INSTITUTO TECNOLOGICO DE

ZACATEPEC
LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA 3: EXTRACCIN DE ADN.
INTEGRANTES:
ANTUNEZ GARCIA EDGAR
HERNNDEZ SALINAS MARIO
ALBERTO
MENDEZ CANO AARON DANIEL
ORTIZ GAMBOA JESUS RAFAEL
VAZQUEZ LEON EMMANUEL
FECHA DE ENTREGA: 24/09/2015
BIOQUIMICA GRUPO WA

OBJETIVO
Realizar la extraccin de ADN de clulas
animales poniendo de manifiesto su
estructura fibrilar.
MARCO TEORICO
La molcula de ADN (que es la que se va a extraer en sta actividad
prctica) est constituida por dos largas cadenas de nucletidos
unidas entre s formando una doble hlice. Las dos cadenas de
nucletidos que constituyen una molcula de ADN, se mantienen
unidas entre s porque se forman enlaces entre las bases nitrogenadas
de ambas cadenas que quedan apareadas. La unin de las bases se
realiza mediante puentes de hidrgeno, y este apareamiento est
condicionado qumicamente de forma que la adenina (A) slo se
puede unir con la Timina (T) y la Guanina (G) con la Citosina (C). La
estructura de un determinado ADN est definida por la "secuencia" de
las bases nitrogenadas en la cadena de nucletidos, residiendo
precisamente en esta secuencia de bases la informacin gentica del
ADN. El orden en el que aparecen las cuatro bases a lo largo de una
cadena en el ADN es, por tanto, crtico para la clula, ya que este
orden es el que constituye las instrucciones del programa gentico de
los organismos. Conocer esta secuencia de bases, es decir,
secuenciar un ADN equivale a descifrar su mensaje gentico. La
estructura en doble hlice del ADN, con el apareamiento de bases
limitado ( AT; G-C ), implica que el orden o secuencia de bases de una
de las cadenas delimita automticamente el orden de la otra, por eso
se dice que las cadenas son complementarias. Una vez conocida la
secuencia de las bases de una cadena, se deduce inmediatamente la
secuencia de bases de la complementaria.
La purificacin del DNA permite:
1. Identificar mutaciones.

2. Ver caractersticas propias de los tipos de DNA (Polimorfismo).

3. Para clonar (Genes especficos, fragmentos de cromosomas o
individuos).
4. Aislar DNA afectado y compararlo con uno bueno.
5. Detectar en las muestras, la presencia de un largo espectro de
agentes patognicos.
6. Identificar resistencia microbiana.

7. Evaluar desordenes genticos, neurodegenerativos, neoplsicos,

imunolgicos.
8. Medicina forense para la identificacin de personas.
9. Para hacer tests de paternidad.
El rendimiento de la prueba de ADN radica en que los miles de pares
de bases que se reparten de forma secuencial y determinada para
cada persona permiten seleccionar a un nico individuo entre todos los
de su especie si se conoce esa secuencia.
Es Importante Diferenciar dos Conceptos
Extraccin: sacar los componentes desde un compartimento celular.
Involucra:
Lisis de las clulas que contienen a los AN
Inactivacin de nucleasas
Clarificacin: separacin de los AN de los restos celulares
Purificacin: Separacin de AN:
De protenas solubles.
De otros AN no deseados.
De Lpidos, carbohidratos,

De sales y otros compuestos orgnicos.

MATERIAL.
2 Tubos de ensayo de 16 ml de
capacidad.
1 Vaso de precipitados de 50 ml.
1 Bao Mara.
1 Embudo pequeo.
1 Agitador de vidrio.
2 Lminas de papel filtro.
1 Gradilla.
1 Pipeta Pasteur.
SOLUCIONES.
Hgado de pollo fresco.
Solucin salina con NaCl al 10%.
cido tricloroactico al 15%.

 Alcohol isoproplico.

PROCEDIMIENTO
1.

Nos conducimos a leer las indicaciones del profesor

que previamente nos haba proporcionado para as tener
una mejor perspectiva para llevar acabo la prctica.
Posteriormente lavamos material.

2.

En un recipiente se coloc el hgado con un poco de

agua
destilada
y
se
procedi
a
macerarlo.
Simultneamente, las soluciones cida y salina,
respectivamente, fueron preparadas.

3.

Con las soluciones listas, se coloc una muestra de

10 ml de solucin de hgado (aproximadamente) en el
vaso de precipitados junto con 10 ml de solucin cida y
fueron mezcladas.

4.

Habiendo colocado una lmina de papel filtro,

estratgicamente, en el embudo, se filtr la mezcla. Se
recuper el cogulo seco del papel y se puso en un tubo
de ensayo.

5.

Posteriormente se agregaron 10 ml de la solucin

salina, se mezcl y la colocamos en un bao Mara a 95 C
durante aproximadamente 3.5 minutos.

6.

Se filtr la muestra recuperando la fase lquida en

otro
tubo
de
ensayo.
Luego
se
agregaron
aproximadamente 2 ml de alcohol lentamente, y se
pudieron observar en la muestra las hebras de ADN,
que era la sustancia blanca.

RESULTADOS

CONCLUSION
El alcohol es menos denso que el agua, por lo que flota en la
parte superior. Debido a que se formaron dos capas
separadas, toda la grasa y protena que rompimos en los dos
primeros
pasos
y
el
ADN
tiene
que
decir:
"Mmmmm...
a
que
capa
debera
de
ir?"

Esto es algo as como buscar en una recmara el lugar ms

confortable para sentarse. Alguien escoger el silln, otros
quizs escojan la mecedora.
En este caso, la protena y la grasa irn al fondo, que es la
capa acuosa, donde se sienten ms confortables, mientras
que el ADN prefiere la capa superior, el alcohol.
El ADN es una larga y pegajosa molcula a la que le gusta
formar grumos.

BIBLIOGRAFIA
Learn.genetics.utah.edu/es/extraction
Platea.pntic.mec.es/bio/adn.pdf
jpimentel.com/ciencias_experimentales/pagwebcien
cias/pagweb/la_ciencia_a_tu_alcance_II/quimica/Exp
eriencias_quimica_extraccion_de_adn