UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

CURSO: MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

TEMA: BIODEGRADACIN DE PETRLEO
INTEGRANTES:
- BRAVO VIDAURRE FRANKLIN
- ROJAS GONGAZA DIEGO JESUS
- SANCHEZ BALAREZO KATERYN LESLY
PETRLEO: Es una mezcla compleja y variable de compuestos orgnicos. Presentan
cadenas lineales y ramificados, anillos sencillos, condensados y aromticos. Contienen el
0.05%-3% de compuestos heterocclicos: Azufre, Nitrgeno y Oxgeno
USOS:
-

Gaslina
Kerosene
Gases ligeros
Petrleo diesel
Brea y Alquitrn
Aceites lubricantes

PETRLEO COMO CONTAMINANTE:

-

Aire
Suelo
Agua
Flora
Fauna

SOLUCIN ANTE EL PROBLEMA : BIORREMEDIACIN

Bacterias degradadoras

Hongos

Achromobacter
Acinetobacter
Actynomices
Alcaligenes
Arthrobacter
Bacillus
Beneckea
Brebebacterium

Peptococcus
Pseudomonas
Sarcina
Spherotilus
Spirilum
Strepyomyces
Vibrio
Xanthomyces

Aspergillus
Botrytis
Candida
Cephalosporium
Cladosporium
Debaromyces
Fusarium
Geotrichum
Hansenula
Helmintosporium

Mucor
Phialophora
Penicillium
Rhodosporidium
Rhodotorula
Saccharomyces
Saccharomycopsis
Scopulariopsis
Torulopsis
Trichoderma
Trichosporun

Coryneformes
Erwinia
Flavobacterium
Klebsiella
Lactobacillus
Leumthrix
Moraxella
Nocardia

Biorremediacin: Eliminacin biolgica de los contaminantes en las reas afectadas

que se lleva a cabo por organismos autctonos en donde su actividad puede ser
favorecida por: Bioestimulacin , oxigeno , nitrgeno y el incremento de la poblacin
bacteriana :
a) Bioinoculacin: Incorporacin de mo comerciales cuando los mo autctonos
no pueden degradar el contaminante presente
b) Bioaumentacin: Incremento drstico de la masa microbiana del suelo
mediante adicin de mo similares a los presentes en el suelo pero
incrementados en biorreactores

Fitorremediacin: Utilizacin de plantas para la eliminacin de contaminantes y

metales del suelo.

RUTAS DE DEGRADACIN:
Biodegradacin de compuestos alifticos
(monoterminal, subterminal y biterminal)

Biodegradacion de compuestos aromticos

VERTIDOS DE CRUDO EN EL MAR:

CONTAMINACIN DEL SUELO:
-

Los compuestos voltiles (aquellos de 12 carbonos o menos) pueden perderse en la

atmsfera
Si el derrame es bajo el nivel del suelo los componentes mviles pueden migrar hacia el
nivel fretico y aguas subterrneas
Los compuestos de mayor peso molecular, en su mayora insolubles se pueden
desplazar lentamente a travs del suelo

PROCEDIMIENTO: AISLAMIENTO DE LAS BACTERIAS DEGRADADORAS DE PETROLEO

DIESEL
-

Aislamiento de bacterias hetertrofas: Se pesaron 10 g, de cada una de las

muestras de suelo contaminado y luego son enriquecidas en 90 mL de caldo

Bushnell Haas a 30 C durante 24 horas .Despus, se tom una alcuota de 0,1
mL y se sembr mediante la tcnica de agotamiento y estra sobre agar nutritivo,
King B y Mac Conkey. Las placas de Petri fueron incubadas a 30 C durante 24
horas. Donde en el agar nutritivo se agruparon las colonias desarrolladas, segn
sus caractersticas morfolgicas y se seleccion una representante de cada
grupo. De igual manera en el agar King B se seleccionaron las colonias
formadoras de fluorescencia y en el agar Mac Conkey las colonias lactosa
negativas .A tales colonias se cultivaron en agar Tripticasa Soya (TSA) y
Bushnell Haas con 4 % de petrleo Diesel ,constituyendo los cultivos puros, que
posteriormente fueron guardados en refrigeracin a 8 C
-

Tiempo requerido para la utilizacin del petrleo como fuente de

energa :

carbono y

Cada bacteria nativa se cultiv en 10 mL de caldo nutritivo a 30 C

durante 24 horas. Posteriormente el caldo nutritivo se centrifug (3500 rpm)

durante 10 minutos, el sobrenadante se elimin, el sedimento se lav con
solucin salina esterilizada (0,87 %, p/v). Luego se tom 1 mL y se inocul por
triplicado en tubos de prueba de 16 x 150 mm con 10 mL de caldo Bushnell
Haas con indicador prpura de bromocresol y 0,1 mL de petrleo Diesel. La
incubacin se realiz a 30 C hasta por 10 das, con agitacin manual,
diariamente por 10 minutos y en simultneo se investig el viraje del indicador

del lila al amarillo, que se interpret como positivo para la utilizacin del petrleo
como fuente de carbono y energa
-

Eficiencia de la Biorremediacin de suelo contaminado con petrleo por tres

bacterias nativas seleccionadas: El clculo de la eficiencia (%) de la

biorremediacin del suelo contaminado con petrleo Diesel se realiz segn

Ramrez (2005):
E = Si Sf x 100
Si
Donde:
E = Eficiencia de degradacin de petrleo (%)
Si = Concentracin inicial de TPH
Sf = Concentracin final TPH

Clculo de las concentraciones de urea y fosfato diamnico requeridos para

alcanzar una relacin C:N:P de 100:10:1 (en Carreo, 2008)

Clculo de FDA (18%N 46%)

100 kg FDA
46 U/P
x
1 U/P
x = 2,174 kg FDA.Ha-1
x = 0,217g FDA. m2
Adicin por terrario:
0,217g FDA
1 m2
x
0,112 m2
x = 0,024 g FDA
100 kg FDA
18 U/N
0,000024 kg FDA
x
x = 0,000024 kg N
x = 0,004 g N FDA

Clculo de Urea (46% N)

100 kg urea

46 U/N

10 U/N

x = 21,739 kg urea. Ha-1

x = 2,1739 g urea. m2
Adicin por terrario:
2,174 g urea
1 m2
x
0,112 m2
x = 0,239 g N
0,239 g N (urea) - 0,004 g N (FDA)
x = 0,235 g urea