LABORATORIO # 5

DETERMINACIN DE PROTENAS EN UNA MUESTRA DE CARNE POR EL

MTODO DE BIURET

SANDRO PADRA 117002644

NICOLE HERNANDEZ LEN 117003314
KAREN DAZA NIETO 117003309

MIGUEL NGEL RAMREZ

QUMICO

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES
INGENIERA AGROINDUSTRIAL
VILLAVICENCIO
2015

DETERMINACIN DE PROTENAS EN UNA MUESTRA DE CARNE

POR EL MTODO DE BIURET

1. OBJETIVOS

Determinar el contenido de protenas en una muestra de carne por

el mtodo de Biuret.

2. MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales
Reactivos
Erlenmeyer de 50 ml
Pipeta calibrada de Hidrxido de sodio 0.5
1ml
N
Probeta de 25 ml
Pipeta volumtrica de ter de petrleo
1ml
Solucin stock de BSA
Tubos de ensayo (4)
Pera de succin
(10 mg/ ml)
Embudo Buchener
Espectrofotmetro
Reactivo de Biuret
Erlenmeyer de 250 ml
con desprendimiento Licuadora
lateral
Centrifuga
Muestra de carne
3. METODOLOGA

3.1. PREPARACIN Y DIGESTIN DE LA MUESTRA

Tomar 100 g de muestra de carne (picada finamente)

Pesar 0.9000-1.2000
g de carne

Transferir a un
Erlenmeyer de
50 ml

Centrifugar a 4000 rpm

colectar el extracto
clarificado

Enfriar y filtrar al
vaco

Aadir 20 ml de
NaOH 0.5 N

Calentar en bao
de mara 10 min

3.2. Determinacin de protena totales en la muestra

Llevar el volumen a 1ml con

agua destilada

Colocar 0.4 y 0.8 ml de la

solucin en tubos de ensayo

Dejar reposar
por 30 min

Leer absorbancia
a 550 nm

Aadir 4 ml de reactivo
de Biuret y mezclar

3.3. Preparacin de la curva de calibracin

Colocar en 6 tubos de ensayo

desde 0-10 ml de albumina
Leer
absorbancia
a 550 nm

Dejar
reposar
durante 3 min.

Llevar a volumen de 1.0 ml de cada

en cada tubo con agua destilada

Aadir a 4 ml de reactivo de
Biuret en cada tubo

4. DATOS Y CCULOS
4.1. CURVA DE CALIBRACIN

Gramos de protena en 100 gramos de carne de res = 22,3

gramos
Datos
Segn el codex alimentarius cada 100 gramos de carne de res
magra contiene un aproximado de 22,3 gramos de protena.

Tabla N 1 composicin nutricional de diferentes alimentos (codex alimentarius) 1

Tabla 2. Concentraciones y absorbancias de la curva de calibracin

Concentrac
Absorbancias
Toma 1
Toma 2
Toma 3
A Prom.
Tubo
in
(mg/ml)
1
0,00
0,000
0,000
0,000
0,000
2
2,00
0,075
0,083
0,085
0,081
3
4,00
0,163
0,168
0,181
0,171
4
6,00
0,247
0,247
0,249
0,248
5
8,00
0,325
0,330
0,330
0,328
6
10,0
0,423
0,425
0,434
0,427
Tabla 1. Concentraciones y absorbancias de la curva de calibracin

Clculos
Tubo # 1 = blanco

o C2 =

0.0 ml X 10 mg /ml
1 ml

mg /ml
Tubo # 2

= 0

o C2 =

0.2ml X 10 mg/ml
1 ml

2,0 mg /ml
Tubo # 3
o C2 =

0.4 ml X 10 mg/ ml
1 ml

4,0 mg /ml

 Tubo # 4
o C2 =

0.6 ml X 10 mg/ml
1 ml

6,0 mg /ml
Tubo # 5

o C2 =
=

0.8 ml X 10 mg/ml
1 ml

8,0 mg /ml
Tubo # 6
o C2 =

1.0 ml X 10 mg/ml
1 ml

10,0 mg /ml

o
Grfica N 1 curva de calibracin patrn albmina (absorbancia Vs concentracin)

Curva de calibracin patrn albmina

0.45
0.4
0.35

0.43
f(x) = 0.08x - 0.09
R = 1
0.33

0.3
0.25

Absorbancia Promedio

0.25

0.2

0.17

0.15
0.1

0.08

0.05
00
0

Concentracin

4.2. MUESTRA DE CARNE DE RES

o
o

Tabla N 3 Datos obtenidos de la muestra (peso y volumen filtrado)

o
o Peso (g)
muestra
o 1,0050
o
o

o Vol. (ml)
filtrado

o Vol. (ml)
total

o 18

o 18

Tabla N 4 Absorbancias de muestra de carne de res

o Tubo
ml
1. (0,2)
2. (0,4)

o Absorbancias
o To
o To
o
ma
ma
1
2
o 0,2
o 0,2
o
24
22
o 0,3
o 0,3
o

To
ma
3
0,2
24
0,3

10

30
o 0,4
41

3. (0,6)

35
o 0,4
47

36
o 0,4
47

o
o

DETERMINANCION DE LA CONCENTRACION INICIAL Y LOS GRAMOS DE

PROTENA A PARTIR DE LA CONCENTRACION

Y = MX + B

X=

PROTEINAS =

MUESTRA DE 0,20mL DE CARNE DE RES

Absorbancia 1:
o

Y B
M
ABSORBANCIA B
M

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,224(0,0861)
=3,6742mg/ mL
0,0844

o
o

Absorbancia 2:
o

[ Protenas ] = A bsorbanciab =
m

0,222(0,0861)
=3,6505 mg/mL
0,0844

o
o

Absorbancia 3:
o

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,224(0,0861)
=3,6742mg/ mL
0,0844

o
o
o

MUESTRA DE 0,40mL DE CARNE DE RES

Absorbancia 1:

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,330(0,0861)
=4,9301mg /mL
0,0844

o
o

Absorbancia 2:
o

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,335(0,0861)
=4,9893 mg/mL
0,0844

o
o

Absorbancia 3:
o

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,336(0,0861)
=5,0012 mg/mL
0,0844

o
o

MUESTRA DE 0,60mL DE CARNE DE RES

Absorbancia 1:
o

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,441(0,0861)
=6,2453 mg/ mL
0,0844

o
o

Absorbancia 2:
o

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,447(0,0861)
=6,3163mg/mL
0,0844

o
o

Absorbancia 3:
o

[ Protenas ] = Absorbanciab =
m

0,447(0,0861)
=6,3163mg/mL
0,0844

o
o

CANTIDAD DE PROTENAS PRESENTES EN LA DISOLUCIN

o
o

MUESTRA DE 0,20mL DE CARNE DE RES

Absorbancia 1:
o

3,6742
C1 =

18,00 mL18,3710

mg
1g

=0,3307 g Protena
ml 1000 mg

Absorbancia 2:

3,6505

mg
1,00 mL
mL
mg
=18,2525
0,2 mL
mL

C1 =

18,00 mL18,2525

C 2V 2
V1

mg
1,00 mL
mL
mg
=18,3710
0,2 mL
mL

C1 =

mg
1g

=0,3285 g Protena
ml 1000 mg

Absorbancia 3:

3,6742

mg
1,00 mL
mL
mg
=18,3710
0,2 mL
mL

C1 =

18,00 mL18,3710

mg
1g

=0,3307 g Protena
ml 1000 mg

o
o

( 0,3307+ 0,3285+0,3307 ) g Protena

X =
=0,3300 g Protena
3

o
o

MUESTRA DE 0,40mL DE CARNE DE RES

Absorbancia 1:
o

C1 =

C 2V 2
V1

mg
1,00 mL
mL
mg
=12,3252
0,4 mL
mL

4,9301
o

o
o

C1 =

18,00 mL12,3252

mg
1g

=0,2218 g Protena
ml 1000 mg

Absorbancia 2:

mg
1,00 mL
mL
mg
=12,4732
0,4 mL
mL

4,9893
o

o
o

C1 =

18,00 mL12,4732

Absorbancia 3:

5,0012
o

mg
1g

=0,2245 g Protena
ml 1000 mg

C1 =

mg
1,00 mL
mL
mg
=12,5030
0,4 mL
mL

18,00 mL12,5030

mg
1g

=0,2250 g Protena
ml 1000 mg

o
o

( 0,2218+ 0,2245+ 0,2250 ) g Protena

X =
=0,2238 g Protena
3

MUESTRA DE 0,60mL DE CARNE DE RES

Absorbancia 1:
o

C1 =

C 2V 2
V1

6,2453
o

o
o

C1 =

18,00 mL10,4088

o
o

C1 =

mg
1,00 mL
mL
mg
=10,5272
0,6 mL
mL

18,00 mL10,5272

mg
1g

=0,1895 g Protena
ml 1000 mg

Absorbancia 3:

6,3163
o

mg
1g

=0,1873 g Protena
ml 1000 mg

Absorbancia 2:

6,3163
o

mg
1,00 mL
mL
mg
=10,4088
0,6 mL
mL

C1 =

mg
1,00 mL
mL
mg
=10,5272
0,6 mL
mL

18,00 mL10,5272

mg
1g

=0,1895 g Protena
ml 1000 mg

o
o

( 0,1873+ 0,1895+ 0,1895 ) g Protena

X =
=0,1888 g Protena
3

o
o

o
o

CANTIDAD DE PROTENAS EN 100g DE MUESTRA DE CARNE DE RES

Muestra de 0,20mL

100 g

Carne0,3300 g Protenas
=32,8358 g Protena
1,0050 g Carne

o
o

Muestra de 0,40mL

100 g

Carne0,2238 g Protenas
=22,2686 g Protena
1,0050 g Carne

Muestra de 0,60mL

100 g

Carne0,1888 g Protenas
=18,7861 g Protena
1,0050 g Carne

o
o
o
o

Cantidad de protena promedio

( 32,8358+22,2686+18,7861 ) g Protena
X =
=2 4,6302 g Protena
3

o
o

Desviacin estndar

S=

(32,835824,6302) +( 22,268624,6302) +(18,786124,6302)

=7,3165
31

o
o
o

Coeficiente de variacin

CV =

7,3165
100=29,70
24,6302

o
o
o

o
o

Porcentaje de protenas

de Proteinas :

Cantidad de proteinas por porcion

100
cantidad de proteinas nec esaria segun valor diario

de Proteinas :

24,6302 g Protena
100 =3 3,5 Protenas
73,5 g Protena

Error absoluto
o

E A =Valor experimentalValor literatura=24,63022 2,3=2,3302

Error relativo

o
o

E R=

Error absoluto
100
Valor literatura

E R=

2,3302
100=10,45
22,3

o
o RESULTADOS
o

Tabla N 5 Resultados

o
T o
N DE
UBOS ABSORBANCI
MUES
A
TRA
o
(
ml)

o
o
0
,20

o
o
0
,40

o
o
0
,60

1. (0,224
)
2. (0,222
)
3. (0,224
)
1. (0,330
)
2. (0,335
)
3. (0,336
)
1. (0,441
)
2. (0,447

o
CON
CENTRACI
ON
PROTEINA
S EN
MUESTRA
(mg/ml)

o
o
o
o
o
o
o
o

3,67
42
3,65
05
3,67
42
4,93
01
4,98
93
5,00
12
6,24
53
6,31

o
C o
C o
P o
P
ANTID
ANTID
ROTEI
ROME
AD
AD
NAS
DIO DE
PROTE PROTE
TOTAL PROTEI
INAS
INAS
ES EN
NAS
EN
PROME
100g
TOTAL
MUEST DIO (g) MUEST
ES en
RA (g)
RA
100 g
de
muestr
a

o
0
,3307
o
0
,3285
o
0
,3307
o
0
,2218
o
0
,2245
o
0
,2250
o
0
,1873
o
0

o
o
o
0 o
3
,3300 2,835
8

o
o
o
0 o
2
,2238 2,268
6

o
o
o
0 o
1
,1888 8,786

o
o
o
o
o
2
4,630
2

)
3. (0,447
)
o
o

63
,1895
6,31 o
0
63
,1895

Tabla N 5,1 Resultados

DESVIACIN ESTANDAR
o
COEFICIENTE DE
VARIACIN
o
PORCENTAJE DE
PROTENAS
o
ERROR ABSOLUTO
o
ERROR RELATIVO

o
o

7,3165
29,70%

33,5 %

o
o

2,3302
10,45%

o
o
o
o
o
o
o
o DISCUSIN DE RESULTADOS
o
o Teniendo en cuenta los datos obtenidos por medio de la prctica,
los datos encontrados en literatura y los clculos realizados en el
informe se puede concluir que la cantidad de protena que
contiene la carne de res empleada para los anlisis fisicoqumicos,
es de 24,6302 gramos en 100 gramos de carne, y los datos
encontrados en la teora habla de 22,3 gramos de protena en 100
gramos de carne, resultados muy similares con una diferencia de
tan solo 2,3302 gramos.
o La diferencia entre el resultado obtenido en la prctica y los datos
encontrados en la teora se pueden dar por la raza de la res, la
edad de la res al ser sacrificada, la alimentacin de la res, e
incluso por diferencias en la metodologa de extraccin, siendo
muy difcil que los resultados sean exactos, aun as los resultados
fueron bastante similares.
o
o CONCLUCIONES
o
Se logr determinar el contenido de protena en una muestra de
carne de res por el mtodo de Biuret.

Se concluy que la cantidad de protena en la carne muestra eran

bastante similares a los datos hallados en literatura.
El mtodo de Biuret para la extraccin de protenas, es un mtodo
prctico y confiable, generando resultados viables.

o
o REFERENCIAS
1. http://www.fao.org/ag/againfo/themes/es/meat/backgr_com
position.html