Microbiologa, 17:00-18:55, Jason Rodrguez Guerra, fecha: 07/09/2015

Esterilizacin por desinfectantes y antispticos

(Qumicos)
Dentro de los compuestos qumicos podemos encontrar agentes esterilizantes,
desinfectantes y antispticos.
La efectividad de estos agentes depende de las condiciones bajo las que actan.
Concentracin: vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues una misma
concentracin del agente puede producir un efecto diferente en distintos
microorganismos.
Tiempo: los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma,
por lo que no todos los microorganismos mueren al mismo tiempo.
pH: afecta tanto a los microorganismos como a los agentes qumicos. El aumento de
pH por encima de 7 incrementa la carga negativa de los microorganismos afectando
la concentracin del agente sobre la clula. El pH determina el grado de disociacin
y la efectividad del agente qumico, pues a menor disociacin mayor permeabilidad y
mayor efectividad.
Clasificados segn su mecanismo de accin:

Agentes que daan la membrana

1) Detergentes

catinicos
aninicos
no inicos

2) Compuestos fenlicos
3) Alcoholes

Agentes desnaturalizantes de protenas

1) cidos y bases fuertes
2) cidos orgnicos no disociables

Agentes modificadores de grupos funcionales

1) Metales pesados

mercuriales
compuestos de plata
compuestos de cobre

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2) Agentes oxidantes

halgenos
agua oxigenada
permanganato potsico
cido peractico

3) Colorantes

derivados de la anilina
derivados de la acridina (flavinas)

4) Agentes alquilantes

formaldehido
-propionil-lactona

Agentes que daan la membrana celular

Los solventes orgnicos (fenoles, alcoholes) y los desinfectantes tensioactivos
(detergentes) daan la integridad estructural de la membrana (es decir, la
disposicin ordenada de lpidos y protenas), de modo que interfieren con su funcin,
ejerciendo un efecto neto de:

Interferencia con procesos de transporte y metabolismo energtico;

Salida de pequeas molculas de la clula.

Detergentes

Los detergentes sintticos, al igual que los jabones, contienen una porcin
hidrofbica (normalmente una larga cadena lipfila) y una porcin hidrfila (un
grupo polar), lo cual les permite formar micelas en solucin acuosa, as como
formar capas que cubren y solubilizan molculas hidrfobas.

1. Detergentes catinicos

Son los detergentes ms potentes en cuanto a su actividad desinfectante,

siendo activos contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.

Mecanismo de accin: La porcin hidrfoba penetra en las membranas,
mientras que el grupo polar catinico se asocia con los fosfatos de los
fosfolpidos, provocando alteraciones en dichas membranas, reflejadas en la
prdida de su semipermeabilidad, con salida de metabolitos de N y P desde el
citosol. Es entonces cuando el detergente puede entrar al interior celular, con

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un efecto secundario de desnaturalizacin de protenas. Su actividad se

mejora a pH alcalino.
Usos, ventajas e inconvenientes: Tienen baja toxicidad, por lo que se
pueden emplear como desinfectantes y antispticos de la piel. Se emplean
igualmente en la desinfeccin de material de industrias alimentarias. Su
actividad se ve neutralizada por jabones y fosfolpidos, precipitando en su
presencia.

2. Detergentes aninicos

Mecanismo: Provocan una gran disrupcin de membranas, con efectos de

lisis. Son activos sobre todo a pH cido, preferentemente sobre bacterias
Gram-positivas, pero poco sobre Gram-negativas, ya que stas quedan ms

protegidas por la barrera del lipopolisacrido de la membrana externa.

Usos: Cuando los detergentes aninicos se combinan con cidos, se logran
desinfectantes sanitarios muy potentes (debido al efecto sinrgico de ambos
componentes) y de rpida actuacin (unos 30 segundos).

3. Detergentes no inicos

No tienen actividad antimicrobiana, pero algunos tienen empleo en otros

campos de la Microbiologa: los steres del cido oleico pueden adicionarse a
medios de cultivo para evitar la formacin de grumos y favorecer el
crecimiento disperso de ciertas bacterias (como Mycobacterium tuberculosis);
adems el oleico puede estimular el crecimiento.

Fenoles
Son rpidamente bactericidas a bajas concentraciones, causando:

daos a membranas, con prdida de constituyentes citoplsmicos

inactivacin irreversible de oxidasas y deshidrogenasas de membrana
desnaturalizacin de protenas.

Tienen baja solubilidad en agua, por lo que se emplean en frmulas que incluyen
agentes emulsificadores (jabones) que, adems, aumentan su actividad.

Alcoholes

Mecanismo de accin: El mecanismo de accin de los alcoholes es la

desnaturalizacin de las protenas de los microorganismos. La
desnaturalizacin proteica slo es posible en presencia de agua; por este

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motivo el alcohol absoluto presenta un poder bactericida mucho menor que
las mezclas de alcoholes con agua. Podra tener cierta accin bacteriosttica
al inhibir la produccin de metabolitos esenciales para la divisin celular
rpida. Tiene accin bactericida pero poco efecto residual. Presenta un inicio
de accin retardado; por este motivo se debera dejar actuar dos minutos
antes de cualquier procedimiento.
Aplicaciones como desinfectante:
a) En ausencia de esporas puede utilizarse en la desinfeccin de algunos
instrumentos clnicos; no obstante, existen alternativas mejores, como el
xido de etileno y el glutaraldehdo. Ha sido utilizado eficazmente para la
desinfeccin de termmetros orales, termmetros rectales y fonendoscopios.
No es til para desinfectar material quirrgico (porque no es esporicida).
b) Tiene utilidad en la desinfeccin de los tapones de caucho de los viales
multidosis de medicacin, en la desinfeccin de pequeas superficies, y en
general en la desinfeccin de materiales no crticos o de bajo riesgo
(ventiladores, maniques de reanimacin cardiopulmonar,).

Agentes desnaturalizantes de protenas

cidos y lcalis fuertes
Son activamente bactericidas, debido a sus grupos H + y OH- disociados,
respectivamente. En principio, su actividad es proporcional al grado de disociacin,
pero algunos hidrxidos son ms potentes de lo sugerido por su mero grado de
disociacin, debido a la accin txica directa que puede ejercer el catin metlico.
Existen ciertas especies bacterianas que resisten relativamente bien la accin de
bases fuertes. Tal es el caso del bacilo tuberculoso. Esto se aprovecha para aislarlo
y purificarlo: se lica un esputo de enfermo sospechoso en una solucin 1M de sosa
(NaOH) y se deja 30 minutos antes de sembrar. Bajo estas condiciones,
prcticamente slo sobrevive el Mycobacterium tuberculosis.
cidos orgnicos
Los cidos orgnicos, que son poco disociables, ejercen su efecto en cuanto a
molculas intactas (sin disociar), que penetran a la clula.
El cido benzoico y el cido srbico se usan ampliamente como conservantes
alimentarios.
Ciertos cidos (como el actico, lctico, propinico) aparecen en alimentos
fermentados, actuando como conservantes naturales. Estos mismos, as como el

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ctrico se pueden aadir a otros tipos de alimentos, para prolongar el periodo de
posible almacenamiento de los productos.
El cido brico
Se ha usado como conservante (a veces ilegal) de alimentos, as como en
oftalmologa.

Agentes modificadores de grupos funcionales

Esta amplia clase de agentes se caracteriza, en general, por los siguientes efectos:

alteran grupos que forman parte de los centros activos de enzimas y otras

protenas;
alteran grupos funcionales de cidos nucleicos, componentes de pared y de
membrana.

Metales pesados
Las sales solubles de Hg, As, Ag, Cu, entre otros, "envenenan" la actividad
enzimtica formando mercptidos con los grupos -SH de la cistena. Tambin
interaccionan con -NH2, -COOH y radicales fosfato.
Los ms efectivos son los derivados del mercurio y de la plata.
Mercuriales. Se vienen usando desde antiguo en Medicina.

Cloruro de mercurio (HgCl2). En solucin al 0,1% fue muy usado como

desinfectante potente, pero es muy txico, y apenas se emplea en la

actualidad.
Compuestos orgnicos de mercurio (como el MercurocromoJ, la
MercrominaJ, el Mertiolato): No son totalmente fiables como desinfectantes y
presentan cierta (aunque baja) toxicidad, pero se emplean mucho como

antispticos de la piel y de heridas.

Sales de fenilmercurio. Son potentes inhibidores no slo de bacterias, sino
de levaduras, hongos y algas. Se usan especialmente en el control de
posibles contaminantes microbianos (p.ej., bacterias oportunistas del
gnero Pseudomonas) en productos farmacuticos, cosmticos y
oftalmolgicos.

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Compuestos de plata.
Bien sea en forma de sales solubles, o en preparaciones coloidales, los compuestos
de plata se usan ampliamente como antispticos, aunque estn restringidos, al tener
efectos irritantes y custicos.

Nitrato de plata (AgNO3). Es muy bactericida frente al gonococo (Neisseria

gonorrhoeae), y por ello se usa habitualmente para prevenir la oftalmia

gonoccica del recin nacido.

Coloides orgnicos de plata. En ellos los iones Ag+ se van liberando
lentamente. Tienen efectos bacteriostticos, y encuentran su principal

aplicacin en oftalmologa.
Cremas de nitrato de plata y sulfodiazina de plata. Usadas para el
tratamiento de quemaduras, han reducido notablemente la mortalidad
derivada de las grandes quemaduras.

Sales y compuestos de cobre.

No tienen aplicacin en Bacteriologa Mdica, pero se emplean en Agricultura para el
control de hongos y algas.
Agentes oxidantes
Los efectos de los agentes oxidantes que se tratan a continuacin son la inactivacin
de protenas enzimticas (convitiendo los radicales -SH en disulfuros -S-S-).
Adems, los ms potentes tambin atacan radicales amino, el grupo indol (presente
en el triptfano), y la tirosina.
Halgenos.
Son bactericidas muy tiles y muy potentes. El iodo no tiene parangn como
desinfectante de la piel, y el cloro no tiene igual en el tratamiento de aguas.

Yodo: Aparte de su efecto oxidante, se combina irreversiblemente con

residuos de tirosina de las protenas. Sus principales presentaciones son la

tintura de iodo y los iodforos.

Tintura de iodo: es una mezcla de 2% de I2 + 2% de IK en alcohol de 70%.
Su mximo efecto bactericida lo tiene a pH<6. Es un magnfico antisptico de
la piel, de hecho el mejor de los conocidos, pero tiene un efecto doloroso y
custico en heridas abiertas.

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Iodforos: son mezclas de iodo con agentes tensioactivos (detergentes), en

los que stos actan como portadores del iodo, al que van liberando
lentamente, sin provocar irritacin. Tambin se emplean en desinfeccin de

instalaciones de industrias alimentarias.

Cloro: El cloro se presenta bajo las formas de Cl 2 (gaseoso), hipocloritos y
cloraminas. El efecto desinfectante se debe a la liberacin de cloro libre (Cl 2);
a su vez, el Cl2 reacciona con el agua para dar cido hipocloroso, que a pH
cido o neutro es un oxidante fuerte:

Cl2 + H2O ---------> ClOH + H+ + Cl(ClO)2Ca + H2O ----> Ca++ + H2O + 2 ClO(ClO)2Ca + 2H2O ---> Ca(OH)2 + 2 ClOH
La disociacin del cido hipocloroso depende del pH (se realiza a pH<7)
ClOH -------> H+ + ClO

Cloro gaseoso: a 1-3 ppm se usa en la cloracin de aguas para bebida y de

aguas de piscinas. Su actividad se ve muy influida (mermada) por la
presencia de materia orgnica; por ello, se suele determinar la demanda de
cloro del agua a tratar. Descontada dicha demanda, el cloro gaseoso mata

rpidamente (15-30 segundos) a slo 1 ppm.

Soluciones de hipocloritos: hipocloritos de sodio, de calcio o de litio. A 200
ppm de cloro se usan ampliamente, ya como lquidos (lejas), o en polvo, en
industrias alimentarias y lcteas (para desinfectar el equipamiento y
maquinaria que ha de entrar en contacto con los alimentos a procesar), en
restaurantes, hoteles, hospitales, etc.

Agua oxigenada.
El perxido de hidrgeno (H2O2), en solucin al 3%, se us en otro tiempo como
desinfectante, pero est actualmente en desuso, debido a que algunas bacterias son
resistentes, por la posesin de catalasas y peroxidasas. Adems, en desinfeccin de
heridas abiertas su efecto es muy pobre, porque el agua oxigenada es
descompuesta por la catalasa tisular.
Se emplea en la desinfeccin de lentillas blandas, dejando tiempo suficiente de
actuacin. Tambin, en desinfeccin de superficies inertes y equipos quirrgicos.
Permanganato potsico.
Al 1%, se usa como antisptico uretral.

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cido peractico.
Es un fuerte agente oxidante. En forma de vapor se usa en la esterilizacin de
cmaras de cra de animales libres de grmenes.

Tinturas de colorantes bsicos

Algunos colorantes derivados de la destilacin del alquitrn de carbn, sobre todo
los trifenilmetanos y las acridinas, no slo tien las bacterias (recurdense las
prcticas), sino que tambin actan como antibacterianos, incluso a pequeas
concentraciones. Los colorantes bsicos son los ms efectivos.
En general, su mecanismo depende de su afinidad hacia los grupos fosfato (cidos)
presentes en las nucleoprotenas.
Encuentran su uso como antispticos de lesiones dermatolgicas, infecciones de la
piel y pequeas heridas.
Su principal inconveniente es que muchos de ellos se inactivan en presencia de
suero y otras protenas.
Colorantes de trifenilmetano:
Son derivados de la anilina. Entre ellos se encuentran el verde brillante, el verde
malaquita, el violeta de genciana, el violeta cristal y la fuchsina bsica.
Son muy selectivos hacia bacterias Gram-positivas, sobre las que son efectivos a
slo 0,2-2 ppm. En cambio, las Gram-negativas suelen ser resistentes, debido a su
membrana externa.
El efecto antibacteriano se debe a la pseudobase, que es ms lipfila que el
respectivo catin, y bajo esa forma accede al interior celular, donde se une a los
grupos fosfato de los cidos nucleicos.
Colorantes derivados de la acridina (llamados flavinas, por su color amarillento
-Lat:flavus-)

Los ejemplos tpicos son la acriflavina, la proflavina y la tripoflavina. Interfieren

en la biosntesis de cidos nucleicos (intercalndose en la doble hlice del
ADN) y protenas. Son bactericidas y bacteriostticos sobre una gran

diversidad de bacterias.
A diferencia de las anilinas, ejercen su accin tambin en presencia de

materiales como suero, pus, etc.

Su uso principal es la antisepsia de heridas.

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Agentes alquilantes
Son agentes esterilizantes, activos tanto sobre clulas vegetativas como sobre
esporas, que ejercen su efecto letal por su accin alquilante de protenas y cidos
nucleicos.
Formaldehido
La alquilacin la produce reemplazando hidrgenos lbiles de ciertos grupos
qumicos (-NH2, -OH, -COOH y -SH), produciendo:

hidroximetilaciones
condensaciones (entrecruzamientos).
Usos comerciales:
como gas, en la descontaminacin de habitaciones;
como formalina (solucin acuosa al 35%);
como para formaldehido (polmero slido de 91-99% de pureza).

La formalina se emplea para preservar tejidos, en lquidos de embalsamamiento, y al

0,2-0,4% en la preparacin de vacunas de virus.
-propionil-lactona.
Es 25 veces ms activa que el formaldehido. Acta como gas en presencia de 8090% de humedad relativa, aunque es poco penetrante.

Esterilizacin en fro (Qumicos)

GLUTARALDEHDO
Mecanismo de accin: Es alquilante de grupos sulfhidrilo, hidroxilo, carbonilo y
amino, alterando as la sntesis de DNA, RNA y protenas. La clula es incapaz de
llevar a cabo sus funciones esenciales. Causa tambin disrupcin de la pared de
esporas e inhibe la esporulacin y germinacin. Las soluciones deben estar
activadas: el pH ptimo de actuacin es entre 7.5-8.5. Menos txico y ms potente
que el formaldehdo.
Aplicaciones como desinfectante
Desinfeccin de endoscopios e instrumentos dentales: solucin acuosa de
glutaraldehdo al 2% a pH 8. Las soluciones son ligeramente cidas y deben
alcalinizarse con bicarbonato sdico al 0.3% para activarlas. La inmersin de
endoscopios flexibles en solucin de glutaraldehdo al 2% durante 20 minutos a 20C

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despus de su limpieza a fondo se considera el patrn de desinfeccin en
endoscopia digestiva.
Material de plstico o goma que no es esterilizable por calor: equipos de terapia
respiratoria, broncoscopios, cistoscopios, artroscopios, conexin de amb y bolsa de
amb, palas laringo, nebulizadores, dializadores, equipos de anestesia y de terapia
respiratoria, tubos de espirometra y hemodilisis, laparoscopios, Antes de la
desinfeccin con glutaraldehdo el material ha de estar limpio. No tiene aplicacin
como antisptico. Se ha utilizado por va tpica, a concentraciones entre 5 y 10%,
para tratar verrugas (no faciales ni anogenitales), hiperhidrosis plantar u
onicomicosis. Su uso para estas indicaciones no se recomienda, ya que existen
tratamientos ms eficaces y menos txicos.

Esterilizacin por gases (Qumicos)

Esterilizacin por gas de xido de Etileno
Es un proceso de esterilizacin a baja temperatura (30-60C) mediante el cual se
somete a los microorganismos a la accin qumica del xido de Etileno. Se presenta
como gas o lquido incoloro, puro o con mezcla (en general, con fren). Penetra con
facilidad a travs de materiales de goma y plstico en estado gaseoso. Es un agente
esterilizante muy eficaz. Esteriliza todos los materiales termosensibles que no se
pueden esterilizar con vapor. El material esterilizado requiere aireacin para que se
eliminen los residuos del gas. La duracin del ciclo es de 90 minutos y el periodo de
aireacin suele ser de 12 horas.

Es inflamable, txico y reactivo, por lo que se necesita formacin adecuada

para su utilizacin, con el fin de evitar riesgos para la salud.

La limitacin ms importante de este sistema es el periodo de aireacin

necesario para eliminar la toxicidad.

Esterilizacin por gas-plasma de Perxido de Hidrgeno

Proceso de esterilizacin a baja temperatura que consiste en la difusin de perxido
de hidrgeno en fase plasma (estado entre lquido y gas), que ejerce la accin
biocida.

El perxido de hidrgeno no deja ningn residuo txico.

Se convierte en agua y oxgeno al final del proceso.

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El material no precisa aireacin.

El ciclo de esterilizacin dura entre 54 y 75 minutos.

Limitaciones: no se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa, algodn,

lquidos, humedad, madera o instrumental con lmenes largos y estrechos. Es el
mtodo de esterilizacin ms caro de entre los descritos.

Esterilizacin por radiacin.

Radiacin ionizante: produce importantes modificaciones qumicas y muy pequeo
incremento de temperatura.
Efecto letal:
Directo: principalmente por alteracin del ADN (hasta cierto punto reversible)
Indirecto: por generacin de radicales libres y perxidos por la interaccin de la
radiacin con el agua.
Microorganismo ms resistente: Deinococcus radiodurans.
Dosis usuales (2 a 25 kGy) no destruyen endotoxinas 1 Rad = 100 erg/g = 10-2 Gy
(dosis de radiacin absorbida)
Ventajas

Escaso dao al material

Gran efectividad
Procedimiento fcil de controlar: dosis de irradiacin (tiempo de

exposicin)
Proceso continuo

Desventajas

Requiere instalacin compleja por lo que es solo aplicable a gran

escala y no est disponible en todos lados.

La emisin de una fuente de radiacin gamma no se puede interrumpir

Radiacin ultravioleta: La energa de la radiacin no alcanza para arrancar

electrones, solo los excita.
Limitaciones: escasa penetracin, no ionizante, accin enzimtica reparadora que
revierte el dao.
Slo tiene utilidad para destruir microorganismos del aire o sobre superficies en el
mantenimiento de reas limpias.

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Limpiar peridicamente las lmparas con alcohol porque el polvo depositado
disminuye la eficacia del mtodo.

Esterilizacin por Filtracin (Mecnicos)

Se usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El tamao del
poro depender del uso al que se va a someter la muestra. Hay que tener en cuenta
que los filtros que se utilizan generalmente en los laboratorios no retienen virus ni
micoplasmas, estos ltimos estn en el lmite de separacin segn el dimetro de
poro que se utilice.
Existen tres tipos bsicos de filtros:

Filtros profundos o Filtros de profundidad: consisten de un material fibroso o

granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de flujo. En

este tipo de filtros la retencin de las partculas se produce por una combinacin de
absorcin y de retencin mecnica en la matriz.

Membranas filtrantes: tienen una estructura continua, y la retencin se debe

principalmente al tamao de la partcula. Partculas ms pequeas al tamao del

poro quedan retenidas en la matriz del filtro debido a efectos electrostticos.

Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo): son pelculas muy delgadas de

policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiacin y

sustancias qumicas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la
membrana verticalmente. Funcionan como tamices, evitando el paso de toda
partcula con un tamao mayor al del poro.
La filtracin se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolbiles. Su usa
para esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, soluciones
intravenosas, drogas diagnsticas, radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y
soluciones de antibiticos y vitaminas.

BIBLIOGRAFA
Enrique Iez. (1998). ACCIN DE LOS AGENTES QUMICOS SOBRE LAS
BACTERIAS. Septiembre 07, 2015, de Universidad Nacional del Nordeste Sitio web:

http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/micro-ianez/19_micro.html