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Turno:
Marte de 7:00am a 10:00am
ELABORADO POR:
Ronald Harol Gutirrez Teves
CUI:
20060732
Arequipa 2015
Espectrofotometria
Transmitancia y absorbancia
Cuando un rayo de luz de una determinada longitud
de onda de intensidad el incide perpendicularmente
sobre una disolucin de un compuesto qumico que
absorbe luz o cromforo, el compuesto absorber
una parte de la radiacin incidente (Io) y dejar
pasar el resto (It), de forma que se cumple:
Io = Ia + It
La Transmitancia (T) de una sustancia en solucin es la relacin entre la
cantidad de luz transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado
la muestra, It, y la cantidad de luz que incidi sobre ella, I, y se representa
normalmente en tanto por ciento:
% T = It/Ioo x 100
La Transmitancia nos da una medida fsica de la relacin de intensidad
incidente y transmitida al pasar por la muestra. La relacin entre %T y la
concentracin no es lineal, pero asume una relacin logartmica inversa.
La Absorbancia (A) es un concepto ms relacionado con la muestra puesto
que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como
el logaritmo de 1/T, en consecuencia:
A = log 1/T = -log T = -log I
Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la
Transmitancia es del 100% e indica que la muestra no absorbe a una
determinada longitud de onda, y entonces A tiene un valor de: log 1 = 0.
La cantidad de luz absorbida depender de la distancia que atraviesa la luz
a travs de la solucin del cromforo y de la concentracin de ste.
Ley de Lambert-Beer
Esta ley expresa la relacin entre absorbancia de luz monocromtica (de
longitud de onda fija) y concentracin de un cromforo en solucin:
A = log I/Io = ecl
La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a su
concentracin (a mayor nmero de molculas mayor interaccin de la luz
con ellas); tambin depende de la distancia que recorre la luz por la solucin
(a igual concentracin, cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra
ms molculas se encontrar); y, por ltimo, depende de e, una constante
de
proporcionalidad (denominada coeficiente de extincin) que es especfica de
cada cromforo. Como A es adimensional, las dimensiones de e dependen
de las de c y l. La segunda magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras
que la primera (c) se hace, siempre que sea posible, en M, con lo que las
dimensiones de e resultan ser M-1cm-1.
Determinac
in simultanea de Fierro 3+, en primer lugar y luego como presencia
negativa de Fierro 2+.
1ml de ortofenantrolina.
Dejar en reposo durante 10 minutos y efectuar la lectura de
absorbancia a la misma longitud de onda.
9.15.- Expresar los resultados en mg de Hierro /100g de muestra. Realizando
el clculo mediante la curva de calibracin, por regresin lineal y mediante
la expresin A=Ebc.
4.- OBTENCION Y PROCESEAMIENTO DE DATOS
TABLA 1: Lectura de absorbancias a 508nm.
Nombre de la
Concentracin
Absorbancia
Muestra
Blanco
0
0
Muestra
?
0.016
Estndar 1
2 ppm
0.183
Estndar 2
4 ppm
0.231
Estndar 3
6 ppm
0.392
4.1.- Conversin de unidades de ppm a mol/L. (Peso Molecular del Fierro:
55.85 g/mol.)
Para el estndar 1, concentracin 2ppm:
2ppm = 2mg/L = 0.002g/L
0.002 g /L
= 3.58x10-5 mol/L.
0.004 g / L
= 7.16x10-5 mol/L.
0.006 g / L
A
A
( a ) c= (b)
cb
b
Donde:
C = Concentracin (mol/L).
A = Absorbancia.
b = Trayecto de celda (cm).
= 10.74x10-5 mol/L.
1=
0.183
(3.58 x 10 mol/ L) x 2.54 cm
= 2012.49 L/mol cm
2 =
0.183
(7.16 x 10 mol/ L) x 2.54 cm
= 1006.25 L/mol cm
2 =
0.183
(10.74 x 10 mol /L) x 2.54 cm
= 670.83 L/mol cm
Estndar
nombre de la
muestra
Blanco
Muestra
Estndar 1
Estndar 2
Estndar 3
(ppm (mol/L)
ia
(Absortividad
)
molar especifica)
0
0
0
0
?
?
0.016
?
2
3.58x1
0.183
2012.49
ppm
0-5
4
7.16x1
0.231
1006.25
ppm
0-5
6
10.74x10
0.392
670.83
-5
ppm
Curva de calibracin:
Con los datos de la tabla 2 (Concentracin en mol/L y Absorbancia)
generamos nuestra curva.
Y = 0.016
X=
0.0179 0.0160
3419
= 5.557x10-7mol/L
(ppm)
(mol/L)
ia
(Absortividad
molar
especifica)
0
0
0
0
0.031
5.557x10
0.016
129838.1
-7
ppm
2 ppm
3.58x10-5
0.183
2012.49
4 ppm
7.16x10-5
0.231
1006.25
-5
6 ppm
10.74x10
0.392
670.83
0.031mg/ L de Fe x 100
0.31 mgFe
mgFe
=
x 100=6.2
10
5 g de Lenteja
100 g Lenteja
5.- CONCLUSIONES
Se puede afirmar que existe una relacin directamente proporcional
entre la absorbancia y la concentracin, y adems una relacin
inversamente proporcional entre la absorbancia y la Absortividad
molar especifica.
Se demostr que tanto por curva de calibracin (espectrofotmetro),
como por la Ley de Lambert y Beer se obtienen valores de
concentracin semejantes.
La concentracin de Fierro en lentejas es de aproximadamente 6
mg/100g de Lenteja. Este valor est un poco alejado del bibliogrfico
(3.5mg/100g de Lenteja), debido a inconvenientes en el
procedimiento experimental, como el exceso al agregar acetato de
sodio incluso como sal solida no contemplado en el procedimiento
experimental original.