INFORME.

POLISACRIDOS
RESUMEN
En esta prctica de laboratorio se realizaron diferentes ensayos experimentales con el fin de
determinar la estructura y composicin de algunos polisacridos por medio de cuatro
montajes diferentes: ensayo de Benedict, ensayo de Lugol, ensayo de Barfoed y ensayo de
Bial. Dichos montajes fueron aplicados a muestras (Almidn, Carragenina y Hemicelulosa)
previamente hidrolizadas con cido clorhdrico (HCl) y sometidas a temperaturas elevadas
(bao mara) para posteriormente ajustar su pH con hidrxido de sodio (NaOH). El almidn
hidrolizado se utiliz en las pruebas de Benedict, Barfoed y Lugol. Por otro lado, la
carragenina se us en la prueba de Barfoed; mientras que la hemicelulosa se emple en el
ensayo de Bial; obteniendo los resultados esperados en cada una de las pruebas
mencionadas anteriormente. Finalmente, se utilizaron diversos patrones (xilosa, arabinosa,
maltosa y glucosa) los cuales se clasificaron como positivos o negativos segn el ensayo al
cual fueron sometidos, permitiendo la comparacin con los diferentes polisacridos
hidrolizados.
Palabras clave: carbohidrato no reductor, enlace glucosdico, hidrlisis cida,
heteropolisacrido, pentosas.
ABSTRACT
In the laboratory practice different experimental tests were realized in order to determine
the structure and composition of some polysaccharides by means of four different
assemblies: Benedict's test, Lugol's test, Barfoed's test and Bial's test. The above mentioned
assemblies were applied to samples (starch, carrageenan and hemicellulose) before
hydrolysed with hydrochloric acid (HCl) and submitted to high temperatures (bain-marie)
later the pH was fitted with sodium hydroxide (NaOH). The starch hydrolyzed was used in
Benedict's test, Barfoed's test and Lugol's test. On the other hand, the carrageenan was used
in Barfoed's test; whereas the hemicellulose was used in Bial's test; obtaining the expected
results in each of the tests mentioned previously. Finally, there were in use diverse patterns
(xylose, arabinose, maltose and glucose) which these were classified as positives or
negatives according to the test to which these were submitted, allowing the compared with
the different hydrolyzed polysaccharides.
Key words: nonreducing sugar, glycosidic linkage, acid hydrolysis, heteropolysaccharide,
pentose.
INTRODUCCIN
Los carbohidratos son compuestos
naturales ampliamente difundidos que
poseen grupos funcionales aldehdo o
cetona y mltiples grupos hidroxilo.
Desempean
diversas
funciones

biolgicas: se utilizan en metabolismo

energtico; algunos desempean un papel
estructural en las paredes de clulas de
bacterias y plantas; la ribosa y
desoxirribosa desempean un papel
estructural en el ARN y ADN; y se

combinan con las protenas para formar

glicoprotenas, los cuales son marcadores
importantes de la superficie celular
(Boyer, 2000, p. 233).

Los carbohidratos, que tambin se

conocen
como
sacridos,
pueden
clasificarse de acuerdo al nmero de
unidades monomricas que contienen:
1. Monosacridos: son las unidades
monomricas fundamentales de la
estructura de los carbohidratos. Los
monosacridos
pueden
unirse
mediante enlaces O-glucosdicos para
formar disacridos y polisacridos
con frmula emprica (CH2O)n,
donde n es 3 o mayor (Horton, 1993,
p. 8.1).
Los monosacridos ms importantes
son las triosas, las pentosas y las
hexosas. Entre las triosas destacan el
gliceraldehdo
(aldosa)
y
la
dihidroxicetona
(cetosa).
Las
principales pentosas son la ribosa, la
desoxirribosa (aldosas) y la ribulosa
(cetosa); las dos primeras forman
parte de los cidos nuclicos y la
tercera
desempea
un
papel
importante en la fotosntesis. Las
hexosas ms importantes son la
glucosa, la galactosa (aldosas) y la
fructosa (cetosa); la primera se
encuentra en la uva, la miel, en
muchas frutas y en la sangre, la
tercera se encuentra asociada a la
anterior en la miel y las frutas, y la
segunda forma parte del azcar de la
leche (Sanchez, 2004, p. 24).

2. Oligosacridos: son polmeros

entre dos y alrededor de 20
residuos de monosacridos. Los
polisacridos ms comunes son
los disacridos, los cuales
consisten en dos monosacridos
enlazados (Horton, 1993, p. 8.1).

3. Polisacridos: son polmeros que

contienen por lo regular, ms de
20 residuos de monosacridos
(Horton, 1993, p. 8.1).
Los carbohidratos que ms abundan en la
naturaleza son los polisacridos almidn,
glucgeno y celulosa, todos polmeros de
la glucosa (monosacrido). El almidn,
producido por las plantas para almacenar
energa, se compone de dos formas
polimricas de glucosa: amilosa y
amilopectina, que tienen una cadena
principal de enlaces (14) Oglucosdicos. Adems, la amilopectina

tiene ramificaciones (16) y el

glucgeno, que es el polisacrido de
almacenamiento en los animales, es
idntico a la amilopectina excepto que
tiene ms ramificaciones (16).

Los polisacridos celulosa, pectina y

quitina proporcionan una pared protectora
o cubierta lubricante a las clulas. La
celulosa es un polmero de glucosa no
ramificado unidos por enlaces (1 4)
O-glucosdicos. La quitina, el principal
componente del exoesqueleto protector de
los insectos, es un homopolisacrido de
N-acetilglucosamina; y la pectina, un
componente de la pared celular de las
plantas, es un polmero del cido Dgalacturnico (Boyer, 2000, p. 233).

CELULOSA

QUITINA

PECTINA

METODOLOGA
Hidrlisis 1

Los polisacridos a su vez, estn

constituidos de azcares reductores o no
reductores. Los azcares reductores son
monosacridos o disacridos que puede
ceder electrones a otras molculas y
pueden, por tanto, actuar como agente
reductor. La presencia de un grupo cetona
(-CO-) o aldehdo (-CHO) libre permite a
la mayora de los monosacridos y
polisacridos actuar como azcares
reductores (Press, 1997, p. 66). Unos de
los monosacridos ms comunes es la
glucosa.

Por otro lado, los azcares no reductores

no tienen la capacidad de ceder electrones
a otras molculas y, por tanto, no pueden
actuar como agentes reductores.

Finalmente, los polisacridos son

carbohidratos que se pueden hidrolizar
dando
muchas
unidades
de
monosacridos. Por ejemplo, la hidrlisis
del almidn da lugar a muchas molculas
de glucosa por medio de una hidrlisis
cida a temperaturas elevadas (Bullet,
2009).

1. Ensayo de Benedict.

2. Ensayo de Lugol.

Hidrlisis 2
RESULTADOS

3. Ensayo de Barfoed.

4. Ensayo de Bial.

 Tabla 1: Ensayo de Benedict.

Tubos

Coloracin

1)

Observaciones
Se present una coloracin
naranja.

(Glucosa)

Resultado: positivo.
2)

Se present una coloracin

naranja.

(Almidn
hidrolizado)

Resultado: positivo.

Tabla 2: Ensayo de Lugol.

Tubos

Coloracin

1)

Observaciones
Se present una coloracin
azul-violeta.

(Almidn sin
hidrolizar)

Resultado: positivo.

2)

No se present
coloracin.

(Almidn
hidrolizado)

Resultado: negativo.

Tabla 3: Ensayo de Barfoed.

Tubos

Coloracin

Observaciones

ninguna

1)

Despus de 10 minutos de calentarse,

se present un precipitado rojo.

(Almidn
hidrolizado)

Resultado:
positivo
monosacridos reductores.

2)

para

Despus de 20 minutos de calentarse,

se present un precipitado rojo.

(Maltosa)

Resultado: positivo para disacridos

reductores.
3)

Despus de 10 minutos de calentarse,

se present un precipitado rojo.

(Glucosa)

Resultado:
positivo
monosacridos reductores.
4)

para

Despus de 10 minutos de calentarse,

se present un precipitado rojo.

(Carragenina
hidrolizada)

Resultado:
positivo
monosacridos reductores.

para

Tabla 4: Ensayo de Bial.

Tubos
1)
(Xilosa)

Coloracin

Observaciones
Se present una coloracin
verde intensa.
Resultado: positivo.

2)
(Arabinosa)

Se present una coloracin

verde intensa.
Resultado: positivo.

3)
(Hemicelulosa
hidrolizada)

Se present una coloracin

verde.
Resultado: positivo.

ANLISIS DE RESULTADOS
1. Ensayo de Benedict.
En esta prueba se emplearon 2 tubos de
ensayo con diferentes soluciones de
carbohidratos y Reactivo de Benedict
para determinar los azcares reductores.
El primer tubo contena glucosa. Dicho
tubo present una coloracin naranja
(resultado positivo) debido a la reduccin
del in cprico del reactivo por el grupo
aldehdo (CHO) de la glucosa; puesto que
el carbohidrato se encontraba en medio
alcalino y su estructura era lineal, se
facilit la reaccin produciendo xido
cuproso, es decir, la formacin del color
caracterstico para esta prueba. Adems,
el tubo 2 contena almidn hidrolizado
dando como resultado positivo la
coloracin antes mencionada. Esto fue
debido a que en la hidrlisis del almidn
se produjeron unidades monomricas de
glucosa por la ruptura de los enlaces
(14) O-glucosdicos, por lo cual se
present
la
reaccin
descrita
anteriormente.

2. Ensayo de Lugol.
En este montaje se utilizaron dos tubos de
ensayo con almidn (en diferentes
condiciones) y solucin de Lugol con el
fin de determinar la presencia de
polisacridos. Debido a que el almidn

est compuesto de amilosa (cadena lineal

de glucosas) y amilopectina (cadena
ramificada de glucosas), este carbohidrato
reacciona con el lugol presentado una
coloracin azul en el tubo 1 (resultado
positivo), gracias a la inclusin del yodo
en el interior de las hlices de la amilosa.

Por otro lado, en el tubo 2 (almidn

hidrolizado) se present como resultado
negativo una incoloracin. Esto fue
debido a la ruptura de los enlaces Oglucosdicos del almidn (producida por
la hidrlisis cida) formando monmeros
de glucosa, los cuales no reaccionan con
lugol.
3. Ensayo de Barfoed.
En esta prueba se utilizaron 4 tubos de
ensayo con diferentes soluciones de
carbohidratos y reactivo de Barfoed para
determinar la presencia de monosacridos
o disacridos reductores.
En el tubo 1 se agreg almidn
hidrolizado (unidades de glucosa), en el
tubo 3 glucosa y en el tubo 4 se aadi
carragenina hidrolizada (unidades de
galactosa). Dichos tubos presentaron un
precipitado rojo a los 10 minutos de
calentamiento (resultado positivo para
monosacridos reductores). Esto fue
debido a la reduccin del cobre (ll) a
cobre (l) por el grupo aldehdo del
monosacrido, formando el color
caracterstico de la prueba.

Por otro lado, en el tubo 3 se emple

maltosa (compuesta por dos unidades de
glucosa) la cual dio como resultado
positivo (para disacridos reductores) un
precipitado rojo a los 20 minutos de haber
sido sometido a calor. Esto fue debido a la
reaccin anteriormente mencionada pero
en forma ms lenta; ya que existe un
enlace (14) O-glucosdico.
4. Ensayo de Bial.
En esta prueba se emplearon 3 tubos de
ensayo con diferentes soluciones de
carbohidratos y reactivo de Bial, con el
fin de determinar cules de los
polisacridos empleados era pentosas.
En el tubo 1 se utiliz xilosa, en el tubo 2
se aadi arabinosa y en el tubo 3 se
emple
hemicelulosa
(polisacrido
compuesto en mayor cantidad por xilosa,
arabinosa y manosa (pentosas) y en
menor proporcin por glucosa, cido
glucurnico y galactosa (hexosas)).
Dichos tubos presentaron como resultado
positivo una coloracin verde intensa
debido a la deshidratacin de las pentosas
hasta formar un compuesto llamado
furfural. Posteriormente, este reacciona
con el orcinol del reactivo para formar la
coloracin caracterstica de la prueba.

La hidrlisis cida es un proceso

eficiente el cual permite que otras
pruebas se lleven a cabo para la
identificacin de carbohidratos.

El reactivo de lugol forma

inclusiones con las hlices de la
cadena lineal de los polisacridos,
presentando diferentes coloraciones
segn el origen del carbohidrato.
La identificacin de monosacridos y
disacridos reductores por medio de
la prueba de Barfoed, depende del
intervalo de tiempo en el cual se
forma el precipitado rojo.
La prueba de Bial es un mtodo
cualitativo, el cual se utiliza para
identificar las pentosas por medio de
una coloracin verde.
BIBLIOGRAFIA
Boyer, R. (2000). Conceptos en
Bioqumica. Mxico: International
Thomson Editores.
Bullet, B. (07 de 07 de 2009).
Scribd.com.
Obtenido
de
http://es.scribd.com/doc/17151688/1Hidrolisis-de-carbohidratos#scribd
Horton, H. R. (1993). Bioqumica.
Mxico:
Prentice
Hall
Hispanoamericana.
Press, O. U. (1997). Diccionario de
Qumica. Espaa: COMPLUTENSE.

CONCLUSIONES
Los azcares reductores se pueden
identificar por medio de su carbono
anomrico libre.

Sanchez, J. A. (2004). Biologa.

Espaa: MAD, S.L.