+

BIOINDICADORES Y BIOMARCADORES DE
CONTAMINACION AMBIENTAL
Dr. Rodrigo Orrego
rodrigo.orrego@uantof.cl
www.iio.cl

Contenido

Introduccion

Biondicadores

Conceptos y Criterios de seleccion

Ventajas y desventajas

Biomarcadores

Nutrientes vs toxicos
Condicion fisiologica y estrs
Monitoreo fisicoquimico de contaminantes

Concepto y Clasificacion
Ventajas y desventajas
Usos

Ejemplos estrategia Bioindicador/Biomarcador

en ambientes costeros

PAHs
Metals exposure
Endocrine Disruption
Pharmaceuticals

REGION
DE TOXICIDAD
REGION
DE NO-EFECTO

Respuesta

MUERTE

Nutrientes
esenciales

Homeostasis

Txicos
(no-nutritivos)

UMBRAL
DE SEGURIDAD

Dosis (incremento en concentracin)

Limite
Tolerancia Fisiolgica

INHABILIDAD

ZONA 3

DAO SEVERO
(no curable)

ZONA 2

DAO
(curable)

ZONA 1

Estrs

Enfermedad
Deterioro reproductivo
Muerte

Mecanismos
de reparacin

Respuestas
compensatorias

Saludable
Rpida
adaptabilidad

OK

Homeostasis

Compensacin

DETERIORO

No-Compensacin

Monitoreo Ambiental
Las desventajas de los anlisis fisicoqumico de contaminantes en distintas
matrices ambientales se relacionan con :

Muchas veces no toma en cuenta sistemas

dinmicos si no estacionarios (Fotografas).

Generan informacin espacio-temporalmente

muy limitada.

Para contaminantes complejos es necesario

realizar anlisis de alto costo (caso algunas
STPs).

La sola presencia de un contaminante en una

matriz ambiental no implica que esta sea capaz
de provocar dao en algn organismo vivo
(Biodisponibilidad).

ES POSIBLE EVALUAR LOS CONTAMINANTES EN LAS DISTINTAS MATRICES

BIOLOGICAS Y DETERMINAR SUS POTENCIALES EFECTOS?

BIOTA
Ambiente
Atmosfrico
Terrestre

AIRE

SUELO

K2
K3

AGUA

K5
BIOTA

SUSPENDIDO
K4
Ambiente
Acutico

K1

SEDIMENTO

Bioindicators: Using Organism s to Measure Environm ental Im pacts | Learn Science at Scitable

12- 08- 24 11:44 AM

GLOBAL AND REGIONAL ECOLOGY | Lead Editor: Carolyn Malmstrom

Bioindicators: Using Organisms to Measure Environmental

Impacts
By: Emily A. Holt (Department of Watershed Sciences, Utah State University) & Scott W.
Miller (Department of Watershed Sciences, Utah State University) 2 0 1 1 Nat ure Education
Citation: Holt, E. A. & Miller, S. W. (2 0 1 1 ) Bioindicators: Using Organisms to
Measure Environmental Impacts. Nature Education Knowledge 2 (2 ):8

How do we assess the impacts of hum an activities on natural ecosystem s? What can the biota tell us about the
environment and its response to natural stress?

Introduction
What can the canary in the coal m ine tell us? Historically, canaries accom panied coal m iners deep underground. Their sm all lung capacity and unidirectional lung ventilation
system made them more vulnerable to sm all concentrations of carbon m onox ide and m ethane gas than their hum an companions. As late as 1986, the acute sensitivity of these
birds served as a biological indicator of unsafe conditions in underground coal m ines in the United Kingdom. Since hum an health concerns continue to drive the developm ent
and application of bioindicators, the loss of ecosystem services (e.g., clean air, drinking water, plant pollinators) has increasingly focused our attention on the health of natural
ecosystem s. All species (or species assem blages) tolerate a limited range of chem ical, physical, and biological conditions, which we can use to evaluate environm ental quality.
Despite m any technological advances, we find ourselves turning to the biota of natural ecosystem s to tell us the story of our world.

What Is a Bioindicat or?

What can the canary in the coal mine tell us?

Historically, canaries accompanied coal miners
deep underground. Their small lung capacity and
unidirectional lung ventilation system made them
more vulnerable to small concentrations of carbon
monoxide and methane gas than their human
companions.

Biological indicators are species used

to monitor the health of an environment
or ecosystem. They are any biological
species or group of species whose
function, population, or status can be
used to determine ecosystem or
environmental integrity

BIOINDICADOR
Organismo vivo en el cual puede ser avaluada una respuesta producto de la exposicin a
un contaminante o una mezcla de ellos.

Informacin de su biologa bsica

Fcilmente disponible (cultivo/captura)

Presentar ciclos de vida cortos

Suficientemente sensible a la exposicin

Tener una amplia distribucin geogrfica (Cosmopolita)

Encontrarse en un estado de conservacin que permita su uso

Fcil manipulacin tanto en condiciones de laboratorio como en campo

BIOMONITOR
Organismo que acumula contaminantes en sus tejidos, y por lo tanto pueden ser analizados
para identificar la abundancia y biodisponibilidad de estos en los ambientes acuticos.
Los contaminantes deben ser acumulados sin impactos letales
sobre el organismo.

Los contaminantes en sus tejidos deberan reflejar fielmente la

biodisponibilidad ambiental de estos compuestos

HABITAT
DISPONIBLES

EUTROFICACION

HIDRODINAMICA

DISPONIBILIDAD
ALIMENTOS

FACTORES
FISICOQUIMICOS

CONTAMINACION

RESPUESTA
INTEGRADA
CRECIMIENTO

REPRODUCCION
RESPUESTA
POBLACIONAL

CAMBIOS
COMUNIDAD

EFECTOS
ECOSISTEMICOS
(adapted from: Adams, 2001).

EL CONCEPTO DE BIOMARCADOR

Cambio inducido por un contaminante en un componente bioqumico o

celular de un proceso, estructura y funcin que puede ser medido en un
sistema biolgico (NRC, 1989).

Cambio bioqumico, celular, fisiolgico o del comportamiento que puede

ser medido en un tejido, fluido biolgico, organismo o poblacin y que
proporciona evidencia de exposicin a, y/o efectos de uno o ms
contaminantes (Depledge, 1994).

LOW ECOLOGICAL RELEVANCE

BIOCHEMICAL
ENZIMATICAL DETOXICATION

IMMUNOLOGICAL
PHYSIOLOGICAL
HISTOPATHOLOGICAL

SHORT-TERM RESPONSES

LONG-TERM RESPONSES

BIOENERGETIC
REPRODUCTIVE
POPULATION / COMMUNITY

HIGH ECOLOGICAL RELEVANCE

BIOMARCADOR

BIOINDICADOR

Molecular, Bioqumica

Individuo, Poblacin,
Comunidad

SESIBILIDAD AL
ESTRESOR

Alta

Baja

RELACIN CON
LA CAUSA

Alta

Baja

VARIABILIDAD DE
LA RESPUESTA

Alta

Media - Baja

Meda - Alta

Media - Baja

Baja

Alta

TIPO DE
RESPUESTA

ESPECIFICIDAD
AL ESTRESOR
RELEVANCIA
ECOLGICA

POR QU UTILIZAR BIOINDICADORES/BIOMARCADORES?

El anlisis de los compartimentos ambientales est

sometido a variaciones muy drsticas en funcin de la
fuente de emisin ya sea puntual o difusa.

Las concentraciones en el aire y en el agua son de 1 a 4

rdenes de magnitud inferiores en relacin a aquellas
presentes en los organismos.

Los valores entregados por los anlisis qumicos de los

distintos compartimentos ambientales, no involucra el
conocimiento de los efectos y de la biodisponibilidad
de las sustancias contaminantes sobre los organismos.

Los bioindicadores proveen de un dato integrado en el

tiempo

Los bioindicadores, a travs de los biomarcadores

proporcionan informacin relativa a exposicion y
efectos de las sustancias y tambin de procesos
interactivos bajo condiciones naturales (sinergismo,
antagonismos)

CARACTERISTICAS DE LOS BIOMARCADORES

Cuantificable

Dependiente de la dosis o del tiempo de exposicin

El desarrollo de los BM es debido en gran parte por la
investigacin e identificacin analtica de las sustancias
qumicas en los organismos

Reproducibilidad, sensibilidad, especificidad,

reversibilidad, aplicabilidad en diversos taxones
La aplicacin apropiada permite integracion en gradientes
espacio-temporales

VENTAJAS DE LOS BIOMARCADORES

Cuantifica solo los contaminantes biodisponibles relevancia biolgica.
Como una medida de los efectos ellos pueden integrar efectos de mltiples estresores
y pueden ayudar a elucidar mecanismos de accin.
Potencial de predecir un efecto ecolgicamente relevante (i.e. mortalidad, impedimento
reproductivo antes que los efectos se manifiesten en el ambiente). Predice el dao antes
que sea demasiado tarde.
Facilidad de uso y relacion coste/efectividad adecuado.

Los estudios de campo deben ser diseados de tal

manera que las mediciones sean representativas de
varios niveles de organizacin biolgica incluyendo
biomarcadores de exposicin y bioindicadores de
efectos.
normalmente los recursos son escasos una mezcla
ptima de biomarcadores sensibles y puntos
crticos ecolgicamente relevantes deben ser
evaluados a nivel organismico.

Zona 1
Respuesta Rpida

Zona 2
Respuesta intermedia

Zona 3
Respuestas poblacionales y
comunitarias

Enzimas de detoxificacin

Histopatologa

Distribucin de tamao y
frecuencia

Dao al DNA

Disfuncin del sistema inmune

Alteracin de la proporcin
macho-hembra

Metabolitos biliares

Impedimento bioenergetico

Alteraciones en la cadena
alimentaria

Enzimas antioxidantes

Integridad reproductiva

Relaciones trficas

Acetilcolinesterasa

Crecimiento

Diversidad comunitariariqueza

Protenas de estress

Actividad

Tipos mas importantes

de estresores

Respuesta de exposicin
representativa

Respuesta ecologica
relevante

Referencias

Agricultura

Plaguicidas, nutrientes,
sedimentos

Inhibicin de la
Acetilcolinesterasa

Impedimento reproductivo,
crecimiento inducido,
enfermedades

Bass et al, 1977

Sanchez et al, 2009

Pulpa y Papel

Nutrientes, dioxinas,acidos
resnicos, color,
clorofenoles
fitosteroles

Induccin de la MFO,
aparicin de metabolitos
biliares

Impedimento reproductivo,
alteraciones del
crecimiento
Disrupcion endocrina

Andersson et al, 1998

Orrego et al., 2011

Petroqumica

PAHs, metales pesados

Elevada induccin de la
MFO, metabolitos biliares
aromticos

Impedimento reproductivo,
crecimiento reducido,
tumores hepticos

Vetemaa et al, 1997

Fuentes et al., 2005

Minera

Metales pesados,
sedimentos

Metalotioneinas, enzimas
antioxidantes, dao al DNA

Crecimiento reducido,
histopatologa branquial,
impedimento metablico,
diversidad gentica

Woodward et al., 1995

Efluentes domsticos

Cloro, nutrientes,
detergentes
Farmaceuticos

Induccin de la MFO,
enzimas antioxidantes
Alteraciones reproductivas

Cambios en el
comportamiento,
histopatologa branquial y
heptica, impedimentos
reproductivo
bioenergticos

Mitz and Giesy 1985

Desarrollo urbano,
tala rasa

Aumento de la
temperatura y sedimentos,
altaracin del rgimen
hidrulico

Protenas de estress

Disminucin del
crecimiento,
anormalidades
branquiales, cambios en la
dieta

Newcombe and
Macdonadl, 1991

Plantas de energa

Aumento de temperatura,
cloro

Protenas de estrs y
enzimas antioxidantes

Impedimento
bioenergtico, cambios en
el comportamiento

Coutant, 1997

Fuente: Adams (2001)

The Biomarker Search procedure allows the user to search the Biomarkers table in the database by
defining a search term or terms for one or more fields. In the Main Menu screen, the user clicks the
Search Biomarkers button to open the Search Biomarkers screen (Figure 2). More specifics on the
biomarker search procedure are discussed below.
Figure 2. Search Biomarkers Screen

Two versions of the Biomarkers Database were provided to EPA. One vers ion all
contents of the database without making any modifications or additions. The othe
allows users to modify the databases contents and to add additional references. B
database require the users computer to have Microsoft Access installed. Since the
developed in Microsoft Access 2000, this is the preferred version of Access to use
versions of Access should be functional. If Access 2000 is not being used, a mess
converting the database to the newer version of Access upon opening the database
that users do NOT convert the database.
A. SEARCHING BIOMARKER INFORMATION

Most of the biomarker information recorded in the database was obtained from ab
information is found in the Keywords too. During the abstract review process, eac
name of any biomarker(s) that were discussed in the references abstract. In additio
biomarker type, health outcome, specimen type, and exposure were recorded.

BIOMARCADORES DE EXPOSICIN
MFO
ENZIMAS

METABOLITOS
BILIARES

DAO

METALOTIONINA

ADN

ENZIMAS
ANTIOXIDANTES

ACETILCOLINESTERASA

PROTEINAS DE
ESTRS

COMUNIDAD

BIOENERGETICOS

HISTOPATOLOGIA

BRANQUIAS
HIGADO

X
X

DESCARGAS DOMESTICAS

DECRECIMIENTO

MINERIA

INCREMENTO

PULPA Y PAPEL

CRECIMIENTO

X
X

PLANTAS DE ENERGIA

DESARROLLO URBANO

AGRICULTURA

REPRODUCCION

PETROQUIMICA

BIOINDICADORES DE EFECTOS

ECOSYSTEM EFFECTS
Reproductive output falls below critical levels required for maintaining the population survival

POPULATION EFFECTS
Impaired reproductive success
(reduced fecundity, fertilization, hatchability, decline in embryo-larval viability, gender distribution)

INDIVIDUAL REPRODUCTIVE EFFECTS

Decrease in gamete quality, changes in
secondary sex characteristics affecting
behaviour

Inmuno-suppression, reduced
gamete quality and quantity

Impaired development and survival,

delay in metamorphosis or sexual
maturation

BEHAVIOURAL AND MORPHOLOGICAL EFFECTS

Changes in blood hormone levels, Vtg

and Zr-protein synthesis

Effects on neuro-endocrine system

(e.g. corticosteroid production)

Impaired or failed synthesis of

essential enzymes or hormones

MOLECULAR, CELULAR AND BIOCHEMICAL RESPONSES

Exogenous endocrine disrupter

(e.g. xenoestrogen)

Natural endocrine disrupter

(e.g. environmental stress)

EXPOSURE TO POTENTIAL ENVIRONMELTAL EDs

Non-endocrine factors
(e.g.nutritional defficiences)
(Cambell & Hutchinson, 1998).

Pulp mill effluents SPE

ODS-C18

ME1 (untreated)
ME2 (Primary Treated)
ME3 (Secondary
Treated)
OH

HO
17-Testosterone
Estradiol

OH

ME1 ME2 ME3

Intraperiton
eal injection
of juveniles

500

cd

400

500

cd
cd

ME2
ME3

bc
bc

bc
bc
bc
b

200

ab

Vtg (ng/ml plasma)

300

c bc
b

ab

ab

ab

ab

ab

100
0
Day 4

500

Day 7

Day 14

Day 21

Day 28
EC
CO
TZ

400

100
300
200

0
Day 4

Day 7

Day 14

Day 21

Day 28
100
a

0
Day 0

Day 4

Day 7

Day 14

Day 21

Day 28

600
500
400
300
200
100
0
-100

ME3
BS
E2
ME2
DHAA / E2
DHAA
CO
EC

ME3
BS
E2
ME2
DHAA / E2
DHAA
CO
EC

ME3
BS
E2
ME2
DHAA / E2
DHAA
CO
EC

ME3
BS
E2
ME2
DHAA / E2
DHAA
CO
EC

-200

ME3
BS
E2
ME2
DHAA / E2
DHAA
CO
EC

VTG

VTG (ng/ml plasma)

200

300

400

BS
E2
DHAA/E2
DHAA

cd

T ime: Day 4

T ime: Day 7

T ime: Day 14

T ime: Day 21

T ime: Day 28

Fem ale
Male

Waterborne exposure Post-fertilized

embryos

25 ppm

ME1

ME2

5 ppm

ME3

E2

BS

TE

CO

EC

1 ppm

Trout
5
7
9

0
8
11

16
23
43

0
24
28
33
43
47

hpf
dpf
dph

14

64

Sex ratio

1000L

Growth
period

10L

Hatching
period

Control eggs
first hatch

Exposure
period

exposure

Fertilized
eggs
viability
4

Delayed last
eggs hatch

Medaka
0

Control eggs
last hatch

Collection

Flagfish

60

87

226

They were used as sentinels to be early

warning systems of toxic gases in the
mine. The canaries would become sick
from toxic fumes sooner than miners
would notice them, and that would give
them time to either escape or put on
respirators . . . .

. . . When designed properly, BIOINDICATORS can accomplish the same

thing . . .

Instead of trying to measure everything, choose something to measure that

gives you an earlier indicator that something requires attention
. . . Thats what BIOMARKERS are for . . .