UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

ZONA XALAPA

PROGRAMA EDUCATIVO:
INGENIERA AMBIENTAL
EVALUACIN DE PRETRATAMIENTOS CIDO-TRMICOS
EN BIOMASA LIGNOCELULSICA DE AGAVE SALMIANA
PARA LA LIBERACIN DE AZCARES FERMENTABLES
TESIS
Que para acreditar la experiencia educativa:
Experiencia Recepcional
P r e s e n t a:
CARLOS DE JESS BEZ MNDEZ
Asesor:
Dr. SERGIO MARTNEZ HERNNDEZ

Xalapa, Ver., Noviembre 2014

AGRADECIMIENTOS
Le agradezco a Dios por haberme acompaado y guiado a lo largo de mi carrera, por ser
mi fortaleza en los momentos de debilidad y por brindarme una vida llena de aprendizajes,
experiencias y sobre todo felicidad.
Le doy gracias a mis padres, Carlos Bez Garca y Mara del Roco Mndez Olivares
porque ellos siempre estuvieron a mi lado brindndome su apoyo y sus consejos para
hacer de m una mejor persona. Por haberme forjado como la persona que soy en la
actualidad; muchos de mis logros se los debo a ustedes entre los que incluye este.
A mis hermanas, Iris Denis Bez Mndez y Guadalupe Bez Mndez por no solo
ayudarme en gran manera a concluir el desarrollo de esta tesis, sino por todos los bonitos
momentos que pasamos en el proceso.
A mi asesor de Tesis, Dr. Sergio Martnez Hernndez por su esfuerzo y dedicacin, quien
con sus conocimientos, su experiencia, su paciencia y su motivacin ha logrado en m que
pueda terminar mis estudios con xito.
A mi tutor acadmico, Dr. Epifanio Morales Zarate por haberme apoyado y orientado en
los momentos de dificultad.
A mi profesora, Dr. Yolanda Cocotle Ronzn por el apoyo brindado y por sus enseanzas.
A mis amigos, Eleazar Emmanuel Gmez, Esperanza Anai Huerta Martnez, Everardo
Lobato Cortez, Jess Alberto Hernndez romero Y Juan Mauro Esmediche Landa por
todos los momentos que pasamos juntos. Por las tareas que juntos realizamos y por todas
las veces que a m me explicaron gracias. Por confiar y creer en m y haber hecho de m
etapa universitaria un trayecto de vivencias que nunca olvidare.
A mis amigos y compaeros de INBIOTECA, Claudia Ivet Contreras Hernndez, David de
la Torre Sarmientos, IBQ. Magdiel Linez Gonzlez, M.I.E. Ricardo Musule Lagunes y
Zyanya Mariam Lpez Dvila por brindarme su ayuda y amistad en el transcurso de esta
Tesis.

El presente trabajo se llev a cabo en el Instituto de Biotecnologa y Ecologa

Aplicada (INBIOTECA) de la Universidad Veracruzana - Campus Xalapa y cont
con el apoyo financiero del FONDO SECTORIAL SAGARPA-CONACYT mediante
el

proyecto

de

investigacin

2011-15-174696

denominado

Estrategias

biotecnolgicas de rescate, conservacin y reactivacin del cultivo del agave

pulquero en la regin Poblano-Veracruzana para su uso integral en la produccin
industrial de biocombustibles y otros coproductos.

NDICE

1. INTRODUCCIN ................................................................................................ 8
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................. 9
2.1 Crisis energtica ............................................................................................ 9
2.2 El petrleo y sus problemas ambientales ..................................................... 11
2.2.1 Contaminacin de agua ....................................................................... 11
2.2.2 Contaminacin de suelo....................................................................... 12
2.2.3 Contaminacin de aire ......................................................................... 12
2.2.3.1 Cambio climtico .......................................................................... 13
3. JUSTIFICACIN ............................................................................................... 14
4. ANTECEDENTES ............................................................................................. 14
4.1 Fuentes de energas renovables .................................................................. 14
4.2 Biocombustibles ........................................................................................... 16
4.3 Biocombustibles de segunda generacin ..................................................... 17
4.4 Bioetanol ...................................................................................................... 17
4.5 Biomasa lignocelulsica ............................................................................... 20
4.5.1 Celulosa ............................................................................................... 21
4.5.2 Hemicelulosa ....................................................................................... 23
4.5.3 Lignina ................................................................................................. 25
4.6 Agave como fuente de energa .................................................................... 26
5. OBJETIVOS ...................................................................................................... 34
5.1 Objetivo general ........................................................................................... 34
5.2 Objetivos especficos ................................................................................... 34
6. HIPTESIS ....................................................................................................... 34
7. METODOLOGA ................................................................................................ 35
7.1 Zona de estudio ........................................................................................... 35
7.2 Muestreo y colecta ....................................................................................... 36
7.3 Procesamiento fsico de la muestra ............................................................. 36
7.3.1 Secado ................................................................................................. 36
7.3.2 Molido .................................................................................................. 37
4

7.3.3 Tamizado ............................................................................................. 37

7.4 Procesamiento previo .................................................................................. 37
7.4.1 Lavado de muestra .............................................................................. 37
7.5 Evaluacin de pretratamientos cido-trmicos ............................................ 38
7.6 Anlisis de experimentos ............................................................................. 39
7.7 Mtodos analticos ....................................................................................... 39
7.7.1 Determinacin de humedad ................................................................. 39
7.7.2 Contenido de cenizas .......................................................................... 40
7.7.3 Determinacin de azcares reductores................................................ 40
7.7.4 Determinacin de componentes lignocelulsicos ................................ 41
8. RESULTADOS Y DISCUSIN .......................................................................... 42
8.1 Humedad y Cenizas ..................................................................................... 42
8.2 Azcares reductores .................................................................................... 42
8.3 Caracterizacin lignocelulsica de Agave salmiana en dos etapas
fisiolgicas (juvenil y adultas). ............................................................................ 45
8.4 Tratamientos cido-trmicos aplicados a biomasa lignocelulsica de A.
salmiana. ............................................................................................................ 46
9. CONCLUSIONES .............................................................................................. 49
10. ANEXOS ......................................................................................................... 50
10.1 Anexo I. Determinacin de azcares reductores........................................ 50
11. BIBLIOGRAFA ............................................................................................... 52

NDICE DE FIGURAS

Figura 1. Consumo mundial de energa primaria por fuentes.................................. 9

Figura 2. Precios del barril de petrleo .................................................................. 10
Figura 3. Composicin lignocelulsica. ................................................................. 21
Figura 4. Composicin de la Celulosa. .................................................................. 22
Figura 5. Composicin de la hemicelulosa. ........................................................... 24
Figura 6. Composicin de la lignina. ..................................................................... 26
Figura 7. Ruta metablica de CAM. ...................................................................... 30
Figura 8. Zona de estudio o muestreo de Agave Pulquero, A. salmiana............... 35
Figura 9. Diagrama de los parmetros a evaluar en plantas juveniles y maduras. 38
Figura 10. Contenido de azcares reductores de biomasa lignocelulsica de hojas
A. salmiana de plantas juveniles y maduras despus de procesamiento fsico y de
lavados. ................................................................................................................. 43
Figura 11. Contenido de azcares reductores de biomasa lignocelulsica de hojas
A. salmiana de plantas juveniles (A) y maduras (B), no tratadas y tratadas a
distintas condiciones de temperatura y diluciones de cido sulfrico. ................... 45
Figura 12. Contenido de componentes lignocelulsicos en biomasa de hojas A.
salmiana de plantas juveniles (A) y maduras (B).. ................................................ 46

NDICE DE TABLAS

Tabla 1. Propiedades de la gasolina, etanol y E85. .............................................. 19

Tabla 2. Precipitacin necesaria para la productividad de distintas plantas .......... 31
Tabla 3. Comparacin de las propiedades lignocelulsicas de distintas plantas .. 32
Tabla 4. Caracterizacin de biomasa de Agave salmiana ..................................... 42
Tabla 5. Contenido de azcares reductores en biomasa lignocelulsica de Agave
salmiana de hojas de plantas juveniles y maduras, despus de ser sometidas a
pretratamientos cido-trmicos. ............................................................................ 48
Tabla 6. Curva con una solucin de 4g/L .............................................................. 50

1.

INTRODUCCIN

Durante el desarrollo humano, las fuentes fundamentales de energa han sido los
combustibles fsiles, bsicamente petrleo, gas natural y carbn, los cuales
tambin se emplean como materias primas para la industria qumica (Abril y
Navarro, 2012). Sin embargo, las reservas de petrleo estn agotndose y la
contaminacin por esta fuente de energa va en aumento. Lo anterior ha llevado a
la bsqueda de fuentes alternas renovables, como lo son la energa a partir de
biomasa, energa solar, energa hidrulica, energa elica y energa nuclear, entre
otras (Montaez et al., 2011).
El presente trabajo tuvo como objetivo contribuir con el conocimiento del uso de
material lignocelulsico como substrato bioenergtico. Para lo anterior se
consider

el

uso

de

la

biomasa

lignocelulsica

de

agave

pulquero,

especficamente la especie de A. salmiana como materia prima para evaluar el

efecto de pretratamientos fisicoqumicos para la liberacin de azcares reductores
susceptibles de fermentacin. Tambin, se plane como objetivo determinar la
composicin lignocelulsica de A. salmiana a dos edades o etapas fisiolgicas,
juvenil (2-3 aos) y madura (8 o ms aos), esto con el fin de conocer detalles de
su composicin con el propsito de optimizar tiempos de cosecha para su posible
uso como material bioenergtico.

2.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

2.1

Crisis energtica

El aumento poblacional a nivel mundial ha generado un incremento en las

necesidades energticas, provocando un mayor consumo de combustibles fsiles
y en consecuencia un agotamiento gradual del stos (Bulln, 2005).
El petrleo, por ser un producto fcil de extraer, transportar y utilizar para generar
miles de productos, lo cual lo convierte en una de las materias primas ms
explotadas a nivel mundial (Hernndez, 2008).
Actualmente, an con el implemento de otras fuentes de energa, este junto con
los otros combustibles fsiles (gas y el carbn) suponen casi el 90% del consumo
energtico primario mundial, como se puede observar en la figura 1, y ao con
ao aumenta su uso, proyectndose que para el ao 2030 un incremento de un
35% con respecto al 2010 (Juri, 2011).

Figura 1. Consumo mundial de energa primaria por fuentes. (Obtenido de

http://menospetroleo.blogspot.mx/2012/10/recursos-energia-crecimientoeconomico.html)
9

El consumo excesivo de los combustibles fsiles ha provocado que las reservas

de petrleo estn disminuyendo, proyectando su agotamiento en unos 45 aos
(Colonna, 2010); esto y otros factores, polticos y sociales, hacen que se est
atravesando por una crisis energtica, provocando un aumento en los precios de
los combustibles (Figura 2). Se puede observar que del 2003 al 2008 el precio del
barril aument de 33 a 142 dlares, y aunque a partir del tercer trimestre del 2008
comenz una cada en los precios, hasta bajar a los 44 dlares, actualmente el
precio oscila en los 91 dlares (Hernndez, 2008).

Figura 2. Precios del barril de petrleo (Modificacin de Hernndez, 2008)

La demanda energtica, el agotamiento del petrleo y el incremento de los

precios, ha provocado que se explore nuevas fuente de energa.

10

2.2

El petrleo y sus problemas ambientales

Aunado al incremento en los precios del petrleo y sus derivados, otra de las
razones por la cual se propone reducir su uso es el relacionado con su
contribucin en la contaminacin ambiental debido principalmente a su extraccin,
transporte y manejo inadecuado. A continuacin, se mencionan algunos de sus
efectos en diversos ecosistemas.

2.2.1 Contaminacin de agua

El principal problema de contaminacin del agua se lleva a cabo por la extraccin
del petrleo en campos petrolferos marinos, que se producen por fugas durante la
perforacin o por surgencias eruptivas cuando se encuentra acumulado a altas
presiones, tambin se debe al derramamiento accidental. Un ejemplo, es el evento
que sucedi en las costas de Campeche en el Golfo de Mxico en 1979, cuando la
plataforma petrolera Ixtoc estaba perforando un pozo a 3 km de profundidad y
colaps liberando aproximadamente 476,000 toneladas de crudo, parte del
petrleo ardi y otro alcanz las zonas costeras de Tabasco, Veracruz,
Tamaulipas, y tambin zonas de Texas (Arcos, 2010).
La contaminacin de las aguas marinas por petrleo provoca una pelcula
impermeable que flota por diferencia de densidades, impidiendo la entrada de luz
y el intercambio de gases afectando a especies como: el plancton (sirve de
alimento para otros organismos adems de producir grandes cantidades de
oxgeno), macroinvertebrados (organismos que degradan la materia orgnica) y
Bentos (organismos que viven en el fondo de los ecosistemas acuticos), tambin
genera un problema para las aves y animales marinos ya que cubre su piel y
branquias provocndoles la muerte por asfixia (Benavides et al., 2006).

11

2.2.2 Contaminacin de suelo

La contaminacin del suelo por hidrocarburos se da principalmente por fugas en
los oleoductos, que algunas veces son fugas pequeas y no se toman en cuenta,
y derramamiento ya sea accidental por el mal manejo o robo de combustible
(Zamora et al., 2012).
El derramamiento del petrleo y sus derivados en el suelo impiden el intercambio
gaseoso a la atmsfera alterando la estructura y los bioprocesos que ocurren en el
ecosistema, afectando severamente a la biota, por los compuestos txicos que
posee, daando a las plantas, animales y humanos, pero los ms afectados son
los microorganismos, los cuales cumplen una funcin importante en el ecosistema
(Zamora et al., 2012).
La mayor parte de los hidrocarburos que se derraman en el suelo van a dar a los
mantos acuferos y aguas superficiales, otra parte se volatiliza facilitando el riesgo
por inhalacin de las personas ocasionando enfermedades severas (Riesco,
2012).

2.2.3 Contaminacin de aire

La contaminacin del aire es uno de los problemas ms grandes a nivel mundial
debido a la quema de combustibles fsiles en vehculos automotores, plantas de
energa y humos industriales, ocasionando la muerte prematura de alrededor de
dos millones de personas al ao en todo el mundo (OMS, 2011).
El uso

de los combustibles fsiles generan emisiones de contaminantes

atmosfricos por su combustin como son: xidos de nitrgeno (NOx), monxido

de carbono (CO), compuestos orgnicos voltiles (COV) y gases responsables
del efecto invernadero (Snchez et al., 2011).
Los gases emitidos por la quema de hidrocarburos ha dado lugar a la destruccin
parcial de la capa de ozono (causando melanomas o cncer de piel), a la
12

generacin del smog fotoqumico generado por los xidos de nitrgeno (NOx) y
algunos hidrocarburos ligeros no quemados liberados por los automviles
(provocando daos en los ojos y problemas respiratorios), la generacin de lluvias
cidas que se asocia a los productos de la combustin, como el SO 2 y los xidos
de nitrgeno, las cuales caen sobre campos (dando muerte a las cosechas),
ciudades (deteriorando las estructuras de edificios) y aguas (acidificndolas las
cuales dan muerte a animales y propician enfermedades a la salud de quien las
consume), (Manahan, 2007).

2.2.3.1

Cambio climtico

Adems la quema de combustibles fsiles ha contribuido a la alteracin de la

capa de ozono y sus efectos sobre el clima, dando como resultado el efecto
invernadero. De hecho la bsqueda de otras fuentes de energa para sustituir el
petrleo es principalmente para disminuir las emisiones de gases de efecto
invernadero, cuyo resultado es un cambio climtico de consecuencias tan
peligrosas como impredecibles (Sempere et al., 2007).
El principal factor del aumento de los gases de efecto invernadero se debe al uso
masivo de combustibles fsiles, la industrializacin, el aumento en el nmero y uso
de coches y el transporte areo; teniendo la necesidad de reducir cuanto antes y
de forma importante dichas emisiones (Sephere et al., 2007).
Es por estos problemas que se requiere buscar fuentes de energas renovables
que sean ms amigables con el ambiente e inagotables como lo son las fuentes
de biomasa lignocelulsica.

13

3.

JUSTIFICACIN

La crisis energtica del petrleo, su agotamiento, y el aumento en los precios de

los combustibles estn afectando la economa de la sociedad (Castillo at al.,
2011). Adems de los problemas ambientales que enfrentamos hoy en da, ya que
los hidrocarburos son una fuente importante de contaminacin del agua, suelo y
aire, debido al derramamiento accidental, emisin de contaminantes atmosfricos
por su combustin como los xidos de nitrgeno (NOx), monxido de carbono
(CO), compuestos orgnicos voltiles (COV) y gases responsables del efecto
invernadero.
Debido a estos problemas se requiere buscar fuentes de energas renovables que
sean sustentables, como lo son las fuentes de biomasa lignocelulsica, adems
de buscar los parmetros ms eficientes para la liberacin de azcares y ser
usados en la generacin de combustibles.

4.

ANTECEDENTES

4.1

Fuentes de energa renovables

El modo en que la sociedad utiliza la energa y los problemas derivados de tal uso
ponen de manifiesto la urgencia por encontrar nuevas fuentes de energa, que
puedan reponerse a un ritmo igual o superior al que son consumidas (Gonzlez,
2009).
A partir del siglo XIX, por la crisis energtica y el cambio climtico, se comienzan a
buscar otras fuentes de energa que sean inagotables (Newth, 2007), adems de
ocasionar un mnimo dao al ambiente (Vargas y Valds, 2006).
Entre las energas renovables se encuentran las siguientes:
Hidroelctrica: se obtiene por el paso del agua a travs de generadores que
producen corrientes elctricas. El agua proviene, por lo general, de un lago
14

artificial que se logra bloqueando un rio con un dique. El lago se llena

continuamente de nueva agua proveniente de los ros que forman la cuenca. A su
vez los ros reciben el agua de las precipitaciones. Pero esta fuente de energa
presenta un problema, al bloquear los ros con los diques, la naturaleza sufre
graves daos (Newth, 2007).
Energa elica: se obtiene por medio de aerogeneradores, molinos de viento de
tamao variable que transforman con sus aspas la energa cintica del viento en
energa mecnica. Esta tecnologa al depender del viento, la hace poco viable, ya
que al no poder controlarlo, se necesita otra fuente de energa para los momentos
donde el viento es insuficiente, adems de poder ser usada solo en lugares donde
el viento es favorable (Arns, 2012).
Energa solar: este tipo de energa se divide en solar trmica, solar fotovoltaica y
solar termoelctrica. La primera de ellas se encuentra solar trmico, que es la
transformacin de la energa radiante solar en calor o energa trmica, solo se
utiliza para calor o refrigeracin; la segunda es la captacin de energa solar y su
transformacin en energa elctrica por medio de mdulos fotovoltaicos; y la
tercera es una combinacin de las otras dos, donde se pretende obtener energa
elctrica mediante el calentamiento de un fluido. Aunque es una fuente inagotable
y no contamina presenta muchos inconvenientes, como sus altos precios y la
variacin de la cantidad de energa, que depende principalmente de la
temperatura y la radiacin solar, siendo ideal solo para lugares desrticos, adems
del impacto visual de los paneles y su amplio terreno para colocarlos (De Juana,
2003; Nombela, 2010; Arns, 2012).
Como estas hay otras fuentes de energas renovables, todas presentan ventajas y
tambin inconvenientes econmicos o ambientales, que an no se resuelven por
completo. Otra opcin de energa renovable, son los biocombustibles obtenidos a
partir de biomasa lignocelulsica. A continuacin se describen sus caractersticas.

15

4.2

Biocombustibles

Los biocombustible son aquellos que estn compuestos a partir de biomasa, que
es toda la masa viviente que existe sobre la tierra (Gonzles, 2009). Estos, se
proyecta como una de las mejores alternativas debido a que su uso ofrece
diversos beneficios como son la reduccin de gases de efecto invernadero, el
desarrollo econmico de zonas agropecuarias-rurales y un incremento en la
sustentabilidad energtica (Castillo et al., 2011).
Los primeros biocombustibles en ser fabricados fueron los de primera generacin,
que son obtenidos a partir de cultivos que tienen usos alimentarios, utilizando
azcar y almidn provenientes de caa de azcar, maz, trigo, cebada y sorgo,
entre otros. Los mayores productores de bioetanol de primera generacin, a nivel
comercial, son Brasil con caa de azcar principalmente y EEUU que utiliza maz
(Castillo et al., 2011).
Existe un problema al obtener biocombustible por estas fuentes y es que su
principal uso es para la alimentacin de la poblacin, provocando un descontento
en la sociedad ya que esto pueden generar problemas de alza de precios para los
sectores ms pobres de la poblacin. As como problemas ambientales como el
agotamiento y cambio de uso del suelo, deforestacin, entre otros.
Debido a esto es necesario recurrir a otro tipo de materia prima dando lugar a los
biocombustibles de segunda generacin producidos a partir residuos de procesos
agroindustriales o forestales, distinto de los cultivos bsicos alimenticios. Los
biocombustibles de segunda generacin se encuentran en fase precomercial
(Estudio Fao, 2008).

Hay una tercera generacin de biocombustibles, que es en base a los aceites

extrados a partir de microalgas y otras fuentes microbianas, an se encuentra en
desarrollo y muy lejos de su produccin a gran escala y, por tanto, de su
comercializacin (Guerrero et al., 2010).

16

Actualmente se habla de una cuarta generacin de biocombustibles basada en

procesos termoqumicos y bioqumicos, en estos avances an no ha tenido
relevancia (Guerrero et al., 2010).

4.3

Biocombustibles de segunda generacin

Los biocombustibles de segunda generacin representan un cambio en la

tecnologa de conversin que permite reemplazar los azcares, el almidn y los
aceites de la materia prima utilizada por la primera generacin por biomasa
lignocelulsica como puede ser residuos agrcolas y forestales, hierbas perennes,
arboles de crecimiento rpido entre otras, aprovechando la hemicelulosa y la
celulosa de la planta (IICA & ARPEL, 2009; Estudio Fao, 2008).
Los principales pases que estn invirtiendo por estos nuevos biocombustibles son
casi los mismos que en el caso de la primera generacin, destacando Alemania
EEUU y Suecia que son los que ms estn investigando para su implementacin a
gran escala. Por ejemplo Suecia cuenta con un plan gubernamental para sustituir
completamente el petrleo en el transporte por combustibles de origen vegetal
para el 2020 y Alemania inaugur la primera planta comercial de biocombustibles
de segunda generacin ubicada en Freiberg en el 2008 (IICA y ARPEL, 2009).
Actualmente esta tecnologa no ha alcanzado su punto de madurez para la
produccin a gran escala; sin embargo, la produccin de estos combustibles ya ha
comenzado, por lo que el bioetanol es el combustible celulsico lquido ms
prximo a ser comercializado. Se prev que dentro de 10 a 15 aos la produccin
de biocombustibles de segunda generacin sea comercial (Estudio Fao, 2008).

4.4

Bioetanol

El empleo del etanol como aditivo o combustible automotor se remonta desde los
primeros das del automvil, pero este fue rpidamente remplazado por el
combustible a base de petrleo ya que su fabricacin era ms econmica, la cual
se mantuvo sin competencia hasta la crisis de los aos 1970s, donde se
comenzaron a explorar nuevas alternativas de combustible (Dufey,2006).
17

El bioetanol se produce por la fermentacin de los azcares contenidos en la

materia orgnica de las plantas y puede obtenerse a partir de tres tipos de
materias primas como pueden ser por cultivos y materiales con alto contenido de
sacarosa, como la caa de azcar, la remolacha azucarera, el sorgo dulce y las
melazas, entre otros; cultivos con altos contenidos de almidn, tales como los
cereales (maz, sorgo granfero, trigo y cebada) o races y tubrculos (mandioca,
papa batata, etc.) o de inulina (topinambur, agave, ame, etc.); y materias primas
y cultivos con alto contenido de celulosa (lignocelulsicos), cuyos carbohidratos se
encuentran en formas ms complejas (madera, residuos agrcolas y forestales,
cultivos lignocelulsicos, material herbceo, etc.) (IICA y ARPEL, 2009).
El etanol puede emplearse de forma pura, o en disoluciones con gasolina, se
denomina con la letra E al etanol seguido por un nmero que indica el porcentaje
de este en la mezcla, as, E100 se refiere al alcohol puro y E20 representa una
mezcla de 20% etanol y 80% gasolina. Siendo la disolucin E85 (85% etanol y
15% gasolina) la que ms se recomienda por los fabricantes de automviles ya
que al utilizar E100 es necesario hacer unas ligeras modificaciones al motor, como
aumentar la cantidad de combustible inyectado en cada ciclo, debido a que
presenta menor poder calorfico que la gasolina (Castillo et al, 2011; Gonzlez,
2012).
Las caractersticas fisicoqumicas del etanol representan una ventaja sobre la
gasolina, tal como podemos ver en la tabla 1, debido a que cuenta con un octanaje
mucho mayor, lo que puede facilitar a la manipulacin del motor/carburante y
optimizar su funcionamiento; una densidad prxima a la de la gasolina; la
presencia de oxgeno en su composicin puede provocar una combustin ms
completa en el automotor, lo que reduce las emisiones de hidrocarburos sin
quemar (HC), monxido de carbono (CO) y partculas (PM); y un calor latente de
evaporizacin elevado, que tiene como consecuencia una eficiencia de rellenado,
principalmente en los motores de inyeccin directa de gasolina (Colonna,2010;
Castillo et al., 2010; Aguilar, 2005; Camarillo, 2011).

18

No obstante tambin presenta algunos inconvenientes, ya que al tener un poder

calorfico volumtrico menor que el de la gasolina, los vehculos deben tener
tanques de combustible aproximadamente un 50% mayores que los vehculos
convencionales para conservar la autonoma tpica de un automvil (500 a 650
Km), esto quiere decir que para recorrer una misma distancia, se debe emplear un
poco ms de biocombustible que de gasolina; al ser miscible en agua puede
provocar problemas de ruptura de la mezcla con los hidrocarburos; el calor latente
de vaporizacin elevado puede provocar dificultades de funcionamiento en frio,
especialmente en el arranque; el contenido elevado de oxgeno y la capacidad de
formar cido actico por oxidacin (Colonna,2010; Castillo et al., 2010; Aguilar,
2005).
Tabla 1. Propiedades de la gasolina, etanol y E85. (Colonna, 2010; Castillo et al., 2010;
Agular, 2005)
Gasolina

Etanol

E85

Carbono

85-88

52.2

56-58

Hidrgeno

12-15

13.1

13-14

0-4

34.7

29-30

95

118

110

0.96-0.79

0.794

0.78-0.79

~0

100

100

43,530

26,810

29,170

349

923

836

Composicin (%masa)

Oxgeno
ndice de octano
Densidad (kg/L) a 15C
Solubilidad en agua (% en volumen)
Poder calorfico inferior (kJ/kg)
Calor latente de vaporizacin (kJ/kg)

19

El bioetanol de segunda generacin es una mejor alternativa que el de primera

generacin, en cuanto a emisiones de gases de efecto invernadero, como se
explica en la pgina de kit motor (www.biokitmotor.com), en la cual se realizaron
estudios por la Agencia Internacional de Energa y Worldwatch Institute, donde se
demuestra que el bioetanol obtenido a partir de maz y trigo reducan entre el 13%
y 47% de gases de efecto invernadero por kilmetro recorrido; mientras que el
bioetanol generado a partir de biomasa celulsica reduca los gases de efecto
invernadero entre el 60% y 100% por kilmetro recorrido, adems de no competir
con el sector alimentario.

4.5

Biomasa lignocelulsica

Una de las mejores alternativas para generar combustibles es la que proviene de

la biomasa lignocelulsica, la fuente ms abundante de carbono renovable del
planeta, producida por la fotosntesis, que se estima en una produccin anual de
200,000 millones de toneladas en el mundo (Cuervo et al., 2009). Esta materia,
tambin se puede obtener de residuos agrcolas, forestales, slidos urbanos, as
como residuos agroindustriales, de la industria de alimentos y otras industrias
(Domnguez et al., 2012). Usarla ofrece grandes ventajas, como un bajo costo por
ser residuos innecesarios de los procesos, no afecta las fuentes de alimento y es
un producto renovable (castillo et al., 2011).
La biomasa lignocelulsica es el principal componente de la pared celular de las
plantas, est compuesto principalmente por tres polmeros como se ilustra en la
fig. 3, la celulosa, que es el principal determinante de las propiedades mecnicas
de la biomasa lignocelulsica, la hemicelulosa que son molculas estructurales y
qumicamente heterogneas y la lignina, que son las que mantienen rgida la
pared celular (Colonna, 2010).
Los tres constituyentes (celulosa, hemicelulosa y lignina) encuentran aplicaciones
prcticas apreciables: la celulosa y la

hemicelulosa para obtener etanol y la

lignina como fuente de combustible slido, adhesivos o inmunoadyuvantes (Vials

et al., 2012).
20

Figura 3. Composicin lignocelulsica. (Modificacin de Cuervo et al., 2009)

La composicin y los porcentajes de los polmeros varan entre las especies de

plantas, incluso entre la edad y la etapa de crecimiento; sin embargo, de manera
general los valores oscilan aproximadamente en 25% lignina, 25% hemicelulosa
y 40-50% celulosa (Cuervo et al., 2009; Agbor, et al., 2010; Hernndez et al.,
2009).
A continuacin se describen cada uno de estos componentes:

4.5.1 Celulosa
La celulosa es el componente mayoritario y constituye la base estructural de las
clulas vegetales. Se trata de un homopolmero de D-glucosa unida por enlaces
glucosdicos -1,4 (fig. 2) y dependiendo de su origen vegetal, su grado de
polimerizacin comprende entre 2,000 y 8,000 unidades glucosdicas, pero
pueden alcanzar hasta 15,000 unidades (Paz, 2008; Prinsen, 2010; Barroso,
2010). Las cadenas de celulosa tienden a ordenarse en planos paralelos y forman
una estructura cristalina, esto por la formacin de enlaces de puentes de
21

hidrgeno y fuerzas de van der Waals intermoleculares y extramoleculares entre

los grupos OH de una misma cadena y cadenas adyacentes (fig. 4). De esta
forma, conjuntos de cadenas lineales de celobiosa (D-glucopiranosil--1,4-Dglucopiranosa) en la direccin longitudinal, tienden a formar microfibrillas, que
constituyen a la estructura de la pared celular de las clulas vegetales (Paz, 2008;
Prinsen, 2010; Barroso, 2010).

Figura 4. Composicin de la Celulosa. (Modificacin de Cuervo et al., 2009)

La celulosa tiene una estructura lineal o fibrosa, y debido a la cristalinidad formada
por mltiples puentes de hidrgeno hace que sea insoluble en agua adems de
ser la razn fundamental de la resistencia de la celulosa a ataques qumicos y
enzimticos. En general, la estructura de la celulosa en los materiales
lignocelulsicos, consta de zonas cristalinas y zonas amorfas. (Cuervo et al.,
2009).

22

4.5.2 Hemicelulosa
La hemicelulosa es un heteropolisacrido y su principal funcin es la interaccin
con la celulosa y lignina para proporcionar rigidez a la pared celular. Posee una
estructura amorfa al azar con poca fuerza por lo que son fcilmente hidrolizados
por cido diluido o base, as como por innumerables enzimas hemicelulsicas
(Prinsen, 2010; Barroso, 2010).
Se encuentra sobre todo en las paredes celulares, sus puentes de hidrgeno
cubren la superficie de las microfibrillas de celulosa y se orientan de forma
paralela a ellas formando cadenas ramificadas pero de menor grado de
polimerizacin que la celulosa, entre 100 y 200 unidades, por lo que no tienen
zonas cristalinas. Son insolubles en agua, pero se disuelvan en medio alcalino y
cidos dbiles (Cuervo et al., 2009; Prinsen, 2010; Barroso, 2010).
Los monmeros que constituyen a la hemicelulosa (Fig. 5) son principalmente
hexosas (D-glucosa, D-manosa, D-galactosa) y pentosas (D-xilosa y L-arabinosa),
que forman cadenas ramificadas, y cidos urnicos (cido -D-glucurnico, cido
-4-O-metilglucurnico, cido -D-galacturnico) (Cuervo et al., 2009; Barroso,
2010; Prinsen, 2010).
La estructura que tiene la hemicelulosa vara dependiendo la especie de la planta,
por ejemplo las gramneas, estn constituidos por una cadena principal de xilosa
unidas por enlaces -1,4 que estn ramificadas por arabinosas y cido glucurnico
o por cido -D-4-O-metilglucurnico; o la madera de las conferas que est
constituido por manosa y glucosa (en una relacin de 4:1) unidos entre ellos por
enlaces -1,4 que estn ramificados (en el C-2 o C-3 de la cadena principal) por
galactosa (Barroso, 2010; Prinsen, 2010).

23

Figura 5. Composicin de la hemicelulosa. (Modificacin de Cuervo et al., 2009)

24

4.5.3 Lignina
La lignina es el componente no carbohidrato ms importante presente en la pared
celular de la planta. Es un heteropolmero amorfo, tridimensional y ramificado
formado

por

alcoholes

aromticos

que

da

soporte

estructural,

rigidez,

impermeabilidad y proteccin a los polisacridos estructurales (celulosa y

hemicelulosa) e impide los ataques de los microbios, sus principales funciones son
dar resistencia y servir de pegamento a la pared celular, adems de ser altamente
resistente a la degradacin qumica y biolgica, es insoluble en cidos y solubles
en lcalis (cuervo et al., 2009).
La lignina es un polmero muy complejo en relacin con su estructura y
heterogeneidad por lo que no es posible describir una estructura definida. Est
compuesta principalmente por tres alcoholes fenilpropenoicos o alcoholes phidroxicinamlicos: alcohol sinaplico, alcohol cumrico y alcohol coniferlico (Fig.
6). Estos alcoholes forman estructuras heterogneas amplias y amorfas (Paz,
2008; Prinsen, 2010; Barroso, 2010).
Los alcoholes fenilpropenoicos se distinguen por sus sustituyentes del anillo
aromtico tal que: el alcohol cumrico no presenta sustituyentes y forma las
unidades de hidroxifenilo o unidades H; el alcohol sinaplico con metoxilos en las
posiciones 3 y 5 forma las unidades de siringilo o unidades S; y el alcohol
coniferlico con un metoxilo en la posicin 3 del anillo aromtico forma las
unidades guayacilo o unidades G (Paz, 2008; Prinsen, 2010; Barroso, 2010).

25

Figura 6. Composicin de la lignina. (Modificacin de Cuervo et al., 2009)

4.6

Agave como fuente de energa

En Mxico existe mucha materia prima que puede ser utilizada para fines
bioenergticos sin afectar la seguridad alimentaria (Victoria et al. 2007), como lo
es el Agave, que es una planta 100% mexicana. Mxico se considera centro de
origen de este gnero, constituido por casi 300 especies y muchas de estas se
encuentran solo en nuestro pas (Martnez et al., 2007; Alfaro et al., 2007).
Los agaves son plantas perennes, sus hojas, conocidas comnmente como
pencas, estn distribuidas en forma de espiral y arregladas en rosetas en el
apndice de un tallo. El tallo, tambin conocido como pia, puede ser corto y
apenas sobrepasar unos centmetros del suelo, o bien, largos y erectos llegando a
26

medir hasta tres metros de altura. Las hojas son suculentas, fibrosas y carnosas,
adems de poseer espinas en los bordes y terminan en una punta muy filosa, lo
cual constituyen un mecanismo de defensa de la planta, las hojas pueden llegar a
pesar ms de treinta kilos y pueden vivir entre 10 y 15 aos (Flores et al., 2008;
Garca 2007).
El agave ha tenido un uso muy importante desde la poca prehispnica, los
pueblos indgenas encontraban en esta planta una fuente de materia prima para
elaborar una gran cantidad de productos (Garca et al., 2010), como la obtencin
de bebidas alcohlicas como mezcal y pulque, el empleo de la fibra de sus hojas
para fabricar cuerdas y la aplicacin tradicional en la medicina, por mencionar
algunos (vila et al., 2012). Actualmente la especie de agave de mayor
importancia econmica es el Agave tequilana para la elaboracin del tequila, pero
algunas aplicaciones de los diferentes tipos de Agave cayeron en desuso debido a
que se presentaron otros productos que los sustituyen, como la cuerda fabricada
por Agave que fue sustituida por cuerda sinttica, el uso mdico por medicina
actual, etc. (Martnez et al., 2007; Davis et al., 2011).
El Agave salmiana, se usa principalmente para producir pulque, y aunque es una
bebida muy conocida, ya no es tan comerciable, todo empez en el ao 1928,
cuando se estableci un reglamento sanitario para todas la bebidas alcohlicas,
en las cuales los productores deban de mejorar higinicamente su proceso de
elaboracin, utilizando bombas para la extraccin del aguamiel y barriles ms
higinicos, pero al no hacerlo ocasion un sinfn de crticas sobre su elaboracin
primitiva y las enfermedades que generaba su consumo, haciendo que muchas
personas dejaran de consumirla, pero todas estas crticas no eran ms que para
poder sustituir el pulque por la cerveza, y actualmente an se conserva el
desprestigio sin fundamento otorgado a la bebida del pulque. Pero el declive final
del pulque fue en 1960 con la llegada de fbricas, que hicieron que los
tlachiqueros dejaran el agave para irse a trabajar en un lugar donde les daban
mejores condiciones para el trabajo, buenos alimentos, etc., por lo que la siembra

27

de agave pulquero se fue perdiendo dejndolo casi en peligro de extincin

(Ramrez, 2004).
Hoy en da se han hecho muchos programas para la conservacin del agave, uno
de ellos es por medio de biocombustible, ya que varias especies y en especial el
Agave salmiana pueden funcionar bien en zonas donde la lluvia es escasa para
cultivos con metabolismo C3 y C4, gracias a que posee un metabolismo cido de
las Crasulceas (por sus siglas en ingles CAM). Esto hace que los agaves puedan
crecer con muy poca agua y/o insumos, y aun as generar una buena cantidad de
biomasa, adems, para cultivarla se necesita tierra demasiada seca como para
cultivar alimentos, reduciendo as la competencia con el suministro alimenticio, al
mismo tiempo se vuelven productivas las tierras semiridas en zonas rurales
pobres, haciendo al agave una materia prima ideal (Escamilla, 2011).
El metabolismo C3 (tambin conocido como el ciclo de Calvin) y metabolismo C4
llamados as porque el primer compuesto que incorpora el CO 2, tiene tres y cuatro
carbonos respectivamente. Estos metabolismos son un conjunto de reacciones
que propician la fijacin y asimilacin reductiva del CO2 hasta formar compuestos
orgnicos (CH2O). La captacin de CO2 sucede durante el da, y requiere que los
estomas se encuentren abiertos por lo que la planta ha de ceder agua para poder
captar CO2 (Cordero, 2003).
La caracterstica clave del agave para poder sobrevivir con poca agua se debe a
que es una planta CAM, que le permite absorber CO 2 durante la noche,
permitiendo as una prdida muy baja de agua. Las plantas CAM necesitan
aproximadamente el 33% de agua que requiere una planta C4 y aproximadamente
el 16% que requiere una planta C3 para producir la misma cantidad de biomasa.
(Davis et al., 2011; Escamilla, 2011; Borland et al., 2009).
Los estomas (poros microscpicos en las hojas) se abren para permitir que el CO 2
entre y as realizar la fotosntesis. Esta apertura conduce a la prdida de agua en
forma de vapor (transpiracin). Las plantas C3 y C4 abren sus estomas durante el
da, cuando el sol brilla mucho y la temperatura es mayor por lo que la prdida de
28

agua por transpiracin es muy alta. Las plantas CAM, como el agave, abren sus
estomas y absorben el CO2 durante la noche, ocasionando una prdida menor de
agua por transpiracin, y durante el da, las plantas CAM cierran sus estomas
impidiendo la entrada de CO2 y al mismo tiempo evitar la prdida de H2O por
transpiracin, por lo que cualquier CO2 fijado proviene de la misma planta (Garca
et al., 2006; Escamilla, 2011; Borland et al., 2009).
Este proceso en las plantas CAM, sucede en la clula del mesfilo, donde los
estomas se abren permitiendo la fijacin del CO2 atmosfrico por la
fosfoenolpiruvato carboxilasa (PEP carboxilasa) en el citosol; el fosfoenolpiruvato
(PEP) sobre el que acta esta enzima procede de la degradacin del almidn,
acumulado en los cloropastos durante el da. La enzima PEP carboxilasa genera
un producto cido de cuatro carbonos (oxalacetato), que es reducido a malato en
el citosol por la enzima malato deshidrogenasa, este despus es transformado a
cido mlico, el cual no se transporta a otras clulas sino que se acumula en la
vacuola de la misma clula (fig. 7), durante el da este malato es exportado al
citosol, donde se descarboxila. La descarboxilacin se puede producir por varias
vas y enzimas dependiendo de la planta CAM (Garca et al., 2006; Escamilla,
2011; Borland et al., 2009).

29

Figura 7. Ruta metablica de CAM. (Garca et al., 2006)

An no est claro cmo se produce la descarboxilacin del malato en el agave,

pero los productos podran ser el piruvato o fosfoenolpiruvato (PEP) y el CO 2, este
CO2 entra en los cloropastos para iniciar all el ciclo de Calvin. El piruvato es
transformado en PEP y este por varios procesos da lugar a la sntesis y
acumulacin de almidn (fig. 7) (Garca et al., 2006; Escamilla, 2011; Borland et
al., 2009).
Como se muestra en la tabla 2, el Agave salmiana como planta CAM puede
sobrevivir con muy poca agua, pero adems tiene una mayor productividad con
una precipitacin escasa (Tabla 2), en donde cualquier otro cultivo bioenergtico
en cantidades similares de lluvia estara muy lejos de alcanzar la productividad de
A. salmiana (Escamilla, 2011).
30

Tabla 2. Precipitacin necesaria para la productividad de distintas plantas. (Escamilla, 2011)

Tolerancia

Productividad

Precipitacin

a la sequia

(Kgha-1ao-1)

(mmao-1)

Agave salmiana

10,000

320

Agave deserti

7,000

430

Agave fourcroydes

15,000

1000

Yucatn, Mxico

Agave tequilana

25,000

1080

Jalisco, Mxico

11,000 a 20,000

600 a 1300

Arkansas, Texas

Grano

7,000

500 a 800

ns

Rastrojo

3,000

500 a 800

ns

Moderado

5,000 a 11,000

700 a 1050

ns

Bajo

15,000 40,000

750 a 1200

ns

Moderado

50,000 67,000

ns

Bueno

47,000

ns

Cultivos
Agave

Panicum virgatum

Localizacin

Alto
San Luis potos,
Mxico
Desierto de
Sonora, USA

Bueno

Var. Alamo
Otros cultivos
energticos
Zea mays

Populus spp.
Miscanthus
giganteus
Saccharum
offcinarum
Sorghum bicolor

Bajo

Guyana; Hawi,
USA
California, USA

ns, no especifico

No solo esta ventaja tiene el agave, sino tambin en su composicin

lignocelulsica, al presentar un contenido elevado de celulosa mientras que el
contenido de lignina es muy bajo, sta ltima dificulta la conversin de biomasa en
combustible, al presentar una resistencia a la separacin de azcares. La
31

composicin de lignina, celulosa y hemicelulosa en agave son muy favorables en

comparacin con otros cultivos como se puede apreciar en la tabla 3. (Escamilla,
2011).

Tabla 3. Comparacin de las propiedades lignocelulsicas de distintas plantas.

(Escamilla, 2011)
Celulosa

Hemicelulosa

Lignina

Solubles

65

5.3

16

12.25

A. fourcroydes

77.6

5-7

13.1

3.6

A. lechuguilla

79.8

3-6

15.3

2-4

77.3-84.4

6.9-10.3

7.4-11.4

Nd

44

30

26

Nd

Panicum virgatum

44.9

31.4

12

Nd

Miscanthus

41.9

26.6

13.3

15

Eucalipto

49.4

21.2

18.2

Nd

Trigo

34.9

22.5

21.3

11.9

Caa de azcar

48.6

31.1

19.1

Nd

Fuente de fibra
Agaves
A. tequilana

A. sisalana
Rastrojo de maz

Otros cultivos

Nd, no determinado

Otras reservas importantes del agave que pueden ser usadas en la produccin de
etanol son los carbohidratos solubles en agua, tambin llamados carbohidratos no
estructurales, que se liberan despus del tratamiento trmico (Escamilla, 2011).
Aunque el agave tiene un gran potencial para ser desarrollado como cultivo
bioenergtico, se necesitan ms investigaciones de laboratorio y de campo.

32

De los escasos trabajos reportados en la literatura, relacionados con la evaluacin

de pretratamientos sobre la biomasa lignocelulsica de agaves, se encuentran los
publicados por Hernndez-Salas (2009). Este autor hizo una comparacin entre
caa de azcar y agave, donde compararon la liberacin de los azcares
reductores. La hidrlisis cida en la caa de azcar produjo de un 37.2 a 35.37%
de azcares reductores mientras que el agave produjo un 5.02 a 9.91%, siendo
mayor la liberacin en la caa de azcar. Los autores volvieron a comparar los
resultados pero esta vez con una hidrlisis enzimtica donde la concentracin de
azcares para la caa de azcar estuvo entre un 11 y 20% y para el agave
aument de

12 a 58%. Tambin se encuentra los resultados publicados por

Saucedo-Luna (2010), quienes determinaron los efectos que presentaba la

temperatura, la concentracin de cido sulfrico y del tiempo de reaccin sobre la
hidrlisis de Agave tequilana Weber para la produccin de azcares fermentables
alcanzando un rendimiento de 48.5% y concluyendo que a altas temperaturas y a
tiempos largos de reaccin se obtiene un mayor rendimiento de azcares. Como
estos trabajos realizados para agaves hay muy pocos, por lo que son necesarias
ms investigaciones al respecto.

33

5.

OBJETIVOS

5.1

Objetivo general

Evaluar tratamientos cido-trmicos sobre la fraccin lignocelulsica de

Agave salmiana para la liberacin de azcares fermentables.

5.2

Objetivos especficos
Determinar la composicin lignocelulsica (celulosa, hemicelulosa y lignina)
de dos etapas fisiolgicas (juvenil y maduro) de Agave salmiana cultivado
en la regin del Valle de Perote, Veracruz.

Evaluar diluciones de cido sulfrico a concentraciones de 1 y 2% y

distintas temperaturas (100 y 120C) sobre la fraccin lignocelulsica de
Agave salmiana para la liberacin de azcares fermentables.

6.

HIPTESIS

Los agaves poseen un alto contenido de celulosa, hemicelulosa y poca lignina,

comparados con otras plantas, lo que facilitar la liberacin de azcares
fermentables por la aplicacin de pretratamientos cido-trmicos.

34

7.

METODOLOGA

7.1

Zona de estudio

Las muestras se colectaron en la regin Poblano-Veracruzana, en el Valle de

Perote, Veracruz. La zona de estudio tiene una extensin aproximada de 16,527.6
ha, que incluye territorio ejidal de las localidades de San Antonio Tenextepec en el
estado de Veracruz y de San Jos Alchichica en Puebla (Fig. 8).

Figura 8. Zona de estudio o muestreo de Agave Pulquero, A. salmiana.

San Antonio Tenextepec se localiza en las coordenadas latitud 19 29 y longitud

97 15; se encuentra a una altura de 2539 msnm. El clima que predomina en la
zona se clasifica como semiseco templado, con una precipitacin media anual de
400 mm y una temperatura media anual de 12 C (INEGI, 2013; nuestromexico.com, 2013a). San Jos Alchichica, se localiza en las coordenadas 97 23
35

longitud oeste y 19 25 latitud norte, se ubica a una altura de 2300 msnm, su

precipitacin es similar a Tenextepec y su temperatura media anual es de 14 C
(INEGI, 2013 ;nuestro-mexico.com, 2013b).

7.2

Muestreo y colecta

La identificacin de la especie se realiz con apoyo de la literatura (Gentry, 2012)

y con la asesora del Dr. Miguel de Jess Chzaro Basez, botnico experto en
el gnero Agave, acadmico de la Facultad de Biologa-Xalapa, UV. Se estableci
el sitio de muestreo en un suelo tipo regosol en el ejido de San Jos Alchichica. Se
establecieron transectos de 2 x 100m, cada uno separado del otro por al menos
500m, de los cuales se tomaron al menos 2 plantas (completas o pencas) de cada
etapa de desarrollo o edad a evaluar, que fueron de 2 y de ms de 8 aos, las
cuales se etiquetaron debidamente y se transportaron al laboratorio. Para saber la
edad de la planta, se consider la altura de meristemo, meyolote de 0.4 0.15 y
1.5 0.25 m, respectivamente. Lo anterior basado en el siguiente modelo
matemtico que correlaciona la edad con la etapa de crecimiento: (Edad =
e(altura cogoyo-27.225/37.484) (Sandoval Salas et al. Datos no publicados).

7.3

Procesamiento fsico de la muestra

7.3.1 Secado
Una vez recolectadas las muestras, se cortaron, a un tamao aproximado de 2 x
1cm, los trozos se depositaron en charolas de aluminio y se colocaron en una
cmara de secado BINDER de la serie FD, a 70C por 72 horas. Pasado este
tiempo, las muestras se guardaron en bolsas con cierre hermtico bien
etiquetadas.

36

7.3.2 Molido
Las muestras completamente secas, fueron molidas, empleando un molino
automtico marca Mr. Coffee modelo BMH23.

7.3.3 Tamizado
Despus del molido, las muestras fueron tamizadas, utilizando tamices de malla
40 y malla 60. Al tamizarlos solo se tomaron las partculas que pasaban la malla
40 y se quedaban retenidas en la malla 60 (denominndose partculas -40/+60).

7.4

Procesamiento de muestras previo a sometimiento de

pretratamientos.
7.4.1 Lavado de muestra
Previo al sometimiento de pretratamientos, las muestras fueron lavadas. Para lo
anterior, se colocaron 2g de muestra tamizada en matraces de 125mL y se
aadieron 100mL de agua destilada, teniendo una relacin slido/lquido de 1:50.
Los matraces fueron colocados en parrillas de agitacin y calentamiento (marca
PRENDO modelo PC-1000X6) a 80C durante 3 horas con agitacin constante.
Posteriormente, las muestras fueron filtradas empleando un filtro de porosidad
mediana, un matraz Kitasato con embudo buchner y una bomba de vaco marca
COLE PARMER modelo EW-79200-30. Despus se enjuagaron las muestras con
200mL de agua destilada caliente. La fraccin slida se coloc en un recipiente de
aluminio y se metieron en una cmara de secado BINDER de la serie FD a 105C
por 4 horas, posteriormente se guardaron en bolsas hermticas para los
tratamientos cidos trmicos. La fraccin liquida, se guard en congelacin para
determinacin posterior de azcares reductores.

37

7.5

Evaluacin de pretratamientos cido-trmicos

La fraccin slida obtenida de los filtrados de hojas o pencas de agave de ambas

edades, se someti a diferentes tratamientos cido-trmico (figuras 9).

Figura 9. Diagrama de los parmetros a evaluar en plantas juveniles y maduras.

Para el desarrollo de estos experimentos, se tomaron 2g de muestra de la fraccin

slida obtenida de los filtrados y se coloc en un matraz Erlenmeyer de 125mL, se
aadi una solucin de 40mL de cido sulfrico al 1 o 2% (v/v) por lo que se tuvo
una relacin slido/lquido de 1:20. Posteriormente, los matraces se taparon y se
sometieron a temperaturas de 100 y 120C (empleando una autoclave UL 6P38
modelo 25X-1) y tiempos de reaccin de 1 y 2 horas tal como se ilustra en las
figuras 9. Trascurrido el tiempo indicado, las muestras fueron filtradas de una
manera similar a lo descrito anteriormente. Las fracciones slidas obtenidas de
estos experimentos fueron puestas en charolas de aluminio y sometidas a secado
a 105C durante 4 horas, posteriormente fueron almacenadas en bolsas
hermticas para la determinacin de componentes lignocelulsicos. Estos fueron
obtenidos por diferencia, despus de obtener fibra detergente neutra (FDN), fibra
detergente a cida (FDA) y lignina detergente cida (LDA) usando un ANKOM 200
Fiber Analyzer (Macedon, NY USA) (ANKOM and technology, 2005; Garca-Reyes
y Rangel Mndez, 2009). Este procedimiento est basado en los mtodos de
extraccin secuencial propuestos inicialmente por Van Soest (Van Soest, 1961).

38

La fraccin liquida, fue almacenada en congelacin para posterior determinacin

de azcares reductores por la tcnica DNS (Miller, 1959).

7.6

Anlisis de experimentos

Las determinaciones analticas se realizaron al menos por duplicado. Las variables

de respuesta fueron el contenido de azcares reductores y componentes
lignocelulsicos, celulosa, hemicelulosa y lignina. Los datos se analizaron como un
experimento factorial con dos niveles, la edad: juvenil y madura. El anlisis
estadstico se realiz mediante comparacin de medidas de tratamientos usando
la prueba t de Student, con un factor de confianza del 95% (p<0.05) mediante el
uso de Excel.

7.7

Mtodos analticos

7.7.1 Determinacin de humedad

Para el contenido de humedad, se tom un trozo de muestra de hoja de agave de
aproximadamente 2g, est se coloc en crisoles previamente puestos a peso
constante, y se metieron en una cmara de secado (BINDER de la serie FD) a
105C por 24 horas, pasado el tiempo se sacaron y se pesaron en una balanza
analtica (RADWAG modelo AS220/C/2), y se registr el peso.

El contenido de humedad se expres como porcentaje y se determin con la

siguiente formula:

(1)

39

7.7.2 Contenido de cenizas

Despus de determinar el contenido de humedad, las muestras fueron calcinadas
durante una hora a 525C mediante el uso de mufla (marca FELISA FE-340),
posteriormente las muestras fueron colocadas en un desecador por un periodo de
15 minutos y despus se registr su peso mediante el uso de una balanza
analtica.

El contenido de cenizas se determin mediante la siguiente formula:

(2)

7.7.3 Determinacin de azcares reductores

La determinacin de azcares reductores se realiz por la tcnica de DNS (Miller,
1959),

antes y despus de los pretratamiento cido trmicos. Para lo anterior,

se tom 1.5ml de muestra y se colocaron en tubos eppendorf de 2ml etiquetados.

Los tubos fueron colocados en una centrifuga HERMLE modelo Z300K a 3000rpm
por 5min. Se tom 0.5ml de muestra centrifugada, y se colocaron en tubos de
10ml con tapa, se adicionaron 0.5ml del reactivo de DNS. Los tubos se colocaron
a bao mara en agua a 100C por 5min, para esto primero se dej que el agua
alcanzara los 100C y despus se metieron los tubos por 5min. Inmediatamente
alcanzado los 5 minutos se metieron los tubos en agua helada por 5 min para
detener la reaccin (choque trmico). Pasado el tiempo a cada una de las

40

muestras se diluyeron con 5ml de agua destilada. La lectura se realiz en un

espectrofotmetro UV/Visible marca VELAB a 540nm.

7.7.4 Determinacin de componentes lignocelulsicos

Los parmetros de Fibra Detergente Neutro (FDN), Fibra Detergente cido (FDA)
y Lignina Detergente cido (LDA) fueron determinados con un equipo Ankom 200
fibre analyser. Se pesaron aproximadamente 0.5 g de biomasa de agave en base
seca (secada a 105 C por 2hrs) y fueron colocadas dentro de bolsas filtro Ankom,
fueron selladas y sometidas consecutivamente a extraccin con soluciones de
Fibra Detergente Neutro (Sol. FDN utilizando -amilasa), solucin de Fibra
Detergente cido (Sol. FDA), aplicacin de hidrlisis cida con Solucin de cido
sulfrico concentrado al 72% 1 N. Despus de cada extraccin las bolsas fueron
lavadas con reactivo de acetona purificada y secadas a base seca para determinar
los porcentajes de cada componente siguiendo las instrucciones y mtodos
suministrados por el fabricante. Por ltimo se incineraron las muestras en una
mufla para determinar el porcentaje de cenizas de cada muestra. Los porcentajes
de celulosa, hemicelulosa y Lignina insoluble fueron calculados de forma indirecta,
de la siguiente manera:

(3)

(4)

(5)

41

8.

RESULTADOS Y DISCUSIN

8.1

Humedad y Cenizas

El contenido de humedad y de cenizas de las muestras de Agave salmiana

analizadas correspondientes a las dos edades o etapas de desarrollo,
denominadas juvenil (menores a 2 aos) y maduras (mayores que 8 aos) fue
de 86.91% 1.74 y de 85.25% 1.51, respectivamente (Tabla 4). Se pudo
observar que los valores fueron prcticamente similares (=0.197), indicando que
independientemente del estado de desarrollo el contenido de humedad fue similar.
En lo que respecta al contenido de cenizas los valores para plantas juveniles
fueron de 1.32% 0.05, mientras que para las plantas maduras fueron de 1.55%
0.09, encontrando tambin valores similares (=0.161) (Tabla 4).

Estos

resultados indicaron un contenido de materia inorgnica o mineral menor de 1.6

para ambas edades de plantas, en consecuencia el contenido de materia orgnica
oscil alrededor del 98%.

Tabla 4. Caracterizacin de biomasa de Agave salmiana

MADURA
JUVENIL

8.2

HUMEDAD
85.25% 1.51
86.91% 1.74

CENIZAS
1.55% 0.09
1.32% 0.05

Azcares reductores

El contenido de azcares reductores de la biomasa lignocelulsica, se calcul

antes (en aguas de lavado) y despus de evaluar los pretratamientos cidotrmicos. Los resultados se expresaron en rendimiento, reflejados como
porcentaje de azcares reductores en peso seco, esto basado en la propuesta de
Neureiter et al., (2002) que indican que el rendimiento podra ser un parmetro
ms adecuado para la comparacin de tratamientos que la concentracin ya que

42

los experimentos con materia seca usualmente dan hidrolizados con ms alta
concentracin de azcares aunque los rendimientos podran ser bajos.
En la Figura

10,

se muestran los resultados

del contenido de azcares

reductores de la biomasa lignocelulosa para las plantas juveniles y maduras antes

de someterlas a los distintos tratamientos cidos-trmicos, obtenido a partir de las
aguas de lavado. En los resultados se encontr que el contenido de azcares de
plantas juveniles fue de 1.48% 0.32 mientras que para las muestras de plantas
maduras los valores oscilaron alrededor de 1.93% 0.22. Estos valores fueron
sometidos a un anlisis estadstico, mediante la

comparacin de medias de

tratamiento haciendo uso de la prueba de T student, donde los resultados

indicaron que no hubo diferencia significativa (=0.243). Estos resultados indican
por un lado, que los lavados previos fueron eficientes para eliminar la posible
presencia de azcares hidrosolubles presentes en la biomasa lignocelulsica. Por
otro lado indican que independientemente de la edad o estado de desarrollo de la
planta, el contenido de azcares en la biomasa lavada es prcticamente similar.

Figura 10. Contenido de azcares reductores de biomasa lignocelulsica de hojas A.

salmiana de plantas juveniles y maduras despus de procesamiento fsico y de lavados.

43

Considerando

lo anterior, se procedi a comparar el contenido de azcares

reductores en muestras de plantas juveniles y maduras no tratadas y tratadas, es

decir las sometidas a algn tratamiento cido-trmico (aqu se compar con el
valor promedio ms bajo obtenido), cuya representacin grfica se puede observar
en la figura 11. Como ya se cit anteriormente, los valores para muestras de
plantas juveniles no tratadas fueron de 1.48% 0.32, mientras que para las
muestras tratadas los valores fueron de

7.95% 1.58. Al comparar

estadsticamente estos valores, mediante una prueba t, los resultados mostraron

diferencias significativas (=0.029), indicando que independientemente del
tratamiento aplicado a la biomasa lignocelulsica el contenido de azucares fue
mayor, es decir la aplicacin de pretratamientos con cidos y trmico, tuvieron un
efecto en la liberacin de azcares.
Un anlisis similar, se aplic para las muestras de plantas maduras (figura 11 B)
encontrando que para muestras no tratadas, el contenido de azcares fue de
1.93% 0.22 mientras que para las muestras de plantas sometidas a algn tipo de
tratamiento, los valores fueron de 7.84% 0.8. El anlisis estadstico, tambin
revel diferencias significativas entre estos valores (=0.009), lo que muestra un
comportamiento similar al obtenido en las muestras de plantas juveniles. Al
comparar los valores entre muestras tratadas juveniles y maduras, se encontr
que no hubo diferencia significativa (=0.938).

44

Figura 11. Contenido de azcares reductores de biomasa lignocelulsica de hojas A.

salmiana de plantas juveniles (A) y maduras (B), no tratadas y tratadas a distintas
condiciones de temperatura y diluciones de cido sulfrico.

8.3

Caracterizacin lignocelulsica de Agave salmiana en dos

etapas fisiolgicas (juvenil y adultas).

Los anlisis se llevaron a cabo con la materia seca recuperada de los lavados y
fue sometida a un anlisis de fibra detergente neutro y cido (Van Soest). Los
resultados de la composicin lignocelulsica de los anlisis de fibra de plantas
juveniles y maduras se muestran en la figura 12. Para el caso de plantas juveniles
(figura 12 A) esta se observa que la porcin ms grande es la comprendida por la
celulosa con un resultado del 31.21% 5.12, para la hemicelulosa fue de 9.4%
1.74, mientras para para lignina fue de 14.95% 1.71.

45

Para el caso de la composicin lignocelulsica de plantas maduras (figura 12 B).

Se encontr que el porcentaje para

celulosa fue de

34% 2.99, para

hemicelulosa fue de 8.87% 0.7 y de lignina de 12.57% 2.3.

Los valores obtenidos sobre la composicin lignocelulsica

tanto de

plantas

juveniles como de maduras se sometieron a un anlisis estadstico, aplicando la

prueba t, donde los resultados indicaron que no hubo diferencia significativa entre
estas (HEM=0.686; CEL=0.460; LIG=0.224), indicando que independientemente de
la edad o estado de desarrollo, la composicin lignocelulsica en la biomasa es
prcticamente similar.

Figura 12. Contenido de componentes lignocelulsicos en biomasa de hojas A. salmiana

de plantas juveniles (A) y maduras (B). CEL: celulosa, HEM: hemicelulosa y LIG: lignina.

8.4

Tratamientos cido-trmicos aplicados a biomasa

lignocelulsica de A. salmiana.
La fraccin slida obtenida de los filtrados despus de los trabajos de lavados con
agua, fue secada y posteriormente se tom una muestra homognea (2 g base
seca) para ser sometida a diferentes tratamientos cido trmicos. Para lo anterior,
46

se emple una proporcin slido/lquido 1/20, se evaluaron diluciones de cido

sulfrico a 1 y 2% V/V, temperatura de 100 y 120 C y tiempo de contacto de 1 y 2
horas. Despus de las evaluaciones, las muestras fueron filtradas, utilizando la
fraccin lquida para la determinacin de azcares reductores. A continuacin se
muestran los resultados:
Los rendimientos de azcares para plantas juveniles y maduras se muestran en la
tabla 5.
Se encontr que el contenido de azcares en plantas juveniles sometidas a 100C,
tiempo de reaccin de 1 hora y concentraciones de cido de 1 y 2 % fueron
similares, con valores que oscilaron alrededor de 7.9%. Para los ensayos con
tiempos de reaccin de 2 horas, el contenido de azcares increment a valores
entre 10 y 11%, sin embargo las diferencias entre estos tratamientos no fueron
significativas. Una conducta similar, se encontr cuando la biomasa lignocelulsica
fue sometida a temperatura de 120 C, tiempo de reaccin de 1 hora y
concentraciones de cido de 1 y 2%, donde los rendimientos de azcares
incrementaron a 11.5%. Valores similares fueron observados en el tratamiento
con temperatura de 120 C, tiempo de reaccin de 2 horas y 1% de cido. Sin
embargo, cuando la biomasa fue sometida a 120C, tiempo de reaccin de 2 horas
y 2% de cido, los rendimientos de azcares, incrementaron hasta 17%,
mostrando mediante anlisis estadstico, diferencias significativas (=0.045) con
respecto a los valores de azcares ms cercanos a ste tratamiento.
Con respecto a los rendimientos de azcares para las planta maduras, se
encontr que para los ensayos sometidos a 100C con un tiempo de reaccin de 1
hora y concentraciones de cido de 1 y 2%, tuvieron valores de

7% y 12%

respectivamente, mientras que para los ensayos con las mismas condiciones pero
con un tiempo de reaccin de 2 horas los resultados no aumentaron
significativamente mostrando valores entre

9 y 12%. Para los ensayos con

temperatura de 120C, tiempo de reaccin 1 hora y concentraciones de cido de 1

y 2%, los rendimientos oscilaron alrededor de 14.8%. Sin embargo cuando la
biomasa fue sometida a condiciones de 120C, tiempo de reaccin de 2 horas y
47

concentraciones de cido de 1 y 2% aumentaron a concentraciones de hasta

20%, mostrando diferencias significativas (=0.025), respecto a los valores de
rendimiento de azcares ms cercanos a este tratamiento.
Un anlisis estadstico indic que no hubo diferencia significativa (=0.386) entre
una planta madura y una planta juvenil sometidas a una temperatura de 120C,
concentracin de cido de 2% y tiempo de contacto de 2 horas, lo que indica que
la edad no tuvo efecto con relacin a la liberacin de azcares reductores
susceptibles de ser fermentados.

Tabla 5. Contenido de azcares reductores en biomasa lignocelulsica de Agave

salmiana de hojas de plantas juveniles y maduras, despus de ser sometidas a
pretratamientos cido-trmicos.
TRATAMIENTO
Temperatura C
Control

T. Reaccin
(h )
0

AZCARES REDUCTORES (%)

[H2SO4]
%, V/V
0

Juvenil

Maduro

0.54 0.06

0.76 0.09

7.95 1.58

7.84 0.81

7.95 1.28

12.45 0.81

10.12 0.7

9.87 2.09

11.72 0.24

12.20 1.83

9.52 1.02

13.78 0.93

11.62 0.6

14.89 1.3

12.8 1.52

20.47 0.06

17.72 0.24

17.22 0.6

1
100C
2

1
120 C
2

48

9.

CONCLUSIONES

Despus de realizar el trabajo de tesis de pretratamientos cido-trmicos en

biomasa lignocelulsica de Agave salmiana para la liberacin de azcares
fermentables se pueden considerar las siguientes conclusiones:

Los resultados indican que en Agave salmiana

el porcentaje de

componentes lignocelulsicos, llmense celulosa, hemicelulosa y lignina fue

similar entre plantas juveniles y plantas maduras.

La edad de la planta no afect en la liberacin de azcares, siendo los

resultados presentados de una planta madura similares a los de una planta
juvenil.

Los pretratamientos cido-trmicos aplicados a la biomasa lignocelulsica

de A. salmiana, tuvieron un efecto en la liberacin de azcares reductores.

El tratamiento con temperatura de 120C, concentracin de cido al 2% y

tiempo de reaccin de 2 horas, fue el que present la mayor liberacin de
azcares reductores comparado con el resto de los pretratamientos
evaluados en el presente trabajo.

49

10.

ANEXOS

10.1 Anexo I. Determinacin de azcares reductores

Preparacin del Reactivo cido 3,5 dinitrosaliclico (DNS)
Se pesan las siguientes cantidades para hacer 500mL de reactivo DNS:

5g de cido 3,5 dinitrosaliclico

150g de tartrato de Na-K

8g de NaOH

Se disuelve el NaOH en 200mL de agua destilada y se aade en agitacin el

tartrato de Na-K lentamente. Se completa a 400mL con agua destilada y se
comienza a aadir lentamente el cido 3,5 dinitrosaliclico y se enrasa a 500mL
con agua destilada.
Curva de calibracin DNS
Se realiz una curva, con una solucin de glucosa de 4g/L, en cada tubo colocar
las siguientes cantidades (tabla 6):
Tabla 6. Curva con una solucin de 4g/L
CURVA CON UNA SOLUCIN DE GLUCOSA DE 4g/L
Concentracin de glucosa

Sol. De glucosa

Agua destilada

(g/L)

(L)

(L)

Blanco

500

0.4

50

450

0.8

100

400

1.2

150

350

1.6

200

300

2.0

250

250

2.4

300

200

2.8

350

150

3.2

400

100

3.6

450

50

10

4.0

500

Tubo

50

Todas las soluciones se hicieron en tubos de 10ml con tapa, se adiciono 0.5ml del
reactivo de DNS. Los tubos se colocaron a bao mara en agua a 100C por 5min
y despus se metieron los tubos por 5min. Inmediatamente alcanzado los 5
minutos se sometieron a los tubos se metieron en agua helada para detener la
reaccin (choque trmico) por 5min. Pasado el tiempo a cada una de las muestras
se diluyo con 5ml de agua (d). La lectura se realiz en un espectrofotmetro
UV/Visible marca VELAB a 540nm.

51

11.

BIBLIOGRAFA

vila, R., Rivas B., Hernndez, R. y Chirinos, M. (2012). Contenido de azcares

totales, reductores y no reductores en Agave cocui Trelease. Multiciencia,
12(2), 129-135.
Abril, A. y Navarro, E. A. (2012). Etanol a partir de biomasa lignocelulsica.
Ediciones Aleta. ISBN: 978-84-15225-50-8, 101 pginas.
Agbor, V. B., Cicek, N., Sparling, R., Berlin, A. y Levin, D. B. (2011). Biomass
pretreatment: Fundamentals toward application. Biotechnology Advances
29, 675-685.
Aguilar, J.L. (2005). Combustibles alternativos convenientes para Mxico.
Recuperado

de

http://www.conae.gob.mx/work/sites/CONAE/resources/LocalContent/3713/
4/artluisaguilar.pdf
Arns, S. (2012). Un regalo del cielo. Energa renovables EPARNES. Espaa:
Ediciones Club universitario.
ARPEL

IICA.

(2009).

Manual

de

biocombustibles.

Recuperado

de

http://www.iica.int/Esp/Programas/Innovacion/Publicaciones_TeI/B2223E.p
df
Alfaro, G., Legaria, J. P., y Rodrguez, J. E. (2007). Diversidad gentica en
poblaciones de agaves pulqueros (Agave spp.) del nororiente del estado de
Mxico. Revista Fitotecnia Mexicana, 30 (1), 1-12.
Arcos, E. (2010, 2 de junio). La catstrofe del Golfo de Mxico, puesta en contexto
[http://www.cookingideas.es].

Recuperado

http://www.cookingideas.es/la-catastrofe-petrolifera-del-golfo-de-mexicopuesta-en-contexto-20100602.html

52

de:

Barroso, M. (2010). Lignocelulosa como fuente de azcares para la produccin de

etanol. (Tesis de licenciatura). Universidad Politcnica de Madrid, Madrid.
Benavides, J., Quintero, G., Guevara, A. L., Jaime, D. C., Gutirrez, S. M. y
Garca,

J.

(2006).

Biorremediacin

de

suelos

contaminados

con

hidrocarburos derivados del petrleo. NOVA, 4 (5), 1-116

Borland, A. M., Griffiths, H., Hartwell, J. y Smith, J. A. (2009). Exploiting the
potential of plants with crassulacean acid metabolism for bioenergy
production on marginal lands. Journal of Experimental Botany, 60 (10),
2879-2896
Bulln, F. (2006). El mundo ante el cenit del petrleo. Editado por Asociacin para
el estudio de los recursos energticos (AEREN).
Camarillo, J. A. (2011). Estudio de la combustin de un motor monocilndrico de
ignicin alimentado con mezclas gasolina-etanol anhidro e hidratado a
distintas concentraciones. (Tesis para maestra). Universidad veracruzana,
Xalapa, ver.
Castillo, N. P., Siqueiros, T. y Rascn, Q. (2011). Biocombustibles: estrategias
limpias para combatir la crisis energtica. TECNOCIENCIA, 5 (2), 61-66.
Colonna, P. (2010). La qumica verde. Espaa: Editorial Acribia.
Cordero, S. (2003). Plantas de metabolismo fotosinttico C3, C4 y CAM. SpinCero,
7(26), 121-128.
Davis, S.C., Dohleman, F.G. y Long, S.P. (2011). The global potential for agave as
a biofuel feedstock. GCB Bioenergy 3, 68-78. DOI: 10.1111/j.17571707.2010.01077.x
De Juana, J. M., Crespo, A., De Francisco, A., Herrero, M. A. y Santos, F. (2003).
Energas renovables para el desarrollo. Madrid, Espaa: Ediciones
Paraninfo.

53

Domnguez, M. M., lvarez, A., Granados, M. y Hernndez, F. (2012). Estudio de

la cintica del pretratamiento e hidrlisis cida del bagazo de caa de
azcar. Revista Iberoamericana de Polmeros, 13 (4), 200-211.
Cuervo, L., Folch, J. L. y Quiroz, R. E. (2009). Lignocelulosa como fuente de
azcares para la produccin de etanol. BioTecnologia, 13(3), 11-25.
Dufey, A. (2006). Produccin y comercio de biocombustibles y desarrollo
sustentable: los grandes temas. Londres: Ediciones iied.
Escamilla, L. L. (2011). Potential of plants from the genus agave as bioenergy
crops. Bioenerg Res, 5(1), 1-9. DOI: 10.1007/s12155-011-9159-x
Estudio Fao (2008). Bloques y energa. Cuestiones clave. Roma, Italia.
Recuperado de http://www.fao.org/3/a-i0139s.pdf
Ferrer, J. R., Pez, G., Arenas de Moreno, L., Chandler, C., Mrmol, Z. y
Sandoval, L. (2002). Cintica de la hidrlisis cida de bagacillo de caa de
azcar. Maracaibo, Venezuela.
Flores, A., Castaeda, E., Snchez, F. J., Romero, L. y Ruiz, J. (2008).
Mecanismos de conservacin y uso del maguey pulquero agave salmiana
en

el

altiplano

mexicano.

Recuperado

de

http://www.somas.org.mx/pdf/pdfs_libros/agriculturasostenible6/61/42.pdf
Garca, F. J., Rosell, J., y Santamarina, M. P. (2006). Introduccin al
funcionamiento de las plantas. Valencia: Ediciones Universidad politcnica
de valencia.
Garca, A. J. (2007). Los agaves en Mxico. Ciencias, 87. 14-23.
Garca, E. J., Mndez, S. J. y Talavera, D. (2010). El gnero Agave ssp. En
Mxico: principales usos de importancia socioeconmica y agroecolgica.
RESPYN, 5, 109-129.

54

Gonzlez, A. S., Hernndez, E., Valcrcel, Y., Hernndez, V. y Gil de Miguel, A.

(2010). Contaminacin de agua en campos petrolferos en Bolivia. Rev
Panam Salud Publica, 28 (4), 235-243.
Gonzlez, D. (2012). Motores trmicos y sus sistemas auxiliares. Madrid, Espaa:
Ediciones Paraninfo.
Gonzlez, J. (2009). Energas renovables. Espaa, Barcelona: Ediciones Reverte.
Guerrero, R., Marrero, G., Martnez, J. M. y Puch, L. A. (2010). Biocombustibles
lquidos: situacin actual y oportunidades de futuro para Espaa. Madrid,
Espaa: Ediciones Fundaciones IDEAS.
Hernndez, E. (2008). La crisis energtica mundial y sus repercusiones en el
desarrollo de los programas nacionales de biocombustibles. (Tesis de
licenciatura) Universidad el mar, Oaxaca.
Hernndez, J. M., Villa, M.S., Veloz, J. S., Rivera, K. N., Gonzlez, R. A.,
Plascencia, M. A. y Trejo, S.R. (2009). Comparative hydrolysis and
fermentation of sugarcane and agave bagasse. ScienceDirect, 100. 1238
1245.
Juri, S. A. (2011). Sacarificacin y fermentacin simultanea para la produccin de
bioetanol de segunda generacin, mediante pretratamientos alternativos:
lquido inico reciclado y hongos de pudricin blanca. (Tesis de
licenciatura). Universidad de chile. Chile, Santiago de chile.
KitMotor.

(2014).

Todo

sobre

bioetanol.

Recuperado

de:

http://www.biokitmotor.com/info/bioetanol
Manahan, S. E. (2007). Introduccin a la qumica ambiental. Barcelona: Ediciones
Revertes.
Montaez, J. L., Victoria, J. C., Flores, R. y Vivar, M. A. (2011). Fermentacin de
los fructanos del Agave tequilana Weber Azul por Zymomonas mobilis y

55

Saccharomyces cerevisiae en la produccin de bioetanol. Informacion

Tecnologica, 22 (6), 3-14. DOI: 10.4067/S0718-07642011000600002
Martnez, A., Pastrana, J., Snchez, A., Lara, J., Herrera, L., Herrera, A., Martnez,
O. y Simpson, j. (2007). Geonmica de agave tequilana: identificacin de
genes tiles para la industria tequilera y desarrollo de usos alternativos del
agave. Colegio de Postgraduados y CINVESTAV. Articulo tcnico enviado.
Artculo del anlisis global del transcriptoma en preparacin.
Newth, E. (2007). Que ocurrir el da despus. Barcelona, Espaa: Ediciones ma
non troppo.
Nombela, G. (2010). Ideas para una nueva economa: Hacia una Espaa ms
sostenible en 2025. Madrid, Espaa: Ediciones Fundaciones IDEAS.
Organizacin Mundial de la Salud. (2011). Calidad del aire y salud. Recuperado
de: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs313/es/
Paz, F. J. (2008). Determinacin de la composicin qumica de la madera obtenida
del primer clareo en rboles de melina (gmelina arborea roxb.), de una
plantacin proveniente del departamento de Izabal. (Tesis de licenciatura).
Universidad de San Carlos de Guatemala, Guatemala.
Prinsen, P. (2010). Composicin qumica de diversas materiales lignocelulsicas
de inters industrial y anlisis estructural de sus ligninas. (Tesis de
maestra). Universidad de Sevilla, Sevilla.
Ramirez, R. (2004). El maguey y el pulque: memorias y tradicin convertidas en
historia, 1884-1993. (Tesis de licenciatura). Benemrita Universidad
autnoma de Puebla, Puebla.
Riesco, R. A. (2012). Proyecto de recuperacin de suelos contaminados por
hidrocarburos. Universidad autnoma de Barcelona. Sardaola del Valls.
Roldan, J. (2013). Energas renovables. Lo que hay que saber. Espaa: Ediciones
Parafino.
56

Sanchez, J. M. (2011). Caractersticas fisicoqumicas de los gases y partculas

contaminantes del aire. Scielo, 25(4), 369-379.
Saucedo, J., Castro, A. J., Rico, J. L. y Campos, J. (2010). Optimizacin de
hidrolisis cida de bagazo de Agave tequilana Weber. Revista Mexicana de
Ingeniera Qumica, 9 (1), 91-97.
Sempere, J., Tello E. (2007). El final de la era del petrleo barato. Barcelona:
Ediciones Icaria.
Vargas, R. y Valds, J. L. (2006). Alternativas energticas para el siglo XXI.
Universidad Autnoma de Mxico & Centro de Investigaciones sobre
Amrica del Norte. Dimensin Econmica, 1(0), 1-4.
Victoria, J. C., Montaez, J. L., Flores, R. (2007). Aprovechamiento de los
azucares de las pencas de Agave tequilana Weber var. azul para la
produccin de bioetanol (primera parte). Michoacn, Mxico. Recuperado
de
http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/acapulco09/TRABAJOS/AR
EA_IX/CIX-19.pdf
Vials, M., Bell A., Michelena, G. y Ramil, M. (2012). Obtencin de etanol a partir
de biomasa lignocelulsica. ICIDCA, 46(1), 7-16.
Zamora, A., Ramos, J y Arias, M. (2012). Efectos de la contaminacin por
hidrocarburos sobre algunas propiedades qumicas y microalgas de un
suelo de sabana. Bioagro, 24 (1), 5-12.

57