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La cromatografa lquida de alta ecacia o high performance liquid chromatography (HPLC) es un tipo de
cromatografa en columna utilizada frecuentemente en
bioqumica y qumica analtica. Tambin se la denomina
a veces cromatografa lquida de alta presin o cromatografa lquida de alta resolucin (high pressure
liquid chromatography) (HPLC), aunque esta terminologa se considera antigua y est en desuso. El HPLC es
una tcnica utilizada para separar los componentes de
una mezcla basndose en diferentes tipos de interacciones qumicas entre las sustancias analizadas y la columna
cromatogrca.
1
1.1
Principio
Cromatografa lquida de alta resolu- La cromatografa de fase normal o normal phase HPLC
(NP-HPLC) fue el primer tipo de sistema HPLC utilizacin (HPLC)
1 PRINCIPIO
En esta cromatografa, la fase estacionaria consiste en largos polmeros entrecruzados que forman una red tridimensional porosa. A los nes prcticos, la columnas se
empaquetan con pequeas partculas esferoidales formadas por esos polmeros entrecruzados. En consecuencia,
estas partculas son porosas, y el tamao de los poros es
tal que algunas molculas (las demasiado grandes) no podrn ingresar a esos poros, en tanto que otras (las sucientemente pequeas) podrn pasar libremente. Los poros quedan conectados formando una malla o red, lo cual
determina una serie de caminos a ser recorridos por las
molculas que acceden al interior de esta.
3
ricacin de agua, concentracin de componentes traza,
Ligand-exchange chromatography, Ion-exchange chromatography of proteins, High-pH anion-exchange chromatography of carbohydrates and oligosaccharides, etc.
1.7
1.8
2 Parmetros
se puede cargar a la columna y tambin inuye en su sensibilidad. Las columnas de dimetro interno ms grande
(>10mm) se utilizan normalmente en la puricacin de
compuestos para su utilizacin posterior. En cambio, las
columnas de dimetro interno menor (4-5 mm) se utilizan
en el anlisis cuantitativo de las muestras, y se caracterizan por el aumento la sensibilidad y la minimizacin del
consumo de disolventes que conllevan. Estas columnas
se suelen denominar columnas de rango analtico y normalmente estn asociadas a un detector UV-VIS. Aparte,
existen otros tipos de columnas, como las de tipo capilar,
con un dimetro inferior a 0.3 mm, utilizadas principalmente en espectrometra de masas.
una protena que sea ligeramente ms pequea que el tamao de los poros puede entrar, pero difcilmente saldr
con facilidad.
REFERENCIAS
4 Fabricantes de columnas de
HPLC y accesorios
Merck/ EMD
2.4
KONIK GROUP
Fabricantes
HPLC
de
aparatos
de
Sielc
Supelco
HITACHI
TEKNOKROMA %
KONIK GROUP
Tosoh Corporation %
Waters Corporation %
Sugelabor S.A. %
Dionex Corporation %
Kromasil %
Eksigent Technologies %
Gilson, Inc. %
Micro-Tech Scientic %
PerkinElmer, Inc. %
Proxeon Biosystems A S/ %
Shimadzu Scientic Instrumentos %
Thermo Electron Corporation %
Waters Corporation %
Knauer%
5 Vase tambin
Cromatografa
Cromatografa de intercambio inico
Cromatografa de exclusin molecular
Cromatografa lquida: Teora y aplicaciones. I. Katime, O. Katime, D. Katime. Editorial Universidad
de Guadalajara, Mxico 1998
Csaba Horvth, inventor de la HPLC
6 Referencias
JASCO%
YOUNG LIN%
Varian
Enlaces externos
Silica hielos for liquid chromatography
HPLC Find
LC Resources ChromFAQ
Chromatography Forum
marketoverview//search.php?language=e&market=lc&showtree=yes
Overview ofo HPLC Suppliers
Novasep
HPLC Resources
HPLC Primero
8.1
Texto
8.2
Imgenes
https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/e/e8/
8.3
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