina
CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA
CORPUSCULAR MEDIA
CHCM = Hb X 100 =
Hto

ANEMIA

HIPOCROMICA
NORMOCRONICA
HIPERCROMICA

Recordar que los valores incrementados de CHCM (hipercroma) son slo transitorios y se dan en
la anemia hemoltica inmunomediada con lisis extravascular, donde a nivel de los macrfagos se
produce el descarozado de los eritrocitos, los cuales no son lisados sino que vuelven a la
circulacin con un tamao menor (por la prdida de parte de su membrana) pero con el contenido
normal del eritrocito. Este es el nico caso en el que se puede hablar de hipercroma, pero debe
recordarse que estas clulas pierden la capacidad de modificar su forma y son rpidamente
lisadas.

En las muestras lipmicas no puede medirse la Hb ya que se produce un aumento por la turbidez
del plasma.
Los valores disminudos de CHCM (tipocroma) suelen presentarse en los pacientes con anemia
regenerativa, en especial en aquellos con altos porcentajes de reticulocitos, los cuales no han
terminado aun de sintetizar Hb. Tambin en los pacientes con deficiencia crnica de hierro suelen
observarse CHCM inferiores a los valores normales, dado que el hierro es un componente
fundamental de la molcula de Hb, por lo tanto en casos de dficit no se logra sintetizar la cantidad
de Hb necesaria para que el normoblasto ortocromtico (ltima clula de la serie eritroide nucleada)
expulse el ncleo. Al retener el ncleo esta clula vuelve a dividirse (microcitos) y con menor
contenido de Hb (hipocroma)
C) ndice reticulocitario:
El reticulocito es el estado previo al eritrocito maduro, el cual retiene material basfilo que se
observa como un reticulado intracelular, producto del precipitado de los ribosomas. La presencia
de reticulocitos en sangre perifrica constituye un valioso elemento de pronstico para diferenciar
las anemias regenerativas de aquellas arregenerativas. La cantidad de reticulocitos en sangre
aporta datos sobre la intensidad de la respuesta medular. La liberacin de reticulocitos por parte de
la mdula sea tarda de 48 a 72hs desde el inicio del proceso. Es muy importante recordar que el
reticulocito es una clula que sigue madurando en sangre una vez extrada la misma, razn por lo
cual es fundamental que la misma sea remitida inmediatamente al laboratorio y que ste determine
el ndice de reticulocitos dentro de las primeras horas ya que de lo contrario si el tiempo se excede,
muchos de los reticulocitos presentes en la muestra de sangre habrn madurado y se habrn
convertido en eritrocitos maduros alterando el valor real de dicho ndice.
Tcnica: Colocar 1 2 gotas de sangre en un tubo de hemlisis y agregar la misma cantidad del
colorante. Incubar a Bao Mara a 37 durante 15. Retirar del bao y hacer un frotis. Dejar secar y
mirar con inmersin contando la cantidad de reticulocitos que se encuentran en 500 glbulos rojos.
Sacar el porcentaje
Reticulocitos teidos con azul brillante de cresilo

Clculo:
1- Sacar el porcentaje de reticulocitos
2- Corregir el porcentaje de reticulocitos en base al grado de anemia del paciente:
Recuento absoluto = % reticulocitos x Ht paciente (PERRO)
45 (perro) 35 (gato)
3- Hacer la correccin en base a la vida media del reticulocitos, la cual est en relacin con el Ht
del paciente. Cuanto ms importante es el grado de anemia la mdula sea libera a sangre
reticulocitos que tienen una vida media ms larga en circulacin que aquellos que tienen un Ht
normal donde el reticulocitos tarda un dia en madurar
Ht
45
35
25
15

PERRO
vida x
1
1,5
2
2,5

GATO
Ht
vida x
35
1
25
1,5
15
2
10
2,5

Indice de reticulocitos (IR) = rec. Absoluto de reticulocitos


vida media s/ especie
El ndice de reticulocitos sirve para determinar si una anemia es regenerativa o arregenerativa.
Si el IR es = mayor a 2 la anemia es Regenerativa
Si el IR es menor de 2 la anemia es Arregenerativa
D) Recuento de Leucocitos:
A diferencia de los hemates los leucocitos no exhiben un lapso vital en la sangre sino que la
abandonan al azar en respuesta a estmulos quimiotcticos. Su produccin y cintica depende de
las necesidades orgnicas como respuesta a ciertas noxas. Otras veces, su produccin puede
estar alterada como en el caso de alteraciones neoplsicas de clulas precursoras. Por estos
motivos que es fundamental realizar una evaluacin tanto del nmero total de leucocitos como la
evaluacin de los distintos tipos presentes.
El recuento total de leucocitos es el recuento total de clulas nucleadas en sangre perifrica.
Existen en la actualidad mtodos electrnicos con resultados muy exactos y de alta repetibilidad
pero no tiles en medicina veterinaria. El mtodo manual ms utilizado es el recuento en cmara
(Neubauer).

Para realizar el recuento de leucocitos totales se realiza una dilucin 1:20 (20 l de muestra y 380
l de diluyente) con diluyentes como cido actico glacial al 2% o cido clorhdrico al 1%. Estos
diluyentes lisan los glbulos rojos. Se debe esperar un minuto para realizar la carga. Previamente
debe pegarse el cubrecmaras sobre las barras laterales de la cmara y ste debe quedar firme
verificando la formacin de los anillos de Newton. Se puede realizar la carga con pipeta o utilizando
un capilar de manera precisa y rpida, sin formacin de burbujas y evitando el rebasamiento y se
espera que las clulas sedimenten para realizar la lectura.
Se deben leer a poco aumento (10x) los 2 cuadrantes opuestos si el conteo fuese mayor a 6000
glbulos blancos o los cuatro cuadrantes si el conteo fuese menor.
La lectura de cada uno de los 16 cuadrados dentro del cuadrante se realiza de izquierda a derecha
y para evitar el conteo doble se cuentan las clulas que estn en contacto con las lneas internas
superior e izquierda y no las clulas que contactan con las lneas internas inferior y derecha. Si en
el recuento se obtuviera una diferencia superior al 20% en cada cuadrante debe realizarse
nuevamente el procedimiento por la incorrecta distribucin de clulas.

Una vez hecho el recuento se aplica la siguiente frmula.

Leucocitos/mm = Clulas contadas x 20 (dilucin) x 10 (cmara)


4 (cuadrados contados)
Valores de referencia:
Caninos 6000 a 17000/mm3
3
Felinos 5500 a 19500/mm
Recordar que en los recuentos muy altos (recuentos mayores a 80000 glbulos blancos) debe
realizarse una dilucin mayor de la muestra.
Interpretacin: Leucocitosis / Leucopenia.
Las leucocitosis se presentan comnmente como leucocitosis neutroflica debido a que este tipo
celular es el predominante en sangre perifrica en caninos y felinos. Se debe generalmente a la
respuesta medular en casos de tipo infecciosos, txicos, qumicos y en respuestas a enfermedades
sistmicas.
Las leucopenias pueden deberse a la reduccin total de leucocitos o como ocurre frecuentemente
a la disminucin marcada de uno de los tipos celulares, generalmente neutrfilos, por ser las
clulas que se presentan en mayor cantidad. Esta es una respuesta comn de observar en ciertas
enfermedades virales o como respuesta a aplasia medular sea medicamentosa , txica o por
neoplasias hematopoyticas.
E) Frotis sanguneo:
Para completar la evaluacin de las clulas sanguneas es necesario recurrir al examen del frotis
sanguneo el cual nos aporta datos sobre los distintos elementos celulares:
Eritrocitos: tamao, forma, color, puntillado basfilo, cuerpos de Howell-Jolly, eritrocitos
nucleados, reticulocitos y cuerpos de inclusin (moquillo), hemoparsitos
(Haemobartonella, Babesia).
Leucocitos: tamao, caractersticas del citoplasma (color, grnulos, vacuolas),
caractersticas del ncleo (forma, color, nuclolos)cuerpos de inclusin (moquillo),
hemoparsitos (Ehrlichia, Hepatozoon)
Trombocitos (plaquetas): cantidad, tamao y distribucin.

Cuerpos inclusin Moquillo

Haemobartonella felis

Hepatozoon canis

Mrula Ehrlichia canis

Puntillado basfilo por


intoxicacin con plomo

Confeccin del frotis:


Se coloca una gota de sangre en uno de los bordes de un portaobjetos limpio y desengrasado.
Inmediatamente se extiende la gota con un extensor. Debe deslizarse hacia atrs para permitir
que difunda la gota de sangre. Cuando la sangre llega hacia los bordes del portaobjetos, el
extensor se empuja hacia adelante con un solo movimiento firme formando un ngulo de 45, ste
puede cambiarse para variar el tamao y grosor del frotis dependiendo de la concentracin de la
sangre. Lo importante es que deben ser delgados para obtener una distribucin de clulas en
monocapa..Luego de confeccionarse deben ser secados al aire para su posterior tincin. Es
fundamental ROTULARLOS para su correcta identificacin.

Tinciones:
Las tinciones que se utilizan rutinariamente en hematologa son del tipo de ROMANOWSKY que
estn basadas en colorantes como el Azul de metileno y Eosina. Dos son las ms utilizadas:
1) Metanol-Giemsa: una vez realizado el extendido se coloca en un recipiente con barras paralelas
y se fija durante 1a 3 con Metanol. Pasado ese tiempo se enjuaga con agua y se lo cubre con el
colorante de Giemsa el cual se prepara en una dilucin 1:10 con agua corriente. Pasado ese
tiempo se enjuaga con agua, se deja secar y luego se observa al microscopio.

2) Tincin 15 (tincin rpida): el kit viene con 3 reactivos: un fijador, un colorante acidfilo y uno
basfilo. La tincin se realiza introduciendo en primer lugar 5 veces el preparado en el fijador, se
escurre perfectamente y se realizan 5 pasadas por el colorante acidofilo, se vuelve a escurrir
minuciosamente (para evitar la contaminacin de cada reactivo) y por ltimo se hacen 5 pasadas
en el colorante basfilo. Al finalizar esta etapa debe lavarse con agua corriente, dejar secar y
observar al microscopio.

Una vez seco el preparado se procede a la lectura. El rea de monocapa es el nico lugar donde
debe realizarse la evaluacin celular. Dos errores comunes en la lectura de los frotis de sangre
citolgicos son intentar identificar las clulas de las reas gruesas del frotis y las clulas daadas.

En las reas gruesas, las clulas estn suspendidas de manera ms derecha, de modo que cuando
se observa desde arriba la clula presenta un dimetro ms pequeo y se colorea de manera
demasiado oscura para una evaluacin apropiada. Todos los frotis presentan algunas clulas
daadas con formas caractersticas de coloracin distorsionada, que no deben ser tomadas en
cuenta.
Para realizar la evaluacin primero se lee con objetivo de menor aumento (10x) para observar la
distribucin celular, acmulos celulares y/o plaquetarios. El recuento diferencial de leucocitos, las
caractersticas morfolgicas y la presencia de cuerpos de inclusin, hemoparsitos y alteraciones
txicas leucocitarias se realiza utilizando el objetivo con aceite de inmersin (100x).
Para realizar un adecuado recuento diferencial leucocitario se lee en guarda griega de borde a
borde y empezando por la cola del frotis.

4399

En general se cuentan 100 leucocitos anotando los distintos tipos celulares. Si el recuento
leucocitario en cmara llega a ser alto lo ideal es hacer una lectura de 200 a 300 clulas.
IMPORTANTE: el recuento leucocitario relativo de cada uno de los tipos celulares SOLO sirve para
calcular el valor absoluto de cada tipo de leucocito. Para su clculo (si es que el laboratorio no lo
expresa) debe sacarse haciendo una regla de tres: por ej: si el porcentaje de neutrfilos leidos en el
frotis es del 90% y el recuento leucocitario absoluto en cmara de Neubauer fue de 10000
leucocitos/mm3, el valor absoluto de neutrfilos de ese paciente ser de 9000 neutrfilos/mm3. Es
este valor el que debe utilizarse para interpretar el cuadro leucocitario.
NUNCA DEFINIR SI HAY NEUTROPENIA O NEUTROFILIA (lo mismo para cualquier otro tipo de
leucocito) A PARTIR DE LA FRMULA LEUCOCITARIA RELATIVA YA QUE PUEDEN
COMETERSE ERRORES IMPORTANTES DE INTERPRETACION.Ej:
Frmula leucocitaria relativa

Por ej: NS: 90%

L: 5%

M: 3%

E:2%

NS: 90%
R.Leucocitario/mm3
Valor Referencia de NS en caninos: 3000-11500/mm3
20000 leuc/mm3
Frmula
Leucocitaria 18000 NS/mm3
Absoluta

NEUTROFILIA

10000 leuc/mm3
9000 NS/mm3

RECUENTO
LEUCOCITARIO
NORMAL

3000 leuc/mm3
2700 NS/mm3

NEUTROPENIA

Cuando se observa en el frotis un nmero de eritrocitos nucleados mayor al 8% debe realizarse la


correccin de leucocitos totales, ya que stos al presentar ncleo se incorporan en el recuento
leucocitario en la cmara, lo que alterara el recuento absoluto de los diferentes tipos de leucocitos.
Para realizar la correccin se utiliza la siguiente frmula:

CUENTA LEUCOCITARIA CORREGIDA.


CUENTA OBSERVADA

100

100 + % ERITROCITOS NUCLEADOS


F) Recuento absoluto de eosinfilos (RAE):
Esta tcnica no se la incluye rutinariamente dentro del hemograma, e incluso no todos los
laboratorios la realizan. Los casos en los cuales suele solicitarse este estudio es en aquellos
procesos que cursan con eosinopenia (hiperadrenocortisismo, as tambin como control del
tratamiento de esta enfermedad.). Teniendo en cuenta que en condiciones normales el porcentaje
de eosinfilos en sangre perifrica es bajo, no sera correcto sacar el valor absoluto relacionando el
valor relativo (% leido en frotis) relacionndolo con el recuento leucocitario absoluto obtenido en
cmara de Neubauer. Por este motivo es que en aquellos casos donde se sospecha de
eosinopenia lo correcto es hacer el recuento absoluto en una cmara especial (Fusch-Rosentha)
Tcnica: Se utiliza como diluyente una solucin a base de eosina y acetona que tiene como fin lisar
las clulas y teir los grnulos eosinoflicos.
La dilucin utilizada es de 1:20 (muestra 20ul y 380 ul ), la misma que para realizar el recuento
leucocitario absoluto
Se realiza el recuento en cmara contabilizando la totalidad de su superficie, obteniendo la
cantidad de eosinfilos por mm3 a partir de la siguiente formula:
N de Eosinfilos contados en cmara x 6.25 = Eosinfilos /mm3
Valores de referencia:
Caninos: 100 a 1250/mm3
Felinos:
0 a 1500/mm3

VALORES HEMATOLOGICOS DE REFERENCIA


PARAMETRO

PERRO

GATO

CABALLO

( X 106 /MM3 )

5.5-8.5

5-10

7-13

HEMOGLOBINA g/dl

12-18

8-15

10-18

HEMATOCRITO %

cach.30-50

VACA

REC. GL. ROJOS


6.5-8

8-14

28-45

32-55

24-48

adult.37-55
V.C.M. (ft)

60-77

39-55

37-50

40-60

CHCM%

30-36

31-35

31-35

26-34

IND. RETICUL.

1.8-2

1.8-2

R.GL. BLANCOS /mm3 6000-17000

5500-19500

--

--

7000-14000

4000-12000

FORMULA LEUCOCITARIA RELATIVA


NEUTROF. SEGM (NS).%

60-77

37-75

30-65

15-4

NEUTROfF. BANDA (NB)%

0-3

0-3

0-2

0-2

LINFOCITOS (L) %

12-30

20-55

27-70

MONOCITOS (M)%

3-10

1-4

0,2-14

2-7

2-12

0,5-11

2-20

EOSINOFILOS (E) %

2-10

45-75

FORMULA LEUCOCITARIA ABSOLUTA


NS /MM3

3000-11500

NB /MM3

0-300

2500- 12500
0-300

L /MM3

1000-4800

1500-7000

M /MM3

150-1350

0-850

E /MM3
PLAQUETAS X 100/MM3

2300-8600

600- 4000

0-1000

0-120

1500-8000

2500-7500

0-1000

25-900

100-1250

0-1500

0-1000

200-500

300-800

100-600

0-2500
100-800

EXAMEN COPROPARASITOLGICO
Es el anlisis clnico que nos permite identificar las distintas parasitosis ( helmintos y protozoos
del tracto gastrointestinal) que afectan a los animales domsticos
RECOLECCION DE MUESTRAS
Se recomienda la recoleccin seriada de una pequea porcin (tamao de una ua) de cada una
de las deposiciones, durante 3 a 5 das seguidos, las cuales son colocadas en un mismo
recipiente, de boca ancha con cierre hermtico, conteniendo la solucin conservadora, respetando
las normas de bioseguridad.
Se deber identificar correctamente el frasco y se enviar con su correspondiente protocolo.
Formol 5% es uno de los fijadores ms usados en donde los huevos y quistes se conservan por
tiempos prolongados.
Preparacin del formol al 5%: se parte del formol al 40% (al cual se considera como 100%) y se
mezclan 5cc de formol al 40% con 95cc de agua de la canilla.

EXAMEN COPROPARASITOLOGICO
El examen coproparasitolgico se divide en:
1- Examen macroscpico
2- Examen microscpico

1) EXAMEN MACROSCOPICO:
Permite identificar a simple vista partes de parsitos, tales como progltidos de cestodes y
formas adultas de nematodes.
Para realizarlo simplemente con la ayuda de una esptula vamos separando las distintas
porciones de materia fecal para poner en evidencia cualquier progltido o parsito adulto que
pueda contener la misma

Parsitos adultos

Segmentos de tenias

2) EXAMEN MICROSCOPICO:
Permite poner en evidencia huevos, quistes o larvas de parsitos.
Dentro del examen microscpico existen mtodos:
- Cuantitativos
- Cualitativos
-Mtodos cuantitativos: se utilizan en grandes animales haciendo un recuento en cmara (Mac
Master). Se expresa la cantidad de huevos por gramo de materia fecal. Debemos recordar que en
grandes animales existe una carga parasitaria normal y lo importante es saber cuando la misma

est aumentada para indicar la desparasitacin. En pequeos animales estos mtodos no se


utilizan ya que el simple hecho de ver un huevo de parsito en el preparado es suficiente para
indicar la desparasitacin.
-Mtodos cualitativos: estos son los mtodos de eleccin en pequeos animales. Pueden
dividirse en:
1- Mtodo simple: Observacin directa
2- Mtodos de enriquecimiento
1- METODO SIMPLE: OBSERVACIN DIRECTA
Consiste en colocar directamente materia fecal en un portaobjetos (por ejemplo obtenida con el
termmetro en el momento de medir la temperatura corporal), diluyndola con solucin fisiolgica
para una mejor observacin. Colocar un cubreobjetos y mirar al microscopio.
Posee la ventaja de ser un mtodo rpido y con un mnimo de equipamiento, pero el mismo es
impreciso ya que se debe tener en cuenta que la probabilidad de hallar formas parasitarias es muy
baja, y el resultado negativo no es concluyente.
2- MTODOS DE ENRIQUECIMIENTO
Son aquellos en los cuales se trata de concentrar en pequeos volmenes la mayor cantidad de
huevos.
Hay dos mtodos de enriquecimiento utilizados en medicina veterinaria:
a) Flotacin
b) Sedimentacin.
Estos mtodos se basan en la diferente densidad o peso especfico de los huevos, quistes y larvas
de los parsitos con respecto a la concentracin de la solucin diluyente utilizada.
a) FLOTACIN:
Estos mtodos se caracterizan porque utilizan diluyentes que tienen mayor peso especfico que los
huevos de parsitos, por lo tanto stos tienden a flotar. Con estos mtodos se pueden identificar
la mayora de los huevos de helmintos, como as tambin quistes y ooquistes.
La mayora de los huevos tienen un peso especfico que oscila en los 1.100 a 1.200 , por lo tanto
las soluciones a emplear tienen que tener uno mayor . Existen distintas soluciones a emplear:
La solucin azucarada tiene la ventaja de ser econmica y no modificar la morfologa de
los huevos.
La solucin de cloruro de sodio es la menos deseada porque corroe los equipos de
laboratorio y forma cristales que deforman los huevos. No se puede alcanzar pesos especficos
mayores a 1.200, por lo tanto los huevos ms pesados no flotan.
La solucin de Sulfato de zinc es otro mtodo que se puede utilizar aunque no es el que
utilizamos habitualmente en pequeos animales.
- Mtodo de Willis Flotacin simple
Este mtodo es recomendable por ser sencillo y rpido.
Se disuelve una porcin de materia fecal fresca con solucin de Willis (p.e.1200) (solucin
sobresaturada de cloruro de sodio en agua: se disuelve cloruro de sodio en agua caliente hasta
que queda un exceso de sal ) en un recipiente de plstico o vidrio bien limpio, con la ayuda de una
esptula para que se disuelva en su totalidad.
Filtrar la solucin con colador y colocar el filtrado en un tubo de ensayo llenndolo hasta el borde
sin que vuelque.
Colocar un cubreobjeto en la superficie, dejndolo en reposo 20 minutos.
Si se deja ms de 1 hora los huevos se deforman y/o se hunden.
Remover el cubreobjeto y colocarlo sobre el portaobjetos tratando de no formar burbujas y luego
observar al microscopio primero a 10X y luego a 40X.

- Mtodo de Bembrook de Flotacin por centrifugacin


PREPARACION DE SOLUCIONES DE FLOTACION BEMBROOK

Solucin de Benbrook
Azcar.................454 g
Agua....................355 ml
Ir agregando el azcar mientras se calienta el agua.
Agregar como conservante 6 ml de formol para el total de la solucin o bien fenol cristalino a razn de
1 g cada 100 ml de solucin.

Posee mayor eficiencia porque recupera mayor cantidad de huevos y quistes porque posee mayor
peso especfico (p.e.1250)
Homogeneizar la materia fecal que viene en el frasco con Formol al 5% al mismo tiempo que
vamos buscando formas parasitarias macroscpicas.
Paso siguiente se debe filtrar la materia
fecal con un colador de malla fina.
La porcin que fue filtrada se la coloca en un tubo cnico y es centrifugada durante 5 minutos a
1500 rpm.
Una vez centrifugada la muestra se retiran los tubos de la centrfuga, descartando el sobrenadante
(al descartar el sobrenadante se eliminan deshechos de bajo peso especfico) y reemplazndolo
con solucin de Bembrook (solucin saturada de azcar en agua).
Homogeneizar
y
centrifugar nuevamente 5 minutos a 1500 r.p.m.
Se toma con un ansa una gota de la superficie y se la coloca entre porta y cubre para su
observacin microscpica, primero a 10X y luego a 40X

Huevos de parsitos observados por las tcnicas de flotacin en caninos y felinos

Toxocara canis

Toxocara cati

Toxascaris leonina

70u x 80u

70u x 80u

70u x 80u

Ancylostoma
60u x 40u

Trichuris

Coccidios

80u x 40u

10u x 15u

b) SEDIMENTACIN
Estos mtodos se caracterizan porque utilizan diluyentes que tienen menor peso especfico que
los huevos de parsitos, por lo tanto stos tienden a sedimentar.
- Sedimentacin simple
Utiliza agua corriente como diluyente, dado que el peso especfico del agua es 1000 por lo tanto al
tener los huevos de parsitos mayor peso tienden a sedimentar.
Homogeneizar 5 a 10 g de materia fecal en un recipiente con 100 ml de agua y filtrar.
Dejar reposar la mezcla durante 30 minutos. Descartar el sobrenadante sin mezclar el
sedimento y repetir la operacin con lquido nuevo, luego tomar una porcin del sedimento y
colocarlo entre porta y cubre. Observar al microscopio ptico a 10x y luego a 40 x.
Indicaciones: para huevos con peso especfico mayores que las soluciones de flotacin
(Cestodes).

Dipilidium
150u x 200u

Tenias sp.
45u

- Mtodo de Telleman
Este mtodo es especialmente til para poner en evidencia quistes de giardias
Reactivo de Telleman:
5gr. De cloruro de sodio
50 ml de formol 40%
950 ml de agua destilada
Tcnica:
En un tubo de centrfuga se colocan:
3 ml de materia fecal mortereada y filtrada
4 ml de reactivo de Telleman
2 ml de ter sulfrico
Se homogeiniza la muestra y luego se centrifuga por un minuto a 1500 r.p.m.
Se tira el sobrenadante y se toma una porcin del culote de la muestra.
Se toma una pequea muestra del sedimento y se coloca sobre un portaobjetos, al cual se le
agrega adems una gota de lugol, el cual tie de un color amarronado a las giardias y permite
diferenciarlas de las levaduras las cuales no se tien con lugol.
Se observa a 40 X dado que las giardias son de muy pequeo tamao (9x12u) lo cual hace que
sea imposible reconocerlas a menor aumento

10

METODO DE TELLEMAN:
Huevos de Giardias

Quistes de Giardias
9u x 12u

Forma vegetativa de
Giardias

11

ANALISIS DE ORINA
I NTRODUCCIN
El anlisis de orina es una de las herramientas de diagnstico ms importantes de las que se
dispone en la clnica de pequeos animales. Cuando se realiza correctamente, puede
proporcionar abundante informacin diagnstica y ser utilizado para evaluar la respuesta al
tratamiento de las infecciones del tracto urinario inferior
Un anlisis completo de orina consta de cuatro componentes principales:

Examen fsico: color, transparencia/turbidez, densidad.


Examen qumico: tiras reactivas, mtodo de Heller.
Examen microscpico: sedimento.
Examen microbiolgico: urocultivo.

El examen fsico y el qumico son relativamente fciles de hacer, pudiendo realizarse en el


consultorio clnico de rutina, lo que disminuye los errores por conservacin inadecuada de la
muestra.

R ECOLECCIN DE ORINA
Lo ideal es que la muestra sea tomada de la primera miccin de la maana (debido a que suele
ser la ms concentrada) y la cantidad mxima posible. La orina recin recogida, no es
necesariamente recin formada, y sta lleva varias horas almacenada en la vejiga pudiendo
sufrir cambios antes de ser expulsada.
La orina se puede recolectar por miccin espontnea (chorro medio), compresin manual
(chorro medio), sondaje uretral o (cateterizacin) y cistocentesis. Siempre es preferible la
utilizacin de contenedores estriles, aun cuando no se requiera cultivo, para evitar la
contaminacin bacteriana que acelera la descomposicin. Es muy importante remitir en el
protocolo de la muestra cmo fue obtenida la misma, lo que es muy valioso a la hora de la
interpretacin del sedimento, y sobretodo para la correcta confeccin del informe para el
clnico.

C ONSERVACIN Y ALMACENAMIENTO
Es importante que la muestra sea procesada lo antes posible, de lo contrario ser necesaria
alguna forma de conservacin. La orina es una solucin inestable particularmente a altas
temperaturas y particularmente si es alcalina. Si se requiere para bacteriologa, debe
almacenarse sin aditivos, un mximo de 12hs a 4C antes del cultivo.
Las formas de conservacin posibles incluyen:
1. Sin aditivos.
2. Con aditivos.
a. cido brico.
b. Formaldehdo; tolueno.
1.
Sin aditivos: Siempre que el tiempo de almacenamiento sea superior a los 30 minutos,
las muestras deben refrigerarse entre 2C y 8C. La muestra debe tornar temperatura
ambiente antes de ser procesada, dado que puede alterar datos de reacciones enzimticas
tanto como la densidad (que es mayor en la orina fra)..
2.

Con aditivos:.
a.
Acido brico al 1%, slo es til para cultivo y citologa. Los resultados de pH y
densidad, no son vlidos. Tambin hay que tener presente que se pueden disolver los
cristales que precipitan en medios alcalinos como los de estruvita y uratos de amonio.
b.
Formaldehdo el cual impide el crecimiento bacteriano, ayudando a la
conservacin del sedimento (1 gota de formalina concentrada por cada 30 ml de orina).
Esta forma de conservacin permite tinciones histolgicas como hematoxilina y eosina,
pero
las tinciones Romanovsky no son recomendadas para las clulas as
conservadas.

EXAMEN FSICO DE LA ORINA

- Color
El color normal de la orina fresca es amarillo plido o mbar (resultado de los urocromos:
urobilina+urobilingeno+pptido), pero como depende de otros factores, para la correcta
interpretacin del anlisis, debe observarse conjuntamente con el resto de los resultados
obtenidos en la muestra. Puede haber enfermedad con orinas de color normal, y el color
anormal puede ser un dato relativamente inespecfico.
Los pigmentos que interfieren en la orina normal son los urocromos (producto de la
degradacin de la hemoglobina) y la urobilina (producto de la oxidacin del urocromgeno,
incoloro, que contiene azufre).
La intensidad del color depende de otros factores: del volumen de orina recogida, de la
concentracin de la misma y por lo tanto de la densidad urinaria de la muestra en cuestin.
Las causas de coloracin anormal deben ser investigadas con pruebas de laboratorio
apropiadas y examen del sedimento. Estas alteraciones pueden provenir del alimento,
medicamentos, ambiente y de las tcnicas de recoleccin.
Los colores ms frecuentes que se presentan en la prtica diaria son:
amarillo o mbar: urocromos, urobilina
amarillo oscuro: alta concentracin urinaria
azul: azul de metileno
verde: azul de metileno, cristaluria de uratos, ditiazanina.
rojo, rosa, marrn rojizo, rojo anaranjado, naranja: hematuria, hemoglobinuria, mioglobinuria,
porfirinuria, rojo congo, fenolsulfonftalena (despus de la alcalinizacin)
naranja amarillento: orina muy concentrada, exceso de urobilina, bilirrubina
amarillo-marrn, marrn verdoso: pigmentos biliares
marrn a negro: melanina, metahemoglobina, mioglobina, pigmentos biliares
marrn: metahemoglobina, melanina, heces (fstula rectourinaria)
incolora: orina muy diluida
blanco lechoso: lpidos, piuria, cristales
- Transparencia/turbidez
La orina normal tanto en perros como en gatos suele ser transparente, . Los cambios trmicos
y de pH pueden producir variaciones en la turbidez.
Segn el grado de turbidez lo informaremos de la siguiente manera: lmpido, ligeramente turbio,
turbio, intensamente turbio. Estos grados dependern de la interferencia que nos brinde la
muestra al colocarle por detrs una hoja impresa.
- Densidad ()
La densidad es la proporcin de la masa de una solucin comparada con la masa de un
volumen igual de agua.
Si bien no mide directamente la cantidad de partculas de un soluto en una solucin como la
osmolalidad, las dos determinaciones estn relacionadas. La densidad es una prueba de
utilidad clnica porque indica el grado de resorcin tubular y consecuentemente, la capacidad
renal de concentrar; la prdida de la capacidad de concentracin es uno de los primeros
signos de la enfermedad renal.
El valor diagnstico de la densidad urinaria depende del estado hdrico del paciente.
Los Intervalos de referencia normales son:
Perro: 1025-1050
Gato: 1035-1060
El filtrado glomerular es un proceso fsico y tiene una densidad de 1008-1012 (o sea la
densidad del plasma). Los riones normales pueden producir orinas ms o menos
concentradas lo que depender de la cantidad total de agua y solutos en el organismo. En
general la mayora de los solutos nitrogenados se reabsorben, produciendo los valores
referenciales de densidad urinaria.
La concentracin de distintas sustancias afecta la densidad en forma diferente. Las sales la
afectan considerablemente por su bajo peso molecular (PM) y el alto nmero de molculas
presentes en solucin, mientras que las protenas son molculas de mayor tamao y presentes
en menor nmero, lo que hace que su efecto sobre la densidad sea menor.
Debemos considerar la ocurrencia de perodos cortos de deshidratacin lo que puede generar
una concentracin importante de la orina, con densidades en el orden de 1065 en el perro y

1080 en el gato. Estas situaciones son mucho ms habituales que las de sobrehidratacin
donde la densidad puede ser tan baja como 1001 en ambas especies.
En general se puede decir que existe una relacin inversa entre el volumen urinario y la
densidad: a mayor volumen menor densidad y viceversa, Esto se cumple con una sola
excepcin que se da en pacientes con diabetes mellitus, los cuales tienen micciones con
grandes volmenes de orina pero la densidad urinaria es alta, esto se debe a que la molcula
de glucosa tiene una alta incidencia en la determinacin de la densidad (Figura 1)
Figura 1:

Causas de modificaciones de los valores de densidad urinaria (Figura 2):


Figura 2:

Mtodos para medir densidad:

1- Refractmetro: este instrumento mide el ndice de refraccin que sufre la luz el cual se
correlaciona con la densidad. Es el mtodo ms preciso (de los aqu mencionados) y requiere
una a dos gotas de orina. (Figura 3)
2- Urinmetro o urodensmetro: Se necesitan volumen de muestra mayores, 15 ml, y la
precisin es inferior al mtodo anterior (Figura 4)

Figura 3:

Figura 4:

3- Tiras reactivas: stas se basan en reacciones colorimtricas, pero no es un mtodo


confiable. El inconveniente que tienen es que fueron fabricadas para uso humano por lo tanto
el valor mximo de densidad que permiten leer es de 1030, por lo cual es imposible utilizar en
orinas de felinos, cuyo valor mnimo normal es 1035. NO USAR

EXAMEN QUMICO DE LA ORINA :

Se lleva a cabo mediante la evaluacin por medio de tiras reactivas de los distintos parmetros
que se mencionarn a continuacin (Figura 5). El principio bsico de las mismas es la
deteccin de la presencia de distintas sustancias presentes en la orina medibles a travs de
una reaccin colorimtrica, cuya intensidad representa una concentracin determinada de esa
sustancia que puede ser considerada o no anormal.
El anlisis de orina de rutina incluye pruebas qumicas para pH , protenas , glucosa cetonas ,
pigmentos biliares , sangre oculta y hemoglobina .
Desde la introduccin de tiras reactivas el examen qumico de la orina se ha convertido en un
procedimiento rpido , preciso y eficiente .

Figura 5:

Uso de las Tiras reactivas

- pH:
Es un parmetro muy importante que debe analizarse en la orina reciente. El pH indica la
acidez o alcalinidad de la orina. El rango total de pH es de O a 14 (cido fuerte-base fuerte),
con 7 como valor neutro, siendo el rango observado en la clnica de perro y gatos algo ms
acotado: -entre 4,5 y 8,5-.
Los Intervalos de referencia normales son:

Perro y gato: 5,5-7, si bien normalmente se encuentran entre 6 y 7 (con ms frecuencia en


perros 6,5 y en gatos 6-6,5.
El pH es un reflejo grosero del estado cido/base y est altamente relacionado con la dieta,
enfermedad y momento de la toma de muestra. Los carnvoros (alta ingesta proteica) tienen
orinas cidas; con incrementos de alimentos de origen vegetal en la dieta (sales orgnicas) es
esperable una disminucin de la acidez hasta una leve alcalinidad. Tambin vara a lo largo del
da, siendo menor la acidez luego de comer (marea alcalina).
Si bien, el pH por si solo, no permite inferir un diagnstico especfico, colabora en la
orientacin al proceso patolgico concurrente.
El incremento de la acidez urinaria (pH < a 7) puede deberse a: inanicin, fiebre, acidosis
metablica o respiratoria, hipoxemia, shock, diarrea intensa, vmitos intensos (aciduria
paradjica), cetoacidosis diabtica, azotemia grave ejercicio muscular intenso, intoxicacin con
etilenglicol, dietas acidificantes o administracin de drogas que contengan sales cidas (como
NH4Cl). Mientras que el incremento de la alcalinidad (pH > a 7) se puede deber a: cistitis
bacteriana, retencin urinaria, tendencia alcalina postprandial, alcalosis metablicas o
respiratorias, vmitos, dietas bajas en protenas y ricas en vegetales, acidosis tubular renal
(rara) o frmacos alcalinizantes. En el caso de orinas alcalinas la primer causa que debe ser
descartada es una mala conservacin de la muestra. Recordar que la orina es un excelente
medio de cultivo, por lo cual si la muestra no es refrigerada hasta el momento de ser analizada,
las bacterias ureasa positivas contenidas en la orina se multiplican y desdoblan a la urea
presente en la muestra liberando amonaco que alcaliniza el medio. El sedimento urinario es
fundamental para diferenciar una muestra con una conservacin incorrecta de una con
infeccin urinaria, ya que si bien en ambas se observar un nmero muy importante de
bacterias, en la que no fue bien conservada no se detectar la presencia de leucocitos los
cuales nos indican la existencia de un proceso infeccioso.
- Protenas:
Recordatorio fisiopatolgico
El endotelio de los capilares glomerulares se caracteriza por presentar poros de un tamao
aproximado de 70.000 daltons (Da) y estar recubierto por una sialoprotena con carga elctrica
negativa. Esta estructura de la membrana filtrante determina que el pasaje de las protenas
sea inversamente proporcional al tamao, forma y carga elctrica de las molculas proteicas.
La Ig A, protena de alto peso molecular, puede estar presente en la orina normal por que es
secretada por las clulas epiteliales del tracto urinario. Baja cantidad de albmina, es filtrada y
parcialmente reabsorbida por las clulas tubulares en condiciones normales, constituyendo el
40 a 60 % de las protenas de la orina. En contraste, las protenas con PM < 70.000 Da luego
de filtrar libremente son totalmente reabsorbidas en forma activa (endocitosis) por las clulas
tubulares proximales (regresando a sangre como aminocidos). Las clulas epiteliales del asa
de Henle, del tbulo distal y colector agregan una glicoprotena, denominada de Tamm Horsfall
o uromucoide a la orina en cantidades no detectadas (0,5 a 1 mg/dl).
La proteinuria se clasifica segn su origen en:
a) Pre-renal
b) Posrenal
c) Renal
a)

b)

Pre-renal: tambin es denominada por sobreproduccin o sobrecarga, llega a la orina


como consecuencia de elevados niveles sricos de ciertas protenas, que pasan
libremente a travs de la membrana filtrante glomerular, por ser de bajo peso molecular
(hemoglobina, mioglobina y la protena de Bence Jones producida por las clulas
neoplsicas en el mieloma mltiple). Son reabsorbidas activamente por las clulas
tubulares proximales, pero cuando este transporte se satura, por una oferta excesiva,
aparecen en orina.
Posrenal: como su nombre lo indica, es debida a las protenas que son agregadas a la
orina luego que sta sale del rin, y lo hacen desde el aparato urinario bajo y/o el
genital. En las enfermedades posrenales (infeccin baja, neoplasia, litiasis) se
encontrarn, adems de albmina, otras protenas de exudado inflamatorio con
concentraciones que pueden variar entre 30 mg/dl y 2000 mg/dl. Las muestras con
hematuria franca tendrn valores muy altos de proteinuria con un patrn similar al de la
sangre.

c)

Renal: a la proteinuria renal se la puede dividir en:


(1) Glomerular
(2) Tubular
(3) Benigna o funcional

(1) Glomerular. Como consecuencia de la enfermedad glomerular, se produce un dao en la


membrana filtrante (alteracin de los poros y/o prdida de la carga negativa de la
misma); entonces podemos hallar una proteinuria selectiva o bien una proteinuria no
selectiva. Se llama proteinuria selectiva a aquella constituida principalmente por
albminas, mientras que la proteinuria no selectiva es aquella que est compuesta
conjuntamente por albminas y globulinas de PM > 70000 Da- .
La proteinuria glomerular se relaciona ms con la naturaleza de la lesin que con el
estado de la enfermedad renal. Cuando aumenta la carga de protena filtrada, los
tbulos incrementan su reabsorcin hasta que el mecanismo se satura y la proteinuria
aparece. Este esfuerzo funcional termina por enfermar a las clulas tubulares, motivo por
el cual las protenas con PM < 70.000 Da, tampoco, podrn ser reabsorbidas
eficazmente y tambin aparecern en orina junto con las albminas (proteinuria
glomrulo - tubular).
(2) Tubular. La lesin de la clula tubular causa una disminucin en la reabsorcin de
protenas que normalmente son filtradas por el rin. Las causas pueden ser:
isqumicas, infecciosas, txicas, hipokalemia, funcional (Sndrome de Fanconi), o
necrosis tubular por escape de protena celular a la orina. Las protenas presentes son
de menor PM que la albmina (< 70.000 Da). Son alfa y beta globulinas e incluyen: 2
microglobulina (12.000 Da), 1 microglobulina (27.000 Da). La cantidad que suele
encontrarse es menor que la presente en las glomerulopatas, aproximadamente de 2 +
(100 mg/dl).
(3) Benigna o funcional. Si bien es de origen renal, es considerada no patolgica, dado su
carcter transitorio y grado leve a moderado. Suele aparecer luego de ejercicios
enrgicos, intenso calor o fro, estrs, convulsiones, fiebre, hipertensin o falla cardaca
congestiva.
Mtodos para determinar la proteinuria
Normalmente, los perros excretan 1,8 a 22 mg/kg/da de protenas por orina, lo que se traduce
en concentraciones de 50mg/dl de protena urinaria. Esto es poco significativo.
Aproximadamente la mitad de la protena urinaria es albmina procedente del rin. Recordar
que una cantidad reducida de protenas pasa el filtro glomerular pero es reabsorbida (ms del
90%) por los tbulos renales, esto hace que las protenas urinarias reflejen la funcin renal y
sean consideradas uno de los marcadores de su disfuncin. La otra mitad de la protena
urinaria (mucoprotena de Tamm Horsfall e Ig) secretada procede de los tbulos distales y
colectores, del tracto urinario inferior y genital. Es por esto que un resultado traza
(aproximadamente 30 mg/dl) no es significativo. La concentracin de protenas depende,
adems, del volumen de agua excretado. Es decir que una ligera proteinuria ser ms
significativa en una muestra de orina de baja densidad, que en una de densidad mayor (ms
concentrada).
El estudio de la proteinuria en cantidad y composicin tiene gran importancia en el paciente
enfermo renal, por que permite: diagnosticar precozmente, diferenciar entre enfermedad
glomerular y/o tubular, facilitar la eleccin teraputica adecuada, controlar la evolucin,
reconocer enfermedades sistmicas que frecuentemente ocasionan lesin renal secundaria.
La proteinuria debe interpretarse en asociacin con la densidad urinaria y el sedimento.
Los mtodos para evaluar proteinas se dividen en :
- Cuantitativos
- Semicuantitativos
- Cualitativos: Estos mtodos permiten evaluar la proporcin de las distintas protenas
(albminas, los distintos tipos de globulinas) presentes en orina, as como tambin la presencia

de paraprotenas (protenas de Bence Jones). Estos mtodos (electroforesis difusin en gel)


no son utilizados rutinariamente en la evaluacin de la proteinuria.
- Cuantitativos:
- Proteinuria de 24hs: este mtodo muy utilizado en medicina humana no es
empleado en veterinaria debido a que resulta casi imposible recolectar la orina producida por
un canino o felino en las 24hs. Este mtodo es reemplazado en medicina veterinaria por la
relacin Proteina urinaria/creatinina urinaria: en caninos normales esta relacin es < 0,3,
dudoso entre 03 0,5 y > a 0,5 es anormal. Esta relacin permite establecer en que fase de la
enfermedad renal se encuentra el paciente, y hacer un control de la evolucin de la respuesta
al tratamiento.
- Semicuantitativos (Figura 6):
- Tiras reactivas: Este estudio colorimtrico, consiste en un rea impregnada
con tetrabromofenol azul. El grupo amino de la molcula de la protenas se liga y el colorante
indicador cambia de color de verde claro a una gama de verdes ms oscuros. Esta reaccin es
totalmente pH dependiente. Es ms sensible a la deteccin de albminas. No cuantifica con
exactitud y su valor no es corroborado con un standard, por lo que resulta ser un mtodo
semicuantitativo. Pudiendo haber:
a) Falsos negativos: No detecta proteinuria de Bence Jones u otras de cadena liviana o
globulinas de bajo PM; tampoco concentracines < 30mg/d; o en orina muy diluidas.
b) Falsos positivos: cuando el pH urinario es > 8; cuando la orina esta contaminada con ciertos
antispticos como los compuestos de amonio cuaternario o clorhexidina; cuando el rea no se
ha mantenido seca (el buffer fue lavado por excesiva exposicin con orina); o en orinas muy
concentradas.
- Precipitacin de las protenas urinaria por cidos: Es una medicin
semicuantitativa por que la cantidad de precipitado o turbidez es subjetivamente graduada en 0
a 4+, por el operador. Debe realizarse en orinas lmpidas o con el sobrenadante para que la
turbidez no interfiera con la interpretacin. Entre estos mtodos se encuentran:
a- Tcnica de Heller
Es una de las tcnicas de precipitacin de las protenas urinaria por cidos. Se trata de un
mtodo semicuantitativo dado que el operador mide la cantidad de precipitado o turbidez,
subjetivamente, otorgndole valores entre 0 y 4. Debe realizarse en orinas lmpidas o con el
sobrenadante para que la turbidez no interfiera con la interpretacin.
Se coloca aproximadamente un 1 ml de cido ntrico concentrado en un tubo de ensayo y luego
por las paredes del tubo inclinado se coloca 1ml de orina. Las protenas forman un anillo
blanquecino y algodonoso en la interfase. , El espesor del halo da una idea subjetiva de la
cantidad de protenas. Debe diferenciarse del halo blanco escamoso y refringente que
corresponde a la precipitacin de cristales (y que no tienen valor diagnstico). Este sencillo
mtodo puede realizarse en el consultorio para tener una primera aproximacin a la proteinuria
Figura 6:

Mtodos para cuantificar la proteinuria


1) M
Mtodos semicuantitativos:
semicuantitativos:
HELLER: cido ntrico concentrado
Orina

Acido ntrico

TIRAS REACTIVAS

Siempre que evaluemos proteinuria por m


mtodos
semicuantitativos debemos correlacionar dicho valor con
la densidad de esa muestra

b- Tcnica cido sulfosaliclico (SSA) al 3%


Es tambin, al igual que la anterior, una tcnica de precipitacin de tipo semicuantitativa.
Se coloca 3 ml del reactivo en un tubo de ensayo ms 1 ml de orina.
A diferencia del mtodo de Heller, s se compara el grado de turbidez con un testigo, realizado
con distintas concentraciones de albmina, pudindose as, realizar una estimacin ms
exacta. Los falsos positivos ocurren con orinas que contienen: medio de contrastes, penicilinas,
cefalosporinas, miconazoles, sulfonamidas o sus metabolitos, o en orinas no centrifugada.
Si bien ambos mtodos son muy sensibles a la albmina, tambin detectan globulinas y
glicoprotenas.
La comparacin de los resultados por tiras reactivas y precipitacin por cidos podra ayudar a
diferenciar albuminas de las globulinas de bajo peso molecular.
c- Precipitacin de las protenas por calor:
Este mtodo se utiliza para poner en evidencia la presencia de protena de Bence Jones
(mieloma mltiple), la cual no puede evidenciarse con las tiras reactivas ni por accin de
cidos. Esta protena tiene la caracterstica que precipita a 60C, pero por encima y por
debajo de esa temperatura vuelve a disolverse, por lo tanto lo que debe hacerse es llevar al
abrigo de la llama un tubo con orina y se deja que llegue a ebullicin; si durante el transcurso
del calentamiento la muestra no precipita indica la ausencia de dicha protena, dado que si
fuese positiva debera haber precipitado al llegar a 60C. Es importante remarcar que si bien
este mtodo puede evidenciar la presencia de protena de BJ no es un mtdo muy sensible por
lo cual en caso de dar negativo no puede descartarse su presencia y se hace necesario realizar
una corrida electrofortica de la muestra para confirmar o descartar la positividad. (Figura 7)
Figura 7:

Prote
Protena de Bence Jones

- Glucosa:
La glucosa es filtrada en el glomrulo y luego totalmente reabsorbida por las clulas tubulares,
por lo tanto no se la detecta en orinas normales. Aparece glucosuria cuando la glucosa en
sangre es superior al umbral renal, en los perros: 180 mg/dl y en los gatos: 290mg/dl (en los
gatos diabticos podra ser menor, alrededor de los 200 mg/dl).
La glucosuria puede estar asociada a procesos:
- No patolgicos: por ejemplo: excitacin o stress en felinos o a la administracin de soluciones
glucosazas.
- Patolgicas: dentro de los mecanismos anormales asociados a proteinuria es muy importante
verificar si cursa con o sin hiperglucemia:
- Sin hiperglucemia: en este caso el problema primario radica en el rin el cual no puede
reabsorber la glucosa que filtr por el glomrulo (necrosis tubular aguda, sindrome de Fanconi)
- Con hiperglucemia: la causa ms importante y frecuente de glucosuria con hiperglucemia
es la Diabetes Mellitus, pero tambin se debe tener en cuenta el hiperadrenocorticismo y la
pancreatitis aguda.
Se mide con tiras reactivas, la mayora de las mismas se basan en el mtodo de glucosa
oxidasa. Es muy especfico y sensible.
- Cuerpos cetnicos:
Los cuerpos cetnicos no deberan estar presentes en la orina de pacientes normales. La
excesiva formacin de cetonas proviene de la oxidacin acelerada de los cidos grasos como

fuente de energa. Por lo tanto es posible encontrarlos en orinas de animales diabticos con
descompensacin metablica, pero tambin en perros y gatos en estado de inanicin o ayuno
prolongado.
Se mide con tiras reactivas, es ms sensible para el cido acetoactico y dbilmente sensible
para la acetona, no reacciona con el cido -hidrxibutrico.
- Sangre:
Mediante la utilizacin de tiras reactivas podemos obtener una reaccin positiva de distinta
intensidad, cuando tengamos en orina, hematuria (sangre entera), hemoglobinuria o bien
mioglobinuria (hemoglobina o mioglobina libres en orina).
Se puede establecer la diferencia entre presencia de glbulos rojos o pigmentos con la
centrifugacin de la muestra, donde dicho procedimiento permite la sedimentacin de los
eritrocitos, mientras que los pigmentos no precipitarn (Figura 8)
Figura 8:

Sangre /Hemoglobina:
Hematuria

Hemoglobinuria

Causas de hematuria pueden ser, patologas que asienten en cualquier punto del tracto urinario
como: inflamacin, litiasis, traumas, neoplasias; patologas a nivel renal como: leptospirosis
aguda, parsitos (dioctophyma renale), necrosis tubular aguda, glomerulopatas, etc.
La hemoglobinuria estar presente cuando haya lisis de los glbulos rojos, por lo tanto puede
acompaar a la hematuria. Patolgicamente el proceso por el cual puede detectarse
hemoglobinura es la anemia hemoltica con lisis intravascular de los eritrocitos; recordar que en
condiciones normales la hemoglobina no filtra por el glomrulo dado a que circula unida a una
protena de alto peso molecular (haptoglobina), pero en procesos de hemlisis intravascular la
destruccin masiva de los eritrocitos dentro de los vasos sanguneos libera una excesiva
cantidad de hemoglobina, la cual satura la cantidad de haptoglobina circulante y ese exceso
que no puede ligarse a la protena filtra por el glomrulo, siendo en parte reabsorbida a nivel
tubular, pero el exceso que no puede reabsorberse aparecer en orina, dando positiva la
hemoglobinuria.
La presencia de mioglobina en sangre es consecuencia de la rabdomilisis debida a isquemias,
traumatismos o toxemias.
- Bilirrubina:
La bilirrubina no conjugada o indirecta (segn al reaccin de Van den Bergh) circula unida a
albmina y no es filtrada por el glomrulo. La bilirrubina conjugada (o directa), soluble en agua,
es la que aparece en orina. En perros sanos, y sobretodo machos, es posible detectar 1 o 2
cruces en orinas de 1020; mientras que en felinos, la bilirrubinuria es siempre patolgica.
Estas diferencias entre las especies son debidas a que los caninos poseen sistemas
enzimticos capaces de degradar la hemoglobina en las clulas tubulares renales y a esto se le
suma que los tbulos renales tiene un umbral resortivo reducido para la bilirrubina. Los felinos,
en cambio, carecen de tal capacidad y adems la resorcin tubular es 9 veces mayor (que en
los perros).
Las causas de bilirrubinuria pueden ser por cuadros de emaciacin y fiebre, hemlisis
intravascular, prdida de la funcin heptica, obstruccin del flujo biliar. Tener presente que los
metabolitos de la clorpromazina pueden dar falsos positivos, en cambio la presencia de niveles
elevados de cido ascrbico o de nitritos (en casos de infeccin del tracto urinario), pueden dar
falsos negativos.
Se mide con las tiras reactivas mediante una reaccin colorimtrica, que se basa en la
formacin de una sal con la bilirrubina en un medio cido.

- Urobilingeno:
La bilirrubina conjugada que se excreta por el intestino, es convertida a urobilingeno incoloro
por las bacterias anaerobias. Una pequea porcin (10- 15%) de este urobilingeno, es
reabsorbida llegando al hgado a travs de la vena porta; de esta, la mayora es reexcretada en
la bilis, mientras que el resto (20% de lo reabsorbido) es lo que finalmente se elimina por orina.
Algunos autores consideran que esta determinacin, carece de utilidad diagnstica. El
urobilingeno es muy inestable, oxidndose a urobilina en orinas expuestas a la luz dando un
resultado falso negativo, por lo que es muy importante que las muestras sean frescas, y por su
puesto, correctamente remitidas. Otras causas de su disminucin en orina ser la obstruccin
biliar, poliuria. Se puede hallar un incremento del mismo en orinas alcalinas (falso positivo), en
hemlisis intravascular, prdida de la funcin heptica, tambin como incremento de la
fermentacin bacteriana intestinal.

E XAMEN DEL SEDIMENTO URINARIO :


El sedimento en condiciones ideales debe ser observado dentro de los 30 minutos de obtenida
la muestra. De no ser posible, se recomienda que la misma sea refrigerada por un tiempo no
mayor a las 4 horas. Esto evitar los cambios producidos por las alteraciones de pH debido a la
prdida de CO2, la proliferacin bacteriana y la consecuente lisis de clulas y de cilindros, y la
disolucin o precipitacin de cristales.
Mtodo para la observacin del sedimento
Homogenizar la muestra de orina (por ejemplo, por inversin) y colocar un volumen estndar
(de 5 ml) en un tubo de centrfuga limpio y seco. Proceder a la centrifugacin de la muestra
durante 5 minutos a 1000- 2000 rpm (no debe centrifugarse la muestra a mayores revoluciones
para evitar la lisis celular). Descartar el sobrendante (o bien conservarlo para otros anlisis),
dejando 0,5 ml de orina para resuspender el sedimento (agitando el tubo). Transferir una gota a
un portaobjeto, colocar un cubreobjetos por encima y observar al microscopio. Se hace una
observacin a pocos aumentos con objetivo de 10x para determinar cantidad de sedimento y
encontrar elementos de mayor tamao como cilindros y clulas; para detectar la presencia de
bacterias e identificar algunos cristales y diferente tipos celulares es necesario utilizar objetivo
de 40x.
En el sedimento urinario se pueden encontrar:
A- CLULAS:
- Epiteliales
- Eritrocitos
- Leucocitos
- Neoplsicas
1- Clulas epiteliales (Figura 9)
Clulas epiteliales escamosas: Son las clulas de mayor tamao, de contorno irregular, solas o
en hojas. Tienen un citoplasma abundante y aplanado con un pequeo ncleo redondo. Uno o
ms ngulos de las clulas pueden estar plegados. Derivan de la capa superficial de la uretra y
de la vagina. No se encuentran normalmente en muestras obtenidas por cistocentesis. Las
clulas epiteliales escamosas pueden encontrarse en grandes cantidades especialmente se la
muestra pertenece a una hembra. No son consideradas de importancia diagnstica.
Clulas epiteliales transicionales: Pueden ser redondas, ovaladas, en forma de huso y
caudadas, de tamao intermedio entre las clulas epiteliales escamosas y las clulas renales.
Tienen textura granular y ncleo pequeo. Derivan de la uretra, vejiga, urteres y pelvis renal.
Se considera normal de 0 - 1 clula epitelial de transicin por campo de mayor aumento (40x).
La presencia de gran nmero de estas clulas puede indicar condiciones inflamatorias,
cateterizacin o un proceso patolgico, algunas veces de tipo maligno.
Clulas epiteliales renales: Son clulas pequeas, redondas con un solo ncleo, algo ms
grande que los leucocitos. Son difciles de identificar, es ms fcil hacerlo cuando se incorporan
a los cilindros epiteliales. Las clulas renales aumentan en nefritis intersticial aguda (pero
generalmente son poco reconocibles).
Figura 9:

Clulas escamosas
descamativas
50 60u

Clulas transicionales
20 -30u

Clulas renales
10 -40u

Clulas pelvis renal


20 -30u

2- Eritrocitos:
La forma de los glbulos rojos (GR) vara de acuerdo a la densidad de la orina. En orinas
frescas con una densidad de 1010 - 1020 se observan como clulas pequeas (6 -7 u de
dimetro), de color amarillo plido. En orinas muy concentradas los GR se crenan y se ven
con bordes erizados. En orinas muy diluidas o alcalinas los GR se hinchan, se lisan y liberan
la hemoglobina por lo cual aparecen incoloros vindose como formas fantasmales.
Los GR deben diferenciarse de los glbulos blancos, gotas de grasa y levaduras. Los eritrocitos
son ms pequeos que los leucocitos y no poseen estructura interna. Los GR no varan de
tamao, mientras que las gotas de grasa son de tamaos variables y normalmente se
encuentran justo por debajo del cubreobjetos. Las levaduras por lo general no se observan en
orinas frescas, pero cuando estn presentes son de forma variada pueden encontrarse en
gemacin.
El sedimento de orina contiene habitualmente menos de 2 - 3 eritrocitos por campo de mayor
aumento. Cuando superan ese nmero indican sangrado de alguna porcin del tracto
urogenital.
3- Leucocitos:
Tienen dos veces el tamao de los glbulos rojos y son ms pequeos que las clulas
epiteliales. Puede distinguirse el ncleo, pero generalmente est degenerado observndose
granulado (piocitos). Normalmente podemos encontrar de 0-1 por campo de 40x; ms de 2-3
leucocitos indica inflamacin en algn punto del tracto urinario o genital. La presencia de
glbulos blancos no localiza la lesin, a menos que se observen cilindros leucocitarios que son
indicativos de origen renal. Cuando el nmero de glbulos blancos es alto se recomienda
realizar el cultivo de la orina.
4- Clulas neoplsicas:
Son de forma y tamao variables. Si se observa gran cantidad de clulas epiteliales con
diferentes formas y tamaos se deben hacer extendidos del sedimento, secarlos al aire,
teirlos con tinciones hematolgicas y luego observarlas al microscopio.

B- CILINDROS:
Se forman en la luz de los tbulos distales y colectores de los riones , .La concentracin
aumentada y la acidez de la orina en los tbulos promueven la precipitacin de proteinas
secretadas a este nivel. Los cilindros se pueden clasificar de acuerdo a su contenido, lo que
puede ayudar a caracterizar el tipo de lesin renal.El tamao est determinado por el dimetro
de la luz de los tbulos. Por ello, los cilindros formados en la luz de los colectores suelen ser
de mayor tamao que los formados en el Asa de Henle o en los tbulos distales. Al ser
retenidos en los tbulos por un tiempo variable previo a su eliminacin, las clulas y
estructuras que se les han adherido suelen encontrarse en proceso de desintegracin.
El pH urinario y la densidad alteran la morfologa de los cilindros, es por ello que son difciles
de observar en orinas alcalinas. El procesamiento de la muestra tambin puede afectar el
diagnstico de cilindruria puesto que una excesiva centrifugacin puede destruir aquellos muy

frgiles y confundir sus fragmentos con cristales amorfos, los cuales generalmente son menos
cilndricos ms refrctiles.
Las orinas normales no contienen cilindros o los presentan en muy poca cantidad. Ms de uno
por campo de 40x en orinas moderadamente concentradas, es un signo de localizacin de una
enfermedad renal activa.
La cantidad de los mismos no es indicativo de la gravedad, duracin, reversibilidad o
irreversibilidad de la enfermedad. Un alto nmero siempre implica enfermedad renal activa
generalizada que puede ser reversible o no, no obstante, un nmero escaso de los mismos
puede representar enfermedad renal generalizada crnica.
Podemos encontrarlos ante una leve irritacin renal, en cuadros febriles, ejercicio intenso o
perfusin renal escasa.
Teora de la formacin de los cilindros:
Las clulas epiteliales del Asa de Henle, tbulos contorneados distales y tbulos colectores
producen una mucoprotena llamada de Tamm Horsfald, la cual dadas las condiciones de
mxima acidez y concentracin de la orina precipita en la luz de los tbulos conformando una
matriz mucoproteica sobre la cual se depositan distintos elementos que puedan estar presentes
en la luz tubular (leucocitos, clulas epiteliales, proteinas filtradas, etc) dando lugar a los
distintos tipos de cilindros presentes en la orina. (Figura 10)
Figura 10:

Formaci
Formacin de los Cilindros
Matriz mucoproteica secretada por las c
clulas
epiteliales del Asa de Henle,
Henle, TCD y tubos colectores

PROTEINA DE TAMMTAMM-HORSFALL
Mxima acidez y
concentraci
concentracin de
orina

Prote
Protena precipita

A.Henle
T.C.D
T.Colect.

Cualquier material presente en la luz tubular se


incorpora a la matriz proteica: c
clulas, prote
protenas

Los distintos tipos de cilindros que pueden encontrarse en orina son:


Cilindros hialinos: Formados por protenas que filtraron por el glomrulo y que precipitan
sobre la matriz mucoproteica formada. Son incoloros, homogneos, semitransparentes.
Son estructuras cilndricas, con bordes definidos, paralelos y bordes redondeados. Son
muy solubles en orina alcalina. Se distinguen por observacin en un campo bien
oscurecido dado que su ndice de refringencia es casi idntico al medio circundante. Los
cilindros hialinos indican la forma ms leve de irritacin renal. Pueden encontrarse en la
orina normal. Aparecen en estados febriles, despus de una anestesia, despus de un
ejercicio extremo y por trastornos circulatorios (deshidratacin). Son los nicos que
aparecen sin que exista lesin tubular renal. Normal: 0 2 cilindros/campo
Cilindros granulares: son los ms frecuentes de encontrar en el sedimento de orina. Son
cilindros que contienen grnulos finos o gruesos, los cuales derivan principalmente de la
desintegracin de las clulas epiteliales tubulares. Si se los encuentra en un primer
perodo, el material desintegrado forma grnulos gruesos, dando lugar a los llamados
cilindros granulosos gruesos; si el proceso contina, estos grnulos se tornan ms
pequeos dando lugar a los cilindros granulosos finos. Estos cilindros indican un grado ms
severo de enfermedad renal que los hialinos, porque representan la desintegracin del
epitelio tubular renal. Se encuentran en nefritis y en infartos. Normal: 0 1 cilindros/campo.
Cilindros epiteliales: Se forman por clulas descamadas del recubrimiento epitelial de los
tbulos renales, generalmente se observan dos hileras de clulas epiteliales. Se forman por
descamacin de clulas tubulares que no se han desintegrado. Se los encuentra en nefritis
aguda y en degeneracin del epitelio tubular.
Cilindros cereos: representan el estado final de degeneracin de los cilindros granulosos e
indican una degeneracin tubular crnica. Son similares a los hialinos, incoloros pero son

ms anchos, con extremos cuadrados, son altamente refrctiles y homogneos, y


presentan fisuras en su superficie.
Cilindros grasos: Contienen grnulos de grasa, son muy refringentes. Son incoloros pero se
tien de anaranjado o rojo con el colorante Sudan III. Se los encuentra en enfermedad
tubular degenerativa asociada con deposicin de material lipoideo en los tbulos renales.
Pueden observarse en gatos con enfermedad renal por lipuria y en perros con diabetes
mellitus.
Cilindros sanguneos: Se presentan como una masa cilndrica homognea de color amarillo
o anaranjado. Los cilindros eritrocticos hialinos son de color amarillo anaranjado profundo
y en sus mrgenes pueden observarse eritrocitos incorporados en el cilindro. Estos
cilindros representan hemorragias en los tbulos renales o severa glomerulonefritis. Si
estos cilindros persisten se recomienda realizar un urograma excretor, ultrasonido renal y/o
pruebas de coagulacin.
Cilindros leucocticos: Son cilindros hialinos con leucocitos adheridos a su matriz. Se
presentan en asociacin con la inflamacin que afecta a los tbulos renales. Indican
proceso supurativo en el rin, pielonefritis o absceso renal.
Cilindro teido con bilis: Cualquier cilindro puede pigmentarse con bilis cuando hay grandes
cantidades de bilirrubina.

C- MICROORGANISMOS:
Los microorganismos que con frecuencia se encuentran en la orina son bacterias , hongos y
levaduras . La orina normal est libre de microorganismos, pero puede contaminarse durante la
miccin por contacto con la vagina, vulva o prepucio .
La orina normal recogida por cistocentesis o cateterizacin no contiene bacterias.
Las bacterias se registran como escasa , moderado o abundante cantidad. Un gran nmero de
bacterias acompaado por un nmero importante de leucocitos indica una infeccin del tracto
urinario o genital con inflamacin .Cuando las bacterias se encuentran sin leucocitos
acompaantes se considera muestra contaminada ya sea por mal manejo en el mtodo de
recoleccin de la orina o su mala conservacin .

Bacterias: A mayor aumento las bacterias se ven como pequeos objetos que efectan
movimientos verdaderos o movimientos brownianos. Tienen escasa importancia si la orina
se recolect en forma sptica. Si se observa gran cantidad en orinas obtenidas por
cateterizacin, chorro medio o paracentesis, sugiere una infeccin bacteriana en alguna
parte del aparato urinario, generalmente en vejiga urinaria. Tambin pueden observarse
bacterias por metritis, vaginitis o prostatitis.
Levaduras: Son estructuras redondas u ovoides de tamao variable, ms grandes que
bacterias pero ms pequeas que leucocitos, incoloras. Existen en la orina como
contaminantes.
Hongos: Hifas definidas, segmentadas y pueden estar coloreadas. Son contaminantes
frecuentes.

D- PARSITOS:
Los huevos de parsitos encontrados en el sedimento urinario , pueden ser parsitos que
afecten al sistema urinario o contaminacin fecal de la muestra de orina. Pueden encontrarse
huevos de:
Dioctophyma renale
Capillaria plica
Dirofilaria immitis
Por contaminacin con materia fecal pueden encontrarse Giardias y otros parsitos.
E- ESPERMATOZOIDES:

Son fcilmente reconocibles por su estructura caracterstica y tienen poca significancia. La


presencia de estas clulas indica contaminacin urinaria con semen y no es inusual encontrar
una pequea cantidad de protena en muestras de orina que contengan espermatozoides.
F- GRASA
Las gotas de grasa se ven redondas, altamente refringentes y de diferentes tamaos. Se tien
de naranja o rojo con el colorantes Sudan III.
En la mayora de los gatos se encuentra cierto grado de lipuria, la cual puede deberse a la
metamorfosis de los tbulos renales.
Pueden estar presentes por obesidad, dieta rica en grasas, hipotiroidismo, diabetes mellitus
G- CRISTALES:
La mayora de ellos no tiene significacin diagnstica. Su clasificacin puede basarse en su
morfologa, su solubilidad en lcalis cidos, su solubilidad al calor, y ms especficamente,
por pruebas qumicas.
La refrigeracin de la orina tiende a promover la formacin de cristales, puesto que la
solubilidad de algunos tipos est estrechamente relacionada con la temperatura.
La evaluacin de la cristaluria puede aportar datos que adhieran a:
-

La deteccin de desrdenes predisponentes a la gnesis de una urolitiasis.

Estimacin de la composicin mineral de los urolitos.

Evaluacin de la efectividad de los protocolos mdicos instaurados para disolver o prevenir


la urolitiasis.

Los cristales se forman en orinas que se han saturado con sustancias cristalognicas.
Representan un factor de riesgo para la formacin de urolitiasis, no obstante su deteccin no
es sinnimo de la misma, puesto que en pacientes con funcin renal normal son eliminados
antes de que adquieran un tamao que implique dao patolgico.
CRISTALES EN ORINAS ACIDAS (Figura 11)
Los ms comunes son: Acido rico, Uratos amorfos y Oxalato de calcio .
Uratos amorfos: son similares a los fosfatos amorfos , aparecen como precipitado granular
pero los diferencia el pH
Oxalatos de calcio : pueden aparecer tambin en pH neutro o alcalino , tienen forma de
cuadrados pequeos con lneas que lo cruzan en forma diagonal y forman estructura en forma
de sobre .( dihidrato) Los cristales de oxalato clcico monohidrato son estructuras alargadas,
planas con extremos terminados en punta , en animales intoxicados con etilenglicol pueden
aparecer en la orina en forma abundante.
En forma anormal pueden aparecer en orinas cidas cristales de.
Bilirrubina
Leucina
Tirosina
Cistina
Cristales de bilirrubina: la bilirrubina precipita en la orina en forma granular o de finas agujas
agrupadas, de color amarillo-rojiza. Pueden observarse en orinas altamente concentradas de
perros normales. Cuando se encuentran en grandes cantidades en la orina pueden sugerir una
anormalidad en el metabolismo de la bilirrubina.
Cristales de Cistina: se los encuentra en orinas cidas de animales con cistinuria debido a un
defecto metablico en el transporte de la cistina y otros aminocidos a travs de los tbulos
renales. Poseen forma de platos planos hexagonales.
Los animales quedan propensos para el desarrollo de urolitos de cistina.

Cristales de Tirosina y Leucina: los cristales de tirosina aparecen como finas, refrctiles e
incoloras o amarillentas agujas agregadas. Los de leucina son esferas grandes con
estriaciones concntricas. Son raros de hallar en orinas de perros y gatos. Ambos slo se
observan en orinas patolgicas asociadas a hepatopatas severas.
CRISTALES EN ORINAS ALCALINAS (Figura 12) :
Encontramos fosfatos amorfos , fosfatos triples, uratos de amonio y carbonatos de
calcio .
Fosfatos amorfos : grnulos en masa , incoloros .
Fosfatos triples : (o estruvita ) tienen en su composicin amonio , magnesio , fosfato.
Se encuentran en pequeo nmero en orinas de perros y gatos normales.. Presentan forma de
prismas con extremos oblicuos en forma de tapa de atad . En otras ocasiones pueden adquirir
foma de helecho, especialmente cuando la orina tiene una alta concentracin de amonaco.
Tambin pueden encontrarse en casos de urolitiasis de estruvita, asociadas normalmente a
infecciones por Staphylococus. En otros casos se acompaa de una reaccin inflamatoria con
un sedimento rico en leucocitos, bacterias clulas descamativas.
Carbonatos de calcio: se presentan en formas de esferas ovaladas con lneas que irradian
desde el centro y en forma de pesas de gimnasia .
Uratos biurato de amonio : son marrones y redondos con espculas largas , stas pueden
romperse y verse pequeos cristales con lneas de radiacin. Aparecen en los shunt porto
cava.

Figura 11:

Cristales que precipitan en orinas ACIDAS

Acido rico

Uratos amorfos

Oxalato calcio

Leucina
Tirosina

Cistina
Bilirrubina

Figura 12:

Cristales que precipitan en orinas ALCALINAS

Fosfato triple amonio y


magnesio (estruvita)

Carbonato calcio

Fosfatos amorfos

Biurato de
amonio

Cuadro que resume las caractersticas principales de las cristalurias:


Cristales

Significacin pH

Color

Se disuelve
con

No se
disuelve
Ac. Actico,
clorhdrico
Calor

Ac. Urico

cida

Amarillo

Hidrxido de
sodio

Uratos
amorfos

cida

Rosados

Calor

Oxalato de Ca

Intoxicacin
por
Etilenglicol

cida, neutra Incoloros


o alcalina

Ac. clorhdrico

Ac. Actico

Ac. Hiprico

Incierto

cida, neutra Incoloros


o lig. Alcalina

Ac. Actico

Carbonato de
Ca

Raro en
Alcalina
perros y gatos

Incoloros

Ac. Actico

Fosfato triple

Normales

Alcalina,
neutra o lig.
cida

Incoloros

Ac. Actico

Fosfatos
amorfos

Normal o
asociado a
litiasis

Alcalina

Incoloros

Ac. Actico

Urato
Biurato de
amonio

Anastomosis
porto-cava

Alcalina

Amarillo

Ac. Actico

Bilirrubina

Orina
cida
concentrada o
bilirrubinuria

Amarillo o
rojo oscuro

Leucina

Enfermedad
heptica

cida

Amarillo

Hidrxido de
Na

Ac. clorhdrico
Eter

Tirosina

Enfermedad
heptica

cida

Incoloro

Hidrxido de
amonio
Ac. Clorhdrico

Ac. Actico

Sulfonamidas

Nefrosis

Cistina

Cistinuria
congnita

cida

Incoloro

Ac. Clorhdrico
Amonio

Ac. Actico

Calor

BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA SOBRE ANALISIS CLINICOS


Lecciones de Histologa
Veterinaria (tomo I)
Diagnstico microbiolgico
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Curso a distancia
Microbiologa Clnica
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Microbiologa
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Patologa Clnica
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Procedimientos de
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Exame de Urina em
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Interpretacin y diagnstico
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Citologa y Hematologa
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