Universidad Autnoma Metropolitana

Unidad Xochimilco

lvarez Romn Thania Sarahi

Larios Ayala Claudia

Aroz Vsquez Alberto

Loeza Coatzozon Grisel

Corrales Andrade Tania Gabriela

Martnez Martnez Carlos

Cruz Hernandez Brenda

Navarrete Gonzlez Diana

Alejandra

Curiel Rojo Alicia Maribel

Quiroz Martnez Irving

Dimas Guzmn Cristian

Ramrez Vega Aura

Garca Betanzo Delfina

Trejo Lara Melina

Gonzlez Cruz Lucero Edith

Turcio Gil Julia Mara

Hernndez Acosta Juan Carlos

Valerio Ordua Sofa Lizeth

Jernimo Hernndez Eduardo

Ventura Maqueda Diana

Divisin: Ciencias Biolgicas y de la salud.

Departamento: Ciencias Biolgicas.

rea de investigacin: Cientfica.

Ttulo del Proyecto: Agentes patgenos presentes en el agua de los

bebederos de las unidades de la Universidad Autnoma Metropolitana

Fecha de inicio: 25/09/2015

Fecha de trmino: 4/12/2015

Lugar donde se desarrolla el proyecto: Universidad Autnoma Metropolitana

unidad Xochimilco.

Resumen:

El agua potable, pasa por procesos fisicos y quimicos con el fin de mejorar su
calidad y pueda ser de consumo humano; entendemos que el agua contiene
organismos vivos que reaccionan con sus elementos fisicos y quimicos, por lo
que es necesario que pase por procesos de purificacin para que sea
adecuada para su consumo; Nuestro objetivo es conocer si hay presencia de
enterobacterias en los bebederos de la Universidad Autnoma Metropolitana
unidades Xochimilco, Cuajimalpa, Azcapotzalco, Iztapalapa, Lerma y Rectora.
El estudio es de tipo observacional y longuitudinal. Se tomaron muestras del
agua de los bebederos de las diferentes unidades y de rectora, las muestras
se tomaron mediante la tcnica de chorro medio y se colocaron en recipientes
esteriles de 50 ml. Posteriormente se prepararan las siembras de cultivo en un
medio selectivo, despus de 24 hrs se analizarn sus caracteristicas mediante
un microscopio y se observara si son Gram + o - mediante la prueba de tincin,
por ltimo las pruebas bioquimicas para la identificacin del tipo de bacterias,
siendo solo una de las muestras contaminada con enterobacterias, la muestra
proveniente de Rectora.
Abstract:

The water goes through physical and chemical processes in order to improve its
quality and may be of human consumption; we understand that the water
contains living organisms that react to their physical and chemical elements, so
it is necessary to go through processes of purifacation to make it suitable for
consumption; Our goal is to know if there is presence of enterobacteria in the
troughs of the Universidad Autnoma Metropolitana Xochimilco, Cuajimalpa,
Azcapotzalco, Iztapalapa, Lerma and Rectory units. The study is observational
type. Water samples were taken from the different units and rectory, samples
were taken using the technique of midstream and placed in 50 ml sterile
containers. Later the samples were prepared in a selective medium, after 24 hrs

its characteristics will be analyzed under a microscope and observe if they are
Gram + or - Finally the biochemical tests were taken to identify the type of
bacterias, being only one of the samples contaminated with enterobacteria,
those saples were from Rectory.

Introduccin:
El agua es un recurso vital para los seres humanos, sta se encuentra sobre la
superficie del planeta y se calcula que el volumen total de agua del planeta
equivale a 1,390 millones de km3. 1 Sin embargo de este total, gran parte del
agua no es posible ser directamente utilizable por los seres humanos, slo el
2.5% del total equivale al agua dulce, el resto es agua salada. 2
A pesar del pequeo porcentaje que puede ser consumible, ste ha disminuido
progresivamente debido a la contaminacin de los sistemas acuticos, a travs
de sustancias como: metales, grasas, aceites, derivados de combustibles,
disolventes y miles de microorganismos.
Ahora bien, respecto al agua que se puede consumir, encontramos el agua
potable. Esta agua pasa por operaciones y procesos, fsicos y qumicos con el
fin de mejorar su calidad, hasta hacerla apta para su uso y consumo humano,
potabilizacin es entonces diferente a filtracin; un proceso de filtracin es
aquel que se lleva a cabo con la finalidad de remover las partculas
suspendidas en el agua, hacindolas fluir a travs de un medio filtrante de
porosidad adecuada.3 Entendemos que el agua contiene organismos vivos que
reaccionan con sus elementos fsicos y qumicos por lo que es necesario
tratarla para que sea adecuada al uso como abastecimiento de la poblacin ya
que los microorganismos causantes de enfermedades que se transmiten por el
agua la hacen peligrosa para el consumo humano.
1 Mizari-Hiriat, M. (2003) El agua como recurso. Cmo ves? Revista de Divulgacin de la
ciencia de la UNAM. 54: 10-12.

2 dem
3 Secretaria de Salud. Estados Unidos Mexicanos (2000) Norma oficial mexicana NOM-127SSA1-1994, "Salud ambiental agua para uso y consumo humano - Limites permisibles de
calidad y tratamientos a que se debe someterse el agua para su potabilizacin". Recuperado
de http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/127ssa14.html Fecha de consulta 29 Septiembre
2015.

Metodologa:
Material:

Cajas de agar MacConkey

Frascos estriles 50 ml

Tubo estril con tapn de rosca o de algodn de 16x150 mm

Pipeta estril de 10 ml

Pipetas estriles de I ml

Propipeta o pipeteador manual

Mechero

Gradilla

Pipeta Pasteur

Solucin salina isotnica (SS1), estril.

Microscopio

Asas bacteriolgicas

Hisopos estriles

Portaobjetos

Cubre objetos

Cubre bocas

Cerillos o encendedor

Mechero

Hipoclorito al 10%

Masking tape

Juegos para uncin de Gram

Frasco gotero con aceite de inmersin

Tiras de papel filtro Whatman No.1 de 2x3 cm estriles

Frasco gotero mbar con reactivo para la prueba de oxidasa

Frasco gotero mbar con agua oxigenada al 3%.

Tubos 13x 100mm con medio agar Hierro Triple Azcar (TS1) (Medio
inclinado, color anaranjado)

Tubos 13x1(10mm con Caldo Urea (Color rosa)

Tubos de I 3x100mm con medio inclinado de agar Cidrato de Sintamos

(Medio inclinado color verde)

Tubos de 13x100mm con caldo semislido de SIM (Color mbar)

Tubos de 13x 100mm con caldo VP-RM (Voges Proskauer-Rojo de

Metilo) (Color mbar)

Trabajo en laboratorio:

PRIMERA SESIN: Sembrado en Agar MacConkey

Antes de comenzar a trabajar fue importante realizar la esterilizacin de rea
de trabajo para evitar cualquier tipo de contaminacin.
Para el cultivo de la muestra estas fueron tratadas de dos maneras:
1) Dilucin de la muestra 1:10, que consiste en tomar 1ml de la muestra y diluirla
en 9ml de Solucin Salina Isotnica estril (SSI)
2) Muestra directa, sin ningn tipo de dilucin
En ambos casos el cultivo se realiz de la misma manera:
-

Con ayuda de un el asa bacteriolgica estril se tom una pequea cantidad

de la muestra de agua y se procede a estriar el inocuo en la caja de Petri sobre
el agar siguiendo un patrn de cuatro cuadrantes y una estra abierta.

Cada agar se sell con un pedazo de masking y se etiquet con los datos
solicitados; especificando el nmero de muestra y si era diluida o pura.

- Las cajas de agar MacConkey se incubaron a 37 C durante 24 horas.

SEGUNDA SESIN: Aislamiento y observacin de las caractersticas
macroscpicas y microscpicas de las Enterobacterias.
Despus de la incubacin de las muestras, se realiz la seleccin de colonias
desarrolladas de agar MacConkey para asi llevar acabo la resiembra de stas,
con la finalidad de obtener un cultivo puro de bacterias.

Observacin microscpica de los cultivos seleccionados por Tincin de Gram.

Para la observacin microscpica de las bacterias desarrolladas se prepar el
frotis con la tincin con la finalidad de determinar si las enterobacterias
presentes eran de carcter Gram+ o Gram- as como su morfologa.

 TERCERA SESIN: Pruebas de identificacin bioqumica de los cultivos

puros seleccionados

Prueba de catalasa: Mediante esta prueba se pretende conocer si las bacterias

reaccionan ante la presencia de perxido de hidrgeno, aquellas bacterias
positivas liberan pequeas burbujas y las negativas no las producen al
adicionar el agua.
Prueba de la oxidasa: El objetivo de dicha prueba es conocer si las bacterias
son o no organismos aerobios o anaerobios. Se utiliza el reactivo clorhidrato de
p-fenilendiamina, en dnde aquellos organismos positivos producen un color
negro o azul intenso en 10 segundos, puede existir una reaccin retardada si
ocurre entre 10 y 60 segundos despus de haber utilizado el reactivo. Si rcidyr
un cambio de color despus de los 60 segundos, la reaccin es negativa.
Los diferentes cultivos fueron sometidos a distintas pruebas bioqumicas, las
cuales fueron: Voges-Proskauer, Rojo de metilo, Citrato de Simmons, Indol
cido sulfihidrico, Ureasa, TSI (hierro triple azcar)
Se realizaron los mismos pasos en tres ocasiones, la primera sin bacterias para
los tubo de control, la segunda para los tubos con la muestra pura y la tercera
para los tubos con las muestra diluida 1:10

Todos los tubos se dejaron incubar a 37 C durante 24 horas

CUARTA SESIN: Lectura de pruebas bioqumicas
Resultados:
. En el caso de las muestras de Rectora de los 10 cultivos totales solo 2
presentaron desarrollo de colonias bacterianas, ambas correspondieron a la
muestra nmero 5 (Dosificador de la caseta de vigilancia en la entrada
principal) observando mayor desarrollo en el cultivo puro a comparacin con el
cultivo diluido
Al observar las tinciones al microscopio se determin que las enterobacterias
presentes en dicha muestra eran de carcter Gram + debido a que presentaban
una coloracin azul violeta.
Tambin se observ la presencia de un hongo en segundo plano

1.2
1
0.8
0.6
Diluida 1:10

0.4

No diluida

0.2
0

1.2

0.8

0.6

Diluida 1:10
No diluida

0.4

0.2

0
Muestra 1: Coordinacin gral. de administracin y relaciones laborales, 2 piso.

COLONIA 1

COLONIA 2

Muestra Pura

Muestra 1:10

MORFOLOGA COLONIAL
Forma

Circular

Circular

Color

Amarillo / Dorado

Amarillo / dorado

Elevacin

Umbilicada con rugosidad

Umbilicada con rugosidad

Borde

Indefinido

Indefinido

Consistencia

Viscosa

Viscosa

Tamao

Grande y puntiforme

Grande y puntiforme

Opacidad

Ausente

Ausente

Superficie

Irregular

Irregular
COLONIA 1

COLONIA 2

Muestra Pura

Muestra 1:10

PRUEBAS BIOQUMICAS
Voges Proskauer

Negativa

Negativa

Rojo de Metilo

Negativa

Negativa

Positiva

Positiva

Presenta

crecimiento

con ligero cambio de

Citrato de Simmons

coloracin hacia un tono

azul verdoso

Presenta

ligero

crecimiento con cambio

de coloracin hacia un
tono azul intenso

Indol

Negativa

Negativa

cido Sulfhdrico (H2S)

Negativa

Negativa

Movilidad

Positiva

Positiva

Ureasa

Positiva

Positiva

Positiva

Positiva

Pico de flauta rojo y Pico de flauta rojo y

TSI (hierro triple azcar)

Profundidad amarillo.

Profundidad amarillo.

Medio

Alcalino/cido Medio

(Alc/A).

Alcalino/cido

(Alc/A).

Despus de realizar las pruebas necesarias se pudo determinar la presencia de

Enterobacterias en las muestras del agua recolectadas en uno de los
dispensadores de la Rectora de la UAM que est localizado en la caseta de
vigilancia de la entrada principal y en base a la identificacin bioqumica las
posibles bacterias presentes en dicha muestra podran ser:
-

Shigella, Grupos A, B, C
Shigella, S. Sonnei
Edwarsiella, E. Tarda
Salmonelleae
Citrobacter, C. Koseri
Hafnia, H. Alves
Pantoea, P. Agglomerans
Serratia, S. Marcescens
Proteus, P. Vulgaris
Proteus, P. Miriabilis
Morganello, M. Morganii
Providencia, P. Rettgeri
Providencia, P. Stuartii
Providencia, P. Alcalifaciens

Es importante resaltar que le objetivo de esta investigacin es solo evidenciar

la presencia de las Enterobacterias, ya que si se desea especificar cul es el
organismo presente en dichas muestras se tendra que proceder a realizar las
pruebas especficas correspondientes.
En relacin a las muestras de los bebederos de la Universidad Autnoma
Metropolitana unidades Cuajimalpa, Lerma, Xochimilco y Azcapotzalco no
hubo desarrollo de bacterias dentro de las muestras de agua que se
distribuye en los bebederos, en cuanto a la Unidad Iztapalapa el servicio
est suspendido por lo que no hubo muestras.

CONCLUSIN:

A travs de la investigacin se verific que el agua que es distribuida en las

diferentes unidades de la Universidad Autnoma Metropolitana es apta para el
consumo humano, puesto que se encuentra libre de entero- bacterias.
Sin embargo, es importante mencionar que slo una de las muestras
recolectadas dio como positivo a la presencia de Entero-bacterias, la muestra
hace referencia al agua recolectada en Rectora, cabe recalcar que no hay
bebederos, por lo que para la distribucin del agua se utiliza un dispensador en
donde se colocan los garrafones de agua, dado que solo la muestra tomada de
este dispensador gener colonias de Entero-bacterias, creemos que el agente
contaminante puede ser el dispensador, es posible que ste se encontrara
sucio o sin mantenimiento adecuado, con esta interrogante dejamos la
investigacin concluida y abierta a nuevas incgnitas para la realizacin de
investigaciones posteriores.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.

1. Mizari-Hiriat, M. (2003) El agua como recurso. Cmo ves? Revista de

Divulgacin de la ciencia de la UNAM. 54: 10-12.
2. Organizacin de Naciones Unidas (2002) Agua: Cuestin de Vida y
Muerte. En Boletn ONU naciones unidas. Centro de informacin para
Mxico, Cuba y Repblica Dominicana. 02/175.
3. Comisin Nacional del Agua (2014) Captulo 6: Agua, salud y ambiente.
Estadsticas del agua en Mxico. Mxico. 140.
4. Secretaria de Salud. Estados Unidos Mexicanos (2000) Norma oficial
mexicana NOM-127-SSA1-1994, "Salud ambiental agua para uso y
consumo humano - Limites permisibles de calidad y tratamientos a que se
debe someterse el agua para su potabilizacin". Recuperado de
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/127ssa14.html

Fecha

de

consulta 29 Septiembre 2015.

5. Cazares Estrada, Lizett Arianna Agua Purificacin Agua, purificacin,
pozos, bombas y Lampara Ultravioleta pp. 51-53
6. Ing. Orellana, Jorge A. Caractersticas del agua potable en Ingeniera
Sanitaria-

UTN

FRRO,

http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/civil/ing_sanitaria/Ingenieria
_Sanitaria_A4_Capitulo_03_Caracteristicas_del_Agua_Potable.pdf,
consultado el 20-09-15 a las 18:45pm
7. Rodier, J (1990). Anlisis de las aguas: aguas naturales, aguas
residuales, agua de mar. Barcelona: Ediciones Omega, S.A.
8. Romero, J (2009). Calidad del agua. Colombia: Editorial Escuela
Colombiana de Ingeniera.