1.

QueselcitocromoP450ycmofunciona?
MARATERESADONATO
UnidaddeHepatologaExperimental.
CentrodeInvestigacin.HospitalLaFe.
E46009Valencia

1. RESUMEN
El citocromo P450 (P450) es el principal responsable del metabo
lismooxidativodelosxenobiticos.Nosetratadeunnicoenzima,sino
queenrealidadesunafamiliadehemoprotenaspresentesennumerosas
especies,desdebacteriasamamferos,ydelasqueyasehanidentificado
msde2000isoformasdiferentes.TodoslosP450sconocidossenombran
siguiendo un criterio comn y se agrupan en familias y subfamilias en
funcin de la similitud en la secuencia del ADN que los codifica. Las
familias 1, 2 y 3 estn constituidas por enzimas encargados de la bio
transformacindexenobiticos,mientrasqueelrestodefamiliasincluyen
P450squeintervienenenlabiosntesisyelmetabolismodecompuestos
endgenos.UnadelascaractersticasmssignificativasdelosP450que
metabolizanxenobiticosessubajaespecificidad,loquepermitequesean
capaces de metabolizar un nmero casi ilimitado de substratos,
principalmente a travs de reacciones de oxidacin, pero tambin de
reduccin e hidrlisis. Las oxidaciones catalizadas por el P450 son
reacciones de monooxigenacin dependientes de NADPH y para las que
utilizaoxgenomolecular.ComoconsecuenciadeestasreaccioneselP450
acelera la eliminacin del organismo de gran nmero de frmacos y
compuestos txicos, pero tambin es el responsable de la activacin de
toxinas o precarcingenos. En el hombre, los P450s estn ampliamente
distribuidosportodoelorganismo,sibienelhgadoeselrganoconmayor
expresindeestosenzimas.Suexpresinestreguladaporfactores
2

MARATERESADONATOMARTN

genticos(algunospresentanpolimorfismosgenticos),fisiopatolgicos
(regulacinhormonal,enfermedades)oambientales(factoresnutriciona
les,induccin,inhibicin).Porestacausa,susniveleshepticosvaran
extraordinariamenteentrediferentesindividuos,loquejustificalasnota
blesdiferenciasque,enocasiones,seobservanenelmetabolismodefr
macos y xenobiticos y, en ltima instancia, la variabilidad en la
respuesta farmacolgica o la diferente susceptibilidad a la accin de
txicosocarcingenos.
2.INTRODUCCIN:ELMETABOLISMODEXENOBITICOS
Alolargodesuevolucin,losorganismosvivoshanestadoexpues
tosdeformacontinuaanmerocrecientedesustanciasqumicasextra
aspresentesensuentornoysusceptiblesdeaccederasuinteriorde
modoaccidental.Parasalvaguardarsedellibreaccesodeestoscompues
tos,losorganismosvivosinterponenunaseriedebarrerasdenaturaleza
fsicaobiolgica.Noobstante,unnmeroindeterminadodelosmismos
escapazdesuperardichosmecanismosdeproteccinycontactarconlas
clulasytejidosproduciendoefectosdediversandole.Loscompuestos
qumicosquenoformanpartedelacomposicinhabitualdelcuerpohu
mano,peroquesoncapacesdeaccederasuinteriorseconocenconel
nombregenricodexenobiticos.Setratadecompuestosdenaturaleza
qumicamuyvariada,algunosdeloscualessondeorigennatural,entre
losquedestacanlasmicotoxinasolosalcaloides,sibienlainmensama
yorasonproductosoriginadosporlapropiaactividadhumana,comolos
contaminantesambientalesoloscompuestosqumicosdesntesis.
Elvertiginosodesarrollodelaindustriaqumicaenlasltimasdca
dashahechoaumentardeformaexcepcionalelnmerodeestoscom
puestos,conelcorrespondienteaumentodelriesgodecontactoconlos
mismos.Algunasestimacioneselevanavariosmileselnmerodemol
culasnuevasintroducidascadaaoyqueengrosanlayalargalistadexe
nobiticos.Estoscompuestospuedenaccederanuestroorganismome
dianteingestin,inhalacin,porvaparenteraloatravsdelapiel.Entre
losmismosseincluyenfrmacos,cosmticos,aditivosalimentarios,pes
ticidas,productosdeusodomstico,derivadosdelacombustindecar
burantes,residuosprocedentesdelaindustriaqumica,etc.Losxenobi
3

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

ticosnosonutilizadoscomonutrientes,porloquenoseincorporanalas
rutas bioqumicas del metabolismo intermediario y no son degradados a
travs de estas vas metablicas. Se trata, en general, de compuestos de
naturalezalipoflicaporloquepuedenatravesarconrelativafacilidadlas
membranasbiolgicas,accederalinteriordelasclulasyunirseaestruc
turascelularesdecarcterlipoflico.Almismotiempo,sueliminacindel
organismoesdificultosa,dadoquelaexcrecindecompuestosnovoltiles
serealizaatravsdefluidosdenaturalezaacuosa,principalmenteorina.
Ante esta situacin, los organismos vivos han desarrollado sistemas
metablicosalternativosparaacelerarlaeliminacindeestoscompuestos.
Setratadeunaseriedeenzimasnointegradosenlasvasdelmetabolismo
energtico o intermediario del organismo y cuyos substratos son los
xenobiticos.Sufuncinesladeconvertirlosxenobiticosenmolculas
mspolares,mshidrosolublesy,portanto,msfcilmenteexcretables.El
papeldeestosenzimasesclaveparalasupervivenciacelular.Denoexistir
talesvasmetablicas,unavezenelinteriordelorganismolosxenobiticos
tenderan a acumularse alterando el equilibrio celular y provocando
alteracionesfuncionaleseinclusolamuertecelular.
Al conjuntodeprocesosenzimticosalos quesevensometidoslos
xenobiticosenelorganismotendentes,engeneral,asuneutralizaciny
eliminacinselesconocecomoreaccionesdebiotransformacinodeme
tabolizacindexenobiticos.Tradicionalmenteestosprocesossehanagru
padoendosfasesoetapas.Enlafase1losxenobiticossonmodificados
mediantereaccionesdeoxidacin,reduccinohidrlisisyconvertidosen
productosmshidrosolublesgraciasalaaparicindenuevosgruposfun
cionalesdecarcterpolar(hidroxilo,amino,carboxilo).Enlafase2losxe
nobiticos,olosmetabolitosgeneradosporlasreaccionesdelafase1,se
combinanconmolculasendgenasdecarcterpolarparaformarproductos
deconjugacinquesonrpidamenteexcretados.Engeneral,losenzimasde
fase1soncapacesdetransformarmltiplessubstratosycatalizarreacciones
diferentes.Setratadeprotenascatalticasdenaturalezamuydiversaentre
los que se incluyen enzimas con actividad monooxigenasa, como el
citocromo P450 o la flavin monooxigenasa, diversas oxidasas (alcohol
deshidrogenasa,aldehidodeshidrogenasa,aminooxidasas,aromatasas),la
epxidohidrolasaoesterasasyamidasashepticasyplasmticas(Figura1).
ElcitocromoP450essindudaelmiembromsdestacadodeestegrupode
enzimasyelquehasidomsampliamenteestudiado.
3

MARATERESADONATOMARTN

o
reductasas n
o
peroxidas
o
as
x
i
g
e
F
n
la
a
vi
s
n
a
m

hi
dr
ol
as
as

r la fecha
O
N
concreta en
CitocromoP450
C
E
que fue
R
R
FIGURA1.Participacinrelativade
descubierto
O
A
dife
elcitocromo
L
ren M
P450. Los
tes O
E
primeros
enz
P
S
ima
conocimiento
sde 45
s sobre el
fas 0:
mismo se
e1
s
C
remontan a
en

el A
estudios
d
met R
realizados
abo
i
A
por diversos
lis
f
gruposenlos
C
mo

xen T
aos 50 a
c
obi
partir de te
E
i
tic
jido heptico
os R
l
de
S

mamferos.
T
p
Transcurriero
3. E
I
r
nvariosaos
L
C
e
hasta que en
A
c
1964 Omura
C
i
S
y Sato (1)
s
IG
identificaron
a
T
E

la D
natu P
rale H
za o
hem po
opro r
teica di
de ti
un on
pig i
men ta.
to Es
pres ta
ente pr
en ot
los e
micr na
oso re
mas ci
hep bi
ticos
de el
difer no
ente m
s
br
espe e
cies, de
que cit
era oc
capa ro
z dem
unir o
sealP
CO 45
tras 0
ser y
redu su
cido fu
por nc
NA i

n metabolismo
de algunos
cfrmacos y
acompuestos
txicos. A
tpartir de ese
amomento el
lestudio de
este enzima
tdespert un
iconsiderable
cinters entre
alacomunidad
cientfica. En
pun principio
rlosresultados
oobtenidos en
ndiferentes
tlaboratorios
ono coinci
danysecre
scierta
econfusin
con respecto
ra

las
efunciones y
lcaracte
arsticas del
ccitocromo P
i450.Estofue
oaclarado
ncuando se
comprob
que existan
cvarios tipos
ode molculas
nde
citocromos
eP450,
lincluso en

indi ad
vidu se
os ha
de re
una co
mis rri
ma do
espe un
cie. la
Des rg
de o
los ca
mo m
men in
tos o
de qu
ince e
rtidu ha
mbr pe
e r
ini m
cial iti
hast
a lado
actu al
alid ca
3

nonocimiento
zde

la
aestructura,
rfuncin y
propiedades
ude estos
nenzimas(2).
El
esistemaP450
lpresenta una
eenorme
vversatilidad
afuncional que
dse refleja
otanto en la
gran variedad
gde procesos
rque puede
acatalizar,
dcomo en el
oelevado
nmero de
dsubstratosque
ees capaz de
metabolizar.
cSibienel
2

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

RH+NADPH+O+H

NADPH+O+H

monooxigenasa
+
ROH+NADP +HO
2

oxidasa

NADP +HO

peroxidasa
RH+LOOH

ROH+LOH

FIGURA2.Reaccionesenzimticasdeoxidacin

P450intervienefundamentalmenteenreaccionesdeoxidacin,tambines
capazdecatalizarreducciones,hidratacionesohidrlisis.Salvocontadas
excepciones,elP450requiereoxgenomolecularyNADPHparaoxidarel
substrato.Setratadereaccionesdemonooxigenacinenlasqueslounode
lostomosdeoxgenoesincorporadoenlamolculadelsubstrato,mientras
queelotroesreducidohastaagua(Figura2).Alosenzimasquecatalizan
estetipodeoxidacionesselesconocecomomonooxigenasasuoxidasasde
funcinmixta.Estasreaccionesdifierendelascatalizadasporlasoxidasas
delmetabolismointermediario,conformacindeperxidodeoxgeno,yde
lasreaccionesperoxidacinenlascualeseltomodeoxgenointroducidoen
el substrato procede de perxidos y nodel oxgeno molecular. Entre las
oxidacionescatalizadasporelP450seincluyenhidroxilacionesaromticas
y alifticas, N y Soxidaciones, epoxidaciones, O, N y S
desalquilaciones, desaminaciones, desulfuraciones, deshalogenaciones y
deshidrogenaciones. Entre sus substratos se incluyen tanto molculas
pequeascomootrasmuchomayores(p.e.etanolyciclosporina,conpesos
molecularesde40y1203D,respectivamente),aromticasolineales,tanto
planas como globulares, que contengan o no heterotomos. Esta amplia
especificidaddesubstratoesdebidaalaexistenciademltiplesformasdel
enzima, cada una de las cuales se ha adaptado para el metabolismo de
grupos de compuestos relacionados estructuralmente. An as, esta
versatilidadnotieneprecedentesyningnotroenzimapuedeacomodarsea
substratosdenaturalezaqumicatandispar.Noseradisparatadoafirmar,
quetodamolcula(inclusocompuestosqumicosdeltimageneracin)que
entraraencontactoconelorganismopodrasermetabolizada,enmayoro
menormedida,porelP450.

33

MARATERESADONATOMARTN

OtradelascaractersticasmssignificativasdelP450essuinduci
bilidadporlospropiosxenobiticos.Lasprimerasalusionesenestesen
tidoseremontanalosaos5060,alobservarsequepacientesqueeran
tratadosconciertosfrmacosdesarrollabanunatoleranciaalmismode
maneraqueerannecesariasdosiscrecientesparaproducirelmismoefec
to.Estehechofueconstatadoenestudiosconanimalesdeexperimenta
cinysecomproblaexistenciadetiposogruposdeinductoresqueac
tuabandeformaselectivasobrediferentesenzimasP450(3,4).

4.

ESTRUCTURA,LOCALIZACINCELULARYFUNCIN
METABLICADELCITOCROMOP450

LosP450ssonhemoprotenascatalticasenlascualesungrupotioldel
aminocidocistenasirvecomoquintoligandoaltomodehierrodelgrupo
hemoyelsextoligandoesunamolculadeagua(almenosasapareceen
lasestructurasdecristaldelenzimalibredesustratodisponibleshastael
momento)(5).EngenerallosP450sdeeucariotastienenunpesomolecular
queoscilaentre50y60kD.Lasimilitudenlasecuenciadeaminocidos
entrelosdiferentesP450sesrelativamentebaja,llegandoasermenordel
20%enalgunoscasos(6).ElextremoCterminaldelamolculapresenta
unaconservacindelassecuenciasdeaminocidosentrelosdistintosP
450s mayor que la regin Nterminal. El menor grado de conservacin
corresponde a las secuencias intermedias. Un 30% de identidad de la
secuencia en la zona intermedia puede considerarse como significativa,
mientras que un 50% de homologa en la regin Cterminal podra
considerarsecomobaja.Apesardeello,losestudiosdecristalizacinde
protenashanpermitidocomprobarqueexisteunaelevadaconservacinen
la topografa y estructura tridimensional de los P450s (7). De forma
general,lamolculadelenzimaestconstituidaporunacombinacinde
regioneshliceydehojasfundamentalmenteenlaregindelaprotena
querodeaalgrupohemo,mientrasquelasregionesmsvariablessonlas
que constituyen los lugares de anclaje a la membrana o de unin y
reconocimiento de substratos (8). La alta conservacin de la regin del
hemo,quesecorrespondeconelcentrocatalticodelenzima, reflejaun
mecanismocomndetransferenciadeelectronesydeprotonesydeacti
vacindeoxgeno(9).Elenzimapermaneceancladoalamembranaatra
3

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

vsdeunahlicehidrofbicacercanaalextremoNterminal,porloque
lamayorpartedelaprotenasesitaenlacaracitoslicadelamembra
na(10).Estahlicetransmembranaestseguida,porreglageneral,por
unaseriedeaminocidosbsicoscuyosresiduosinteraccionanconlas
cargasnegativasdeloslpidosdelamembrana.
Elmonxidodecarbonopuedeunirsealhierroferroso(formareducida
de la hemoprotena) del P450 para formar un complejo Fe2+CO, pro
duciendouncambioenelmximodeabsorbanciadelgrupohemo(picode
Soret)a450nm.Estapropiedadesprecisamentelaquedioorigenaquees
tosenzimaspasaranadenominarsecomocitocromoP450(Pesporpig
mento),apesardeque,comosecomprobposteriormente,estashemopro
tenasnosoncitocromos,enelsentidoestrictodelapalabra.Estemximo
deabsorbanciacaractersticodelP450esutilizadoparasucuantificacin
espectrofotomtrica.Elgrupotioldelacistenaligadoaltomodehierroes
elresponsabledeestepicodeSoret.Enelrestodehemoprotenas,enlasque
lahistidinaactacomoligando,elmximodeabsorcinaparecea420nm.
ElCOseunecongranafinidadeimpidelauninylaactivacindeloxgeno
molecular y, de este modo, inhibe de forma reversible la actividad
enzimticadelP450.Otrosligandos(substratoseinhibidores)tambinpue
deninducircambiosdeabsorbanciaenelpicodeSoret,loquepermiteel
anlisisporespectrofotometradelaunindetalescompuestos.
LosenzimasP450catalizanelataqueoxidativoacompuestosdenatu
ralezaorgnica(hidrocarburosysusderivados)noactivados.Estasreaccio
nesdeoxidacinsonregioyesteroespecficasytienenlugaratemperatu
rafisiolgica.Siestasmismastransformacionesnoestuvierancatalizadasno
seranespecficasynecesitaratemperaturasmuyelevadas.LosP450re
quierenelectronesparareducireloxgenomolecular,salvocontadasexcep
cionesenlasqueelenzimautilizaperxidosenlugardeoxgenomolecular
(11).LosP450spuedenclasificarseencuatroclasesenfuncindecmoac
cedenloselectronesdesdeelNADPHhastaelcentrocatalticodelenzima
(6).LasprotenasdeclaseIutilizanunareductasaquecontieneFADyuna
ferrosulfoprotena (ferridoxina). Las de clase II usan una cadena de transfe
renciadeelectronesmscortayslonecesitanunareductasadelcitocromoP
450quecontieneFAD/FMNparalatransferenciadeelectrones.Lasdeclase
IIIsonautosuficientesynorequierenundonadordeelectrones,mientrasquelas
declaseIVrecibenloselectronesdirectamentedelNAD(P)H.
3

MARATERESADONATOMARTN

FIGURA3.LocalizacindelsistemacitocromoP450enlamembranadelretculo
endoplsmico

EnlosorganismoseucariotaslosP450sdeclaseIseencuentranaso
ciadosalamembranainternadelamitocondria.Elorigenfilogenticodelas
formasdeP450mitocondrialidentificadasendiferentesespeciesanimales
(estosenzimasnohansidodescritosenplantas)parecenoestarrelacionado
conlosP450sdeclaseIdelosprocariotas,apesardesusanalogasenla
cadenadetransporteelectrnico(6).EnlosmamferosestosP450scatali
zandiversospasosdelabiosntesisdehormonasesteroideasyvitaminaD3.
LosenzimasdeclaseIIsonlosmsabundanteseneucariotas.LosP
450sylasNADPHcitocromoP450reductasasnoestnasociadosyambos
estnancladosdeformaindependienteenlacaraexternadelamembrana
del retculo endoplsmico mediante la regin hidrofbica del extremo
aminoterminal(Figura3).LaactividaddealgunosP450ssevefavorecida
porlapresenciadecitocromob5quefacilitalatransferenciadeelectrones
desdeelNAD(P)H(12).Estosenzimasparticipanenmltiplesfunciones
biosintticas.Amododeejemplo,enloshongosseencargandelasntesis
deesterolesdemembranaymicotoxinas,yenlosvegetalesintervienenen
losprocesosdesntesisycatabolismodehormonas,laoxidacindecidos
grasos,lasrutasmetablicasqueconducenalalignificacinylasntesisde
pigmentosycompuestosdedefensa(antioxidantes,fitoestrgenos,aromas)
(10). En los animales, entre sus funciones fisiolgicas se incluyen la
biosntesis y el catabolismo de molculas sealizadoras, hormonas
esteroideasycidoretinoico.

3
6

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

Ademsdesusfuncionesbiosintticas,losP450sdeclaseIydecla
seIIparticipanenlosprocesosdemetabolizacindexenobiticostanto
enplantascomoenanimales(13).Setratadeenzimasdegrantrascen
denciadesdeelpuntodevistafarmacolgicoytoxicolgico.Sonlosres
ponsablesdelmetabolismodefrmacosydelosprocesosdedetoxifica
cin. No obstante, en ocasiones participan en procesos de activacin
contribuyendoalaaparicindefenmenostxicosodecarcinognesis.
LosP450sdeclaseIIIparticipanenlasntesisdeprostaglandinasen
mamferos,mientrasqueelP450declaseIVslosehaidentificadoen
hongos(14).Ambasclasesdeenzimassepodranconsiderarcomolas
formasmsancestralesdeP450squeparticipanenladetoxificacinde
especiesactivadasdeoxgeno.
5. MECANISMOENZIMTICODELP450
LosdetallesdelosmecanismosporlosquelosP450scatalizantanele
vadonmerodereaccionessontodavadesconocidos.Laactivacindelox
geno,queparecesersimilarentodoslosP450s(oalmenosentodosloses
tudiados),esprecisamenteelaspectomejorconocido(5).Elcentrocatalticode
los P450 es el tomo de hierro hexacoordinado (con los 4 anillos de la
protoporfirinaIX,conelgrupotioldeunresiduodecistenadelacadenapo
lipeptdicayconelsolvente,normalmenteagua).Elprimerpasodelproceso
catalticoconsisteenlaunindelsubstratoyeldesplazamientodelsolventeen
lasextaposicindecoordinacindeltomodehierro.Comoconsecuenciade
elloseoriginancambiosenelestadode spin, enelpotencialredoxyenel
mximodeabsorbanciadelahemoprotena.Enelsegundopasoseproducela
reduccindelcomplejohemoprotenasubstratoalestadoferroso(elFe 3+ del
grupohemopasaaFe2+)graciasalaportedeunelectrnyalaumentoenel
potencialredoxoriginadoenelpasoanterior.Eltercerpasoeslaunindel
oxgenomolecularparaformaruncomplejosuperxidoyenelcuartopasose
produce el aporte de un segundo electrn con la formacin de una especie
activadadeoxgeno.Apartirdeestepuntoelmecanismonoseconocecon
certeza. Lanaturaleza delaespecieactivada de oxgenoes desconocida (se
apuntaquepudieraserunamezcladecomplejoshierroperoxoohierrooxocon
lahemoprotena).Encualquiercaso,setrataradeunoxidanteelectroflicode
vidamuycortaformadoporlaprotonacindeldioxgeno(O=O)(15).

MARATERESADONATOMARTN

FIGURA4.CiclocatalticodelcitocromoP450

Elresultadofinalseralaliberacindeunodelostomosdeoxgenoenfor
madeunamolculadeaguaylaincorporacindelotroenelsubstrato.En
laFigura4estrepresentadoelprocesoquedaralugaralaformacindeun
metabolitohidroxilado.ElresultadodelaactividadenzimticadelP450no
siempreeslainsercindeoxgenoenlamolculadelsubstrato,pudiendo
catalizar tambin reacciones de deshidratacin, deshidrogenacin,
isomerizacin,dimerizacin,einclusoreduccin.
EldesacoplamientodelciclocatalticodelP450seproducecuandolos
electronesdelcofactorNADPHsonconsumidossinformacindemetabo
litosoxidados.Estoocurrecuandoa)elintermediarioFe 2+O2seautooxida
liberandoaninsuperxidoyregenerandoelenzimaenestadofrrico;b)el
intermediarioFe3+hidroperxidosedisociaenunamolculadeH2O2yen
zimafrrico;oc)laespecieFe=Oenlugardeoxidarelsustratoesreducida
aunamolculadeaguaportransferenciaadicionaldeelectrones(5).

6.

LASUPERFAMILIAP450:NOMENCLATURA

DesdeelmomentodeldescubrimientodelP450lapurificacineiden
tificacindenuevosisoenzimashasidounaconstante(2).Enunprincipio
losenzimassenombrabanenfuncindelareaccinquecatalizabanode
3

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

suinducibilidad,loquemotivqueunmismoP450recibieranombresdi
ferentesencadaunodeloslaboratoriosdondehabasidocaracterizado.A
finalesdelosaos80elelevadonmerodeP450conocidoshizoquela
comunidadcientficaseplantearalanecesidaddeestablecerunoscriterios
denomenclatura queevitara posibles ambigedades. En 1987seestable
cieronlosprincipiosdelsistemadenomenclaturayclasificacinqueseuti
lizahoyenda,elcualobedeceacriteriosfilogenticosysebasaenlaiden
tidaddelasecuenciadeaminocidosenlascadenaspolipeptdicasdelos
diferentesenzimas(16).Segnestecriterio,losP450seidentificanconlas
siglasCYPseguidodeunnmeroquedesignalafamilia,unaletraqueiden
tifica la subfamilia y otro nmero que se corresponde con el gen (p. e.
CYP1A1,CYP2C9).Conestesistemadenomenclaturaquedantotalmente
identificadostodoslosP450s,tantoprocariotascomoeucariotas.Enuna
mismafamiliaseagrupanaquellosenzimascuyasecuenciadeaminocidos
tieneunasimilitudmayordel40%,independientementedela especiede
procedencia.DentrodeunafamilialosP450sseagrupanendiferentessub
familiasque,siemprequehayamsdeuna,sedenominancorrelativamente
empezandosiempreporlaletraA(p.e.CYP2A,CYP2B,CYP2C,etc).En
este caso, el requisito para que dos P450 pertenezcan a la misma sub
familiaesquetenganunahomologaenlasecuenciadeaminocidossupe
rioral55%.Porltimo,dentrodelamismasubfamilia,losenzimasindivi
duales se designan segn nmeros empezando siempre por el 1 (p. e.
CYP1A1,CYP1A2),teniendoencuentaquedosP450seconsiderancomo
diferentessiempreycuandosusrespectivassecuenciasdifieranenmsdeun
3%.

LosP450constituyenunasuperfamiliadehemoprotenasquepue
denencontrarseennumerosasespecies (bacterias,hongos,plantas,in
sectos,nematodos,peces,aves,mamferos)yparalosquesesuponeun
origencomn.TodoslosP450identificadosalolargodelaescalafilo
gentica(desdebacteriashastamamferos)senombransegnelmismo
criterioyseincluyendentrodelamismaclasificacin.AlgunosP450
soncomunesavariasespecies(p.e.CYP1A2yCYP2E1presentesen
diferentesmamferosyroedores)yotrossoncaractersticosdeunaespe
cieenparticular(p.e.CYP2A6oCYP3A4exclusivosdelhombre).En
cualquiercaso,cadaespeciepresentasupropiopatrndeP450s.Estos
enzimassehanutilizadocomoinstrumentosparaestudiosfilogenticos.
Enestesentido,lainformacinobtenidatraselanlisisdelahomologa
3

MARATERESADONATOMARTN

FIGURA5.LosenzimasP450identificadosenlaespeciehumana

delosgenesquecodificanlosP450sendiferentesespecieshapermiti
dolageneracindemapasdelaevolucindedichasespeciesylasrela
cionesexistentesentrelasmismas(17).
Cuandoen1987serealizlaprimeraclasificacindelosmiembros
deestasuperfamiliadeenzimas,sehabandescritoapenas30genesdi
ferentesqueseagruparonen10familias(16).Enpocomsde15aosel
nmerodeP450conocidoshaaumentadodeformaextraordinariayen
laactualidadyaasciendeamsde2000,incluidosen200familiasdi
ferentes (http:/drnelson.utmem.edu/CytochromeP450.html). En el caso
concretodelhombresehansecuenciado57genesy47pseudogenesper
tenecientesa18familias(Figura5).Lospseudogenessongenesdefecti
vosquenooriginanprotenasfuncionalesyqueseconsiderancomouna
reminiscenciadeduplicacionesdegenesenlosqueunadelascopiasha
degeneradoyperdidosufuncin.
LosenzimasP450intervienentantoenelmetabolismodexenobiti
coscomoenlabiosntesisdecompuestosendgenos.Hoyendaparece
evidentequeelP450surgiconlafinalidaddecatalizarreaccionesdel
metabolismodecompuestosendgenosyqueenunmomentodeterminado
losxenobiticosaparecieroncomosubstratosfortuitos.Nodebemosol
4

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

vidarquelamayorpartedelosxenobiticossoncompuestosdenaturaleza
lipoflicaqueguardanciertassimilitudes(estructurales,fisicoqumicas,etc)
conlossubstratosendgenosdelosP450.Portanto,ytomandocomopunto
departidalosP450preexistentes,losorganismosvivos,ensuevolucin,
se han ido adaptado a su nuevo entorno desarrollando nuevos enzimas
capacesdefavorecerlaeliminacindelosxenobiticosconlosquepueden
entrarencontacto.Estaevolucinnoshallevadoalasituacinactualenla
queexistenfamiliasdeP450squesiguencatalizandolatransformacinde
molculasendgenas,mientrasqueotrosenzimassehanespecializadoen
elmetabolismodecompuestosexgenos(18).

7. LOSENZIMASP450ENELHOMBRE.EXPRESIN
ENDIFERENTESTEJIDOS
EnunprincipiosepensquelosP450seranprotenasexclusivamente
hepticas.Estaideainicialsedescartalcomprobarselapresenciadeestos
enzimasenprcticamentetodoelorganismo(19)einclusoalgunosdeellos
sloselocalizanentejidosextrahepticos.Laampliadistribucintisularde
losP450ssedebeprobablementealgrannmerodefuncionesquerealizan.
Noobstante,elhgadoeselrganoconmayorexpresindeestosenzimasy
enlseencuentrantantolosP450simplicadosenreaccionesfisiolgicas
comolosencargadosdelmetabolismodexenobiticos,sibienstosltimos
son los ms abundantes. Se estima que alrededor del 70% de los P450
hepticospertenecenalasfamilias1a3(Tabla1).Precisamenteestastres
familias son las que catalizan la mayor parte de las reacciones de
biotransformacindesubstratosexgenos.Losisoenzimasmsabundantes
enelhgadohumanosonelCYP3A4ylosCYP2Cs,querepresentanun
30%yun20%respectivamentedelcontenidototaldeP450(20).Como
consecuenciadeello,yapesardequealgunosP450squeparticipanenlas
reaccionesdebiotransformacinsloseexpresanentejidosextrahepticos
(p.e.CYP1A1,CYP2F1)(21,22),elhgadoseconsideracomoelprincipal
rganodemetabolizacindexenobiticos.Elpapelclavedelhgadoenla
eliminacindeestoscompuestosderivadesumayorcontenidoenenzimas
implicados en las reacciones de metabolizacin y de su privilegiada
situacin anatmica que le permite el contacto directo con todos los
compuestosqueaccedenalorganismoporvaoral.
4

MARATERESADONATOMARTN

TABLA1
PrincipalesP450sdemetabolizacindefrmacosenelhgado
humano
CYP
1A2
2A6
2B6
2C8
2C9
2C19
2D6
2E1
3A4
3A5
1

Abundancia
enhgado(%)a
10
5
1

<1
15
4
4

10
30

<1

Variabilidad
interindividualb
30
100
50
30
30
30
200
50
80

Expresin
Inducible,polimrfico
Polimrfico
Inducible
Polimrfico
Polimrfico
Polimrfico
Polimrfico
Inducible,polimrfico
Inducible,polimrfico
Inducible,polimrfico

Metabolismode Activacinde
frmacos(%)c precarcingenos
4

<1
<1
<1
11

S
S

25
4

50

S
S

<1

EstimacindelcontenidorelativoenhgadohumanodecadaenzimaP450conrespectoalP450total(20).

Variabilidaddelosnivelesdecadaenzimaenelhgadodediferentesindividuos(23).

3Estimacindelaparticipacindecadaenzimaenelmetabolismodefrmacosenelhombre(76).
LaexpresinhepticadelosP450varaextraordinariamenteentredi
ferentesindividuoscomoconsecuenciadefactores genticos,fisiopatol
gicosyambientales(23).AlgunosP450presentanexpresinpolimrficalo
queconduceavariantesdelenzimaquepuedenteneralteradasuactividad
cataltica(http://www.imm.ki.se/CYPalleles).Lafrecuenciadeaparicinde
las formas polimrficas del enzima vara notablemente entre diferentes
grupos tnicos (24). Los diferentes fenotipos pueden traducirse en
variacionessignificativasdelmetabolismodealgunosfrmacosendeter
minadosindividuosy,comoconsecuenciadeello,puedenobservarsealte
racionesdesusparmetrosfarmacocinticos,disminucindesueficaciate
raputicaounmayorriesgodeaparicindeefectosadversos.
Noobstante,elpatrndeP450senunindividuonosloestcontrola
doanivelgentico,sinoquetambinestmoduladoporotrosfactores.En
estesentidosehaapuntadolaexistenciadediferenciasenlaactividaddelP
450enfuncindelaedaddelindividuo,sibienlosresultadosrealizadosen
trediferentesgruposdepoblacin(neonatos,nios,adultos,poblacinge
4

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

ritrica)nosontotalmenteconcluyentes(2627).Delmismomodo,elsexose
consideraotroposiblefactormoduladordelaactividaddeestosenzimas(28).
Se ha demostrado que algunas formas del P450 slo se expresan en ratas
macho,mientrasqueotrassonespecficasdelashembras(29).Elorigende
estas diferencias parece ser la existencia de un control hormonal sexo
dependientedelaexpresindelosP450.Enotrasespeciesderoedoresoen
primatesnohumanostambinsehanobservadociertasvariacionesligadasal
sexo,aunqueentodosloscasoslamagnituddelasdiferenciasesinferiorala
observada enla rata. Diferentes estados fisiolgicos como el embarazo oel
ayuno,alteracionesfisiopatolgicosqueafectanalahomeostasisgeneraldel
organismo, entre los que se incluyen desequilibrios hormonales, procesos
inflamatorios,obesidad,neoplasias,etc.oenfermedadeshepticas,talescomo
esteatosis,cirrosisotumoreshepticosmodificanlaexpresindelP450ysu
capacidadfuncional(30,31).Asimismo,lainfluenciadeladietaydelestado
nutricionaldelindividuohasidoampliamenteestudiada(32,33).Laexpresin
del P450 puede modularse por cambios en los niveles de macro o
micronutrientes,porelayunoylareduccinenlaingestacalrica,oporla
presenciaenlosalimentosdeotroscomponentesquenopuedenconsiderarse
comonutrientesyquepuedenproducirinduccinoinhibicindelosP450.
Entre estos ltimos se pueden incluir aditivos alimentarios (conservantes,
estabilizantes,colorantes,antioxidantes,etc),compuestosindlicospresentes
en ciertos vegetales, la cafena, flavonoides naturales de ciertos vegetales,
terpenoides y una larga lista de compuestos a la que habra que aadir los
productosquesegenerancomoconsecuenciadelapreparacindelosalimentos
aelevadastemperaturas(33).Mencinespecialmerecenlosefectosinductores
producidos por el alcohol y ciertos componentes del humo del tabaco.
Finalmente, a todos estos factores habra que sumar los posibles efectos
inductoreseinhibidoresproducidosporlaingestin,inhalacinocontactocon
otros xenobiticos tales como contaminantes ambientales, pesticidas,
cosmticos,productostxicosolospropiosfrmacos.

8. LOSENZIMASP450DEMETABOLIZACIN
DEXENOBITICOS
Losenzimasquecatalizanlatransformacindexenobiticosenel
hombreyelrestodemamferospertenecenalasfamilias1a3,mientras
queenelrestodelasfamiliasseincluyenenzimasqueintervienenenel
4

MARATERESADONATOMARTN

metabolismodecompuestosendgenosdenaturalezatandiversacomo
esteroides,cidosbiliares,cidosgrasos,prostaglandinas,leucotrienos,
etc.Noobstante,algunosenzimasdelastresprimerasfamiliastambin
metabolizansubstratosendgenos(34,35)yparaalgunosdelosenzimas
incluidosenlafamilia2(p.e.CYP2J2,CYP2T,CYP2V,CYP2W)nose
hapodidodemostrar,almenoshastaelmomento,supapelenelmeta
bolismodexenobiticos.
8.1.

FamiliaCYP1

Enestafamiliaseincluyendossubfamilias:CYP1A,constituidapor
losisoenzimasCYP1A1yelCYP1A2,yCYP1B,alaqueperteneceel
CYP1B1.Estostresenzimascompartenunaseriedecaractersticas.En
todosellos,elcontroltranscripcionaldelaexpresindelenzimatienelu
garatravsdelavadelreceptornuclearAh(Arylhydrocarbonrecep
tor)(36,37).Adems,lostresparticipandeformadestacadaenprocesos
deactivacindeprocarcingenos.Sinembargo,presentannotablesdife
renciasensuactividadmetablicaysudistribucinendiversostejidos.
LosenzimasCYP1A1yCYP1A2jueganunpapelimportanteenlaacti
vacindealgunosprocarcingenos,convirtindolosenmetabolitosinter
mediarios que pueden unirse al DNA originando mutaciones (38). El
CYP1A1activaelbeno(a)pirenoyotroshidrocarburosaromticospoli
cclicos,yelCYP1A2participafundamentalmenteenlaactivacindeni
trosaminas,aflatoxinaB1yaminasaromticas(38,39).
ElCYP1Alesunenzimaextraheptico.Suexpresinconstitutivaes
muybaja,peroesmuyinducibleporligandosdelreceptorAh(hidrocar
burosaromticospolicclicos,dioxinas,humodeltabaco)porloquela
exposicinaestoscompuestosaumentadeformasignificativasusnive
lesentejidoscomoelpulmn,laplacenta,laglndulamamariaoloslin
focitos(40).Presentaformaspolimrficas,algunasdelascualessehan
relacionadoconunamayorincidenciadelcncerdepulmnenalgunos
gruposdepoblacin(41).
LaexpresinCYP1A2pareceestarrestringidaalhgado,dondecons
tituyeaproximadamenteel10%delcontenidototaldeP450(20).Setrata
deunenzimainducibleporhidrocarburos(contenidosenelhumodeltabaco
oproducidosdurantelacarbonizacindealgunosalimentos),com
4

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

puestos indlicos de algunos vegetales o algunos frmacos (fenitona,

omeprazol)(4244).Sehanidentificadovariantesallicasdelenzima,al
gunasdelascualessecorrelacionanconunamayoromenorrespuestaal
efectoinductordelhumodeltabaco,loquepodraexplicar,almenosen
parte,laelevadavariabilidadquepresentaelenzimaentrediferentesin
dividuos(45,46).EntrelossubstratosdelCYP1A2nosloseencuentran
precarcingenosycompuestostxicos,sinotambinmolculasconacti
vidad farmacolgica como fenacetina, paracetamol, cafena, teofilina,
olanzapinaopropanolol(43).Engeneral,setratademolculasneutraso
bsicas,lipoflicasyplanas(47).
ElCYP1B1eselmiembrodelafamiliamsrecientementecaracte
rizado.Seexpresadeformaconstitutivaenelrin,prstata,glndula
mamariaoelovario,peronoenelhgado(38,48).Engeneralsuexpre
sinbasal(ensituacionesdenoinduccin)esmayorqueladelCYP1A1
yparticipatantoenelmetabolismodeestrgenoscomodehidrocarbu
rosaromticospolicclicosydeaminasheterocclicas(38).Elgendel
CYPlB1presentaformasallicasalgunasdelascualessetraducenenuna
alteracinfuncional(49).Sehasugeridounposiblepapeldelenzima
comomoduladordeciertosprocesosdecrecimientoydiferenciacin,as
comounasobreexpresindelmismoenalgunostumores(50).
8.2. FamiliaCYP2
Setratadelafamiliaconstituidapormayornmerodemiembros,los
cualesestnorganizadosenmsde20subfamilias.Enelhombrelafa
miliaCYP2Claintegran20enzimaspertenecientesa13subfamiliasdi
ferentes.AdiferenciadelafamiliaCYP1,susmiembrosnocomparten
vascomunesderegulacindelaexpresinylanaturalezaqumicadelos
substratosdeestosenzimasesmuyheterognea.
TresmiembrosdelasubfamiliaCYP2Ahansidoidentificadosenel
hombre:CYP2A6,CYP2A7yCYP2A13.ElCYP2A6seexpresaenel
hgadodonderepresentaaproximadamenteel5%deltotalyesinducible
porfenobarbitalyotrosfrmacosantiepilpticos(20,51).Esteenzimain
tervieneenlaactivacindealgunosprocarcingenoscomoaflatoxinaB1
onitrosaminasdelhumodeltabaco(52),enlametabolizacindelani
cotina(53)yenlabiotransformacindealgunosfrmacos(54).Seha
4

MARATERESADONATOMARTN

observadolaexistenciadepolimorfismosgenticosdelCYP2A6quehan
sido asociados a una diferente susceptibilidad al cncer de pulmn
(55,56).ElCYP2A7esunaprotenanofuncionalyelCYP2A13nose
expresaenelhgadoysdeformaimportanteenlamucosaolfativa(57).
ElCYP2B6eselnicomiembrodelasubfamiliaCYP2Bidentifi
cadoenelhombre.Losnivelesenhgadosonbajosymuyvariables,si
bienengeneralrepresentauncontenido<1%delP450total(58).Suin
duccinestmediadaporelreceptornuclearCAR (constitutiveactive
receptor) y probablemente tambin por PXR (pregnane X receptor)
(59,60).EntrelossubstratosdelCYP2B6sehanidentificadocompuestos
txicosyalgunosfrmacos(61,62).
La subfamiliaCYP2C enelhombreestintegradaporcuatrogenes:
CYP2C8,CYP2C9,CYP2C18yCYP2C19.Entreellos,elCYP2C9esel
quepresentamayorcontenidoenhgadohumano(Tabla1).Lossubstratos
delCYP2C9suelensermolculasdbilmentelipoflicasquesecomportan
como cidos dbiles. Se ha identificado la existencia de polimorfismos
genticos del CYP2C9 (63), pero se desconocen sus consecuencias
funcionales,apesar dequeeste enzima cataliza el metabolismodegran
nmero de compuestos de gran inters teraputico tales como frmacos
antiinflamatorios o hipoglucemiantes (64). El CYP2C9 metaboliza la
mayorpartedeestossubstratosatravsdereaccionesdehidroxilacin.Se
trata,engeneral,demolculasdecarctercido,ionizadasapHfisiolgico,
posiblemente con un heterotomo y anfipticas (la regin hidrofbica se
correspondeconellugardehidroxilacin).Losfrmacosantiinflamatorios
noesteroideosconstituyenelgrupodesubstratosmsimportante,enlos
cualeslahidroxilacintienelugarenelanilloaromticooenunacadena
alqulica lateral de 2 3 tomos de carbono. El CYP2C19 tambin se
expresa en hgado y es responsable del metabolismo de un nmero
importante de frmacos (64). Presenta polimorfismo gentico cuyas
consecuencias fenotpicas conducen a la aparicin de individuos
consideradoscomometabolizadoreslentosconunaincidenciadel3%y
20%enpoblacionescaucsicasyjaponesas,respectivamente(65,66).Este
polimorfismo afecta al metabolismo de frmacos como la mefenitona,
warfarinauomeprazol(67).AdiferenciadelCYP2C9,lossubstratosdel
CYP2C19 suelen ser molculas neutras o de carcter bsico y
moderadamentelipoflicas(47).ElCYP2C8seexpresaenhgado
4

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

ennivelesvariablesypocoimportantes.Entresussubstratosseencuentran
molculasendgenas(cidoretinoico,retinol)yalgunosfrmacos(68,69).
Hastaelmomentonosehadetectadolaexistenciadeformaspolimrficas.
ElCYP2C18noseexpresaenhgado,almenosdeformaapreciableyse
desconocensuactividadfuncionalylasposiblesimplicacionesfenotpicas
delasformaspolimrficasidentificadas(70,71).
DentrodelasubfamiliaCYP2D,enelhombreslosehaidentificado
elCYP2D6,elcualseexpresaenhgadoynoesinducible.Setratapo
siblementedelP450mspopularentrelosmdicosyprofesionalesdela
saluddebidoasupolimorfismogentico.Enlaactualidadseconocenunas
80variantesallicasdelgen,lamayorpartedelascualesafectanalaac
tividad de la correspondiente protena (http://www.imm.ki.se/CYPalleles).
Sehanestablecidotresfenotiposdelenzimaqueseconocencomometa
bolizadoreslentos(conalelosdefectivos),metabolizadoresrpidos(forma
nativaovariantesallicassinconsecuenciasfuncionales)ymetabolizadores
ultrarrpidos(conmltiplescopiasdelgen).Elimpactoclnicodeestas
alteracionesenlaactividaddelCYP2D6sehacepatentealobservarlalarga
listadeagentesteraputicosquesonsubstratosdelenzima(72,73).Entrelos
frmacoscuyometabolismoseveafectadoporestosfenotiposfuncionales
seincluyenantiarrtmicos,antidepresivostricclicos,neurolpticosobeta
bloqueantes(64).ElpolimorfismogenticodelCYP2D6seharelacionado
tambinconunadiferentesusceptibilidadalaenfermedaddeParkinsonyal
cncerdehgadoodepulmn(74,75).Esdedestacarelhechodequeel
CYP2D6 es considerado el segundo enzima en importancia en el
metabolismodefrmacos(despusdelCYP3A4),yaqueseestimaquems
del25%delosfrmacossonsubstratosdelmismo,cifrasuperioralade
otrosenzimasmsabundantescomoCYP1A2,CYP2C9oCYP2E1(Tabla
1)(76).Estedatocontrastaconelcontenidorelativamentebajodelenzima
en hgado, donde slo representa en torno al 25% del P450 total. Los
substratosdelenzimasonengeneralmolculasligeramentehidrfilasconal
menosuntomodenitrgenodecarcterbsico(47).
ElCYP2E1,elnicomiembrodelasubfamiliaCYP2Eidentificadoen
laespeciehumana.Seexpresaenelhgado(ardedordel10%delP450total
en este tejido) y tambin en otros tejidos, aunque de forma menos
importante (19). Este enzima participa en la activacin de ciertos car
cingenos(hidrocarburoshalogenados,nitrosaminas)yenelmetabolismo
4

MARATERESADONATOMARTN

desolventesdeusocomncomoetanol,acetonaobenceno(77).Seco
nocenpocosfrmacosmetabolizadosporelCYP2E1entrelosquecabe
destacar el paracetamol, clorzoxazona o ciertos anestsicos (p.e.
halotano,enflurano)(64,78).Setrata,engeneral,demolculaspequeas
(pesomolecular<200kD)yneutras(47).Unadelascaractersticasdel
CYP2E1 es su inducibilidad por etanol y otros compuestos (acetona,
isoniazida),perotambinporciertosestadosfisiopatolgicostalescomo
ladiabetesoelayuno(79,80).
EnelrestodesubfamiliaspertenecientesalafamiliaCYP2seinclu
yendiversosenzimasconmuybajaexpresin(muchossonsloextrahe
pticos)yconpocarelevanciadesdeelpuntodevistafuncional.Entre
ellosseencuentranenzimasqueintervienenenelmetabolismodesubs
tratosendgenos(p.e.CYP2J2)(35)yotrosquemetabolizanxenobiti
cos(p.e.CYP2F1)(81),sibiennosehaidentificadolaparticipacinde
enzimasdeestassubfamiliasenelmetabolismodecompuestosdeinte
rsfarmacolgico.
8.3.

FamiliaCYP3

Enelhombreestafamiliacontieneunanicasubfamiliaquecom
prendecuatrogenes:CYP3A4,CYP3A5,CYP3A7yCYP3A43,delos
cualesslosehancaracterizadolasprotenascorrespondientesalostres
primeros.Sonenzimasconunaaltahomologaenlasecuenciadeami
nocidos (>85%), con caractersticas funcionales (actividad cataltica)
muysimilareseinduciblesporciertosfrmacos(barbitricos,rifampici
na,dexametasona)(82).Setratadelgrupodeenzimasconmayorim
portanciaenelmetabolismodeagentesteraputicos,sibientambinme
tabolizanxenobiticosderelevanciatoxicolgica(p.e.aflatoxinaB1,1
nitropireno(82,83),ocompuestosendgenos(p.e.cortisol,testosterona,
progesterona (84).La expresin tisular deestos enzimas presenta no
tablesdiferencias.ElCYP3A4eselP450msabundanteenelhgado
humano(constituyeun3040%deltotal)yseexpresatambinenlamu
cosaintestinal(85).ElCYP3A5esmenosabundantequeelCYP3A4y
selocalizaenelhgado(dondeseexpresadeformapolimrfica),pul
mn,rin,colon,esfagooglndulapituitaria(19,86).ElCYP3A7se
encuentrafundamentalmenteenelhgadofetal,dondeeslaformama
4

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

yoritaria,aunqueexistenevidenciasdequetambinseexpresaenhgado
adulto(87,88).LosCYP3Asoninduciblesporciertosfrmacosentrelos
que se encuentran anticonvulsivantes (fenobarbital, fenitoina, carba
mazepina),agentesantimicrobianos(rifampicina)yglucocorticoides(de
xametasona)(82).LainduccindeCYP3A4yCYP3A7estreguladaa
travsdelreceptornuclearPXRyladelCYP3A5atravsdelreceptor
paraglucocorticoides(60,89,90).
ElpapeldestacadodeestosP450enelmetabolismodefrmacos,yde
formaparticulardelCYP3A4,sedebenosloasumayorabundanciaenel
tejidoheptico(ensituacionesdeinduccinpuedellegarasuponermsdel
50%delP450heptico),sinotambinalgrannmerodemolculasde
intersclnicoquehansidoidentificadascomosubstratosdelmismo.En
estesentido,seestimaquelamitaddelosfrmacosconrutasmetablicas
conocidassonmetabolizadosporelCYP3A4yenestalargalistaseincluyen
agentes teraputicos de notable importancia como la eritromicina,
midazolam, ciclosporina A, lidocaina o nifedipina (9193). La
administracin simultnea de dos o ms frmacos es una prctica tera
putica comn y cabe la posibilidad de que dichos frmacos sean meta
bolizados por el mismo enzima, probablemente el CYP3A4. Este hecho
origina la aparicin de interferencias metablicas motivadas por la com
petenciadedosfrmacosporelenzima,loquepuededarlugaravaria
cionesimportantes,ynoesperadas,enlosnivelesplasmticosdelosfr
macos.Estasinteraccionespuedenserespecialmentepeligrosasenelcasode
frmacosconndicesteraputicosmuyestrechos.Amododeejemplo,la
coadministracin de antifngicos azlicos (potentes inhibidores del
CYP3A4)ycisaprida(frmacoutilizadoparaeltratamientodeladispepsia
noulcerosaymetabolizadoporelCYP3A4)conduceaunaumentodelos
niveles de ste ltimo, lo que aumenta el riesgo aparicin de arritmias
ventriculares potencialmente fatales (82,94). Otra posible causa de inter
accin metablica es la coadministracin de un frmaco inductor del
CYP3A4yotrometabolizadoporelenzima(93).Elaumentodelaacti
vidadCYP3A4darlugaraunarpidametabolizacindelfrmaco,porlo
quesusnivelesplasmticosnoalcanzarnlosnivelesdeseadosyelfrmaco
se mostrar ineficaz. Por ejemplo, el tratamiento con fenitoina reduce
considerablemente los niveles plasmticos y la biodisponibilidad de la
ciclosporina y la rifampicina acelera la eliminacin del etinilestradiol,
quinidinayotrosfrmacos(93,95).
4

MARATERESADONATOMARTN

LostresenzimasCYP3Apresentanformaspolimrficas.Seconocela
existenciademsde20variantesdelCYP3A4,sinembargoseestimaque
sucontribucinalavariabilidadinterindividualdelenzimaesescasa,aun
quenosedescartaquepuedajugarunpapelimportanteenlarespuestaat
picaaalgunosfrmacosolasensibilidadaciertoscarcingenos(86,96).En
elcasodelCYP3A5elpolimorfismoafectaasuexpresinenelhgadoyse
traduceenunaexpresinrelativamentebajaenlamayorpartedelapo
blacin,enunaexpresinmuyelevadaengruposreducidosolaausenciade
la protena en otros individuos (97). Del mismo modo, la expresin po
limrficadelCYP3A7eselmotivodelasnotablesdiferenciasentreindivi
duosquepresentanlosniveleshepticoseintestinalesdelenzima(88).

8.4.

OtrosenzimasP450

ElrestodeP450stieneunaescasarepercusinenelmetabolismode
frmacos y otros xenobiticos, al tratarse de enzimas implicados funda
mentalmenteenelmetabolismodesubstratosendgenos.Lanicasubfa
miliaconintersfrmacotoxicolgicoeslaCYP4A,queincluyenenzimas
induciblesporhidrocarburosaromticos(plaguicidas,herbicidas,solventes)
(98),perocuyaposibleparticipacinenelmetabolismodexenobiticosno
sehapodidodemostrar.EnlaTabla2semuestranlasrutasoreacciones
metablicasenlasqueintervienenlosP450demetabolismoendgeno.Es
tosCYPssonindispensablesenlosorganismoseucariotasparalabiosnte
sisdeesteroles(constituyentesfundamentalesdelamembranaplasmtica),
eintervienenenotrosprocesosendgenos,talescomoprocesosdesntesiso
de metabolizacin de esteroides, prostaglandinas, leucotrienos, sales bi
liares,vitaminasliposolubles(AyD),alcaloidesendgenos,etc.(2).Setra
tadeenzimasespecficos,quecatalizanunasolareaccinyquetienenun
solosubstrato(enocasionesdos).Estecomportamientocontrastadeforma
notableconlabajaespecificidaddelosP450metabolizacindexenobi
ticos(lospertenecientesalastresprimerasfamilias).
LaaparicindealteracionesenlosgenesquecodificanestosP450s
puedeafectarlafuncindelaprotenacorrespondiente.Porreglageneral,se
produceundficittotaloparcialdelaactividaddelenzima,sibientambin
pueden aparecer casos de sobreactividad. En cualquier caso, estas al
teracionesfuncionalespuedenconduciralaaparicindeenfermedadeso
5

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

TABLA2
PapeldelosP450senelmetabolismoendgenodelhombre
Isoenzima

Funcinmetablica

CYP4A11
CYP4B1
CYP4F2
CYP4F3
CYP4F8
CYP5
CYP7A
CYP7B
CYP8A
CYP8B
CYP11Al
CYP11B1
CYP11B2
CYP17
CYP19
CYP20
CYP21
CYP24
CYP26A1
CYP26B1
CYP26C1
CYP27A1
CYP27B1
CYP27C1
CYP39
CYP46
CYP51

Metabolismocidosgrasos(hidroxilacinyhidroxilacin)
Metabolismocidoaraquidnico(sntesisde12(R)HETE)
Metabolismocidoaraquidnico(sntesisde20HETE)
Metabolismodeleucotrinenos(LTB4)
Metabolismoprostaglandinas(19Rhidroxilacin)
Metabolismodelcidoaraquidnico(TromboxanoA2sintetasa)
Biosntesisdecidosbiliares(primerpasoylimitantedelava)
Sntesisneuroesteroides(cerebro)
Metabolismodelcidoaraquidnico(Prostaciclinasintasa)
Biosntesisdecidosbiliares(12hidroxilasa)
Biosntesisesteroides(conversindecolesterolapregnenolona)
Sntesiscortisol(11hidroxilacinde11desoxicortisol)
Sntesisdealdosterona(18hidroxilacjndecosticosterona)
Sntesisdetestosteronayestrgenos(12hidroxilasa)
Sntesisdeestrgenos(actividadaromatasa)
Enzimaespecficodevertebrados(posiblepapeleneldesarrollo)?
Sntesiscortisol(C21esteroidessintetasa)
Degradacin/inactivacindemetabolitosdelavitaminaD
Metabolismodelcidoretinoico(transhidroxilasa)
Posiblepapelenelmetabolismodelcidoretinoico?
Posiblepapelenelmetabolismodelcidoretinoico?
Biosntesisdecidosbiliares(esterol27hidroxilasa)
ActivacinvitaminaD3(1hidroxilacindelprecursor)
?
Metabolismodelcolesterol(24hidroxicolesterol7hidroxilasa)
Metabolismodelcolesterol(colesterol24hidroxilasa)
Sntesisdecolesterol(lanosterol14desmetilasa)

trastornosfisiolgicoscondistintogradodeseveridad.Amododeejemplo,
sehadescritoquedefectosenlosgenesquecodificanlosenzimasCYP11B1
oCYP21,ambosimplicadosenlabiosntesisdecolesterol(Tabla2),dan
lugar a hiperplasia adrenal congnita, y alteraciones a nivel del gen del
CYP11B2producenhipoaldosteronismocongnito(99,100).Encontraste,
mutacionessimilaresenlosP450sdelasfamilias1a3normalmenteno
5

MARATERESADONATOMARTN

tienenconsecuenciastangraves,aunqueseveaafectadalabiotransforma
cindexenobiticos,conposiblesconsecuenciasfarmacolgicasytoxico
lgicas,yseafectelasusceptibilidadadeterminadasenfermedades(18).

9.

CITOCROMOP450YTOXICIDAD

Comoapuntbamosenlaintroduccindeestecaptulo,elobjetivofinaldel
P450,ydelrestodeenzimasimplicadosenelmetabolismodexenobiticos,
es transformar el substrato en metabolitos ms fcilmente excretables del
organismo.Duranteestasreaccionesdebiotransformacin,elfrmacooelt
xicosufrecambiosensuestructuraqumicaque,confrecuencia,noslolo
conviertenenunamolculamspolar,sinoqueademsloinactivanylocon
viertenenunmetabolitosinactividadfarmacolgicaeinocuodesdeelpuntode
vistatoxicolgico.Aspues,seacelerasueliminacinaltiempoquesepro
duceunfenmenodedetoxificacin.Duranteunciertotiemposepensque
estasituacinidealtenalugarsiemprequeseproducaelmetabolismodeun
xenobitico,porloquealasreaccionesdebiotransformacintambinseles
llamreaccionesdedetoxificacin.Posteriormentesecomprobquemetabo
lizacinnoessinnimodeinactivaciny,pordesgracia,sonnumerososlos
ejemplosdexenobiticosqueseconviertenenmolculastxicastrassume
tabolizacin(101,102).Estadesafortunadacircunstanciaseproducecuandolos
metabolitosformadossonespeciesreactivasqueinteraccionanconelementoso
procesoscelulares.Seformanradicaleslibresyotrosmetabolitoselectrofilicos
(epxidos alifticos o aromticos, quinonaimidas) capaces de modificar co
valentementemacromolculas(protenas,DNA)odeproducirinteraccionesno
covalentes(p.e.estrsoxidativo)(103).Losmecanismosdedefensacelular
tratarndeneutralizarelmetabolitolomsrpidamenteposible.Silavidame
diadelaespeciereactivaesextremadamentecortasloafectaralpropioen
zimaquelohageneradoproduciendolainactivacindelmismo(inhibidores
conocidoscomosubstratossuicidasdelP450)(104).Silavidadelmetabolito
es un pocoms largapodr afectar aotras macromolculas, pero ser neu
tralizadaantesdesalirdelaclulaodeltejidodondesehaformadoprodu
ciendonicamentetoxicidadlocal.Losmetabolitosmsestablespuedenllegar
aactuarsobreotrostejidosdelorganismoporloquesusefectostxicossern
generalizados.Enltimainstanciaeselbalanceentrelasreaccionesdeactiva
cinmetablicaylosprocesosdeneutralizacineliminacin(inactivacin)el
quedeterminalaseveridadyelalcancedelatoxicidad.Estebalancedepende

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

Quimioterapiaconvencional
Frmaco

TerapiagnicabasadaenelP450
Frmaco(dosismenor)

P450heptico

P450heptico

Metabolito
activado
Tejidosano
Toxicidad

Metabolito
activado
Tumor

Muertede
clulastumorales

Tejidosano
Toxicidad

Tumor+P450
Muertede
clulastumorales

FIGURA6.Estrategiadetratamientodelcncerbasadaenlatransduccinselectivade
genesP450enclulastumorales

de mltiples factores (polimorfismos genticos, induccin, inhibicin,

factores dietticos, interacciones entre frmacos, etc) y puede mostrar
notablesdiferenciasanivelindividual(39,103).
Labioactivacinafectatantoafrmacoscomoaotrosxenobiticos.Entre
losprimeroselejemplomejorconocidoeseldelparacetamol.Estefrmaco
puedesermetabolizadoporenzimasdefase2conformacindeconjugados
conglucurnidooconsulfato,loscualessonfcilmenteeliminados,opuedeser
oxidado por el P450 (CYP1A2, CYP2E1, CYP3A4) producindose una
quinonaimina altamente reactiva capaz de interaccionar con las protenas
celulares(105).Losprocesosdeactivacintambinconducenalaconversin
deprocarcingenosencarcingenos(77).Estasreaccionesestncatalizadaspor
diferentesP450,sibienlosenzimasdelasubfamiliaCYP1Ajueganunpapel
muydestacadoporsucapacidaddeactivargrannmerodeprocarcingenos
procedentesdelacombustindediferenteshidrocarburosyquepuedenacceder
alorganismo(principalmenteporinhalacin)(77).

Elfenmenodelabioactivacinhasidopropuestocomounanueva
estrategiaparaeltratamientodelcncer(Figura6).Estaterapiasebasa
5

MARATERESADONATOMARTN

eneldesarrollodemolculasqueadquieranactividadantitumoraltrasser
metabolizadasporundeterminadoP450y,almismotiempo,lograrla
induccin de dicho enzima en el tumor, pero no en clulas normales
(106). Un vector adecuado permite la transduccin selectiva en las
clulastumoralesdelgenP450responsabledelaactivacinmetablica
de la molcula (y tambin del gen del enzima citocromo P450
reductasa).Acontinuacinseadministraelfrmaconotxico,peroque
es convertido en una molcula citotxica por el P450. Con esta
estrategiateraputicaseconsigueunaumentoselectivodelaexposicin
delasclulastumoralesalamolculaactivageneradadeformalocal,
sinaumentosignificativodelatoxicidadsobreelrestodeltejido.
BIBLIOGRAFA
(1) Omura,T.&Sato,R.(1964)Thecarbonmonoxidebindingpigmentoflivermi
crosomes.I.Evidenceforitshemoproteinnature.JBiolChem239,23702378.

(2) Omura,T.(1999)FortyyearsofcytochromeP450.BiochemBiophysResCom
mun266,690698.

(3) Okey,A.B.(1990)EnzymeinductioninthecytochromeP450system. Pharm

Ther45,241298.

(4) Conney,A.H.(1986)InductionofmicrosomalcytochromeP450enzymes.Life
Sci39,24932518.

(5) OrtizdeMontellano,P.R.&DeVossJ.J.(2002)Oxidizingspeciesintheme
chanismofcytochromeP450.NatProdRep19,477493.

(6)

WerckReichhart,D.&FeyereisenR.(2001)CytochromesP450:asuccessstory.

GenBiol1,18.

(7) Graham,S.E.&Peterson,J.A.(1999)HowsimilarareP450sandwhatcantheir
differencesteachus.ArchBiochemBiophys369,2429.

(8) Gotoh,O.(1992)SubstraterecognitionsitesincytochromeP450family2
(CYP2)proteinfromcomparativeanalysisofaminoacidandcodingnucleotide
sequences.JBiolChem267,8390.

(9)

Williams,P.A.,Cosme,J.,Sridhar,Y.,Johnson,E.F.&McRee,D.E.(2000)Mam

malianmicrosomalcytochromeP450monooxygenase:structuraladaptationsfor
membranebindingandfunctionaldiversity.MolCell5,121131.

(10) Chapple,C.(1998)MoleculargeneticanalysisofplantcytochromeP450de

pendentmonooxygenases.AnnRevPlantPhysiolPlantMolBiol49,311343.

5
4

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

(11) Matsunaga,I.,Ueda,A.,Fujiwara,N.,Sumimoto,T.&Ichihara,K.(1999)Cha
racterizationoftheybdTgeneproductofBacillussubtilis:novelfattyacidbeta
hydroxylatingcytochromeP450.Lipids34,841846.

(12) Vergeres,G.&Waskell,L.(1995)Cytochromeb5,itsfunctions,structureand
membranetopology.Biochimie77,604620.

(13) Honkakoski,P.&Negishi,M.(2000)RegulationofcytochromeP450(CYP)
genesbynuclearreceptors.BiochemJ347,32137

(14) Mansuy,D.(1998)ThegreatdiversityofreactionscatalizedbycytochromeP
450.CompBiochemPhysiolPartCPharmacolToxicolEndocrinol121,514.
(15)Schlichting,I.,Berendzen,J.,Chu,K.,Stock,A.M.,Mayes,S.A.,Benson,D.E.,
Sweet,R.M.,RingeD.,Petsko,G.A.&SligarSG.(2000)Thecatalyticpathway
ofcytochromeP450camatatomicresolution.Science287,16151622.

(16) Nebert,D.W.,Adesnik,M.,Coon,M.J.,Estabrook,R.W.,Gonzalez,F.J.,Guen
gerich,F.P.,Gunsalus,J.C.,Johnson,E.F.,Kemper,B.LevinW,Philips,J.R.,
Sato,R.&Waterman,M.R.(1987)TheP450genesuperfamily:recommended
nomenclature.DNA6,111.

(17) Nelson,D.R.(2003)ComparisonofP450sfromhumanandfugu:420million
yearsofvertebradeP450evolution.ArchBiochemBiophys409,1824.

(18) Nelson,D.R.(1999)Cytochrome P450 andtheindividualityofspecies. Arch

BiochemBiophys369,110.

(19) Ding,X.&Kaminsky,L.S.(2003)HumanextrahepaticcytochromesP450:
Functioninxenobioticmetabolismandtissueselectivechemicaltoxicityinthe
respiratoryandgastrointestinaltracts.AnnuRevPharmacolToxicol43,149173.

(20)

Shimada,T,Yamazaki,H.,Mimura,M.,Inui,Y.&Guengerich,F.P.(1994)Inte
rindividualvariationsinhumanlivercytochromeP450enzymesinvolvedinthe

oxidationofdrugs,carcinogensandtoxicchemicals:Studieswithlivermicroso
mesof30japaneseand30caucasians.JPharmacolExpTher270,414423

(21) Hakkola,J.,Pasanen,M.,Purkunen,R.,Saarikoski,S.,Pelkonen,O.,Maenpaa,
J.,Rane,A.&RaunioH.(1994)Expressionofxenobioticmetabolizingcytoch
romeP450formsinhumanadultandfetalliver.BiochemPharmacol48,5964.
(22)Edwards,R.J.,Adams,D.A.,Watts,P.S.,Davies,D.S.&Boobis,A.R.(1998)De
velopmentofacomprehensivepanelofantibodiesagainstthemajorxenobioticme
tabolisingformsofcytochromeP450inhumans.BiochemPharmacol56,377387.

(23) Clarke,S.E.(1998)InvitroassessmentofhumancytochromeP450.Xenobioti
ca28,11671202.

(24) Ma,M.K.,Woo,M.H.&McLeod,H.L.(2002)Geneticbasisofdrugmetabo

lism.AmJHealthSystPharm59,20612069.

5
5

MARATERESADONATOMARTN

(25) Schmucker,D.L.(2001)LiverfunctionandphaseIdrugmetabolismintheel
derly:aparadox.DrugsAging18,837851.

(26)

Blanco,J.G.,Harrison,P.L.,Evans,W.E.&Relling,M.V.(2000)Humancytoch

romeP450maximalactivitiesinpediatricversusadultliver.DrugMetabDis
pos28,379382.

(27) Gow,P.J.,Ghabrial,H.,Smallwood,R.A.,Morgan,D.J.&Ching,M.S.(2001)
Neonatalhepaticdrugelimination.PharmacolToxicol88,315.
(28)Meibohm,B.,Beierle,I.&Derendorf,H.(2002)Howimportantaregenderdif
ferencesinpharmacokinetics?ClinPharmacokinet41,329342.

(29) Mugford,C.A.&Kedderis,G.L.(1998)Sexdependentmetabolismofxenobio
tics.DrugMetabRev30,441498.

(30)

Pelkonen,O.&Breimer,D.D.(1994)Roleofenvironmentalfactorsinthephar
macokineticsofdrugs:considerationswithrespecttoanimalmodels,P450enzy
mes,andprobedrugs.In:WellingPG,BalantLPeditors.Handbookofexperimental
pharmacology,vol110.Heildelberg:SpringerVerlag,pp.289322

(31) Kotlyar,M.&Carson,S.W.(1999)EffectsofobesityonthecytochromeP450
enzymesystem.IntJClinPharmacol37,819.

(32) WalterSack,I.&Klotz,U.(1996)Influenceofdietandnutritionalstatuson
dnugmetabolism.ClinPharmacokinet31,4764.

(33) IoannidesC.(1999)Effectofdietandnutritionontheexpressionofcytochro
mesP450.Xenobiotica29,109154.
(34)Gonzalez,F.J.(1992)HumancytochromesP450:problemsandprospects.Trends
PharmacolSci13,346352.
(35)Capdevila,J.H.,Faick,J.R.&Harris,R.C.(2000)CytochromeP450andara
chidonicacidbioactivation.Molecularandfunctionalpropertiesofthearachido
natemonooxygenase.JLipidRes41,163181.

(36) Schmidt,J.V.&BradfieldCA.(1996)Ahreceptorsignalingpathways. Annu

RevCellDevBiol.12,5589.
(37)Gonzalez,F.J.&FernandezSalguero,P.(1998)Thearylhydrocarbonreceptor:
studiesusingtheAHRnullmice.DrugMetabDispos26,11941198.

(38) Shimada,T.,Hayes,C.L.,Yamazaki,H.,Amin,S.,Hecht,S.S.,Guengerich,F.P.
&Sutter,T.R.(1996)Activationofchemicallydiverseprocarcinogensbyhuman
cytochromeP4501B1.CancerRes56,29792984.
(39)Pelkonen,O.&Raunio,H.(1997)Metabolicactivationoftoxins:tissuespecific
expressionandmetabolismintargetorgans.EnvironHealthPerspect4,767774.

(40) Whitlock,J.P.(1999)InductionofcytochromeP4501A1.AnnuReyPharmacol

Toxicol39,103125.

5
6

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

(41)

Vineis,P.,Veglia,F.,Benhamou,S.,Butkiewicz,D.,Cascorbi,I.,Clapper,M.L.,
Dolza,V.,Haugen,A.,Hirvonen,A.,IngelmanSundberg,M.,Kihara,M.,Kiyo
hara,C.,Kremers,P.,LeMarchand,L.,Ohshima,S.,Pastorelli,R.,Rannug,A.,
Romkes,M.,Schoket,B.,Shields,P.,Strange,R.C.,Stucker,I.,Sugimura,H.,Garte,
S.,Gaspani,L.&Taioli,E.(2003)CYP1AlT3801Cpolymorphismand

lungcancer:Apooledanalysisof2,451casesand3,358controls.IntJCancer
104,650657.

(42) Kall,M.A.&Clausen,J.(1995)DietaryeffectonmixedfunctionP4501A2ac
tivityassayedbyestimationofcaffeinemetabolisminman. HumExpToxicol
14,801807.

(43) Landi,M.T.,Sinha,R.,Lang,N.P.&Kadlubar,F.F.(1999)Humancytochrome
P4501A2.IARCSciPubl148,173195.

(44) Han,X.M.,Ouyang,D.S.,Chen,X.P.,Shu,Y.,Jiang,C.H.,Tan,Z.R.&Zhou,
H.H.(2002)InducibilityofCYP1A2byomeprazoleinvivorelatedtothegene
ticpolymorphismofCYP1A2.BrJClinPharrnacol54,540543.

(45) Nakajima,M.,Yokoi,T.,Mizutani,M.,Kinoshita,M.,Funayama,M.&Kama

taki,T.(1999)Geneticpolymorphisminthe5flankingregionofhuman
CYP1A2gene:effectontheCYP1A2inducibilityinhumans.JBiochem(Tokyo)
125,803808.

(46) Nyeki,A.,Buclin,T.,Biollaz,J.&Decosterd,L.A.(2003)NAT2andCYP1A2
phenotypingwithcaffeine:headtoheadcomparisonofAFM1Jvs.AAMUin
theurinemetaboliteratios.BrJClinPharmacol55,6267.

(47) Smith,D.A.,Ackland,M.&Jones,B.C.(1997)PropertiesofcytochromeP450
isoenzymesandtheirsubstrates.Part2:propertiesofcytochromeP450substra
tes.DrugDiscovToday2,479486.

(48) Cheung,Y.L.,Kerr,A.C.,McFadyen,M.C.,Melvin,W.T.&MurrayG.I.(1999)
Differential expressionofCYP1A1,CYP1A2,CYP1B1inhuman kidney tu
mours.CancerLett139,199205.

(49) Stoilov,I.,Akarsu,A.N.&Sarfarazi,M.(1997)Identificationofthreedifferent

truncatingmutationsincytochromeP4SO1B1(CYP1B1)astheprincipalcause
ofpnimarycongenitalglaucoma(Buphthalmos)infamilieslinkedtotheGLC3A
locusonchromosome2p2l.HumMolGenet6,641647.

(50)

Murray,G.I.,Taylor,M.C.,McFadyen,M.C.,McKay,J.A.,Greenlee,W.F.,Bur

ke,M.D.&Melvin,W.T.(1997)TumorspecificexpressionofcytochromeP
450CYP1B1.CancerRes57,30263031.

(51) Sotaniemi,E.A.,Rautio,A.,Backstrom,M.,Arvela,P.&Pelkonen,O.(1995)

CYP3A4andCYP2A6activitiesmarkedbythemetabolismoflignocaineand
coumarininpatientswithliverandkidneydiseasesandepilepticpatients.BrJ

ClinPharmacol39,716.

5
7

MARATERESADONATOMARTN

(52) Kamataki,T.,Fujita,K.,Nakayama,K.,Yamazaki,Y.,Miyamoto,M.&Ariyos
hi,N.(2002)RoleofhumancytochromeP450(CYP)inthemetabolicactiva
tionofnitrosaminederivatives:applicationofgeneticallyengineeredSalmonella
expressinghumanCYP.DrugMetabRev34,6776.

(53)Kitagawa,K.,Kunugita,N.,Katoh,T.,Yang,M.&Kawamoto,T.(1999)The
significance of the homozygousCYP2A6 deletionon nicotine metabolism: a
new genotyping method of CYP2A6 using a single PCRRFLP. Biochem
BiophysResCommun262,146151.
(54)Pelkonen,O.,Rautio,A.,Raunio,H.&Pasanen,M.(2000)CYP2A6:ahuman
coumarin7hydroxylase.Toxicology144,139147.

(55) Oscarson,M.,Gulisten,H.,Rautio,A.,Bernal,M.L.,Sinues,B.,Dahi,M.L.,
Stengard,J.H.,Pelkonen,O.,Raunio,H.&JngelmanSundberg,M.(1998)Ge
notypingofhumancytochromeP4502A6(CYP2A6),anicotineCoxidase.
FEBSLett.438,201205.

(56)

Miyamoto,M.,Umetsu,Y.,DosakaAkita,H.,Sawamura,Y.,Yokota,J.,Kunitoh,
H.,Nemoto,N.,Sato,K.,Ariyoshi,N.&Kamataki,T.(1999)CYP2A6gene

deletionreducessusceptibilitytolungcancer. BiochemBiophysRes Commun

261,658660.

(57) Gu,J.,Su,T.,Chen,Y.,Zhang,Q.Y.&Ding,X.(2000)Expressionofbiotrans
formationenzymesinhumanfetalolfactorymucosa:potentialrolesindevelop
mentaltoxicity.ToxicolApplPharmacol165,158162.

(58) Mimura,M.,Baba,T.,Yamazaki,H.,Ohmori,S.,Inui,Y.,Gonzalez,F.J.,Guen
gerich,F.P.&Shimada,T.(1993)CharacterizationofcytochromeP4502B6in
humanlivermicrosomes.DrugMetabDispos21,10481056.

(59) Sueyoshi,T.,Kawamoto,T.,Zelko,I.,Honkakoski,P.&Negishi,M.(1999)The
repressednuclearreceptorCARrespondstophenobarbitalinactivatingthehu
manCYP2B6gene.JBiolChem274,60436046.

(60)

Pascussi,J.M.,GerbalChaloin,S.,Fabre,J.M.,Maurel,P.&Vilarem,M.J.(2000)
Dexamethasoneenhancesconstitutiveandrostanereceptorexpressioninhuman

hepatocytes:consequencesoncytochromeP450generegulation.MolPharma
col58,14411450.

(61) Bathelt,C.,Schmid,R.D.&Pleiss,J.(2002)RegioselectivityofCYP2B6:ho
mologymodeling,moleculardynamicssimulation,docking.JMo1Model(On
line)8,327335.
(62)Spatzenegger,M.,Liu,H.,Wang,Q.,Debarber,A.,Koop,DR.&Halpert,J.R.
(2003)AnalysisofdifferentialsubstrateselectivitiesofCYP2B6andCYP2E1
bysitedirected mutagenesis and molecular modeling. J Pharmacol Exp Ther

304,477487.

5
8

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

(63) Goldstein,J.A.(2001)Clinicalrelevanceofgeneticpolymorphismsinthehu
manCYP2Csubfamily.BrJClinPharmacol52,349355.
(64)Anzenbacher,P.&Anzenbacherova,E.(2001)CytochromesP450andmetabo
lismofxenobiotics.CellMolLifeSci58,737747.

(65) IngelmanSundberg,M.,Oscarson,M.&McLellan,R.A.(1999)Polymorphic
humancytochromeP450enzymes:anopportunityforindividualizeddrugtre
atment.TrendsPharmacolSci20,342349.

(66) Inoue.K.,Yamazaki,H.&Shimada,T.(1998)Linkagebetweenthedistribution
ofmutationsintheCYP2C18andCYP2C19genesintheJapaneseandCauca
sian.Xenobiotica28,403411.

(67)

Desta,Z.,Zhao,X.,Shin,J.G.&Flockhart,D.A.(2002)Clinicalsignificanceofthe
cytochromeP4502C19geneticpolymorphism.ClinPharmacokinet41,913958.

(68) Marill,J.,Cresteil,T.,Lanotte,M.&Chabot,G.G.(2000)Identificationofhu
mancytochromeP450sinvolvedintheformationofalltransretinoicacidprin
cipalmetabolites.MolPharmacol58,13411348.

(69) Soyama,A.,Hanioka,N.,Saito,Y.,Murayama,N.,Ando,M.,Ozawa,S.&Sa
wada, J. (2002) Amiodarone Ndeethylation by CYP2C8 and its vaniants,
CYP2C8*3andCYP2C8P4O4A.PharmacolToxicol91,174178.

(70) Klose,T.S.,Blaisdeli,J.A.&Goldstein,J.A.(1999)GenestructureofCYP2C8
andextrahepaticdistributionofthehumanCYP2Cs.JBiochemMolToxicol13,
289295.

(71) Minoletti,C.,Dijols,S.,Dansette,P.M.&Mansuy,D.(1999)Comparisonofthe
substratespecificitiesofhumanlivercytochromeP450s2C9and2C18:application
tothedesignofaspecificsubstrateofCYP2C18.Biochemistry38,78287836.

(72) Bertilsson,L.,Dahi,M.L.,Dalen,P.&AlShurbaji,A.(2002)Moleculargene
ticsofCYP2D6:clinicalrelevancewithfocusonpsychotropicdrugs.BrJClin
Pharmacol53,111122.

(73) Scordo,M.G.&Spina,E.(2002)CytochromeP450polymorphismsandres
ponsetoantipsychotictherapy.Pharmacogenomics3,201218.

(74) Foltynie,T.,Sawcer,S.,Brayne,C.&Barker,R.A.(2002)Thegeneticbasisof
Parkinsonsdisease.JNeurolNeurosurgPsychiatry73,363370.

(75) Silvestri,L.,Sonzogni,L.,DeSilvestni,A.,Gritti,C.,Foti,L.,Zavaglia,C.,Le

ven,M.,Cividini,A.,Mondelli,M.U.,Civardi,E.&Silini,E.M.(2003)CYP
enzymepolymorphismsandsusceptibilitytoHCVrelatedchronicliverdisease
andlivercancer.IntJCancer104,310317.

(76) Smith,D.A.,Abel,S.M.,Hyland,R.&Jones,B.C.(1998)Humancytochrome

P450s:selectivityandmeasurementinvivo.Xenobiotica12,10951128.

5
9

MARATERESADONATOMARTN

(77) Sheweita,S.A.(2000)Drugmetabolizingenzymes:mechanismsandfunctions.
CurrDrugMetab1,107132.

(78) Tanaka,E.,Terada,M.&Misawa,S.(2000)CytochromeP4502E1:itsclinical
andtoxicologicalrole.JClinPharmTher25,165175.

(79) Hu,Y.,IngelmanSundberg,M.&Lindros,K.O.(1995)Inductionmechanisms
ofcytochromeP4502E1inliver:interplaybetweenethanoltreatmentandstar
vation.BiochemPharmacol50,155161.

(80) Wang,Z.,Hall,S.D.,Maya,J.F.,Li,L.,Asghar,A.&Gorski,J.C.(2003)Dia
betesmellitusincreasestheinvivoactivityofcytochromeP4502E1inhumans.
BrJClinPharmacol55,7785.
(81)Lanza,D.L.,Code,E.,Crespi,C.L.,Gonzalez,F.J.&Yost,G.S.(1999)Specificdehy
drogenationof3methylindoleandepoxidationofnaphthalenebyrecombinanthu
manCYP2F1expressedinlymphoblastoidcells.DrugMetabDispos27,798803.

(82) Thummel,K.E.&Wilkinson,G.R.(1998)Invitroandinvivodruginteractions
involvinghumanCYP3A.AnnuRevPharmacolToxicol38,389430.

(83) Parkinson,A.(1996)AnoverviewofcurrentcytochromeP450technologyfor
assessingthesafetyandefficacyofnewmaterials.ToxicolPathol24,4857.

(84)

Ohno,M.,Yamaguchi,I.,Ito,T.,SaikiK.,Yamamoto,I.&Azuma,J.(2000)Cir

cadianvariationoftheurinary6betahydroxycortisoltocortisolratiothatwould
reflecthepaticCYP3Aactivity.EurJClinPharmacol55,861865.
(85) Thompson, P.D., Jurutka, P.W., Whitfield, G.K., Myskowski, S.M., Eichhorst,
K.R.,Dominguez,C.E.,Haussler,C.A.&Haussler,M.R.(2002)LigandedVDR
inducesCYP3A4insmallintestinalandcoloncancercellsviaDR3andER6vi
taminDresponsiveelements.BiochemBiophysResCommunc299,730738.

(86) Lamba,J.K.,Lin,Y.S,Schuetz,E.G.&Thummel,K.E.(2002)Geneticcontri
butiontovariablehumanCYP3AmediatedmetabolismAdvDrugDelivRev54,
12711294.

(87) Hakkola,J.,Raunio,H.,Purkunen,R.,Saarikoski,S.,Vahakangas,K.,Pelkonen,

O.,Edwards,R.J.,Boobis,A.R.&Pasanen,M.(2001)CytochromeP4503A
expressioninthehumanfetalliver:evidencethatCYP3A5isexpressedinonlya
limitednumberoffetallivers.BiolNeonate80,193201.

(88)

Burk,O.,Tegude,H.,Koch,I.,Hustert,E.,Wolbold,R.,Glaeser,H.,Klein,K.,
Fromm,M.F.,Nuessler,A.K.,Neuhaus,P.,Zanger,U.M.,Eichelbaum,M.&Wo

jonowski,L.(2002)MolecularmechanismsofpolymorphicCYP3A7expression
inadulthumanliverandintestine.JBiolChem277,2428024288.

(89)

Hukkanen,J..Vaisanen,T.,Lassila,A.,Piipari,R.,Anttila,S,.Pelkonen,O.,Rau
nio,H.&Hakkola.J.(2003)RegulationofCYP3A5byglucocorticoidsandciga

rettesmokeinhumanlungderivedcells.JPharmacolExpTher304,745752.

6
0

QUESELCITOCROMOP450YCMOFUNCIONA?

(90)

Krusekopf,S.,Roots,I.&Kleeberg,U.(2003)DifferentialdruginducedmRNA

expressionofhumanCYP3A4comparedtoCYP3A5,CYP3A7andCYP3A43.
EurJPharmacol466,712.

(91) Bertz.R.J.&Granneman,G.R.(1997)Useofinvitroandinvivodatatoesti
matethelikelihoodofmetabolicpharmacokineticinteractions.ClinPharmaco
kinet32,210258.

(92) Guengerich,F.P.(1999)CytochromeP4503A4:regulationandroleindrug
metabolism.AnnuRevPharmacolToxicol39,117.

(93) Finch,C.K.,Chrisman,C.R.,Baciewicz,A.M.,&Self,T.H.(2002)Rifampin
andrifabutindruginteractions:anupdate.ArchInternMed162,985992.

(94) Desta,Z.,Soukhova,N.,Mahal,S.K.&Flockhart,D.A.(2000)Interactionof
cisapridewiththehumancytochromeP450system:metabolismandinhibition
studies.DrugMetabDispos28,789800.

(95) Shader, R.I. & Oesterheld, J.R. (2000) Contraceptive effectiveness:

cytochromesandinduction.JClinPsychopharmacol20,119121.

(96) Eiselt.R.,Domanski,T.L.,Zibat,A.,Mueller,R.,PresecanSiedel,E.,Hustert
E.,Zanger,U.M.,Brockmoller,J.,Klenk,H.P.,Meyer,U.A.,Khan,K.K.,He,
Y.A.,Halpert,J.R.&Vojnowski,L.(2001)Identificationandfunetionalcha
racterizationofeightCYP3A4proteinvariants.Pharmacogenetics11,447458.

(97) Kuehl,P.,Zhang,J.,Lin,Y.,Lamba,J.,Assem,M.,,SchuetzJ.,Watkins,P.B.,
Daly,A.,Wrighton,S.A.,Hall,S.D.,Maurel,P.,Relling,M.,Brimer,C.,Ya
suda,K.,Venkataramanan,R.,Strom,S.,Thummel,K.,Boguski,M.S.&
Schuetz,E.(2001)SequencediversityinCYP3Apromotersandcharacteriza
tionofthegeneticbasisofpolymorphicCYP3A5expression. NatGenet 27,
383391.

(98) Simpson,A.E.(1997)ThecytochromeP4504(CYP4)family.GenPharmacol
28,351359.

(99) Peter,M.,Dubuis,J.M.&Sippell,W.G.(1999)Disordersofthealdosterone
synthaseandsteroid11betahydroxylasedeficiencies.HormRes51,211222

(100)

DacouVoutetakis,C.,ManiatiChristidi,M.&DracopoulouVabouli,M.(2001)

Geneticaspectsofcongenitaladrenalhyperplasia.JPediatrEndocrinolMetab
5,13031308.

(101) Welch,R.M.(1979)Toxicologicalimplicationsofdrugmetabolism.Pharmacol
Rev30,457467.

(102) Gelboin,H.V.(1980)Benzo(a)pyrenemetabolism,activation,andcarcinogene
sis: role and regulation of mixedfunction oxidases and related enzymes.

PhysiolRev60,11071166.

6
1

MARATERESADONATOMARTN

(103)

Gonzalez,F.J.(1998)Thestudyofxenobioticmetabolizingenzymesandtheirrole
intoxicityinvivousingtargetedgenedisruption.ToxicolLett102103,161166.

(104) Kent,U.M.,Juschyshyn,M.I.&Hollenberg,P.F.(2001)Mechanismbasedin
activatorsasprobesofcytochromeP450structureandfunction. CurrDrug
Metab2,215243.

(105) Manyike,P.T.,Kharasch,E.D.,Kalhorn,T.F.&Slattery,J.T.(2000)Contribu
tionofCYP2E1andCYP3Atoacetaminophenreactivemetaboliteformation.
ClinPharmacolTher67,275282.

(106) Waxman,D.J,Chen,L.,Hecht,J.E.&Jounaidi,Y.(1999)CytochromeP450
basedcancergenetherapy:recentadvancesandfutureprospects.DrugMetab
Rev31,503522.

6
2