y -adrenoceptores del pez cebra en el movimiento de melanosomas: estudio comparativo

entre melanforos de embriones y adultos

Introduccin
Muchos animales tienen la capacidad de cambiar de color, lo que les confiere grandes ventajas.
Existen dos tipos de cambios de color: los cambios morfolgicos y los fisiolgicos. Estos ltimos,
tpicos de telesteos, se producen por cambios rpidos en la dispersin y agregacin de los
melanosomas (grnulos de melanina que contienen los melanforos). Uno de los mecanismos que
intervienen en este proceso est mediado por los receptores adrenrgicos o adrenoceptores. De este
modo, los -adrenoceptores son los encargados de la agregacin de los melanosomas (produciendo
palidez), mientras que los -adrenoceptores intervienen en su dispersin (produciendo
oscurecimiento).
En peces cebra se han llevado a cabo numerosos estudios sobre los melanforos, que se
encuentran en las scale slips. Algunas de estas investigaciones, han demostrado que los agonistas
del receptor 2 adrenrgico inducen la agregacin de los melanosomas en peces cebra adultos. Sin
embargo, no se haba llevado a cabo (hasta el momento) ningn estudio farmacolgico in vivo en
los melanforos de embriones en vertebrados inferiores. El objetivo de este trabajo es analizar la
funcin de los y -adrenoceptores en melanforos de pez cebra, no solo en adultos sino tambin
en embriones con el fin de averiguar si existen diferencias a lo largo del desarrollo.
Materiales y mtodos
El presente estudio se realiz con embriones decorionizados de pez cebra (lnea AB) y con las
escamas de la parte dorsal de ejemplares adultos. Los embriones se incubaron en medio de
embriones bajo una serie de condiciones (28.5C, fotoperodo 14 horas de luz y 10 de oscuridad).
Posteriormente, colocando las muestras en portas, se observ al microscopio la respuesta de cada
muestra al aadir 50 l de solucin de agonista correspondiente. Como referencia de agregacin o
dispersin de melanosomas se utiliz el ndice melanforo (MI), adaptado del ndice utilizado para
anfibios, en el cual 5 indica una completa dispersin de los melanosomas y 1 la completa
agregacin. Los valores medios obtenidos de MI se analizaron mediante comparaciones
estadsticas no paramtricas.
Resultados
Tras la incubacin de las ``scale slips en solucin salina, la dispersin de los melanosomas era
completa. Todos los agonistas utilizados fueron capaces de producir una agregacin casi completa
de los melanosomas al aumentar la concentracin de cada uno, aunque con distintas intensidades.
Los melanforos dorsales del embrin tambin muestran una agregacin de melanosomas

dependiente de la concentracin de los mismos agonistas adrenrgicos que los utilizados para
``scale slips. Cuando se incubaron con adrenalina (agonista y ) (10 -7 M) y concentraciones
crecientes de propranolol (frmaco beta-bloqueante) (menor o igual que 10 -4 M), se potenci la
agregacin de los melanosomas hasta que la relacin propranolol:adrenalina alcanz 5000,
momento a partir de la cual el efecto de la adrenalina se inhibi significativamente. El efecto in
vitro de la fentolamina (antagonista alfa-adrenrgico) a 5x10-7 M sobre la noradrenalina consisti en
una agregacin de los melanosomas en el adulto. En cambio, el efecto in vivo de la fentolamina (103

M) sobre la noradrenalina (10-5 M) produjo una agregacin de melanosomas en los melanforos de

la parte dorsal del embrin a 60 hpf.

Discusin y conclusiones
A pesar de que la noradrenalina (agonista no selectivo y adrenoceptor) tiene mayor afinidad
por los adrenoceptores que la fenilefrina y la -metilnoradrenalina (agonistas especficos de 1 y
2 adrenoceptores, respectivamente), la capacidad de concentrar melanosomas por parte de la metilnoradrenalina en las primeras etapas es ms fuerte que la de noradrenalina, mientras que la
fenilefrina casi no tiene efecto. Esto sugiere que en las primeras etapas de desarrollo no se produce
concentracin de melanosomas e n respuesta a los 1 adrenoceptores. Por otro lado, la adrenalina
activa los adrenoceptores y , mientras que la noradrenalina apenas activa los -adrenoceptores.
En las scale slips, la presencia de propranolol (antagonista -adrenrgico) incrementa la respuesta
de concentracin de melanosomas a la adrenalina, pero no a la noradrenalina, indicando que los adrenoceptores tambin inducen dispersin de melanosomas (como ocurre en otras especies de
peces), dato apoyado tambin por la mayor respuesta frente a la noradrenalina, respecto a la de la
adrenalina en melanforos.

En comparacin con los resultados obtenidos de los melanforos de adulto, las altas
concentraciones de propranolol (10-5 M) potenciaban el efecto de la agregacin de los melanosomas
por la noradrenalina (10-6 M) en embriones a 60 hpf hasta una relacin propranolol:adrenalina de
5000, sugiriendo que la accin bloqueante del propranolol sobre los -adrenoceptores a este estadio
es dbil. Por ltimo, al aumentar la concentracin de fentolamina, el tiempo requerido para la
dispersin completa de los melanosomas disminuye. Incluso las concentraciones bajas de
fentolamina (5x10-7 M) son capaces de bloquear la concentracin de melanosomas inducida por la
noradrenalina (5x10-7 M).