Qumica ambiental, Instituto tecnolgico de Morelia (2015) pag1

INSTITUTO TECNOLGICO DE MORELIA

JOSE MARIA MORELOS Y PAVN
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA BIOQUMICA.
QUMICA AMBIENTAL
OBJETIVO
Determinar
el
contenido
de
clorofila total en una muestra de
agua
utilizando
el
mtodo
espectrofotomtrico propuesto por
Hansmann
INTRODUCCIN
Las clorofilas son una familia de
pigmentos de color verde que se
encuentran en las cianobacterias y
en todos aquellos organismos que
contienen cloroplastos en sus
clulas, lo que incluye a las
plantas y a los diversos grupos de
protistas, crtica en la fotosntesis,
proceso que permite a las plantas
absorber energa a partir de la luz
sola. En la naturaleza existen
varios tipos de clorofila pero los
ms comunes son:
1. La clorofila a se encuentra
en
todos
los
casos,
vinculada al centro activo
de
los
complejos
moleculares,
llamados
fotosistemas, que absorben
la
luz
durante
la
fotosntesis, difiere de la
clorofila b en que el radical
de la posicin 3 del grupo
tetrapirrlico
es
-CH3
(metilo) en lugar de -CHO
(grupo funcional de los
aldehdos).
2. La clorofila b caracteriza a
los plastos de las algas
verdes
y
de
sus
descendientes las plantas
terrestres. Esos plastos, y
los organismos que los
portan, son de color verde.
3. La
clorofila
c
es
caracterstica de un extenso
y
diverso
nmero
de
protistas que coincide con el
superfilo Chromista y que

incluye
grupos
tan
importantes como las algas
pardas,
diatomeas,
xantofceas, haptfitas y
criptfitas
La concentracin de clorofila en
las aguas es un indicador de la
produccin biolgica de las algas,
bacterias y otros organismos
fotosintticos, de la que, en
definitiva, depende toda la vida
marina.
Lugar de muestreo:

Agua estancada

Fecha de muestreo:
Muestra
Agua estancada

fecha
10/11/2015

Nombre y firma del

realiz el muestreo

quien

Nombre y lugar de laboratorio

de anlisis de muestra:
Laboratorio de Qumica Ambiental
del Instituto Tecnolgico de Morelia
Fecha de entrega de muestras
y anlisis
Muestra
Agua
estancada

Fecha
de
entrega
10/11/2015

Fecha de
anlisis
10/11/20
15

RESULTADOS
Temperat

ABS

ABS

ABS

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QUMICA AMBIENTAL
ura
4C

[665]
0.047

[645]
-0.10

40C

0.048

0.007

[630]
0.001
0.007

Ca = (11.6 x A665) (1.31 x A645)

(0.14 x A630)
Cb = (20.7 x A645) - (4.34 x A665)
(4.42 x A630)
Cc = (55 x A630) (4.64 x A665) (16.3 x A645 )
Concentraciones a Temperatura de
4C
Ca = (11.6 x0.048) (1.31 x -0.1)
(0.14 x -0.001) = 0.6763
Cb = (20.7 x-0.1) - (4.34 x 0.047)
(4.42 x -0.001) = -2.27
Cc = (55 x-0.001) (4.64 x 0.047) (16.3 x -0.01) = -0.11
Concentraciones a Temperatura de
40C
Ca = (11.6 x0.048) (1.31 x -0.007)
(0.14 x -0.007) = 0.567
Cb = (20.7 x-0.007) - (4.34 x 0.048)
(4.42 x -0.007) = -0.3222
Cc = (55 x-0.007) (4.64 x 0.048) (16.3 x -0.007) = -0.5
Clorofila
T @ 4C T @ 40C
Ca
0.6763
0.567
Cb
-2.27
-0.3222
Cc
-0.11
-0.5
Discusin
Primeramente los datos obtenidos de la
absorbancia estn incorrectos, puesto
que no debe haber absorbancia
negativas,
ya
que
los
espectrofotmetros leen en una escala
de 0 a 100%. En nuestros resultados
podemos observar que la concentracin
de clorofila a>b>c, por lo que hay ms
presencia de clorofila a que las dems.

CUESTIONARIO
1.- Se observ algn cambio en
las
diferentes
Temperaturas
utilizadas?
Si se observ una pequea
diferencia entre la absorbancia a
645 y 630, pero en los dems
datos fue muy parecido, casi igual,
posiblemente este dato se tom
una mala lectura, y quizs
volviendo a tomar la lectura puede
ser que entre las temperaturas no
haya
ninguna
diferencia,
es
cuestin de corroborar el dato
experimental.
2. A qu se debe que un cuerpo
de agua presente clorofila a, b y c?
En las plantas, la clorofila a es el
pigmento
involucrado
directamente en la transformacin
de la energa lumnica en energa
qumica, las clulas fotosintticas
casi
siempre
contienen
un
segundo tipo de clorofila, la
clorofila b
Las otras clorofilas
pueden
absorber luz de longitudes de onda
diferentes de las que absorbe la
clorofila a. Estos pigmentos actan
como pantallas que transfieren la
energa
a
la
clorofila
a,
extendiendo as la gama de luz
disponible para la fotosntesis.
La clorofila-a tambin es un
indicador
del
grado
de
contaminacin de los ecosistemas
acuticos y un importante ndice
del
estado
fisiolgico
del
fitoplancton.

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QUMICA AMBIENTAL
La
clorofila
puede
convertir
energa
lumnica
en
energa
qumica solamente cuando est
asociada con ciertas protenas e
incluida
en
una
membrana
especializada, y sin embargo, slo
una fraccin muy pequea de la
luz dentro del espectro visible que
incide en las hojas de las plantas
es finalmente transformada en
energa qumica.

La clorofila b se diferencia de la
clorofila a solamente por estar
sustituido el grupo metilo (--CH3)
del carbono 3 en el segundo anillo
pirrlico, por un grupo aldehido (-CHO). Esta diferencia es suficiente
para causar un cambio notable en
la coloracin como tambin en el
espectro de absorcin de esta
molcula.
En el espectro de absorcin se
manifiestan las partes de la
radiacin visible absorbidas por las
clorofilas y la relacin de este
proceso
con
las
estructuras
descritas. En los espectros de
absorcin de las clorofilas a y b los
dos mximos de absorcin indican
que la radiacin roja y azul es
fuertemente absorbida, mientras
que la verde o la roja oscura son
poco absorbidas.
La clorofila a es verde azulada, la
clorofila b es de color verde
amarillento. Esta diferencia se
manifiesta en el espectro de
absorcin,
en
la
b,
ambos
mximos de absorcin presentan
una tendencia o son desplazados
hacia la parte verde, es decir, el
mximo en la parte roja es
desplazado hacia ondas ms
cortas y el mximo en la parte azul

hacia ondas ms largas. Tambin

es notoria la diferencia en los
mximos de absorcin los cuales
varan
entre
las
diferentes
clorofilas.
Por
ejemplo,
para
la
bacterioclorofila, se presenta un
fuerte desplazamiento del mximo
de absorcin de la parte roja hacia
ondas ms largas del espectro,
esto debido al alto nmero de
tomos de hidrgeno que ella
posee. Es por tal motivo que los
bacterios fottrofos son capaces
de absorber radiacin de una onda
ms larga, la cual no puede ser
utilizada por las plantas verdes. El
ser humano detecta esta radiacin
como calor
Tambin existe clorofila c, la cual
se puede hallar en algas pardas
pero es una clorofilina a la cual le
falta la cola de fitol y los tomos
de hidrgeno en las posiciones 7 y
8 en el anillo IV
La clorofila d ha sido encontrada
en las algas rojas mientras que la
bacterioclorofila es el pigmento
tpico de los bacterios fototrpicos.
Tambin existe clorofila c, la cual
se puede hallar en algas pardas
pero es una clorofilina a la cual le
falta la cola de fitol y los tomos
de hidrgeno en las posiciones 7 y
8 en el anillo IV

4.
Qu
realizarse
porcentaje
porcentaje
ambiente?

acciones
podran
para
disminuir
el
para
disminuir
el
de clorofila en el

Disminuir la contaminacin de los

ecosistemas acuticos.

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Reducir el nivel de dureza del agua
mediante la adicin de agua
destilada o desmineralizada, o
usando resinas de intercambio
inico (son bolitas de un color
ambarino y un tamao de un
milmetro que se incluyen, en
bolsas, dentro del filtro exterior).
La dureza no debe superar los 10 o
12 DH. Reducir el pH en aguas
demasiado alcalinas. El pH se
puede bajar con la adicin de
cido ortofosfrico si despus de
reducir la dureza del agua sigue
muy elevado. Debe ser inferior de
7,2.
Ciertos peces pueden consumir
parte de las algas verdes y
algunas rojas. Peces cirujano
(Acanthuridae) y algunos erizos de
mar (Diadema) en los acuarios
marinos; y peces como los
famosos
chupa-algas
(Gyrinocheilus aymonieri) y los
peces
gato
(Hypostomus,
Plecostomus y Otocinclus) en
ecosistemas de agua dulce.
5.
Qu
otros
mtodos
y
ecuaciones para la determinacin
de la clorofila existen?
Los
mtodos
cromatogrficos
modernos
permiten
la
cuantificacin exacta de la clorofila
y todos sus derivados (HPLC)
El mtodo espectrofotomtrico
que fue el mtodo utilizado en la
presente prctica
puede estar
fuertemente sesgado por el estado
fisiolgico de la clorofila, pero es
muy utilizado debido a que el
equipo requerido se encuentra en
cualquier laboratorio de anlisis de
agua. Para cuantificar la clorofila,
se reportan en las literaturas
diferentes
solventes
(acetona,

metanol, etanol, entre otros) y

procedimientos
de
extraccin
(maceracin,
sonicacin,
calentamiento y congelamiento),
adems de la aplicacin de
ecuaciones
(monodiy
tricromticas) que utilizan distintas
longitudes de onda, se pueden ir
variando algunas condiciones para
este mtodo
El
mtodo
fluoromtrico
de
Welschmeyer (1994) es ms
sensible
y
preciso
en
la
cuantificacin de la clorofila en
relacin
con
los
mtodos
espectrofotomtricos debido a que
no se ve afectado por la presencia
de feopigmentos y clorofila-b en la
muestra
6. Existe alguna regulacin para
el seguimiento de clorofila en los
cuerpos de agua?
BIBLIOGRAFIAS
COMPARACIN DE LA ESTIMACIN
DE LA CLOROFILA-a MEDIANTE LOS
MTODOS
ESPECTROFOTOMTRICO
Y
FLUOROMTRICO
a
CARLOS
RIVERA R.1 , NGELA ZAPATA A.1 ,
GABRIEL PINILLA2 ,
http://www.ehowenespanol.com/tip
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http://www.ingenieroambiental.co
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JOSE MARIA MORELOS Y PAVN
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA BIOQUMICA.
QUMICA AMBIENTAL
http://biblioweb.tic.unam.mx/cienci
asdelmar/instituto/1994-12/articulo438.html
http://www.scielo.br/pdf/ambiagua/
v7n3/v7n3a06.pdf
https://books.google.com.mx/book
s?
id=l4QBTq77BsIC&pg=PA95&lpg=
PA95&dq=a+que+se+debe+que+
un+cuerpo+de+agua+presente+c
lorofila&source=bl&ots=JXzyMftug
0&sig=VHu_0ipSwsvFGf5haOqSNI
WbhHs&hl=es&sa=X&ved=0CEsQ
6AEwCGoVChMI18uKxLmWyQIVBh
c-Ch25ng9z#v=onepage&q=a
%20que%20se%20debe%20que
%20un%20cuerpo%20de%20agua
%20presente%20clorofila&f=false
http://cariacodev.cbm.usb.ve/wpcontent/uploads/2013/07/metodo1
3.pdf
http://www.ual.es/~jlguil/Programa
s/Practicas%20Extractivas.PDF
http://limno.fcien.edu.uy/pdf/curso
ose/16.09.13-taller-clo-clase2.pdf
http://limno.fcien.edu.uy/pdf/fito20
08/metodos/DETERMINACIONDECL
OROFILASYCAROTENOIDESTOTALE
SPORESPECTROFOTOMETRIA.pdf