UNIVERSIDAD PRIVADA DEL NORTE

FACULTAD DE INGENIERA
CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERA AMBIENTAL

BIOQUMICA Y TOXICOLOGA

TEST DE SUPERVIVENCIA LOMBRICES

Docente

: Msc. Blgo MARCO SANCHEZ PEA

Alumnos

ALVARADO CORTEZ, HENRY

ALARCON BALCAZAR, BASTY JUDITH
BAUTISTA MEJIA, ANER
CABANILLAS MIRANDA, LUIS
DIAZ ZAMORA, NELSON YEFFERSON
MUGUERZA CABANILLAS, DIANA
TORRES DE LA ROSA, CLAUDETTE
PONTE HUAMAN, ROSA ANGELICA
PREZ CASTAEDA, JULIO JHONATAN

Cajamarca, 2015

Bioqumica y Toxicologa

TEST DE SUPERVIVENCIA LOMBRICES

OBJETIVOS:
Establecer la prdida de peso de las lombrices en porcentajes
Analizar el efecto en prdida de peso ocasionado por la concentracin de
metales en el suelo.

FUNDAMENTO TERICO:
Las lombrices de tierra son un grupo fundamental de la fauna del suelo, ya que
Constituyen gran parte de la biomasa animal edfica en varios ecosistemas,
tanto en zonas templadas como tropicales. Asimismo, desempean un papel
ecolgico Primordial por su influencia en la descomposicin de la materia
orgnica, el desarrollo de la estructura del suelo y el ciclo de los nutrientes
(Ros, 2005).
Las lombrices causan importantes modificaciones fsicas en el suelo (galeras,
Madrigueras y hoyos) que mejoran el ambiente para el desarrollo de otros
organismos (Como los microorganismos) e incrementan la disponibilidad de
hbitats y alimento para las plantas y otros animales (Lavelle, 1997; Brown et
al., 2000).
Adems, aumentan la porosidad, facilitan la formacin de agregados y mejoran
la Estructura del suelo, promueven la oxigenacin y la infiltracin de agua,
incrementan. El transporte de nutrientes y compuestos qumicos agrcolas hasta
las capas Profundas (Subler et al., 1997; Edwards y Bohlen, 1992), contribuyen
a la formacin del suelo y a reducir la erosin. Sus efectos son especialmente
importantes en Suelos con estructura pobre (Ros, 2005).
Durante su proceso de alimentacin, succionan o chupan la tierra de las
galeras que excavan y digieren de ella las partculas vegetales y animales en
descomposicin. De esta manera, transforman los residuos orgnicos en humus,
el cual Devuelven al suelo al expulsarlo por el ano junto con la tierra. As,
participan en la Fertilizacin del suelo al incrementar su carga microbiana y su
contenido de nitrgeno (Elliot et al., 1990). Adems, participan de manera
importante en el ciclo del carbono, ya sea incrementando su mineralizacin o
disminuyendo su descomposicin al formar agregados estables en los cuales
este elemento queda protegido (Ros, 2005).
La contaminacin del suelo con compuestos orgnicos, metales pesados,
plaguicidas y lluvia acida puede afectar a las poblaciones de lombrices. Estos
contaminantes se acumulan en sus tejidos y pueden constituir un problema para
el gran nmero de animales que se alimentan de ellas, debido a su potencial
biomagnificacin (Edwards y Bohlen 1992).
Las lombrices se emplean con frecuencia como organismos de prueba para
evaluar la toxicidad de los suelos (Cuevas-Daz et al., 2008). La especie de
lombriz ms utilizada en las pruebas estandarizadas es Eisenia ftida (Bouche,
1972). Esta especie se distribuye naturalmente en casi todo el hemisferio norte;
es considerada un bioindicador de la calidad de los suelos, ya que solo es capaz
Test De Supervivencia Lombrices

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de desarrollarse y reproducirse en condiciones adecuadas de humedad (85 %),
temperatura (25 a 30 C), pH del suelo (6.5 a 7.5) y alimentacin (material
orgnico agropecuario, industrial y domstico). Adems, es un organismo de
fcil manejo en el laboratorio (Kaplan et al., 1980), casi no contrae
enfermedades, tiene un ciclo reproductivo corto (alcanza su madurez sexual en
aproximadamente 2 meses) y es extremadamente prolfica (deposita cada 7 a 10
das una capsula o huevo con un contenido que flucta de 2 a 20 embriones)
(Domnguez et al., 2005; Santamara y Ferrera, 2002). Cuando esta sexualmente
madura, desarrolla una estructura sobre la epidermis que se denomina clitelo,
donde crecen los cocones o capsulas en los cuales uno o varios huevos son
depositados. Posteriormente esta capsula pasa hacia los segmentos anteriores
de la lombriz y es colocada en el suelo. Los juveniles se desarrollan dentro de la
capsula y despus emergen de ella.
CAMPO DE APLICACIN
Los bioensayos con lombrices se emplean para evaluar la toxicidad de suelos
contaminados con hidrocarburos, porque de esta manera se puede predecir el
impacto de las mezclas complejas de compuestos como el petrleo e
hidrocarburos aromticos policclicos sobre los organismos.
Estas pruebas tambin son tiles para monitorear la biorremediacion de suelos
contaminados con hidrocarburos, tanto en laboratorio como en campo
(Salanitro, 1997; Meier et al., 1997), ya que la reduccin de la contaminacin no
siempre viene acompaada de una disminucin de la toxicidad del suelo debido
a la transformacin incompleta de los contaminantes o a la formacin de
metabolitos ms txicos (Phillips et al., 2000).
Los bioensayos con lombrices pueden realizarse directamente con las muestras
de suelo o con sus extractos (elutriados); sin embargo, en este captulo solo se
describen las pruebas directas en suelo.

EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS:

Balanza analtica
Frascos de plstico de 1 litro
Guantes
Arcilla blanca
Musgo
Arena de cuarzo
Agua destilada
Lombrices californianas
Estircol de res
Esptula

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Test De Supervivencia Lombrices

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TEST DE SUPERVIVENCIA EN GUSANOS DE LA ESPECIE Eisenia fetida.

Preparacin de las muestras de sedimentos

Pesar cada una de las muestras de sedimentos a analizar y colocarla en los recipientes
de material inerte destinados al ensayo.

Preparar la muestra control: 10% turba de saphagnum, 70% argila blanca (Caolina),
10% arena de cuarzo.

Humedecer cada una de las muestras mediante la incorporacin de agua desionizada

gota a gota evitando que se produzca un exceso de agua.

Seleccin y preparacin de los individuos

Pesar cada uno de los individuos a utilizar en el ensayo. El peso de los gusanos debe
ser entre 250 y 500mg Registrar el peso de cada uno de los individuos al inicio del
ensayo.

Distribuir los gusanos uniformemente entre las diferentes muestras a estudiar. La ratio
de gusanos por peso de muestra a utilizar es de 1 gusano por cada 40g de muestra.

Aadir la cantidad de comida necesaria por individuos presentes en cada muestra. La

cantidad de comida a aadir corresponde a 2g de comida por gusano. Distribuir la
comida entre la muestra de sedimento.

Pesar el recipiente con la muestra, el agua, los individuos y la comida SIN LA TAPA y
registrar el peso. Este es el parmetro de referencia para la monitorizacin del
contenido de agua de las muestras.

Condiciones experimentales del test

Temperatura: 20 2C
Fotoperiodo: 16 horas de luz 8 horas de oscuridad
Iluminacin: 400 800 lux en el rea donde se encuentran los contenedores del
test.
Humedad del sustrato: 40% - 60% 10 %

Una vez por semana

Registrar el peso de todos los gusanos de cada muestra.

Dos veces por semana

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Registrar el peso de todos los recipientes que forman parte del ensayo.
Corregir la diferencia de peso con el ltimo registro (correspondiente a la
prdida de agua) aadiendo el volumen correspondiente de agua desionizada.

Durante todo el ensayo

Mantener la temperatura a 20C 2C y la humedad del sustrato al 40-60%
10%.

Elaboracin
Preparar el suelo testigo de comparacin con
arena de cuarzo arcilla y musgo para un frasco

Preparar una muestra de suelo con suelos contaminantes para el

frasco nmero 2

40 gr por unidad de lombrices para cada

frasco
Mantener siempre una humedad promedio en los frascos con agua
destilada
Dar de comer a las lombrices 2 gr de estircol una vez a la
semana
Pesar a las lombrices una vez a la semana para observar la
variacin una vez a la semana

RESULTADOS:
Cuadro n 1: peso de las lombrices cada semana

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Cantidad

Peso de
Peso de
lombrices Frasco
lombrices Frasco
2 (suelo
1 (Control)
contaminado)

Inicio de la
13 lombrices
4.0 gr.
3.68 gr
prueba
1 semana
13 lombrices
3.85 gr
3.12 gr
2 semana
13 lombrices
4.24 gr
2.76 gr
3 semana
13 lombrices
5.12 gr
2.35 gr
4 semana
13 lombrices
6.01 gr
1.99 gr
Cuadro n 2: Porcentaje de perdida (-) y ganancia (+) de peso de lombrices en
semanas por cada frasco

Cantidad
Inicio de la
prueba
1 semana
2 semana
3 semana
4 semana

Peso de
Peso de
lombrices Frasco
lombrices Frasco
2 ( suelo
1 (Control)
contaminado)

13 lombrices
13
13
13
13

lombrices
lombrices
lombrices
lombrices

-3.75%
+6%
+28%
+52.5%

-15.21%
-25.00%
-36.14%
-45.92%

PROCESAMIENTO DE DATOS:
GRFICO N1: Porcentaje de prdida (-) y ganancia (+) de peso de lombrices en
el frasco #1

Peso de lombrices Frasco 1 (Control)

53%
28%
6%
-4%
0%
-0.1

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

PESO

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GRFICO N 2 Porcentaje de prdida (-) y ganancia (+) de peso de lombrices en
el frasco #2

Peso de lombrices Frasco 2 ( suelo contaminado)

-45.92%

-36.14%

-25.00%

-15.21%

0.00%

-0.5 -0.4 -0.3 -0.2 -0.1 0

ANLISIS Y DISCUCIN DE RESULTADOS:

Se observa que en el primer frasco las lombrices bajan de peso durante la primera
semana, con una disminucin de 0.15 gramos del peso total.
En el primer frasco tambin se observa que desde la semana dos en adelante el peso
de las lombrices va en aumento llegando a un porcentaje de 86.5%.
En el frasco nmero dos se observan un dficit de peso total ya que desde la primera
semana uno hasta la semana 4 las lombrices perdieron peso en un 120% de su peso
original.
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CONCLUSIONES:
Establecimos la prdida de peso de las lombrices en porcentajes; y tambin la
ganancia del mismo: obteniendo en el primer frasco una ganancia de 52.5% y en el
segundo frasco una prdida en un 120% de su peso original; por ltimo en el frasco
nmero tres se obtuvo una ganancia de peso en un 164%.
Analizamos el efecto en prdida de peso ocasionado por la concentracin de metales
en el suelo. Realizado con la comparacin de ganancia y prdida de pesos segn la
concentracin de contaminante que fue 0 en nuestro frasco nmero uno o testigo.
Los resultados para las tres pruebas dependieron de los cambios bruscos,
sensibilidad a los contaminantes, falta de comida, temperatura y PH ya
que esto puedo afectar los resultados.

BIBLIOGRAFA:

Dorn, P. B., Vipond T. E., Salanitro J. P., & Wisniewksi H. L. (1998). Assessment of the acute
toxicity of crude oils in soil using earthworms, microtox and plants. Chemosphere 37(5):845860.

Edwards C.A., & Bohlen P.J. (1996). Biology and Ecology of Earthworms. Third Edition. Chapman
and Hall. Suffolk, Great Britain.

Kaplan, D. L., Hartenstein R., Neuhauser E. F., & Maleckit M .R. (1980). Physicochemical
requirements in the environment of the earthworm Eisenia foetida. Soil Biology and
Biochemistry 12: 347-352.

OECD. (1984). Test No. 207 Earthworm Acute Toxicity Tests. Organization for Economic Cooperation and Development Guidelines for the Testing of Chemicals.

Reynolds, J. (1994). Earthworms of the world. Global Biodiversity. 4: 11-16.

Santamara, R. S. (1996). Aspectos biotecnolgicos del proceso de vermicomposteo y su

aplicacin agronmica. Tesis para obtener el ttulo de Ingeniero Agrnomo. Facultad de Ciencias
Agrcolas. Universidad Veracruzana, Mxico.

https://www.google.com/search?client=aff-maxthonmaxthon4&channel=t26&q=bioquimca
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.14390442.1969.tb00724.x/abstract
http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_Aguas/Determinacio
n_de_DBO5.htm
http://www.humusina.com/cblrc.html

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Anexos
fotografas del procedimiento

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