UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE QUMICA
EXTRACCION Y CRSITALIZACIN DE LA CAFENA
LABORATORIO DE QUMICA RGANI I
MARTINEZ HUERTA EMANUEL Y ESTRADA CRUZ ALAN
PROFE.: AGUSTN PALMA DE LA CRUZ
SEMESTRE 2016-1

Antecedentes
La extraccin lquido-lquido es una tcnica de laboratorio de uso frecuente para aislar
compuestos orgnicos a partir de su fuente natral. Se basa en las propiedades de solubilidad de la
sustancia a extraer y del disolvente utilizado. Usualmente la matriz del compuesto de inters es
acuosa por lo que estos solventes suelen ser no polares.
La cafena es un compuesto famoso, aislado por primera vez de los granos del caf, es un
estimulante de amplio uso en la industria de las bebidas.
Cafena
Componente de los frutos de la planta de caf, el t, el mate y las bayas de guaran, la nuez de
cola y el chocolate, participando en el sabor amargo de estos productos. En total se sabe que la
cafena es un componente qumico de alrededor de 60 plantas que lo emplean como pesticida
natural, que paraliza e incluso mata cierta clase de insectos. Es un producto del metabolismo
secundario (metabolito secundario9 por lo que se considera que no es esencial para la planta y es
almacenada en vacuolas pues es potencialmente txico para las clulas de las plantas y adictivo
para los seres humanos. Los restos hallados de las primeras civilizaciones agrcolas (alrededor de
10 000 a.C.) demuestran que el caf y una de las descripciones ms tempranas de su uso se
encuentra en un libro mdico rabe que data del ao 900 d.C. el botnico sistemtico; Lineus, la
nombr, el rbol del Coffea arabica. El descubrimiento de las propiedades del t, a partir de
Oriente, se le atribuye al fundador del Zen, Daruma. Aunque los expertos afirman que el uso
mdico del t se report muy temprano como en el ao 2737 a.C., en la farmacopea del Shen
Nung, un emperador de China, en el diccionario Chino de Kuo Po, el cual apareci en 350 d.C. se
menciona su uso medicinal. El uso popular o no mdico del t parece haberse esparcido
lentamente. Solo hasta el ao 700 d.C., la planta de t se cultiv ampliamente en China. En 1819
el qumico alemn Friedrich Ferdinand Runge asla por primera vez la cafena del caf.
Siempre se ha valorado la cafena: en 1475 la legislacin turca convirti en motivo de divorcio la
incapacidad de un marido de ofrecer suficiente cantidad de caf a su esposa.
Qumicamente, la cafena es un alcaloide del grupo de las xantinas. Las xantinas son un grupo
qumico de bases purnicas que incluyen sustancias endgenas tan importantes como la guanina y
la adenina. A este grupo, tambin pertenecen la teofilina del t, la teobromina presente en el
chocolate. La cafena tambin se encuentra en el guaran y el mate, por lo cual tambin se le ha
llamado guaranina y matena respetivamente, siendo qumicamente idnticos.

AISLAMIENTO DE LA CAFENA DEL T.

El aislamiento de un compuesto natural consiste en su separacin de los dems constituyentes sin
que se altere su estructura qumica. Puesto que el material vegetal es una matriz compleja (con
muchos constituyentes), el mtodo de extraccin lquido-lquido es adecuado pues es selectivo

para el aislamiento de cafena.

Las hojas del t contienen carbohidratos como la celulosa, la cual es un componente estructural
de las plantas, pequeas cantidades de glucosa y almidn. Otros componentes de las hojas son
protenas y aminocidos, cafena (2-3.5%), taninos (compuestos polifenlicos), pigmentos como la
clorofila y saponinas. La cafena es acompaada por una serie compleja de sustancias las cuales,
obviamente, deben ser separadas. Los taninos son componentes abundantes en las hojas, los
cuales le confieren el sabor astringente y amargor caracterstico. Las saponinas son compuestos
espumantes, que se comportan de manera similar al jabn (del latn sapo, que significa jabn) y
las plantas lo usan contra depredadores. Los compuestos anteriores suelen extraerse junto con la
cafena excepto la celulosa, que permanece en las hojas.
A pesar de que la celulosa es un polmero polihidroxilado (con preso molecular por encima de 500
000 g/ mol) no es soluble en agua debido a la fuerte atraccin por enlaces de puente de hidrgeno
entre las cadenas polimricas que no permite la solubilizacin en agua.
La cafena puede ser separada de los otros componentes del t por extraccin lquido-lquido con
un solvente orgnico como el diclorometano por la diferencia de polaridades de los componentes
del t. La cafena es un compuesto de polaridad media, soluble en agua y algunos solventes
orgnicos. Posee un coeficiente de particin entre diclorometano y agua de 5 (KDiclorometano/agua 5)
aproximadamente, lo que indica que la cafena es cinco veces ms soluble en diclorometano que
en agua. La glucosa, los aminocidos y las protenas son compuestos polares solubles en agua e
insolubles en la mayora de compuestos orgnicos. Estos, permanecen en la capa acuosa despus
de la extraccin con el solvente orgnico. La clorofila y los compuestos formados por su oxidacin,
son solubles en agua y en solventes orgnicos, por lo tanto, se repartirn en ambas capas. Sin
embargo, debido a que su presencia es muy pequea en la fase orgnica, pueden ser eliminados
en la etapa de recristalizacin o sublimacin de la cafena.
Los taninos son una familia de compuestos orgnicos de origen natural con masa molecular de
600 a 3000 Da. El tipo de taninos pueden ser del tipo que se hidrolizan con agua y de los que no lo
hacen. Los que estn presentes en el t son del tipo hidrolizables. Estos consisten de una molcula
de glucosa unida a uno o ms grupos galolo, los cuales pueden reaccionar con agua (hidrlisis,
del griego hydor, agua; lysis, romper) para formar el cido correspondiente. Fig 9.4

Los enlaces entre glucosa y galolo son tipo ster (-O-CO-). Estos enlaces se rompen fcilmente
con la adicin de carbonato de calcio o sodio por hidrlisis. El agua rompe estos enlaces de ster,
fraccionando la macromolcula de tanino en unidades de azcar y cido glico. Resultado de esto,
son molculas de glucosa y cido glico o sus sales de calcio, muy solubles en la fase acuosa. Fig
9.5 Debido a esta afinidad por la fase acuosa, al adicionar el solvente orgnico, la glucosa y las
sales del cido glico permanecern en la fase acuosa.
Adems de los taninos, las clorofilas oxidadas y algunos flavonoides contribuyen a la coloracin,
caf oscura que se observa en la bebida.

Material y equipo
1 agitador de vidrio
2 Probeta de 25 mL
1 Colector
1 Refrigerante para agua con mangueras
1 Embudo de separacin Quickfit con tapn
2 Vasos de precipitados de 250 mL
1 Embudo de vidrio
2 Tubos capilares
1 Equipo adecuado para arrastre con vapor (armado: tubos, tapones, etc.)
1 Anillo metlico
1 Frasco para cromatografa
1 Esptula
1 Frasco vial
1 Mechero con manguera
2 Matraces Erlenmeyer de 150 mL
4 Pinzas de tres dedos con nuez
2 Matraces Erlenmeyer de 250 mL
1 Recipiente de peltre
2 Portaobjetos
1 Tela de alambre con asbesto
1 Matraz Kitasato de 250 mL con manguera
1 Embudo Buchner con alargadera
1 Matraz redondo de fondo plano
1 Agitador magntico
1 Parrilla de calentamiento con agitacin magntica
Reactivos
Diclorometano
Papel filtro
Sulfato de sodio anhidro y cloruro de sodio
Material Adicional
1 lmpara UV, de onda larga y onda corta
1 cmara de yodo
Procedimiento
En este procedimiento se extrae la cafena del t negro, una de las plantas que contiene mayor
proporcin de cafena adems, puede conseguirse en bolsas que permite la filtracin del material
insoluble. Cuando se usa otra fuente como el caf tostado, es necesaria la modificacin de
algunos pasos en la extraccin.
Aislamiento de cafena de las hojas del t.
Se monta el equipo. En el matraz 1 se colocan aproximadamente 175 mL de agua destilada
(generador de vapor) y se agregan cuerpos de ebullicin. En el matraz 2 se coloca en trozos
pequeos el material del que se va a extraer el aceite esencial (cuidando que la conexin de vidrio
no se obstruya con los trozos del material que se trabajar; pues de ser as, no habr paso de la
corriente de vapor). Se calienta con el mechero el matraz 1 hasta ebullicin, con el fin de generar
el vapor que pasar al matraz 2, extrayndose de esta manera el aceite esencial del material, el
cual es inmediatamente arrastrado por el vapor de agua en un proceso de codestilacin (la
temperatura de destilacin debe ajustarse de manera que caiga una gota por segundo). Se

suspende el calentamiento cuando el volumen del destilado sea de 120 150 mL

aproximadamente.
Permita que el filtrado se enfre colocndolo en un bao de hielo. Cuando el filtrado ha alcanzado
la temperatura ambiente, extraiga la solucin con una porcin de 5mL de diclorometano usando
un embudo de separacin de 250 mL. En este experimento, la presencia de saponinas 1 en el
extracto favorece la formacin de emulsiones indeseables pues hace dificultosa la separacin de
las capas. Para minimizar este problema no agite el embudo de separacin vigorosamente, en vez
de esto, solo invierta y rote el embudo de separacin suavemente por un periodo de 5 minutos, tal
como se muestra en la fig.2 Durante este proceso, ventile el embudo frecuentemente abriendo
lentamente la llave de paso para eliminar el aumento en la presin.
Separe ambas capas como sigue: coloque el embudo de separacin sobre un aro, remueva el
tapn y abra cuidadosamente la llave de paso, recogiendo la capa inferior (la fase orgnica) en un
frasco Erlenmeyer de 50 mL. Repita la extraccin sobre la fase acuosa remanente con otra porcin
5 mL de diclorometano. Recoja la fase orgnica en el frasco que contiene el primer extracto de
diclorometano. A continuacin, realice una tercera extraccin con 5 mL de diclorometano y
renalo con los dos extractos anteriores. Con esto se consigue alrededor de 15 mL de extracto.
Algo de la emulsin o gotas de fase acuosa puede estar presente en la fase orgnica. La capa
orgnica es entonces tratada con un agente secante con el doble propsito de secar y romper la
emulsin. Adicione alrededor de 1 g de sulfato de sodio anhidro2 a la fase orgnica. Cubra el frasco
con un tapn; djelo alrededor de 10 minutos ocasionalmente agitando. Asegrese de que la fase
orgnica sea transparente y sin gotas de agua. Filtre la fase orgnica usando una pequea mota
de algodn en el cuello de un embudo de gravedad. Con el agitador de vidrio aplique suavemente
presin para asegurar el algodn al cuello del embudo mientras se hace la filtracin. Lave el
sulfato de magnesio atrapado por el algodn con 2 mL de diclorometano. Si el sulfato de sodio
pasa a travs de la cua de algodn, filtre nuevamente la solucin usando una pieza de algodn
ms grande. Remueva el solvente usando un rotavapor o evaporando hasta sequedad. Pese el
producto al que se le denominar cafena cruda. Calcule el porcentaje de rendimiento basado en la
cantidad originalmente usada.
La cafena puede aislarse del caf tostado y molido. Para ello se debe modificar uno de los pasos
iniciales. Esto consiste en hacer una filtracin para retirar el residuo slido remanente despus de
hervir por 20 min. Los pasos siguientes son iguales.
Tambin puede usarse como solvente de extraccin el cloroformo. El cloroformo debe manejarse
con ms cuidado debido a que interacta con ciertos receptores del sistema nervioso, pues se
caracteriza por ser depresor del SNC (Sistema Nervioso Central)
Purificacin por recristalizacin
La cafena cruda obtenida por la evaporacin del diclorometano puede ser purificada por
recristalizacin de una mezcla de solventes. Tome toda la cantidad posible de cafena del fondo
del baln y colquela sobre una hoja de papel previamente pesada; determinando la cantidad de
cafena cruda pesada. Transfiera la cafena cruda a un tubo de ensayo grande; disuelva el slido
adicionando acetona calentada en un bao de agua (alrededor de 5-6 mL deberan ser necesarios
para disolver la cafena). Agite constantemente con una varilla de vidrio. Adicione ter de petrleo
caliente gota a gota hasta que la nubosidad formada sea persistente. Adicione algunas gotas de
acetona, lo suficiente para hacer desaparecer la nubosidad. Enfre la solucin y recolecte los
cristales por filtracin al vaco. Permita que el slido se seque en el filtro con la bomba encendida.
Pese la cafena purificada y determine el rendimiento de recristalizacin.

Las saponinas son compuestos orgnicos que forman espuma de manera similar al jabn. Al
poseer esta caracterstica, facilita la formacin de emulsiones estables, ver fig. 4 para un ejemplo.

2 Esta cantidad es orientativa, pues la cantidad de sulfato de sodio anhidro adicionada depende
de la cantidad de agua presente. Se recomienda que su adicin sea paulatina con agitacin suave
hasta que la solucin sea transparente.