Medio de Cultivo

Prctica # 3 Diseo de Medios de
Cultivo.
Laboratorio de Microbiologa
Farmacutica
INGENIERA FARMACUTICA
Laboratorio de Microbiologa Farmacutica
Practica N 3
Diseo de Medios de Cultivo.
4FM1
21-Febrero-2014
Equipo #2
Fernndez Delgado Oscar Efran
Aguayo Medina Oscar Yared
Delgado Aldana Luz ngela
Duran Ramrez Armando
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Ingeniera Campus Guanajuato

Profesores: Mario Josu Agilar, Karla Lizbeth Macas y Leonardo Guerrero
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Cultivo.
Farmacutica
OBJETIVOS
Disear y preparar un medio de cultivo mnimo y esencial como inductor en el crecimiento
y desarrollo de microorganismos quimioorganoheterotrofos, usando la tcnica de
estriado.
Identificar la funcin de cada componente con el que se disee el medio de cultivo y
trabajar con la clasificacin de los medios.
INTRODUCCION
Medios de cultivo
Segn Ronald Atlas en 2004, un medio de cultivo para microorganismos contiene las sustancias
necesarias para favorecer el crecimiento de stos. Gracias a la gran diversidad de microorganismos
y de sus rutas metablicas, existen muchos tipos de medios de cultivo, ya que mnimas diferencias
en la composicin de estos medios pueden alterar dramticamente las caractersticas de
crecimiento de los mismos.
Los primeros medios de cultivo fueron desarrollados en el siglo XIX por Robert Koch y sus
colaboradores, quienes utilizaban tejidos de animales y plantas como su principal fuente de
nutrientes para el crecimiento de los microorganismos. Sin embargo, uno de los mayores
descubrimientos de Fanny Hesse, quien trabajaba en el laboratorio de Koch, fue el agar; el cual
sera utilizado para solidificar los medios de cultivo. As, los tejidos de plantas y animales eran
preparados como caldos o mezclados con agar para formar distintas variedades de medios de
cultivo (Atlas, 2004).
Segn Prescott y sus colaboradores (2002), para que sea efectivo, un medio de cultivo debe de
contener todos los nutrientes que el microorganismo requiere para su crecimiento. Adems, todos
los microorganismos necesitan fuentes de energa como carbn, nitrgeno, fsforo, azufre y
algunos minerales. Frecuentemente un medio es usado para identificar especies o para
determinar la composicin de stos, de manera que el conocer el hbitat natural en el que se
desarrollan los microorganismos ser esencial para determinar los componentes que
proporcionarn los nutrientes necesarios para el crecimiento del microorganismo en el medio.
Tipos de medio de cultivo
Aquellos medios de cultivo en donde se conocen todos los componentes de ste y la molaridad o
normalidad de stos, son llamados medios de cultivo definidos. Para los microorganismos
quimiohetertrofos, los medios definidos deben contener factores de crecimiento orgnicos que
sirven como fuentes de carbono y energa. Siendo los medios semidefinidos aquellos en los que se
conocen los componentes, pero slo las concentraciones de stos y no su normalidad o molaridad
(Tortora, et al., 2010).
Los medios complejos son aquellos en los que las concentraciones de los compuestos no estn del
todo definidas, ya que stos estn hechos de nutrientes que incluyen extractos de levaduras,
carne, plantas o digestos de protenas de stos u otras fuentes. En este tipo de medios los
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requerimientos de energa, carbono, nitrgeno y azufre para el crecimiento de los

microorganismos son provistos principalmente por protenas. En estos medios, las vitaminas u
otros factores orgnicos de crecimiento son provistos por extractos de carne o de levaduras
(Tortora, et al., 2010).
Los medios selectivos favorecen el crecimiento de microorganismos particulares. Por ejemplo, las
sales biliares o colorantes como la fucsina bsica y el cristal violeta favorecen el crecimiento de las
bacterias gram-negativas por la inhibicin de las gram-negativas (Prescott, et al., 2002).
Los medios diferenciales son aquellos que son capaces de distinguir diferentes tipos de bacterias y
que incluso permiten una identificacin tentativa de los microorganismos basada en sus
caractersticas biolgicas. Por ejemplo, el agar sangre es un medio diferencial y enriquecido, ya
que distingue entre las bacterias hemolticas y las no-hemolticas (Prescott, et al., 2002).
Los medios de cultivo segn sus caractersticas generales se clasifican como se muestran a
continuacin [Tortora, 2007]:
Medios de
Cultivo
Composicin
Medios
definidos o
sinteticos
Medios
complejos
Estado
Medios
semidefinidos
Slido
Semislido
Lquido
Componentes de un medio de cultivo

Los medios de cultivo de microorganismos tienen una fuente de carbn para la incorporacin de la
biomasa. Para los auttrofos, la fuente ms comn es el dixido de carbono, el cual pude ser
suministrado como bicarbonato, dependiendo del medio. Otros compuestos, tales como iones de
amonio, iones de nitrito, azufre y hierro reducido pueden ser usados como fuentes de energa
para el cultivo de stos microorganismos. Los carbohidratos, tales como glucosa u otros
compuestos orgnicos, algunos lpidos, protenas, hidrocarburos, etc., son incluidos en los medios
de cultivo para los microorganismos hetertrofos (Atlas, 2004).
El nitrgeno tambin es requerido para el crecimiento microbiano, y puede ser suministrado con
compuestos inorgnicos con nitrgeno para el cultivo de algunos microorganismos, pero es ms
comnmente suministrado como protenas, peptonas o aminocidos. Los fosfatos y los metales,
tales como magnesio y hierro, tambin son componentes necesarios para el crecimiento
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microbiano; los fosfatos pueden servir como buffers para mantener el pH del medio entre los
lmites de tolerancia para que el microorganismo sea cultivado (Atlas, 2004).
El agar es el compuesto solidificador ms usado en los medios de cultivo. Ronald Atlas en 2004,
define al agar como un polisacrido extrado de algas marinas. El cual se funde a 84C y se
solidifica a 38C. Para un medio slido se utiliza, comnmente, una concentracin de 15g/L.
Siendo de una menor concentracin de agar aquellos medios semislidos (7.5-10g/L).
Como se mencion anteriormente, los medios complejos son aquellos en los que los componentes
son desconocidos y contienen peptonas como fuente de nitrgeno. Estas peptonas son protenas
hidrolizadas formadas por digestin enzimtica o cida. Por ejemplo, la casena es mayormente
usada como sustrato de protena para la formacin de peptonas (Atlas, 2004).
Preparacin del medio
Los ingredientes en un medio son usualmente disueltos y entonces el medio es esterilizado.
Cuando el agar es utilizado como agente solidificado, el medio debe de ser calentado, usualmente
hasta el punto de ebullicin, para que el agar pueda ser disuelto completamente. En algunos casos
donde hay interacciones entre los componentes, tales como metales, pueden llegar a causar
precipitados, entonces las soluciones deben de ser preparadas y ocasionalmente esterilizadas por
separado antes, y mezclar las soluciones para preparar el medio completo (Atlas, 2004).
Segn Ronald Atlas (2004), en la preparacin de estos medios el pH es ajustado por la
esterilizacin de ste, pero en algunos casos esterilizar un cido o base es usada para ajustar el pH
del medio seguidamente de la esterilizacin.
Por ltimo resta mencionar que en microbiologa ser de inters comn a la hora de trabajar con
bacterias o cualquier otro microorganismo determinado, el emplear los medios de cultivo
conociendo su uso, este se muestran a continuacin [Doelle y col. 1992]:

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Aumento de
biomasa en
microorganismos
Lquido o caldo
Promover
crecimiento
anaerobio
Estudios de
Fermentacion y
motilidad
Medios de cultivo
(uso)
Priebas
Bioquimicas
Aislamientos
puros
Slido
Conteo de
colonias
Observacion de
morfologia
celular
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Para la realizacin de sta prctica se dividieron los tipos de medios de cultivo, y se cultivaron 3
diferentes tipos de microorganismo, en los tres diferentes medios de cultivo utilizados, el equipo
uno sembr Escherichia coli, el segundo equipo sembr Lactobacillus casei shirota, y el tercer
equipo realiz la siembra de cscara de pera, con el fin de observar el crecimiento de alguna
levadura presente en la misma cscara. Se utilizaron las siguientes concentraciones de
compuestos qumicos para los tres medios diferentes.
Tabla 1. Medio de cultivo slido semidefinido para Escherichia coli.
Sustancia
Glucosa
Cloruro de sodio
Lactosa
Cristal violeta
Agar
Manitol
Masa pesada (g)

0.2
0.2
0.375
0.0015
0.375
0.25
Concentracin (%P/V)
1
1
1.875
0.0075
1.875
1.25

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Observaciones: El volumen de agua utilizado en este cultivo fue de 20 mL, por lo tanto la ecuacin
utilizada para calcular la concentracin peso/volumen es:
%
=
100 (1)
Sustituyendo los valores de una de las sustancias, en este caso glucosa se tiene qu:
%
0.2
=
100 = 1%
20
El segundo medio de cultivo qu se realiz, fue uno lquido definido, compuesto por las siguientes
sustancias:
Tabla 2. Medio de cultivo lquido definido para Lactobacillus casei shirota.
Sustancia
Cloruro de sodio
Manitol
Sacarosa
Glucosa
Masa pesada (g)

0.125
0.025
0.06
0.2275
Concentracin (%P/V)
0.5
0.1
0.24
0.91
En este caso se utilizaron 25mL de agua para realizar el medio de cultivo slido semidefinido
especfico de Escherichia coli; tambin se utiliz la ecuacin (1) con el fin de obtener la
concentracin peso/volumen de las sustancias presentes en el medio de cultivo.
Tabla 3. Medio de cultivo slido semidefinido para levaduras.
Sustancia
Agar
Lactosa
Peptona de casena
Almidn
Cloruro de sodio
Masa pesada (g)

0.7506
0.5060
1.9024
0.7519
0.2509
Concentracin (%P/V)
1.5012
1.012
3.8048
1.5038
0.5018
Para realizar el medio de cultivo slido semidefinido especfico para levaduras se utilizaron 50mL
de agua, y de igual forma usando la ecuacin (1) se obtuvo la concentracin peso/volumen de los
componentes del medio.
Es importante destacar las condiciones ambientales en las qu se mantuvieron las cajas petri y los
tubos de ensayo en las qu se encontraban los medios de cultivo sembrados, se incubaron tanto
Escherichia coli como Lactobacillus casei shirota a 37C, y la cscara de pera se incub inicialmente
a 23C, sin embargo alguien ajeno al equipo cambi de lugar por tres das estos medios con
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cscara de pera a la incubadora a 37C, y al darse cuenta de esto una persona del equipo
responsable de dicho medio de cultivo regres las muestras a la incubadora a 23C.
Para ilustrar de una forma ms adecuada los resultados qu se obtuvieron de la siembra de los
diferentes microorganismos en los tres diferentes medios de cultivo, se muestran las siguientes
figuras.
En este caso se presentan en las siguientes figuras los medios de cultivo de Lactobacillus casei
shirota en el da dos despus de la siembra de microorganismos. En las figuras 1, 2 y 3 se puede
observar que el microorganismo no present ningn crecimiento al da dos, en ninguno de los tres
medios de cultivo dnde se sembr.
Figura 1. L. casei shirota en medio slido semidefinido para E. coli da dos.
Figura 2. L. casei shirota en medio slido semidefinido para levaduras da dos.

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Figura 3. L. cashei shirota en medio lquido definido especial para L. cashei shirtoa da dos.
Otro de los microorganismos que se sembraron fue E. coli si se observan las figuras 4 y 5 se puede
observar qu tampoco presentaron crecimiento alguno de colonias, en el da dos.
Figura 4. E. coli en cultivo slido semidefinido para levaduras da dos.

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Figura 5. E. coli en medio lquido definido para L. casei shirota da dos.

En las figuras 6 y 7 se puede observar agrietamiento del medio de cultivo, es decir, tras varios das
de incubacin a 37C el agar polimerizado presente en el medio de cultivo se deform, sin
embargo el medio de cultivo permaneci sin presentar crecimiento alguno de la bacteria E. coli.
Figura 6. E. coli en medio slido semidefinido para levaduras da 7.

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Cultivo.
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Figura 7. E. coli en medio slido semidefinido para E. coli da 7.

A partir de la figura 8 se muestran los medios de cultivo con siembra de cscara de pera en los
cules se espera creciera algn hongo o levadura especfico de materia orgnica cmo la cscara
de pera.
Si se observa la figura 8, es claro que hubo crecimiento de algn hongo ya qu presenta como
caractersticas un punto central negro y a los alrededores un tipo de algodoncillo blanco, los cules
son caractersticos de los hongos microscpicos qu infectan a las frutas y verduras, y dado qu lo
que se sembr fue cscara de pera, se puede decir qu este hongo se desarroll a partir de esta.
Sin embargo, cabe destacar qu no se puede afirmar en su totalidad qu haya sido un hongo
gestado a partir de la cscara de pera ya que las colonias presentes no se encuentran dentro de la
lnea de estriado, por lo tanto es posible qu sea algn otro hongo qu contamin el medio de
cultivo.
Es necesario sealar qu este medio de cultivo era especfico para E. coli, a pesar de ello, se
observa la presencia del hongo mencionado anteriormente.

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Figura 8. Cscara de pera en medio slido semidefinido para E. coli da 7.
Para el caso en qu se sembr cscara de pera en medio slido semidefinido especfico para
levaduras no se present crecimiento alguno (ver figura 9), se observa la caja petri con el medio de
cultivo solidificado sin presencia de otra perturbacin o sustancia.
Figura 9. Cscara de pera en medio slido semidefinido para levaduras da 7.

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Figura 10. Cscara de pera medio lquido definido para L. casei shirota da 7.
Cabe destacar qu ninguno de los tubos de ensayo dnde se encontraba el medio de cultivo
lquido present crecimiento alguno de microorganismos (ver figuras 3, 5 y 10)
DISCUSIONES
En microbiologa, un medio de cultivo adecuado para todo tipo de microorganismo debe contener
fuentes de carbono y nitrgeno principalmente, cada componente de los medios de cultivo se
aadieron con la finalidad de inducir la correcta proliferacin de los microorganismos que
posteriormente se vayan a inocular en los mismos, brindndoles as los factores necesarios para su
crecimiento, y atendiendo a las demandas bioqumicas en el metabolismo de los mencionados
[Tortora, 2007]. El objetivo de disear medios de cultivo mnimos y esenciales en sus tres estados
definidos: solido, semislido y liquido, es identificar cada uno de los componentes con el que se
prepararan los mismos, conocer su funcin y beneficio hacia determinados microorganismos, y su
influencia en numerosos estudios que se realizan a estos seres vivos, principalmente pruebas
bioqumicas de susceptibilidad a antibiticos, estudios de fermentacin y motilidad, e identificar la
morfologa colonial de los microorganismos inoculados. De acuerdo al modelo del Dr. Salomn
Bartnicki desarrollado en el ao 1962, el cual preparo en base al crecimiento y desarrollo de
levaduras, l especifico que un medio de cultivo mnimo y esencial para este tipo de
microorganismos debe contener fuentes de carbono, nitrgeno, sulfato de amonio y
oligoelementos (donde se encuentran muchas sales con metales de transicin, como Mn, Cr, Fe,
Co), y al apreciar un crecimiento de estos hongos y corroborarlo con su morfologa colonial, el
publico que las fuentes de bioelementos aadidas a su medio de cultivo son los requerimientos
nutritivos necesarios para el desarrollo de este tipo de microorganismos, aparte de mantener el
cultivo a una temperatura de 27C, ya que al mover su medio a una temperatura mayor de 30c,
pudo descubrir que a altas temperaturas estos hongos no se desarrollan, debido a que son
organismos termosensibles. De la misma manera fue posible corroborar la naturaleza trmica de
estos microorganismos, ya que no se observo desarrollo alguno en los tres medios de cultivo,
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nicamente se alcanzo a apreciar hongos raros de una apariencia bastante desagradable, parecido
a tumores celulares, su color y forma as los distinguan vase figura 8, por lo que fue una seal
clara de contaminacin al medio, teniendo as un cultivo agnotobiotico, donde el factor
responsable para que no se pudiera proliferar este hongo fue, el cambio brusco de temperatura de
una incubadora a otra. Por otro parte, los tres medios de cultivo que se prepararon en el
laboratorio se hicieron en base a los requerimientos mnimos que necesitan la mayora de los
microorganismos para desarrollarse, segn Prescott y sus colaboradores en 2002, estos
requerimientos se encuentran en reactivos como: extractos (cerebro, carne, levadura, etc.,
brindan los carbohidratos, vitaminas y dems biomolculas necesarias para inducir el correcto
desarrollo en el metabolismo del microorganismo), peptona y manitol (fuente de carbono,
nitrgeno y bioelementos), fuente de carbohidratos (prolifera la degradacin enzimtica)y sales en
especial cloruros (regula las propiedades osmticas en el medio de cultivo) [Negroni, 2009]. Es
importante mencionar que cada uno de los ingredientes aadidos a los medios de cultivo tienen
su funcin bioqumica en el mismo, as se le aaden sales porque tanto las levaduras como los
bacterias gram (+) Lactobacillus casei shirota y la enterobacteria Escherichia coli., son
microorganismos que necesita reguladores capaces de controlar las propiedades osmticas del
medio, la lactosa al igual que la glucosa se les aade a los medios debido a que es una fuente de
carbono y es bsica para el desarrollo de mencionados microorganismos, contribuyen a formar los
componentes estructurales y sirve como fuente de energa para el microorganismo, considerando
que cualquier organismo debe de pasar por el ciclo de krebs, desdoblar la glucosa para producir
piruvato (glucolisis) cuya nica va de salida es el ciclo de Krebs para sintetizar todos los
intermediarios y aminocidos, para el caso del medio de cultivo del equipo 3, se aadi como
nica fuente de carbono por ser un medio diferencial [Tortora, 2007]. La razn por la que se le
aade almidn a los medios de cultivo, aparte de que sigue aportando fuentes de carbono al
microorganismo en caso de que ya no cuente con lactosa, es porque representa el proceso
metablico principal para llevarse el crecimiento y desarrollo, por lo que todos los
microorganismos requieren de carbono, hidrgeno, oxgeno, azufre y nitrgeno para su
crecimiento celular, demandando pequeas cantidades de elementos traza como Cu, Mn y Co
dependientes tanto de la fuente de agua como la mayora de los factores de crecimiento, tales
como vitaminas o aminocidos (Doelle y col. 1992). Como fuentes de carbono, la mayora de los
reactivos estn basados en azcares y compuestos derivados de protenas, para el caso del medio
en levaduras se considero la lactosa y el almidn, para los otros medios fueron la glucosa,
sacarosa, lactosa y manitol. Como fuentes de nitrgeno se usaron las peptonas para el cultivo de
levaduras, y para los otros medios se desconoce el tipo de reactivos que se utilizaron como fuente
de este bioelemento. Las desventajas del medio para levaduras comparndolo con los otros
medios, su aplicacin se limita a microorganismos que crecen en bajos contenidos de humedad, la
naturaleza slida del sustrato trae problemas al medir los parmetros de la fermentacin, tales
como el pH, la temperatura, el contenido de humedad y la concentracin de sustrato y productos,
el tiempo de fermentacin es mayor debido a que generalmente se utilizan microorganismos que
presentan bajas velocidades especficas de crecimiento (Tortora, 2007).
Por ltimo resta mencionar que una propiedad fundamental en los hongos, es que contienen
enzimas que son dependientes de metales como: Manganeso, Cromo, Hierro y Cobalto, necesarios
para que las enzimas cumplan su funcin, considerando que los hongos son restrictivos en su
crecimiento, una desventaja al trabajar con ellos debido a que requieren de medios selectivos
[Negroni, 2008; Tortora, 2007].
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CONCLUSIONES
Con base a los resultados obtenidos en esta prctica se concluye sobre la importancia de
considerar los factores bioqumicos adecuados al metabolismo de un determinado
microorganismo, en este caso un microorganismo quimioorganoheterotrofo como una levadura
proveniente de una porcin de cascara de pera putrefacta, ya que el crecimiento microbiano en un
cultivo es producto de mencionados factores, tales como: reactivos utilizados en la preparacin
del medio (fuentes de carbono, nitrgeno, sales y oligoelementos) y condiciones ambientales
adecuadas (esterilidad, pH y temperatura). El control de las condiciones ambientales es
fundamental para el desarrollo del hongo (y cualquier otro microorganismo), y se comprob
porque no se observo desarrollo alguno de la levadura inoculada en el medio, esto debido a la
diferencia de temperaturas de una incubadora a otra, tambin se fundamenta que el medio de
cultivo debe quedar exento de cualquier microorganismo ajeno al seleccionado, ya que sera ms
complejo trabajar con un cultivo agnotobitico que gnotobitico, y la contaminacin de otros
microorganismos que no se conoce su procedencia resulta mortal a la hora de manipular cepas;
esto se logra gracias a la esterilizacin del medio de cultivo y cada uno de los materiales a emplear
durante la inoculacin, y una correcta siembra de microorganismos en medios tanto lquidos como
slidos.
El medio de cultivo diseado y seleccionado de entre las otras 12 propuestas, nos permiti
observar que no hubo crecimiento de microorganismos quimioorganoheterotrofos, y en su lugar
se observa un microorganismo desconocido y raro, aunque el medio se preparo con los nutrientes
necesarios para el crecimiento de levaduras y el sembrado se realizo bajo las consideraciones
sugeridas por los profesores, a excepcin de la forma de sembrado indicada, se cumpli con las
indicaciones establecidas por protocolos tcnicos, se desconoce por completo la causa por la que
no hubo crecimiento del hongo, y la contaminacin, ya que estos hongos utilizan todos los
nutrientes inmersos en el medio preparado y crecen a una temperatura de 27C, factor que influyo
para que no hubiera desarrollo alguno, debido al cambio repentino de temperatura de 27C a
37C.
CUESTIONARIO
1. Mencione la funcin de TODOS los componentes de los medios de cultivo diseados.
Fuente: (Vera Garca, 2005)
NaCl: El sodio juega un papel muy importante en la regulacin osmtica de la clula.
Adems es un componente necesario para el crecimiento de bacterias halfilas.
Lactosa: Es una de las principales fuentes de energa para numerosas bacterias y
levaduras.
Peptona de casena: La peptona tiene la funcin de aportar los nutrientes necesarios para
el crecimiento de la bacteria, es muy til por su alto contenido de carbono y nitrgeno.
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Almidn: Es una fuente de carbono y energa que resulta til para gran cantidad de
bacterias.
Agar: Es un agente solidificante, es decir su funcin es solidificar el medio de cultivo y de
ah que represente el 1.5% del medio.
Glucosa: Sirve como fuente de energa para las bacterias quimioorganohetertrofas, se
caracteriza por que favorece crecimientos rpidos y abundantes.
Violeta Cristal: Sirve para identificar algunas clases de bacterias como las gram positivas.
Manitol: Es una buena fuente de carbono, oxgeno e hidrgeno y por tanto una fuente de
energa.
Sacarosa: Al igual que los otros carbohidratos, sirve como fuente de carbono y energa
para las clulas.
Agua: Es el componente esencial de todos los medios de cultivos ya que aporta humedad
al medio y disuelve todos los componentes.
2. Defina y ejemplifique:
a) Medio Selectivo
Los medios selectivos son aquellos que contienen sustancias que impiden el desarrollo de algunos
microorganismos, y de la misma manera permiten que otros se desarrollen, de acuerdo con la
NOM-065.
b) Medio Diferencial
Estos medios son los que contienen indicadores que permiten identificar cambios en el medio y/o
caractersticas tpicas de las bacterias o colonias estudiadas (Ingraham, 1998).
3. Mencione un grupo de microorganismos que no han podido cultivarse y proponga un mtodo
para su estudio.
Bacterias extremfilas, este tipo de bacterias representan un gran reto para su cultivo debido a las
condiciones en las que se desenvuelven. Por ejemplo Bacilus infernus se encuentra sin oxgeno a
2.3km bajo tierra. Un mtodo que se puede aplicar para su estudio sera utilizar un biorreactor e
imitar las condiciones a las que se desenvuelven (Vera Garca, 2005).
Treponema palludum, agente causal de la sfilis, inoculada en conejos va intratesticular,
permitiendo apreciar las espiroquetas causantes de la enfermedad, ya que en otro tipo de
animales se dificulta esta observacin (Vera Garca, 2005).
4. Qu norma oficial mexicana establece las especificaciones sanitarias de los medios de
cultivo? Elabore un resumen y discuta sobre su importancia.
La norma encargada de regular la sanidad de los medios de cultivo es la NOM-065 de la secretara
de salud. Esta norma estandariza las especificaciones que todos los medios de cultivos deben de
cumplir. Y se aplica a todas las industrias, desde los laboratorios hasta las fbricas dedicadas al
procesamiento de productos relacionados con los medios de cultivo. En esta norma se puede
encontrar una clasificacin de medios que incluye, medios selectivos, selectivos de
enriquecimiento, diferencial, para cultivar grmenes anaerbicos, de transporte, para filtracin a
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travs de la membrana, especiales para cultivo de hongos y levaduras y especiales para cultivo de
protozoarios.
Esta norma es muy importante ya que regula a todos los fabricantes para que sigan ciertas
especificaciones y mtodos al momento de preparar el medio, y su principal importancia radica en
establecer los aspectos necesarios para evitar algn incidente negativo relacionado con los medios
con los que se trabaja.
REFERENCIAS
Garca-Martos P.; Fernndez del barrio, M.T.; Paredes-Salido, F., Microbiologa clnica
Prctica. Segunda edicin. Servicio de publicaciones de la universidad de Cdiz, Espaa
1994.
Negroni, Microbiologa estomatolgica: fundamentos y gua prctica. Segunda edicin.
Editorial mdica panamericana, Argentina 2009.
Tortora, Gerard J. Introduccin a la microbiologa. 9 ed. Buenos aires 2007, Medica
Panamericana.
[Cultivo de Clulas: Medios de Cultivo] [Universidad Interamericana de Puerto
Rico][Consulta:20/08/2011][http://bc.inter.edu/facultad/amlugo/biol2013/culti%20al
gas.htm]
[NORMA
OFICIAL
MEXICANA
NOM-065-SSA1-1993][Secretaria
de
Salud][Consulta:20/08/2011][http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/065ssa1 html]
Negroni, Marta. Microbiologa estomatolgica, fundamentos y gua prctica. 2 Ed.
Buenos Aires 2009, Mdica Panamericana.
Doelle H. W., Mitchell D. A. y Rolz C. E. (1992). Solid Substrate Cultivation. Elsevier
Applied Science, London, N. York, Chapter 3, 35.
Ingraham, J. L.; Ingraham, C. A., Introduccin a la microbiologa. Volumen dos.

Editorial Revert. Espaa 1998.
Collar, P., El desarrollo de la microbiologa. Editorial Revert, Espaa 1985.

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Figura 2. L. casei shirota en medio slido semidefinido para levaduras da dos.

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Figura 8. Cscara de pera en medio slido semidefinido para E. coli da 7.

Figura 9. Cscara de pera en medio slido semidefinido para levaduras da 7.

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