Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
Enfermedades Mdicas
Prof. Titular: MV Graciela Alicia Mira
Brandi, G
Esarte. M
Fidanza, M
Gabriele, C
Gonzalez, A
Gonzalez, S
Juarez, M
Ldola, V
Mntica, F
Maubecin, E
Micciullo, V
Mira, G
Nosach, N
Pereira, M
Perez, M
Pretti, R
Regonat, M
Vartabedian. A
Vesco, C
TOMA DE MUESTRAS
El laboratorio tiene fundamental importancia en la complementacin del examen del paciente
veterinario. Los parmetros clinicopatolgicos normales y anormales rinden informacin
objetiva en el proceso del diagnstico diferencial, supervisin del tratamiento y formulacin de
un pronstico. Las muestras recolectadas en forma adecuada son un paso fundamental para
lograr confiabilidad en los datos generados y focalizan su interpretacin.
A - SANGRE:
Los puntos a tener en cuenta para lograr una muestra ptima son:
- El paciente debe estar tranquilo y para ello debe brindarse un ambiente calmo, y con la
cantidad suficiente de personal para poder manejarlo sin excitarlo.
- Un ayuno de slidos de 12 horas, ya que si no se genera una coloracin anormal del plasma
o suero, llamado lipemia que entorpece las reacciones bioqumicas (ya que muchas de ellas se
basan en mtodos colorimtricos). Si a pesar de que el animal tenga las 12 horas de ayuno, el
suero sigue estando lipmico, deber considerarse que realice un ayuno mayor, y si a pesar de
esto persiste el problema, se deber tener en cuenta que esto puede ser causa de alguna
alteracin preexistente.
- Se deber contemplar la posibilidad de realizar sedacin (con las drogas adecuadas, recordar
que el uso de acepromacina al generar esplenocontraccin altera el hemograma) en caso que
el paciente no colabore, ya que el estrs puede alterar algunos valores (por la liberacin de
corticoides endgenos y epinefrina) sobre todo en el caso de los felinos. Ej: los esteroides
generan neutrofilia, eosinopenia, monocitosis, linfopenia, y aumentos en los valores de
glucemia. La liberacin de epinefrina genera linfocitosis.
-Deben prepararse con anterioridad los materiales que van a utilizarse y tener de ms por
cualquier imprevisto. Para hematologa los tubos pueden ser de vidrio o de plstico. Para las
pruebas de coagulacin se prefiere que sean de plstico ya que el vidrio siempre presenta
alguna rugosidad que facilita el inicio de la cascada de coagulacin al activar ciertos factores.
Las muestras destinadas a las pruebas bioqumicas, deben recogerse preferiblemente en tubos
de vidrio, ya que logran una mejor retraccin del coagulo, y as, una mayor cantidad de suero.
Otros materiales a utilizar son: jeringas ( 3 ml 5 ml), agujas (preferiblemente 25/8), algodn,
cinta adhesiva, alcohol, peladora u hoja de afeitar, lazo, guantes, gradilla, bozal (segn el
animal), anticoagulantes.
-La sangre est formada por clulas inmersas en un medio de transporte llamado plasma. Entre
los elementos celulares se encuentran: glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas. Dentro del
plasma: agua, protenas, electrolitos y otras sustancias.
Antes de tomar cualquier muestra debe considerarse que determinaciones se van a solicitar.
Para realizar un hemograma o pruebas de coagulacin se utilizar un anticoagulante que evite
la activacin de los factores. Si lo que se desea es realizar pruebas bioqumicas, se recoge la
sangre en un tubo preferentemente de vidrio sin anticoagulante. El suero es el liquido que se
separa de las muestra una vez formado y retrado el coagulo. El suero se diferencia del plasma
en que no contiene varios de los factores de coagulacin.
MUESTRA DE SANGRE
Sin anticoagulante
Con anticoagulante
Suero
Hemograma
Plasma
(pruebas de coagulaci
coagulacin)
Obtenci
Obtencin de suero y plasma
SUERO
PLASMA
Sangre CON
anticoagulante
Sangre SIN
anticoagulante
Dejar coagular
Centrifugar 10
10a 1500rpm
Centrifugar 10
10a 1500rpm
Suero
Plasma +
Prot. coagulacin
Elementos formes +
protenas coagulacin
Elementos formes
ANTICOAGULANTES MS UTILIZADOS:
1) EDTA: ETILENDIAMINA TETRAACETICO ACIDO:
*Uso: hematologa
*Modo de accin: forma sales insolubles de calcio.
*Concentracin ptima: 0,02 ml (20ul) anticoagulante cada ml de sangre.
*Ventajas:
-Preserva la morfologa clulas
-Conserva la muestra al impedir el crecimiento bacteriano.
-No modifica el volumen de sedimentacin de la sangre
-Evita la agregacin plaquetaria.
-Puede usarse para determinar urea y fibringeno.
*Desventajas:
-A una mayor concentracin ejerce una presin osmtica importante extrayendo agua de los
glbulos rojos y dando una disminucin del VCM.
-No puede usarse para determinar electrolitos (sodio, potasio) dado que este anticoagulante se
presenta como sal potsica sdica.
2) HEPARINA:
*Uso: anlisis de gases sanguneos, pH sanguneo, electrolitos.
*Modo de accin: Impide la formacin y activacin de la trombina.
*Concentracin optima: se carga la jeringa a utilizar para la extraccin con heparina, luego se
reintroduce el anticoagulante en el frasco ampolla quedando las paredes de la jeringa
lubricadas con la heparina.
*Ventajas:
-Es muy difcil que se produzca la hemlisis o que se altere la presin osmtica.
*Desventajas:
-Costo.
-La coagulacin de la sangre se retrasa, no se evita.
-Puede producir amontonamiento de los leucocitos, no est indicado para hacer frotis porque
interfiere con la tincin y reduce la coloracin de los mismos.
3) FLUORURO DE SODIO Y OXALATO DE POTASIO:
*Uso: determinacin de la glucemia.
*Modo de accin: inhibe las enzimas glucolticas que desdoblan la glucosa de la sangre. Acta
combinndose con el calcio formando un compuesto insoluble, pero adems es txico
enzimtico, por lo cual se lo usa para determinar la glucemia.
*Concentracin ptima: 1 gota de anticoagulante por cada ml de sangre.
4) CITRATO DE SODIO:
*Uso: pruebas de coagulacin
*Modo de accin: se combina con el calcio para formar una sal insoluble de citrato de calcio.
*Concentracin ptima: 2 gotas de anticoagulante por cada ml de sangre.
Tambin existen tubos comerciales que ya contienen anticoagulante y una marca que indica
que cantidad de sangre se debe colocar para que la proporcin sangre anticoagulante sea la
correcta.
Vena ceflica
antibraquial
canino
Para hematologa: Lo ideal es que la muestra sea procesada lo antes posible, de no ser as
debe conservarse en la heladera (4 C) hasta el momento del procesamiento. Nunca debe
congelarse la muestra de sangre ya que esto producira la crenacin de los eritrocitos. Si se
confeccionaran frotis en el momento de la toma de muestra los mismos deben ser remitidos,
enfrentados de a 2 envueltos en papel y conservados a temperatura ambiente (Figura 5)
Figura 5:
Cuando existe la posibilidad de separar el suero de la muestra sta puede ser conservada a
4C en heladera por 4 das, en el congelador por 1 semana y a menos temperatura (-15C, 20C) por ms tiempo.
Recordar que antes de comenzar a procesar la muestra esta debe ser llevada a temperatura
ambiente.
B - ORINA:
1) Toma de muestra:
Lo ideal es recolectar la primera orina de la maana ya que es la que tiende a estar ms
concentrada, pero en medicina veterinaria esto en general no se cumple
La muestra puede recolectarse de las siguientes formas:
-Cistocentesis (Figura 6): El animal puede ubicarse en decbito esternal o en estacin. Se
realiza la correcta antisepsia de la zona y se realiza la puncin vesical (pudiendo hacerse en
forma ecoguiada no ) y se recolecta la orina. De esta forma se obtiene una muestra estril ,
siendo sta la forma ideal de obtener orina para cultivo . Puede a veces contener algo de
sangre proveniente de la lesin que genera la aguja sobre la pared de la vejiga. Para poder
realizarla, el paciente debe estar tranquilo y tener un volumen suficiente de orina en la vejiga.
Es el mtodo que evita la presencia de contaminantes y clulas del tracto urinario bajo.
Figura 6:
PUNCION VESICAL
clulas del tracto urinario bajo que nos puede llevar a errores en la lectura del sedimento. Las
tcnicas varan segn especie (perro o gato) y segn sexo (macho hembra)
a) Sondaje uretral en canino macho (Figura 7): El mismo puede realizarse con el paciente en
estacin o en decbito lateral. Con una mano debe exteriorizarse el pene fijando el prepucio a
nivel del hueso peneano. Utilizar sonda K33 para perros chicos y K30 o 31 para perros
medianos o grandes. El desplazamiento de la sonda debe realizarse con mucho cuidado para
evitar daar la mucosa lo cual puede contaminar la muestra con clulas y sangre que no
constituan parte de la composicin de la orina del paciente. Los puntos crticos para el pasaje
de la sonda son el hueso peneano y la flexura hacia dorsocraneal para llegar a la vejiga. Una
vez que la sonda est en vejiga empieza a fluir orina por la misma la cual ser recolectada con
una jeringa acoplada en el extremo de la sonda o directamente puede recogerse en un
recipiente limpio para su envo al laboratorio.
Figura 7:
Sonda K33:
Perros chicos medianos
b) Sondaje uretral en canino hembra (Figura 8): Esta tcnica es ms complicada que en el caso
del macho, dado que el orificio uretral externo se encuentra en el piso de la vagina, por lo cual
se debe emplear un vaginoscopio y adecuada iluminacin para visualizar el orificio.
Generalmente se utiliza una sonda K33 a la cual se le inserta un vstago metlico en la punta
para dar cierta resistencia a la misma y poder introducir con facilidad la punta de la sonda. Una
vez introducida el extremo de la sonda en el orificio uretral se retira el vstago metlico y sigue
introducindose la sonda hasta que comienza a fluir orina. Esta maniobra puede realizarse con
la perra en estacin o en decbito lateral.
Figura 8:
Orificio uretral
externo
c- Sondaje uretral en felino macho (Figura 9): para realizarlo debe exteriorizarse el pene y
utilizar una sonda PC 40 o una Tom Cat (que sirve para dejar fijada a la piel en caso de fludt).
Siempre debe trabajarse con sumo cuidado sobre todo ante la sospecha de una posible
obstruccin uretral, para no daar la misma. Con respecto a la hembra felina el sondaje no se
utiliza.
Figura 9
PC 40
Sonda Tom Cat
-Miccin espontnea: Se puede tomar la muestra directamente del suelo (previamente limpio)
o de la bandeja sanitaria (sin piedras) en el caso de los felinos La misma puede cubrirse con un
nylon donde el animal realizar la miccin. Esta muestra normalmente contiene contaminantes
y bacterias del ambiente, por lo que no puede ser usada para cultivo. Es importante aclararle al
dueo que no recoja la orina del piso con un algodn, ya que los elementos del sedimento
quedarn retenidos en el mismo.
Esperar a que el animal est por orinar y colocar un recipiente limpio recolectando la orina en
el tramo medio de la miccin (chorro medio), as se reduce la cantidad de contaminantes y esta
muestra puede ser utilizada para cultivo.
-Compresin vesical: Esta maniobra generalmente se realiza en felinos; se comprime
suavemente la vejiga para estimular al animal a que orine y que se venza la presin del
esfnter uretral interno y se recoje la muestra por chorro medio o desde la camilla. Tener
cuidado ya que una excesiva presin puede generar lesiones en la pared con sangrado o
producirse la ruptura total. Esta maniobra est contraindicada ante una sospecha de
obstruccin uretral.
2) Recipiente (Figura 10)
La muestra debe ser recolectada en un recipiente perfectamente limpio o en jeringa jeringa. Lo
ideal es que el recipiente sea estril (en el caso de solicitarse un cultivo) ya que as se reduce
la presencia de bacterias, las que pueden degradar sustancias (como por ejemplo la glucosa),
o modificar el pH.
Es ideal que el recipiente est bien cerrado, para evitar la prdida de CO2 que modificar el pH
y prevenir la evaporacin de sustancias voltiles como por ej. las cetonas.
Tambin es recomendable que el recipiente sea opaco para reducir la incidencia de la luz y
prevenir la fotodegradacin de elementos como la bilirrubina.
Evitar el uso de frascos reciclados que pueden contener contaminantes o residuos de jabn o
detergente los que alterarn las reacciones enzimticas y qumicas del examen qumico.
Conservaci
Conservacin y remisi
remisin de orina
3) Conservacin:
La muestra una vez obtenida debe guardarse en la heladera hasta el momento de su
procesamiento (para evitar el sobrecrecimiento bacteriano que puede alterar algunos
parmetros de la muestra).
Cuando se va a procesar, debe llevarse a temperatura ambiente ya que el frio puede hacer
cristalizar algunas sustancias y pueden as aparecer cristales que no se observarn con la
orina temperatura ambiente.
Es ideal que la orina sea procesada dentro de las 24 hs de extrada para evitar cambios
qumicos y citolgicos.
4) Rotular la muestra, acompaarla con el protocolo correspondiente, indicando la forma de
obtencin de la muestra.
Figura 10:
C- MATERIA FECAL:
Para la realizacin de un buen estudio coproparasitolgico, lo que se debe hacer es lo
siguiente:
Juntar dentro de un frasco conteniendo formol al 5% una pequea porcin de cada deposicin
que realice el animal durante un perodo de 3 a 5 das. El formol 5% es uno de los fijadores ms
usados en donde los huevos y quistes se conservan por tiempos prolongados.
Preparacin del formol al 5%: se parte del formol al 40% (al cual se considera como 100%) y se
mezclan 5cc de formol al 40% con 95cc de agua de la canilla.
Utilizar un frasco de boca ancha y limpio. Es importante que el formol cubra la totalidad de la
materia fecal, ya que sino la muestra no cumple con las condiciones ptimas de conservacin
produciendo errores en el resultado.
Deben tomarse varias muestras y en diferentes momentos del da ya que la eliminacin de
huevos por materia fecal no se da en todas las deposiciones y puede variar el momento del da
en que son expulsados.
Rotular la muestra.
D- PUNCIN GANGLIONAR:
Todo linfondulo que est aumentado de tamao o con su consistencia modificada debe ser
punzado.
Debe evaluarse, en primera instancia, que ganglios se van a punzar. Si varios ganglios
aparentan ser patolgicos, se debera punzar por lo menos dos de ellos alejados entre s.
Cuando el ganglio est muy grande, ser mejor elegir otro de menor tamao, ya que
probablemente al estar tan aumentado la irrigacin no llegue al centro del mismo y comiencen
a producirse fenmenos de necrosis en la zona central que pueden perturbar la lectura
citolgica.
Se prefiere no elegir para punzar los ganglios submaxilares ya que normalmente al estar
relacionados con el drenaje linftico de la regin de la boca puede obtenerse material
inflamatorio o hiperplsico, ya que muchos de los pacientes presentan infecciones o lesiones
en la cavidad orofarngea.
Preparar el material a utilizar en forma previa: portaobjetos, agujas (25/8), jeringas (3ml, 5ml),
algodn,)
Colocar bozal y posicionar al animal segn el rea a punzar (estacin, decbito lateral, decbito
esternal, etc), si el animal presenta mucho pelo, puede depilarse previamente el rea.
Tomar firmemente el ganglio con una mano entre el dedo pulgar e ndice y con la otra mano
sostener la jeringa acoplada a la aguja y punzar el ganglio (Figura 11). Una vez insertada la
aguja, mover el mbolo de la jeringa (aspirando) y mover la aguja en forma de abanico dentro
del ganglio. Esto garantiza una mayor proporcin de clulas en el preparado.
Quitar la aguja, llenar la jeringa con aire, volver a colocar la aguja y expulsar el aire de la
jeringa empujando el mbolo, realizarlo apuntando el bisel de la aguja hacia un portaobjeto
apoyado en la mesa. As las clulas que se obtuvieron de la puncin aspiracin sern
expulsadas desde dentro de la aguja hacia el portaobjeto. Con otro portaobjeto se extender el
material y se secar al aire. Esto se denomina PAAF (puncin aspiracin con aguja fina).
Figura 11:
En el caso de que el material obtenido sea sangre o est contaminado con sangre, deber
repetirse, ya que en el extendido el material sanguneo nos dificultar el diagnstico.
Otra opcin es el PAF (puncin con aguja fina sin aspiracin). Solo se diferencia en que en
lugar de punzar con aguja ms jeringa, slo se punza con la aguja y se la mueve en forma de
abanico. Luego con una jeringa llena de aire se expulsa lo obtenido en la aguja sobre un
portaobjeto.
Una vez que el material est seco, se deber rotular y se puede o fijar y teir o acondicionar
para su envo al laboratorio.
E- HISTOPATOLOGA
Los tres pilares sobre los que asienta un correcto diagnstico histopatolgico son la toma de
muestra, la fijacin y el procesamiento de la misma.
1- Fijador utilizado: si bien no es el nico, el ms corriente es el Formol al 10%, que se
obtiene al agregarle a una parte de Formol al 40%, nueve de agua destilada. An no siendo el
mejor fijador, rene ciertas condiciones tales como bajo precio, fcil preparacin, gran poder de
penetracin, endurecimiento rpido de los tejidos y conservacin de los lpidos.
En cuanto a las bolsas, se usan las de conservacin de alimentos para freezer, las que vienen
en varios tamaos y son tiles para enviar piezas completas de gran volumen. Como
desventajas pueden mencionarse que el cierre de las mismas no es hermtico y debe
asegurarse con tela adhesiva y tambin la poca estabilidad (equilibrio) que poseen.
3- Volumen del fijador: diez a veinte veces el de la muestra. Recordar que primero se
coloca el fijador y luego la muestra y no lo contrario, ya que debido a que el peso especfico de
las muestras es mayor que el del fijador, estas van a depositarse en el fondo del recipiente ,
demorando la fijacin en esa superficie de contacto. Una excepcin a esto son las piezas que
contienen tejido adiposo que tienden a flotar en el formol, por lo que es imprescindible
colocarles encima una gasa o algodn a modo de pesa.
4- Tamao de la muestra: el ideal es de 1 x 1 cm, dado que el formol tiene un poder de
penetracin de un centmetro en 24 horas. Sin embargo, en la prctica esto no siempre es
aconsejable, sobre todo en el caso de neoplasias de mayor tamao, donde adems del
diagnstico es fundamental conocer los limites de reseccin, por lo que se recomienda realizar
cortes transversales separados por una distancia de 1 cm y paralelos entre si para no retardar
el tiempo de fijacin.
5- Sitio de la toma: es uno de los puntos ms importantes, ya que la muestra tomada de un
sitio incorrecto proporcionar un diagnstico errneo, como por ejemplo el de tejido sin
anormalidades histopatolgicas. Esto reviste particular importancia en el caso de biopsias
cutneas donde lo ms conveniente es tomar varias muestras con sacabocado.
Cuando la muestra es muy grande es conveniente tomar muestras del centro, bordes y
periferia, que incluya tejido normal para que en caso de neoplasias pueda conocerse el margen
de reseccin.
6- Duracin de la fijacin: el tiempo mnimo de fijacin es de 24 horas, salvo para
muestras milimtricas que requieran urgencia en el diagnstico donde el tiempo puede
reducirse a 12 horas.No existe un tiempo mximo de fijacin en Formol, lo que se recomienda
es cambiar peridicamente el fijador si ha de conservarse la muestra por un tiempo
prolongado. Cabe recordar que no es necesario refrigerar las piezas que ya tienen un fijador.
7- Nmero de muestras: cada muestra debe ir en recipientes separados, si esto no es
posible habr que identificarlas, por ejemplo con material de sutura por ejemplo : si fueran 3
muestras a una no se la identifica, a la otra se le coloca un punto y a la otra dos puntos y esto
se anota en el protocolo.
Toda muestra debe ser acompaada por un protocolo donde deben constar los siguientes
datos:
- Propietario
- Profesional solicitante
- Datos del animal : especie, raza, sexo, edad
- Sitio preciso de la toma: importante en ciertas neoplasias y tambin en enfermedades
inmunomediadas que tienen predileccin por determinadas zonas anatmicas
- Fecha y hora de extraccin: en el caso de la hora para aquellas muestras milimtricas cuyo
diagnstico urge
- Fijador utilizado: recordar que el formol no es el nico fijador. Prestar atencin a la
concentracin del mismo, ya que podran estar en formol al 5 % en caso de emergencias
donde no se pudo disponer del fijador en la concentracin adecuada.
- Breve resea: tiempo de evolucin, caractersticas macroscpicas, tratamientos realizados,
cirugas previas, etc.
- Diagnstico presuntivo: es una forma de ver si hay correspondencia entre lo que se ve
clnicamente y los hallazgos histopatolgicos.
Como corolario de lo expuesto hasta ahora el profesional actuante recibir un informe donde
deben figurar:
- Descripcin macroscpica de la o las muestras recibidas: esto tiene una doble importancia,
por un lado la descripcin de las caractersticas visibles de las piezas y por otro la
correspondencia entre el nmero de muestras enviadas por el clnico o cirujano y el de las
procesadas por el patlogo (funcin de control).
Cuando tengamos que tomar una muestra desde una cavidad (torcica, abdominal) u rgano
(vejiga, pulmn, hgado) o realizar un hemocultivo deberemos:
realizar tricotomia de la zona en donde vamos a realizar la puncin (en forma amplia).
colocar iodopovidona.
punzar con aguja acoplada a jeringa (en el caso de punzar la cavidad torcica deber
utilizarse una llave de tres vas).
TCNICAS HEMATOLGICAS
El hemograma es uno de los mtodos complementarios ms utilizados en la clnica veterinaria.
Consta de una serie de determinaciones, algunas de las cuales pueden realizarse con pocos
elementos en el consultorio (hematocrito, confeccin de frotis y tinciones), mientras que otros
deben ser realizados en el laboratorio (recuento leucocitario, dosaje de hemoglobina, ndice de
reticulocitos)
Hemograma:
- Hematocrito
- Hemoglobina
- Indice de reticulocitos
- Recuento leucocitario
- Confeccin de frotis y tinciones
- Recuento absoluto de eosinfilos (RAE)
En el consultorio, con pocos elementos el clnico puede realizar algunas de las tcnicas
includas en el hemograma (hematocrito, ndice de reticulocitos, frotis sanguneos) que pueden
permitirles una rpida aproximacin diagnstica a distintas patologas.
A) Hematocrito:
El hematocrito se utiliza para estimar la masa eritrocitaria y determinar el volumen celular
aglomerado (VCA).
El VCA nos aporta en forma directa el porcentaje de eritrocitos circulantes y depende tanto de
la cantidad y tamao de los glbulos rojos como as tambin del volumen plasmtico.
Hay dos formas de obtener el hematocrito:
Con heparina: podemos tomar la muestra directamente del animal, ya sea del cono de
la aguja en la extraccin o realizando una puncin por ejemplo en oreja, almohadilla,
etc.
El MC se llena por capilaridad y luego debe sellarse el extremo que no fue utilizado para su
carga con plastilina o la llama de un mechero.
aumentarse el tiempo de centrifugado. Como los MC no tienen lneas para identificar el valor de
lectura debe recurrirse al uso de un baco
Abaco para lectura de
microhematocrito
Qu
datos
podemos
obtener
partir
de
un
microhematocrito?:
HEMATOCRITO
DATOS A OBTENER:
OBTENER:
EVALUACIONDEL PLASMA
MICROFILARIAS
CAPA FLOGISTICA
VOLUMEN CELULAR
AGLOMERADO
Capa flogstica
Hepatozoon canis
Presencia de microfilarias:
Cuando los datos de la clnica hacen sospechar de un cuadro de filariasis, la bsqueda de
microfilarias puede hacerse colocando un microhematocrito al microscopio y focalizando la
zona del plasma en contacto con la capa flogstica. Se ubica la capa a menor aumento (10x) y
luego deben visualizarse las microfilarias a mayor aumento (40x) donde en caso positivo se las
podr ver en movimiento. Otra forma de visualizarlas es en el frotis teido con Giemsa o
Tincin 15
Tubo de microhematocrito para
buscar microfilarias
10x
40x
ANEMIA
HIPOCROMICA
NORMOCRONICA
HIPERCROMICA
Recordar que los valores incrementados de CHCM (hipercroma) son slo transitorios y se dan en
la anemia hemoltica inmunomediada con lisis extravascular, donde a nivel de los macrfagos se
produce el descarozado de los eritrocitos, los cuales no son lisados sino que vuelven a la
circulacin con un tamao menor (por la prdida de parte de su membrana) pero con el contenido
normal del eritrocito. Este es el nico caso en el que se puede hablar de hipercroma, pero debe
recordarse que estas clulas pierden la capacidad de modificar su forma y son rpidamente
lisadas.
En las muestras lipmicas no puede medirse la Hb ya que se produce un aumento por la turbidez
del plasma.
Los valores disminudos de CHCM (tipocroma) suelen presentarse en los pacientes con anemia
regenerativa, en especial en aquellos con altos porcentajes de reticulocitos, los cuales no han
terminado aun de sintetizar Hb. Tambin en los pacientes con deficiencia crnica de hierro suelen
observarse CHCM inferiores a los valores normales, dado que el hierro es un componente
fundamental de la molcula de Hb, por lo tanto en casos de dficit no se logra sintetizar la cantidad
de Hb necesaria para que el normoblasto ortocromtico (ltima clula de la serie eritroide nucleada)
expulse el ncleo. Al retener el ncleo esta clula vuelve a dividirse (microcitos) y con menor
contenido de Hb (hipocroma)
C) ndice reticulocitario:
El reticulocito es el estado previo al eritrocito maduro, el cual retiene material basfilo que se
observa como un reticulado intracelular, producto del precipitado de los ribosomas. La presencia
de reticulocitos en sangre perifrica constituye un valioso elemento de pronstico para diferenciar
las anemias regenerativas de aquellas arregenerativas. La cantidad de reticulocitos en sangre
aporta datos sobre la intensidad de la respuesta medular. La liberacin de reticulocitos por parte de
la mdula sea tarda de 48 a 72hs desde el inicio del proceso. Es muy importante recordar que el
reticulocito es una clula que sigue madurando en sangre una vez extrada la misma, razn por lo
cual es fundamental que la misma sea remitida inmediatamente al laboratorio y que ste determine
el ndice de reticulocitos dentro de las primeras horas ya que de lo contrario si el tiempo se excede,
muchos de los reticulocitos presentes en la muestra de sangre habrn madurado y se habrn
convertido en eritrocitos maduros alterando el valor real de dicho ndice.
Tcnica: Colocar 1 2 gotas de sangre en un tubo de hemlisis y agregar la misma cantidad del
colorante. Incubar a Bao Mara a 37 durante 15. Retirar del bao y hacer un frotis. Dejar secar y
mirar con inmersin contando la cantidad de reticulocitos que se encuentran en 500 glbulos rojos.
Sacar el porcentaje
Reticulocitos teidos con azul brillante de cresilo
Clculo:
1- Sacar el porcentaje de reticulocitos
2- Corregir el porcentaje de reticulocitos en base al grado de anemia del paciente:
Recuento absoluto = % reticulocitos x Ht paciente (PERRO)
45 (perro) 35 (gato)
3- Hacer la correccin en base a la vida media del reticulocitos, la cual est en relacin con el Ht
del paciente. Cuanto ms importante es el grado de anemia la mdula sea libera a sangre
reticulocitos que tienen una vida media ms larga en circulacin que aquellos que tienen un Ht
normal donde el reticulocitos tarda un dia en madurar
Ht
45
35
25
15
PERRO
vida x
1
1,5
2
2,5
GATO
Ht
vida x
35
1
25
1,5
15
2
10
2,5
Para realizar el recuento de leucocitos totales se realiza una dilucin 1:20 (20 l de muestra y 380
l de diluyente) con diluyentes como cido actico glacial al 2% o cido clorhdrico al 1%. Estos
diluyentes lisan los glbulos rojos. Se debe esperar un minuto para realizar la carga. Previamente
debe pegarse el cubrecmaras sobre las barras laterales de la cmara y ste debe quedar firme
verificando la formacin de los anillos de Newton. Se puede realizar la carga con pipeta o utilizando
un capilar de manera precisa y rpida, sin formacin de burbujas y evitando el rebasamiento y se
espera que las clulas sedimenten para realizar la lectura.
Se deben leer a poco aumento (10x) los 2 cuadrantes opuestos si el conteo fuese mayor a 6000
glbulos blancos o los cuatro cuadrantes si el conteo fuese menor.
La lectura de cada uno de los 16 cuadrados dentro del cuadrante se realiza de izquierda a derecha
y para evitar el conteo doble se cuentan las clulas que estn en contacto con las lneas internas
superior e izquierda y no las clulas que contactan con las lneas internas inferior y derecha. Si en
el recuento se obtuviera una diferencia superior al 20% en cada cuadrante debe realizarse
nuevamente el procedimiento por la incorrecta distribucin de clulas.
Haemobartonella felis
Hepatozoon canis
Tinciones:
Las tinciones que se utilizan rutinariamente en hematologa son del tipo de ROMANOWSKY que
estn basadas en colorantes como el Azul de metileno y Eosina. Dos son las ms utilizadas:
1) Metanol-Giemsa: una vez realizado el extendido se coloca en un recipiente con barras paralelas
y se fija durante 1a 3 con Metanol. Pasado ese tiempo se enjuaga con agua y se lo cubre con el
colorante de Giemsa el cual se prepara en una dilucin 1:10 con agua corriente. Pasado ese
tiempo se enjuaga con agua, se deja secar y luego se observa al microscopio.
2) Tincin 15 (tincin rpida): el kit viene con 3 reactivos: un fijador, un colorante acidfilo y uno
basfilo. La tincin se realiza introduciendo en primer lugar 5 veces el preparado en el fijador, se
escurre perfectamente y se realizan 5 pasadas por el colorante acidofilo, se vuelve a escurrir
minuciosamente (para evitar la contaminacin de cada reactivo) y por ltimo se hacen 5 pasadas
en el colorante basfilo. Al finalizar esta etapa debe lavarse con agua corriente, dejar secar y
observar al microscopio.
Una vez seco el preparado se procede a la lectura. El rea de monocapa es el nico lugar donde
debe realizarse la evaluacin celular. Dos errores comunes en la lectura de los frotis de sangre
citolgicos son intentar identificar las clulas de las reas gruesas del frotis y las clulas daadas.
En las reas gruesas, las clulas estn suspendidas de manera ms derecha, de modo que cuando
se observa desde arriba la clula presenta un dimetro ms pequeo y se colorea de manera
demasiado oscura para una evaluacin apropiada. Todos los frotis presentan algunas clulas
daadas con formas caractersticas de coloracin distorsionada, que no deben ser tomadas en
cuenta.
Para realizar la evaluacin primero se lee con objetivo de menor aumento (10x) para observar la
distribucin celular, acmulos celulares y/o plaquetarios. El recuento diferencial de leucocitos, las
caractersticas morfolgicas y la presencia de cuerpos de inclusin, hemoparsitos y alteraciones
txicas leucocitarias se realiza utilizando el objetivo con aceite de inmersin (100x).
Para realizar un adecuado recuento diferencial leucocitario se lee en guarda griega de borde a
borde y empezando por la cola del frotis.
4399
En general se cuentan 100 leucocitos anotando los distintos tipos celulares. Si el recuento
leucocitario en cmara llega a ser alto lo ideal es hacer una lectura de 200 a 300 clulas.
IMPORTANTE: el recuento leucocitario relativo de cada uno de los tipos celulares SOLO sirve para
calcular el valor absoluto de cada tipo de leucocito. Para su clculo (si es que el laboratorio no lo
expresa) debe sacarse haciendo una regla de tres: por ej: si el porcentaje de neutrfilos leidos en el
frotis es del 90% y el recuento leucocitario absoluto en cmara de Neubauer fue de 10000
leucocitos/mm3, el valor absoluto de neutrfilos de ese paciente ser de 9000 neutrfilos/mm3. Es
este valor el que debe utilizarse para interpretar el cuadro leucocitario.
NUNCA DEFINIR SI HAY NEUTROPENIA O NEUTROFILIA (lo mismo para cualquier otro tipo de
leucocito) A PARTIR DE LA FRMULA LEUCOCITARIA RELATIVA YA QUE PUEDEN
COMETERSE ERRORES IMPORTANTES DE INTERPRETACION.Ej:
Frmula leucocitaria relativa
L: 5%
M: 3%
E:2%
NS: 90%
R.Leucocitario/mm3
Valor Referencia de NS en caninos: 3000-11500/mm3
20000 leuc/mm3
Frmula
Leucocitaria 18000 NS/mm3
Absoluta
NEUTROFILIA
10000 leuc/mm3
9000 NS/mm3
RECUENTO
LEUCOCITARIO
NORMAL
3000 leuc/mm3
2700 NS/mm3
NEUTROPENIA
100
PERRO
GATO
CABALLO
( X 106 /MM3 )
5.5-8.5
5-10
7-13
HEMOGLOBINA g/dl
12-18
8-15
10-18
HEMATOCRITO %
cach.30-50
VACA
8-14
28-45
32-55
24-48
adult.37-55
V.C.M. (ft)
60-77
39-55
37-50
40-60
CHCM%
30-36
31-35
31-35
26-34
IND. RETICUL.
1.8-2
1.8-2
5500-19500
--
--
7000-14000
4000-12000
60-77
37-75
30-65
15-4
0-3
0-3
0-2
0-2
LINFOCITOS (L) %
12-30
20-55
27-70
MONOCITOS (M)%
3-10
1-4
0,2-14
2-7
2-12
0,5-11
2-20
EOSINOFILOS (E) %
2-10
45-75
3000-11500
NB /MM3
0-300
2500- 12500
0-300
L /MM3
1000-4800
1500-7000
M /MM3
150-1350
0-850
E /MM3
PLAQUETAS X 100/MM3
2300-8600
600- 4000
0-1000
0-120
1500-8000
2500-7500
0-1000
25-900
100-1250
0-1500
0-1000
200-500
300-800
100-600
0-2500
100-800
EXAMEN COPROPARASITOLGICO
Es el anlisis clnico que nos permite identificar las distintas parasitosis ( helmintos y protozoos
del tracto gastrointestinal) que afectan a los animales domsticos
RECOLECCION DE MUESTRAS
Se recomienda la recoleccin seriada de una pequea porcin (tamao de una ua) de cada una
de las deposiciones, durante 3 a 5 das seguidos, las cuales son colocadas en un mismo
recipiente, de boca ancha con cierre hermtico, conteniendo la solucin conservadora, respetando
las normas de bioseguridad.
Se deber identificar correctamente el frasco y se enviar con su correspondiente protocolo.
Formol 5% es uno de los fijadores ms usados en donde los huevos y quistes se conservan por
tiempos prolongados.
Preparacin del formol al 5%: se parte del formol al 40% (al cual se considera como 100%) y se
mezclan 5cc de formol al 40% con 95cc de agua de la canilla.
EXAMEN COPROPARASITOLOGICO
El examen coproparasitolgico se divide en:
1- Examen macroscpico
2- Examen microscpico
1) EXAMEN MACROSCOPICO:
Permite identificar a simple vista partes de parsitos, tales como progltidos de cestodes y
formas adultas de nematodes.
Para realizarlo simplemente con la ayuda de una esptula vamos separando las distintas
porciones de materia fecal para poner en evidencia cualquier progltido o parsito adulto que
pueda contener la misma
Parsitos adultos
Segmentos de tenias
2) EXAMEN MICROSCOPICO:
Permite poner en evidencia huevos, quistes o larvas de parsitos.
Dentro del examen microscpico existen mtodos:
- Cuantitativos
- Cualitativos
-Mtodos cuantitativos: se utilizan en grandes animales haciendo un recuento en cmara (Mac
Master). Se expresa la cantidad de huevos por gramo de materia fecal. Debemos recordar que en
grandes animales existe una carga parasitaria normal y lo importante es saber cuando la misma
Solucin de Benbrook
Azcar.................454 g
Agua....................355 ml
Ir agregando el azcar mientras se calienta el agua.
Agregar como conservante 6 ml de formol para el total de la solucin o bien fenol cristalino a razn de
1 g cada 100 ml de solucin.
Posee mayor eficiencia porque recupera mayor cantidad de huevos y quistes porque posee mayor
peso especfico (p.e.1250)
Homogeneizar la materia fecal que viene en el frasco con Formol al 5% al mismo tiempo que
vamos buscando formas parasitarias macroscpicas.
Paso siguiente se debe filtrar la materia
fecal con un colador de malla fina.
La porcin que fue filtrada se la coloca en un tubo cnico y es centrifugada durante 5 minutos a
1500 rpm.
Una vez centrifugada la muestra se retiran los tubos de la centrfuga, descartando el sobrenadante
(al descartar el sobrenadante se eliminan deshechos de bajo peso especfico) y reemplazndolo
con solucin de Bembrook (solucin saturada de azcar en agua).
Homogeneizar
y
centrifugar nuevamente 5 minutos a 1500 r.p.m.
Se toma con un ansa una gota de la superficie y se la coloca entre porta y cubre para su
observacin microscpica, primero a 10X y luego a 40X
Toxocara canis
Toxocara cati
Toxascaris leonina
70u x 80u
70u x 80u
70u x 80u
Ancylostoma
60u x 40u
Trichuris
Coccidios
80u x 40u
10u x 15u
b) SEDIMENTACIN
Estos mtodos se caracterizan porque utilizan diluyentes que tienen menor peso especfico que
los huevos de parsitos, por lo tanto stos tienden a sedimentar.
- Sedimentacin simple
Utiliza agua corriente como diluyente, dado que el peso especfico del agua es 1000 por lo tanto al
tener los huevos de parsitos mayor peso tienden a sedimentar.
Homogeneizar 5 a 10 g de materia fecal en un recipiente con 100 ml de agua y filtrar.
Dejar reposar la mezcla durante 30 minutos. Descartar el sobrenadante sin mezclar el
sedimento y repetir la operacin con lquido nuevo, luego tomar una porcin del sedimento y
colocarlo entre porta y cubre. Observar al microscopio ptico a 10x y luego a 40 x.
Indicaciones: para huevos con peso especfico mayores que las soluciones de flotacin
(Cestodes).
Dipilidium
150u x 200u
Tenias sp.
45u
- Mtodo de Telleman
Este mtodo es especialmente til para poner en evidencia quistes de giardias
Reactivo de Telleman:
5gr. De cloruro de sodio
50 ml de formol 40%
950 ml de agua destilada
Tcnica:
En un tubo de centrfuga se colocan:
3 ml de materia fecal mortereada y filtrada
4 ml de reactivo de Telleman
2 ml de ter sulfrico
Se homogeiniza la muestra y luego se centrifuga por un minuto a 1500 r.p.m.
Se tira el sobrenadante y se toma una porcin del culote de la muestra.
Se toma una pequea muestra del sedimento y se coloca sobre un portaobjetos, al cual se le
agrega adems una gota de lugol, el cual tie de un color amarronado a las giardias y permite
diferenciarlas de las levaduras las cuales no se tien con lugol.
Se observa a 40 X dado que las giardias son de muy pequeo tamao (9x12u) lo cual hace que
sea imposible reconocerlas a menor aumento
10
METODO DE TELLEMAN:
Huevos de Giardias
Quistes de Giardias
9u x 12u
Forma vegetativa de
Giardias
11
ANALISIS DE ORINA
I NTRODUCCIN
El anlisis de orina es una de las herramientas de diagnstico ms importantes de las que se
dispone en la clnica de pequeos animales. Cuando se realiza correctamente, puede
proporcionar abundante informacin diagnstica y ser utilizado para evaluar la respuesta al
tratamiento de las infecciones del tracto urinario inferior
Un anlisis completo de orina consta de cuatro componentes principales:
R ECOLECCIN DE ORINA
Lo ideal es que la muestra sea tomada de la primera miccin de la maana (debido a que suele
ser la ms concentrada) y la cantidad mxima posible. La orina recin recogida, no es
necesariamente recin formada, y sta lleva varias horas almacenada en la vejiga pudiendo
sufrir cambios antes de ser expulsada.
La orina se puede recolectar por miccin espontnea (chorro medio), compresin manual
(chorro medio), sondaje uretral o (cateterizacin) y cistocentesis. Siempre es preferible la
utilizacin de contenedores estriles, aun cuando no se requiera cultivo, para evitar la
contaminacin bacteriana que acelera la descomposicin. Es muy importante remitir en el
protocolo de la muestra cmo fue obtenida la misma, lo que es muy valioso a la hora de la
interpretacin del sedimento, y sobretodo para la correcta confeccin del informe para el
clnico.
C ONSERVACIN Y ALMACENAMIENTO
Es importante que la muestra sea procesada lo antes posible, de lo contrario ser necesaria
alguna forma de conservacin. La orina es una solucin inestable particularmente a altas
temperaturas y particularmente si es alcalina. Si se requiere para bacteriologa, debe
almacenarse sin aditivos, un mximo de 12hs a 4C antes del cultivo.
Las formas de conservacin posibles incluyen:
1. Sin aditivos.
2. Con aditivos.
a. cido brico.
b. Formaldehdo; tolueno.
1.
Sin aditivos: Siempre que el tiempo de almacenamiento sea superior a los 30 minutos,
las muestras deben refrigerarse entre 2C y 8C. La muestra debe tornar temperatura
ambiente antes de ser procesada, dado que puede alterar datos de reacciones enzimticas
tanto como la densidad (que es mayor en la orina fra)..
2.
Con aditivos:.
a.
Acido brico al 1%, slo es til para cultivo y citologa. Los resultados de pH y
densidad, no son vlidos. Tambin hay que tener presente que se pueden disolver los
cristales que precipitan en medios alcalinos como los de estruvita y uratos de amonio.
b.
Formaldehdo el cual impide el crecimiento bacteriano, ayudando a la
conservacin del sedimento (1 gota de formalina concentrada por cada 30 ml de orina).
Esta forma de conservacin permite tinciones histolgicas como hematoxilina y eosina,
pero
las tinciones Romanovsky no son recomendadas para las clulas as
conservadas.
- Color
El color normal de la orina fresca es amarillo plido o mbar (resultado de los urocromos:
urobilina+urobilingeno+pptido), pero como depende de otros factores, para la correcta
interpretacin del anlisis, debe observarse conjuntamente con el resto de los resultados
obtenidos en la muestra. Puede haber enfermedad con orinas de color normal, y el color
anormal puede ser un dato relativamente inespecfico.
Los pigmentos que interfieren en la orina normal son los urocromos (producto de la
degradacin de la hemoglobina) y la urobilina (producto de la oxidacin del urocromgeno,
incoloro, que contiene azufre).
La intensidad del color depende de otros factores: del volumen de orina recogida, de la
concentracin de la misma y por lo tanto de la densidad urinaria de la muestra en cuestin.
Las causas de coloracin anormal deben ser investigadas con pruebas de laboratorio
apropiadas y examen del sedimento. Estas alteraciones pueden provenir del alimento,
medicamentos, ambiente y de las tcnicas de recoleccin.
Los colores ms frecuentes que se presentan en la prtica diaria son:
amarillo o mbar: urocromos, urobilina
amarillo oscuro: alta concentracin urinaria
azul: azul de metileno
verde: azul de metileno, cristaluria de uratos, ditiazanina.
rojo, rosa, marrn rojizo, rojo anaranjado, naranja: hematuria, hemoglobinuria, mioglobinuria,
porfirinuria, rojo congo, fenolsulfonftalena (despus de la alcalinizacin)
naranja amarillento: orina muy concentrada, exceso de urobilina, bilirrubina
amarillo-marrn, marrn verdoso: pigmentos biliares
marrn a negro: melanina, metahemoglobina, mioglobina, pigmentos biliares
marrn: metahemoglobina, melanina, heces (fstula rectourinaria)
incolora: orina muy diluida
blanco lechoso: lpidos, piuria, cristales
- Transparencia/turbidez
La orina normal tanto en perros como en gatos suele ser transparente, . Los cambios trmicos
y de pH pueden producir variaciones en la turbidez.
Segn el grado de turbidez lo informaremos de la siguiente manera: lmpido, ligeramente turbio,
turbio, intensamente turbio. Estos grados dependern de la interferencia que nos brinde la
muestra al colocarle por detrs una hoja impresa.
- Densidad ()
La densidad es la proporcin de la masa de una solucin comparada con la masa de un
volumen igual de agua.
Si bien no mide directamente la cantidad de partculas de un soluto en una solucin como la
osmolalidad, las dos determinaciones estn relacionadas. La densidad es una prueba de
utilidad clnica porque indica el grado de resorcin tubular y consecuentemente, la capacidad
renal de concentrar; la prdida de la capacidad de concentracin es uno de los primeros
signos de la enfermedad renal.
El valor diagnstico de la densidad urinaria depende del estado hdrico del paciente.
Los Intervalos de referencia normales son:
Perro: 1025-1050
Gato: 1035-1060
El filtrado glomerular es un proceso fsico y tiene una densidad de 1008-1012 (o sea la
densidad del plasma). Los riones normales pueden producir orinas ms o menos
concentradas lo que depender de la cantidad total de agua y solutos en el organismo. En
general la mayora de los solutos nitrogenados se reabsorben, produciendo los valores
referenciales de densidad urinaria.
La concentracin de distintas sustancias afecta la densidad en forma diferente. Las sales la
afectan considerablemente por su bajo peso molecular (PM) y el alto nmero de molculas
presentes en solucin, mientras que las protenas son molculas de mayor tamao y presentes
en menor nmero, lo que hace que su efecto sobre la densidad sea menor.
Debemos considerar la ocurrencia de perodos cortos de deshidratacin lo que puede generar
una concentracin importante de la orina, con densidades en el orden de 1065 en el perro y
1080 en el gato. Estas situaciones son mucho ms habituales que las de sobrehidratacin
donde la densidad puede ser tan baja como 1001 en ambas especies.
En general se puede decir que existe una relacin inversa entre el volumen urinario y la
densidad: a mayor volumen menor densidad y viceversa, Esto se cumple con una sola
excepcin que se da en pacientes con diabetes mellitus, los cuales tienen micciones con
grandes volmenes de orina pero la densidad urinaria es alta, esto se debe a que la molcula
de glucosa tiene una alta incidencia en la determinacin de la densidad (Figura 1)
Figura 1:
1- Refractmetro: este instrumento mide el ndice de refraccin que sufre la luz el cual se
correlaciona con la densidad. Es el mtodo ms preciso (de los aqu mencionados) y requiere
una a dos gotas de orina. (Figura 3)
2- Urinmetro o urodensmetro: Se necesitan volumen de muestra mayores, 15 ml, y la
precisin es inferior al mtodo anterior (Figura 4)
Figura 3:
Figura 4:
Se lleva a cabo mediante la evaluacin por medio de tiras reactivas de los distintos parmetros
que se mencionarn a continuacin (Figura 5). El principio bsico de las mismas es la
deteccin de la presencia de distintas sustancias presentes en la orina medibles a travs de
una reaccin colorimtrica, cuya intensidad representa una concentracin determinada de esa
sustancia que puede ser considerada o no anormal.
El anlisis de orina de rutina incluye pruebas qumicas para pH , protenas , glucosa cetonas ,
pigmentos biliares , sangre oculta y hemoglobina .
Desde la introduccin de tiras reactivas el examen qumico de la orina se ha convertido en un
procedimiento rpido , preciso y eficiente .
Figura 5:
- pH:
Es un parmetro muy importante que debe analizarse en la orina reciente. El pH indica la
acidez o alcalinidad de la orina. El rango total de pH es de O a 14 (cido fuerte-base fuerte),
con 7 como valor neutro, siendo el rango observado en la clnica de perro y gatos algo ms
acotado: -entre 4,5 y 8,5-.
Los Intervalos de referencia normales son:
b)
c)
Acido ntrico
TIRAS REACTIVAS
Prote
Protena de Bence Jones
- Glucosa:
La glucosa es filtrada en el glomrulo y luego totalmente reabsorbida por las clulas tubulares,
por lo tanto no se la detecta en orinas normales. Aparece glucosuria cuando la glucosa en
sangre es superior al umbral renal, en los perros: 180 mg/dl y en los gatos: 290mg/dl (en los
gatos diabticos podra ser menor, alrededor de los 200 mg/dl).
La glucosuria puede estar asociada a procesos:
- No patolgicos: por ejemplo: excitacin o stress en felinos o a la administracin de soluciones
glucosazas.
- Patolgicas: dentro de los mecanismos anormales asociados a proteinuria es muy importante
verificar si cursa con o sin hiperglucemia:
- Sin hiperglucemia: en este caso el problema primario radica en el rin el cual no puede
reabsorber la glucosa que filtr por el glomrulo (necrosis tubular aguda, sindrome de Fanconi)
- Con hiperglucemia: la causa ms importante y frecuente de glucosuria con hiperglucemia
es la Diabetes Mellitus, pero tambin se debe tener en cuenta el hiperadrenocorticismo y la
pancreatitis aguda.
Se mide con tiras reactivas, la mayora de las mismas se basan en el mtodo de glucosa
oxidasa. Es muy especfico y sensible.
- Cuerpos cetnicos:
Los cuerpos cetnicos no deberan estar presentes en la orina de pacientes normales. La
excesiva formacin de cetonas proviene de la oxidacin acelerada de los cidos grasos como
fuente de energa. Por lo tanto es posible encontrarlos en orinas de animales diabticos con
descompensacin metablica, pero tambin en perros y gatos en estado de inanicin o ayuno
prolongado.
Se mide con tiras reactivas, es ms sensible para el cido acetoactico y dbilmente sensible
para la acetona, no reacciona con el cido -hidrxibutrico.
- Sangre:
Mediante la utilizacin de tiras reactivas podemos obtener una reaccin positiva de distinta
intensidad, cuando tengamos en orina, hematuria (sangre entera), hemoglobinuria o bien
mioglobinuria (hemoglobina o mioglobina libres en orina).
Se puede establecer la diferencia entre presencia de glbulos rojos o pigmentos con la
centrifugacin de la muestra, donde dicho procedimiento permite la sedimentacin de los
eritrocitos, mientras que los pigmentos no precipitarn (Figura 8)
Figura 8:
Sangre /Hemoglobina:
Hematuria
Hemoglobinuria
Causas de hematuria pueden ser, patologas que asienten en cualquier punto del tracto urinario
como: inflamacin, litiasis, traumas, neoplasias; patologas a nivel renal como: leptospirosis
aguda, parsitos (dioctophyma renale), necrosis tubular aguda, glomerulopatas, etc.
La hemoglobinuria estar presente cuando haya lisis de los glbulos rojos, por lo tanto puede
acompaar a la hematuria. Patolgicamente el proceso por el cual puede detectarse
hemoglobinura es la anemia hemoltica con lisis intravascular de los eritrocitos; recordar que en
condiciones normales la hemoglobina no filtra por el glomrulo dado a que circula unida a una
protena de alto peso molecular (haptoglobina), pero en procesos de hemlisis intravascular la
destruccin masiva de los eritrocitos dentro de los vasos sanguneos libera una excesiva
cantidad de hemoglobina, la cual satura la cantidad de haptoglobina circulante y ese exceso
que no puede ligarse a la protena filtra por el glomrulo, siendo en parte reabsorbida a nivel
tubular, pero el exceso que no puede reabsorberse aparecer en orina, dando positiva la
hemoglobinuria.
La presencia de mioglobina en sangre es consecuencia de la rabdomilisis debida a isquemias,
traumatismos o toxemias.
- Bilirrubina:
La bilirrubina no conjugada o indirecta (segn al reaccin de Van den Bergh) circula unida a
albmina y no es filtrada por el glomrulo. La bilirrubina conjugada (o directa), soluble en agua,
es la que aparece en orina. En perros sanos, y sobretodo machos, es posible detectar 1 o 2
cruces en orinas de 1020; mientras que en felinos, la bilirrubinuria es siempre patolgica.
Estas diferencias entre las especies son debidas a que los caninos poseen sistemas
enzimticos capaces de degradar la hemoglobina en las clulas tubulares renales y a esto se le
suma que los tbulos renales tiene un umbral resortivo reducido para la bilirrubina. Los felinos,
en cambio, carecen de tal capacidad y adems la resorcin tubular es 9 veces mayor (que en
los perros).
Las causas de bilirrubinuria pueden ser por cuadros de emaciacin y fiebre, hemlisis
intravascular, prdida de la funcin heptica, obstruccin del flujo biliar. Tener presente que los
metabolitos de la clorpromazina pueden dar falsos positivos, en cambio la presencia de niveles
elevados de cido ascrbico o de nitritos (en casos de infeccin del tracto urinario), pueden dar
falsos negativos.
Se mide con las tiras reactivas mediante una reaccin colorimtrica, que se basa en la
formacin de una sal con la bilirrubina en un medio cido.
- Urobilingeno:
La bilirrubina conjugada que se excreta por el intestino, es convertida a urobilingeno incoloro
por las bacterias anaerobias. Una pequea porcin (10- 15%) de este urobilingeno, es
reabsorbida llegando al hgado a travs de la vena porta; de esta, la mayora es reexcretada en
la bilis, mientras que el resto (20% de lo reabsorbido) es lo que finalmente se elimina por orina.
Algunos autores consideran que esta determinacin, carece de utilidad diagnstica. El
urobilingeno es muy inestable, oxidndose a urobilina en orinas expuestas a la luz dando un
resultado falso negativo, por lo que es muy importante que las muestras sean frescas, y por su
puesto, correctamente remitidas. Otras causas de su disminucin en orina ser la obstruccin
biliar, poliuria. Se puede hallar un incremento del mismo en orinas alcalinas (falso positivo), en
hemlisis intravascular, prdida de la funcin heptica, tambin como incremento de la
fermentacin bacteriana intestinal.
Clulas escamosas
descamativas
50 60u
Clulas transicionales
20 -30u
Clulas renales
10 -40u
2- Eritrocitos:
La forma de los glbulos rojos (GR) vara de acuerdo a la densidad de la orina. En orinas
frescas con una densidad de 1010 - 1020 se observan como clulas pequeas (6 -7 u de
dimetro), de color amarillo plido. En orinas muy concentradas los GR se crenan y se ven
con bordes erizados. En orinas muy diluidas o alcalinas los GR se hinchan, se lisan y liberan
la hemoglobina por lo cual aparecen incoloros vindose como formas fantasmales.
Los GR deben diferenciarse de los glbulos blancos, gotas de grasa y levaduras. Los eritrocitos
son ms pequeos que los leucocitos y no poseen estructura interna. Los GR no varan de
tamao, mientras que las gotas de grasa son de tamaos variables y normalmente se
encuentran justo por debajo del cubreobjetos. Las levaduras por lo general no se observan en
orinas frescas, pero cuando estn presentes son de forma variada pueden encontrarse en
gemacin.
El sedimento de orina contiene habitualmente menos de 2 - 3 eritrocitos por campo de mayor
aumento. Cuando superan ese nmero indican sangrado de alguna porcin del tracto
urogenital.
3- Leucocitos:
Tienen dos veces el tamao de los glbulos rojos y son ms pequeos que las clulas
epiteliales. Puede distinguirse el ncleo, pero generalmente est degenerado observndose
granulado (piocitos). Normalmente podemos encontrar de 0-1 por campo de 40x; ms de 2-3
leucocitos indica inflamacin en algn punto del tracto urinario o genital. La presencia de
glbulos blancos no localiza la lesin, a menos que se observen cilindros leucocitarios que son
indicativos de origen renal. Cuando el nmero de glbulos blancos es alto se recomienda
realizar el cultivo de la orina.
4- Clulas neoplsicas:
Son de forma y tamao variables. Si se observa gran cantidad de clulas epiteliales con
diferentes formas y tamaos se deben hacer extendidos del sedimento, secarlos al aire,
teirlos con tinciones hematolgicas y luego observarlas al microscopio.
B- CILINDROS:
Se forman en la luz de los tbulos distales y colectores de los riones , .La concentracin
aumentada y la acidez de la orina en los tbulos promueven la precipitacin de proteinas
secretadas a este nivel. Los cilindros se pueden clasificar de acuerdo a su contenido, lo que
puede ayudar a caracterizar el tipo de lesin renal.El tamao est determinado por el dimetro
de la luz de los tbulos. Por ello, los cilindros formados en la luz de los colectores suelen ser
de mayor tamao que los formados en el Asa de Henle o en los tbulos distales. Al ser
retenidos en los tbulos por un tiempo variable previo a su eliminacin, las clulas y
estructuras que se les han adherido suelen encontrarse en proceso de desintegracin.
El pH urinario y la densidad alteran la morfologa de los cilindros, es por ello que son difciles
de observar en orinas alcalinas. El procesamiento de la muestra tambin puede afectar el
diagnstico de cilindruria puesto que una excesiva centrifugacin puede destruir aquellos muy
frgiles y confundir sus fragmentos con cristales amorfos, los cuales generalmente son menos
cilndricos ms refrctiles.
Las orinas normales no contienen cilindros o los presentan en muy poca cantidad. Ms de uno
por campo de 40x en orinas moderadamente concentradas, es un signo de localizacin de una
enfermedad renal activa.
La cantidad de los mismos no es indicativo de la gravedad, duracin, reversibilidad o
irreversibilidad de la enfermedad. Un alto nmero siempre implica enfermedad renal activa
generalizada que puede ser reversible o no, no obstante, un nmero escaso de los mismos
puede representar enfermedad renal generalizada crnica.
Podemos encontrarlos ante una leve irritacin renal, en cuadros febriles, ejercicio intenso o
perfusin renal escasa.
Teora de la formacin de los cilindros:
Las clulas epiteliales del Asa de Henle, tbulos contorneados distales y tbulos colectores
producen una mucoprotena llamada de Tamm Horsfald, la cual dadas las condiciones de
mxima acidez y concentracin de la orina precipita en la luz de los tbulos conformando una
matriz mucoproteica sobre la cual se depositan distintos elementos que puedan estar presentes
en la luz tubular (leucocitos, clulas epiteliales, proteinas filtradas, etc) dando lugar a los
distintos tipos de cilindros presentes en la orina. (Figura 10)
Figura 10:
Formaci
Formacin de los Cilindros
Matriz mucoproteica secretada por las c
clulas
epiteliales del Asa de Henle,
Henle, TCD y tubos colectores
PROTEINA DE TAMMTAMM-HORSFALL
Mxima acidez y
concentraci
concentracin de
orina
Prote
Protena precipita
A.Henle
T.C.D
T.Colect.
C- MICROORGANISMOS:
Los microorganismos que con frecuencia se encuentran en la orina son bacterias , hongos y
levaduras . La orina normal est libre de microorganismos, pero puede contaminarse durante la
miccin por contacto con la vagina, vulva o prepucio .
La orina normal recogida por cistocentesis o cateterizacin no contiene bacterias.
Las bacterias se registran como escasa , moderado o abundante cantidad. Un gran nmero de
bacterias acompaado por un nmero importante de leucocitos indica una infeccin del tracto
urinario o genital con inflamacin .Cuando las bacterias se encuentran sin leucocitos
acompaantes se considera muestra contaminada ya sea por mal manejo en el mtodo de
recoleccin de la orina o su mala conservacin .
Bacterias: A mayor aumento las bacterias se ven como pequeos objetos que efectan
movimientos verdaderos o movimientos brownianos. Tienen escasa importancia si la orina
se recolect en forma sptica. Si se observa gran cantidad en orinas obtenidas por
cateterizacin, chorro medio o paracentesis, sugiere una infeccin bacteriana en alguna
parte del aparato urinario, generalmente en vejiga urinaria. Tambin pueden observarse
bacterias por metritis, vaginitis o prostatitis.
Levaduras: Son estructuras redondas u ovoides de tamao variable, ms grandes que
bacterias pero ms pequeas que leucocitos, incoloras. Existen en la orina como
contaminantes.
Hongos: Hifas definidas, segmentadas y pueden estar coloreadas. Son contaminantes
frecuentes.
D- PARSITOS:
Los huevos de parsitos encontrados en el sedimento urinario , pueden ser parsitos que
afecten al sistema urinario o contaminacin fecal de la muestra de orina. Pueden encontrarse
huevos de:
Dioctophyma renale
Capillaria plica
Dirofilaria immitis
Por contaminacin con materia fecal pueden encontrarse Giardias y otros parsitos.
E- ESPERMATOZOIDES:
Los cristales se forman en orinas que se han saturado con sustancias cristalognicas.
Representan un factor de riesgo para la formacin de urolitiasis, no obstante su deteccin no
es sinnimo de la misma, puesto que en pacientes con funcin renal normal son eliminados
antes de que adquieran un tamao que implique dao patolgico.
CRISTALES EN ORINAS ACIDAS (Figura 11)
Los ms comunes son: Acido rico, Uratos amorfos y Oxalato de calcio .
Uratos amorfos: son similares a los fosfatos amorfos , aparecen como precipitado granular
pero los diferencia el pH
Oxalatos de calcio : pueden aparecer tambin en pH neutro o alcalino , tienen forma de
cuadrados pequeos con lneas que lo cruzan en forma diagonal y forman estructura en forma
de sobre .( dihidrato) Los cristales de oxalato clcico monohidrato son estructuras alargadas,
planas con extremos terminados en punta , en animales intoxicados con etilenglicol pueden
aparecer en la orina en forma abundante.
En forma anormal pueden aparecer en orinas cidas cristales de.
Bilirrubina
Leucina
Tirosina
Cistina
Cristales de bilirrubina: la bilirrubina precipita en la orina en forma granular o de finas agujas
agrupadas, de color amarillo-rojiza. Pueden observarse en orinas altamente concentradas de
perros normales. Cuando se encuentran en grandes cantidades en la orina pueden sugerir una
anormalidad en el metabolismo de la bilirrubina.
Cristales de Cistina: se los encuentra en orinas cidas de animales con cistinuria debido a un
defecto metablico en el transporte de la cistina y otros aminocidos a travs de los tbulos
renales. Poseen forma de platos planos hexagonales.
Los animales quedan propensos para el desarrollo de urolitos de cistina.
Cristales de Tirosina y Leucina: los cristales de tirosina aparecen como finas, refrctiles e
incoloras o amarillentas agujas agregadas. Los de leucina son esferas grandes con
estriaciones concntricas. Son raros de hallar en orinas de perros y gatos. Ambos slo se
observan en orinas patolgicas asociadas a hepatopatas severas.
CRISTALES EN ORINAS ALCALINAS (Figura 12) :
Encontramos fosfatos amorfos , fosfatos triples, uratos de amonio y carbonatos de
calcio .
Fosfatos amorfos : grnulos en masa , incoloros .
Fosfatos triples : (o estruvita ) tienen en su composicin amonio , magnesio , fosfato.
Se encuentran en pequeo nmero en orinas de perros y gatos normales.. Presentan forma de
prismas con extremos oblicuos en forma de tapa de atad . En otras ocasiones pueden adquirir
foma de helecho, especialmente cuando la orina tiene una alta concentracin de amonaco.
Tambin pueden encontrarse en casos de urolitiasis de estruvita, asociadas normalmente a
infecciones por Staphylococus. En otros casos se acompaa de una reaccin inflamatoria con
un sedimento rico en leucocitos, bacterias clulas descamativas.
Carbonatos de calcio: se presentan en formas de esferas ovaladas con lneas que irradian
desde el centro y en forma de pesas de gimnasia .
Uratos biurato de amonio : son marrones y redondos con espculas largas , stas pueden
romperse y verse pequeos cristales con lneas de radiacin. Aparecen en los shunt porto
cava.
Figura 11:
Acido rico
Uratos amorfos
Oxalato calcio
Leucina
Tirosina
Cistina
Bilirrubina
Figura 12:
Carbonato calcio
Fosfatos amorfos
Biurato de
amonio
Significacin pH
Color
Se disuelve
con
No se
disuelve
Ac. Actico,
clorhdrico
Calor
Ac. Urico
cida
Amarillo
Hidrxido de
sodio
Uratos
amorfos
cida
Rosados
Calor
Oxalato de Ca
Intoxicacin
por
Etilenglicol
Ac. clorhdrico
Ac. Actico
Ac. Hiprico
Incierto
Ac. Actico
Carbonato de
Ca
Raro en
Alcalina
perros y gatos
Incoloros
Ac. Actico
Fosfato triple
Normales
Alcalina,
neutra o lig.
cida
Incoloros
Ac. Actico
Fosfatos
amorfos
Normal o
asociado a
litiasis
Alcalina
Incoloros
Ac. Actico
Urato
Biurato de
amonio
Anastomosis
porto-cava
Alcalina
Amarillo
Ac. Actico
Bilirrubina
Orina
cida
concentrada o
bilirrubinuria
Amarillo o
rojo oscuro
Leucina
Enfermedad
heptica
cida
Amarillo
Hidrxido de
Na
Ac. clorhdrico
Eter
Tirosina
Enfermedad
heptica
cida
Incoloro
Hidrxido de
amonio
Ac. Clorhdrico
Ac. Actico
Sulfonamidas
Nefrosis
Cistina
Cistinuria
congnita
cida
Incoloro
Ac. Clorhdrico
Amonio
Ac. Actico
Calor
Bassi, Fernndez
Surribas
Finegold, S.
Hemisferio Sur
2003
Panamericana
1983
Bianchini, HM.,
Novillom A ; Sordelli,
D.O.
Facultad Bioqumica y
Ciencias Biolgicas
Universidad del Litoral
1998
Jain NC
2000
Benjamin MM:
Limusa
1991
Editorial Multimdica
2003
Editorial Inter-Mdica
2004.
Coles, E.H.
Ed. Interamericana
1989
Doxley, D.L
Grecchi Pacheco, R
1998.
2007
Graff, S.L
Ed. Panamericana
1987
Cowell R, Tyler R,
Meinkoth H:
Elsevier
2009.
Busch, B.M
1999
Coffin, D
La prensa Mdica
Mexicana
Duncan & Prasses
1997
Editores Mdicos
S.A.Madrid
2000
Lattimer
Kraft, W.; Durr, V.M
2005