GLUCONEOGNESIS.

DESCARBOXILACIN
OXIDATIVA DEL PIRUVATO. CICLO DE KREBS.
VA DE LAS PENTOSAS. LANZADERAS.
BALANCE ENERGTICO

Bioqumica

Gluconeognesis
Es la sntesis de glucosa a partir de grasas o protenas.
Por principio, gluconeognesis y gliclisis son vas

opuestas en el metabolismo.
Existen en la gliclisis tres etapas que por su desnivel
energtico deben sobrepasarse mediante procedimientos
alternos.
La gluconeognesis usa cuatro reacciones diferentes
para sobrepasar esas tres etapas.

Gliclisis y gluconeognesis
Hgado y rin tienen todas las enzimas

de la gluconeognesis, pero 80% se

realiza en el hgado.
La 1ra. etapa se realiza en la
mitocondria, transformando piruvato en
oxalacetato.
Las siguientes en el citosol y la ltima
en el retculo endoplasma
Para una mol de glucosa se requiere 4
ATP y 2 GTP y 2 NADH

De dnde provienen los precursores

de la gluconeognesis?
Del tejido adiposo, el glicerol

Glucosa
PEP

Oxalacetato
amino
cidos

Fumarato

amino
cidos

Alfa
cetoglutarato

Succinil
CoA

(Glicerol fosfato-DHAP-glucosa) de los triglicridos.

Del tejido muscular y los hemates, el cido lctico (cido lctico-piruvato-glucosa).
De la protena muscular, la
ala-nina que se transamina a
piru-vato.
Otros aminocidos, llamados
glucogenticos.

amino
cidos

Aminocidos
precursores
de glucosa

Enzimas de la gluconeognesis
Piruvato carboxilasa, enzima que transporta al grupo

carboxilo, mediada por la biotina

Piruvato HCO3 ATP Oxalacetat o ADP Pi

Biotina

Fosfoenolpiruvato carboxiquinasa: fuera de la mitocondria

trans-forma al oxalacetato en fosfoenolpirvico. Requiere de

GTP.

Oxalacetat o GTP Fosfoenolp iruvato GDP CO2

Fructosa difosfatasa: enzima citoslica

Fructosa1,6PP H 2O F 6P Pi
Glucosa 6 fosfatasa

Glucosa 6 fosfato + H2O Glucosa + Pi

Glucosa 6 fosfatasa
Esta reaccin sobrepasa la catalizada por la

hexoquinasa o la glucoquinasa.
La enzima est localizada en el retculo endoplasma
y tiene cinco subunidades.
G6P
Pro.Regula
T1 con Ca++ T2
G6Fos.asa

G6P

Citosol
T3

Pi + Glucosa

Luz del retculo

endoplasma

Metabolismo del piruvato

El piruvato ocupa una posicin central y fundamental

entre los metabolismos de carbohidratos, grasas y

protenas, a travs de su vinculacin con lactato,
alanina, acetil CoA y oxalacetato.
Glucosa

PIRUVATO

Lactato

Acetil CoA
CO2+H2O Ac.grasos

Aminocidos

Acetona

Alanina

Oxalacetato
Krebs

Gluconeognesis

Piruvato deshidrogenasa
La piruvato deshidrogenasa une la Gliclisis con el

Ciclo de Krebs, mediante el procedimiento de

Decarboxilacin Oxidativa, en el cual el grupo
carboxilo del piruvato es liberado como CO2 y los dos
carbonos remanentes forman acetil CoA.
CH 3 CO COOH CoA SH NAD CH 3 CO S CoA CO2 NADH H

La PDH es un complejo multienzimtico formado por

tres enzimas y cinco coenzimas.

De las coenzimas, dos de ellas CoA y NAD, se
asocian al sustrato, mientras que las otras, TPP
(pirofosfato de tiamina) , c.lipoico y FAD se asocian
al complejo.
El complejo tiene adems una quinasa y una
fosfatasa que desactivan y activan a la PDH,
respectivamente.

Complejo PDH

La Decarboxilacin es iniciada por E1 en presencia

de TPP, luego E2 en presencia de c.lipoico oxida

al compuesto y lo prepara para unirse a la CoA. El
c.lipoico es reoxidado por el FAD y E3

Enzimas y coenzimas de la
Decarboxilacin Oxidativa.
Enzimas
E1-Piruvato dehidrogenasa
E2-dihidrolipoil transacetilasa
E3-dihidrolipoil deshidrogenasa
Piruvato DH quinasa
Piruvato DH fosfatasa

Coenzimas
TPP
Ac.lipoico
CoA-SH
FAD
NAD

Participacin
Decarboxilacin
Oxidacin-Transferencia de acilo
Regeneracin de cido lipoico
Fosforilacin e inactivacin de E1
Defosforilacin y activacin de E1

AcetilCoA, NADH, ATP

(+)

Regulacin de la
actividad de la PDH

quinasa

PDH

(-)

NAD+
ADP
CoASH
Piruvato

PDH

Activa
Fosfatasa
(+)
Insulina, PEP, AMP

P
Inactiva

Otros destinos del piruvato

Transformacin

de piruvato en
reoxidacin del NADH a NAD (LDH).

lactato,

con

CH 3 CO COOH NADH H CH 3 CHOH COOH NAD

Transaminacin del piruvato a alanina (ALT).

Piruvato Glutamato alanina cetoglutar ato

Carboxilacin de piruvato a oxalacetato, paso inicial

de la neoglucognesis.

CICLO DE KREBS
IMPORTANCIA
FISIOLGICA

Mitocondrias: organelos
Organelos

del tamao de
una
bacteria
(1x2um)
especia-lizados
en
mecanismos oxida-tivos y en
sntesis de ATP.
Una clula eucariota puede
contener hasta 2000 mitocondrias, aproximadamente
25% de su volumen.
Constan de una membrana
externa, una interna y un
espacio intermembranoso.
La membrana interna tiene
el ms alto contenido
proteico que ninguna otra
membrana en la clula.

Membrana
interna

Membrana
externa

Matriz

La membrana externa se puede separar y

asislar mediante la digitonina, shock
osmtico o radiacin ultrasnica seguida
de centrifugacin en gradiente de
densidad.

Mitocondrias:membranas
Enzimas del

Diferentes tejidos tienen diferen-

te nmero y cantidad de crestas,

de acuerdo a la oxidacin.
La membrana externa tiene unas
protenas integrales llamadas
porinas ,formando poros para el
in-greso de molculas menores
de 10 000 de peso molecular.
La membrana interna es impermeable a la mayora de molculas salvo agua, O2 o CO2.
La membrana interna tiene 75%
de protenas como protenas
transportadoras, cadena respiratoria, ATP sintetasa.

ATP sintetasa

Metabolismo de
lpidos

Cadena
respiatoria
Enzimas del

Nucletido

Metabolismo

quinasas

oxidativo

Transportador

Poro

Funciones metablicas de la
mitocondria
Acil CoA

Piruvato

Urea

Acil CoA
3 CO2

Piruvato

Acetil CoA

3 CO2

B-oxidacin

HCO3+
NH3

Ciclo de la Urea

Krebs

2
Ca +

NAD
FAD

+ PP

2H2O

4e(-)
Ca2+

nH+ nH+

H+

nH+

O2

PPP
H+

PPP

Partes de la mitocondria
Membrana externa: Porosa y permeable a iones y pequeas molculas.
Membrana interna: altamente impermeable. Las molculas requieren de

transportadores proteicos. Gracias a sus pliegues aumenta su superficie.

En la membrana hay transportadores proteicos, deshidrogenasas FAD
dependientes, y todas las enzimas de la Fosforilacin Oxidativa.
Espacio intermembranoso contiene dos enzimas fundamentales : la
adenilatoquinasa y la nuclesido difosfato quinasa.

2 ADP

ATP AMP
adenilatoquinasa
XTP ADP

XDP ATP
muclesidodifosfatoquinasa
Matriz: contiene muchas enzimas, como las del Ciclo de Krebs, la

pirvico deshidrogenasa, la glutamato deshidrogenasa, y las de la b

oxidacin.

Ciclo de Krebs y los macronutrientes

CARBOHIDRATOS

PROTENAS

GLUCOSA

AMINOCIDOS

GRASAS

CIDOS GRASOS

Acetil CoA
ATP

Ciclo
de
Krebs

CO2

Ciclo de Krebs:energa
El Ciclo de Krebs es un conjunto de reacciones

qumicas que se efecta en las mitocondrias, para

catabolizar los residuos de Acetil CoA producidos en
el metabolismo de carbohidratos y grasas.
Este Ciclo libera energa que se guarda como ATP y
molculas de CO2 que se eliminan con la
respiracin.
Esas funciones se llevan a cabo en todos los tejidos
pero con ms importancia en el hgado.
Es responsable de 2/3 de la produccin calrica del
organismo.

Ciclo de Krebs: principio

general
Acetil CoA(C2)

Oxalacetato(C4)

CO2

CoA

Citrato(C6)

CO2

Ciclo de Krebs: valor calrico

Durante la oxidacin del Acetil CoA se forman

equivalentes reductores como H+ o electrones en la

matriz mitocondrial adyacente a la membrana
interna.
As, la transferencia a la cadena respiratoria que
est en la membrana mitocondrial interna se realiza
con facilidad.
Todo el proceso es
aerbico, luego sin
oxgeno se inhibe
total o parcialmente.

Piruvato

Partes del Ciclo

de Krebs

AcetilCoA

A partir de un acetil
Oxalacetato

Malato

Citrato

Isocitrato

Alfa cetoglutarato

Fumarato

Succinato

GTP

Succinato
CoA

GDP +Pi

CoA se producen dos

molculas de CO2.
Se generan cuatro
pares de hidrgenos
que son captados por
3 NAD y 1 FAD.
Adems se produce
una fosforilacin a
nivel del sustrato.

H
H-C-CO~SCoA
H

H2 O

CoA-SH

H--C--COO-

O=C--COO-

HO--C--COO-

H--C--COO-

H--C--COO-

NADH+H+

H
Oxalacetato

H
Citrato

NAD

COOHO-C--H

H--C--COO-

H--C--H

H--C--COOOH--C--COOIsocitrato H

Malato COOFumarasa

H2O

Ciclo de Krebs

NAD+

COOC--H

CO2

H--C

Fumarato
COO-

H
COO-

FADH2

H--C--H
H

H--C--H
FAD

NADH+H+

H--C--COO-

H--C--COO-

H--C--H

O=C--COO-

NAD+

H--C--H

COO-

O=C~SCoA

Succinato

GTP

Succinil CoA
GDP+Pi

cetoglutarato

CO2

NADH+H+

Ciclo de Krebs: etapas 1 y 2

1.- Condensacin inicial del Acetil CoA con el Oxalacetato con
liberacin de energa del enlace tioester por accin de la citrato
sintetasa.

AcetilCoA Oxalacetat o H 2O Citrato CoA

2.-

Conversin de citrato en isocitrato. Se forma transitoriamente cis aconitato. La realiza la enzima aconitasa.

Citrato Cis aconitato Isocitrato

H2O

H2O

Ciclo de Krebs: etapas 3 y 4

3.- Dehidrogenacin del isocitrato, formando oxalsuccinato. Existen tres
isoenzimas: la NAD especfica de las mitocondrias, y las NADP especficas de mitocondrias y citosol. La NAD especfica se acopla a la cadena
respiratoria.
Isocitrato NAD oxalsuccin ato cetoglutar ato CO2 NADH H
unido a la enzima

Esta reaccin requiere Mg++ y genera 3ATP por Mol de acetilo

4.- El alfa ceto glutarato pasa por una decarboxilacin oxidativa semejante a la del piruvato. Requiere los mismos cofactores y vitaminas tales
como, difosfato de tiamina, c.lipoico, NAD,FAD y CoA. La enzima es
la cetoglutarato dehidrogenasa y forma Succinil CoA.

cetoglutar ato NAD CoA SuccinilCo A CO2 NADH H

Esta reaccin genera 3ATP por Mol de acetilo.

Ciclo de Krebs: etapas 5 y 6

5.- La succinil CoA se convierte en succinato por accin de una
tioquinasa. En esta reaccin la energa liberada por la unin con la
CoA permite la sntesis de una mol de ATP. A nivel del sustrato.

succinilCo A Pi ADP succinato ATP CoA

6.- El succinato es metabolizado por una deshidrogenasa, unida a la

superficie interna de la membrana mitocondrial. En la nica

deshidrogenasa que transfiere hidrgeno al FAD sin pasar por el NAD.
Genera fumarato.

succinato FAD Fumarato FADH 2

Esta reaccin slo genera 2 ATP en la cadena respiratoria.

Ciclo de Krebs: etapas 7 y 8

7.- La fumarasa cataliza la incorporacin de una mol de agua para
formar malato.Se elimina la doble ligadura anterior.

fumarato H 2O malato
8.- El malato es convertido a oxalacetato por una deshidrogenasa en
presencia de NAD.

malato NAD oxalacetat o NADH H

Esta reaccin genera 3ATP por mol de acetilo, en la cadena respiratoria y proporciona el oxalacetato necesario para reiniciar el ciclo
con una molcula ms de acetil CoA.

Ciclo de Krebs : balance calrico

Se producen tres molculas
de NADH y una de FADH2 por

cada molcula de acetil CoA.

En la membrana mitocondrial
interna se recibe estos equivalentes reductores por la
cadena respiratoria.
Cada paso por la cadena
genera 3 ATP a partir del NAD
pero a partir de FAD slo 2.
Un enlace de alta energa se
genera a nivel del sustrato.
En total se forman 12 ATP por
ciclo de Krebs.

Generacin de ATP por Ciclo

Enzim a
Deshidrogenasa isoct rica
Deshidrogenasa del cet oglut arat o
Succinat o t ioquinasa
Deshidrogenasa del succinat o
Malat o deshidrogenasa
Tot al

ATP
3
3
1
2
3
12

Vitaminas en el Ciclo de Krebs

Riboflavina como FAD :

cetoglutarato

deshidrogenasa y succinato
deshidrogenasa.
Niacina como NAD: isocitrato
cetoglutarato deshidrogenasa y malato
deshidrogenasa hidrogenasa.
Tiamina como difosfato de tiamina: para
de-carboxilacin y cetoglutarato
deshidrogenasa.
cido pantotnico como Coenzima A.

Control del ciclo de Krebs

Principal funcin del ciclo de Krebs : produccin de ATP.

Una dieta promedio genera 2000 a 3000 kcal por da.

Si ello provee un 50% de generacin de ATP, se debe

pro-ducir aproximadamente 120 moles de ATP o 65 kg del

mismo.
Como el organismo slo tiene 3 a 4 g de nucletidos (ATP
ADP,AMP ) cada molcula debe ser refosforilada miles
de veces al da.
Si una clula no usa el ATP no habr ADP disponible,
luego el NADH no podr ser reoxidado y la relacin
NADH/NAD se elevar y esto detendr al ciclo de Krebs.

Accin de la relacin NADH/NAD

sobre el ciclo de Krebs
El incremento de NADH inhibe a la:
cetoglutarato deshidogenasa
citrato sintetasa
isocitrato sintetasa
piruvato deshidrogenasa.
Estas enzimas tambin se inhiben por el producto.

Aprovechamiento de los NADH en

la cadena respiratoria
El NADH producido en el citosol por efecto de la gliclisis

(gliceradehido 3P deshidrogenasa) no puede atravesar

la membrana mitocondrial.
En condiciones anaerbicas se aprovecha en la
transforma-cin de piruvato a lactato.
En condiciones aerbicas se aprovecha por la cadena
respiratoria.
El ingreso a la mitocondria est regido por un mecanismo
llamado de lanzadera de equivalentes reductores.

Va de la pentosa fosfato
No es una va esencialmente energtica.
Esta va oxida 30% de glucosa en el hgado y 10% en

el eritrocito.
Tiene dos funciones importantes: generar NADPH
para la sntesis de cidos grasos y de esteroles.
Adems provee ribosa para sntesis de cofactores
nucletidos (ej. NAD), RNA, DNA.
Genera tres molculas de CO2 y 3 pentosas las
cuales pro-ducen dos hexosas y una triosa. Dos
triosas pueden regene-rar una hexosa que se
metaboliza por la va glicoltica.
Es una va citoslica , usa NADP como receptor de H
y tiene dos fases: oxidativa (irreversible) y no oxidativa
(reversible).

Va de las pentosas: caractersticas

La va es activa en hgado, tejido adiposo, suprarrenal, tiroides,

eritrocitos, testculos y glndulas mamarias durante la lactancia.

Su actividad es baja en el msculo.
En todos los tejidos se necesita ribosa, luego el msculo puede
producirla por va inversa de la pentosas a partir de fructosa 6P.
El NADPH se utiliza:
En reaccin de biosntesis de cidos grasos, esteroides y c.

biliares.
En el eritrocito regenerar glutatin reducido y la reduccin de la
hemoglobina oxidada

Deficiencia:
De G6PD anemia hemoltica.
De transcetolasa (por falta de fosfato de tiamina)
sndrome de Wernicke-korsakoff

Fructosa
Las dietas abundantes en sacarosa incrementan los

niveles de fructosa.
La fructosa se metaboliza ms rpidamente que la
glucosa por no requerir a la fosfofructoquinasa de
control.
Favorece entonces la sntesis de c. grasos y
estimula la secrecin de insulina.
La fructoquinasa es independiente del ayuno y la
insulina por lo que la fructosa si se aprovecha en la
diabetes.
La afinidad (Km) de la fructoquinasa heptica es alta,
es decir tiene una Km baja.

Fructosa : metabolismo

Galactosa : metabolismo
Proviene de la hidrlisis de la lactosa. El hgado la

convierte en glucosa
No es esencial, la glucosa se transforma en galactosa
ATP

Galactosa

Glucgeno

Galactoquinasa

ADP Galactosa 1P

UDPGlc

Uridin transferasa
Glucosa 1P

Epimerasa
UDPGal

Glicemia

La glucosa sangunea vara entre 40 y 140 mg/dl

durante el da, dependiendo del balance entre ingresos

(alimentos) y gasto por trabajo (fsico o el del propio del
organismo).
Cuando se valora tras 8 horas nocturnas de ayuno
vara entre 60 y 110 mg/dl.
Los procedimientos de medida son corrientemente
enzimticos (glucosa oxidasa).

Glicemia : su relacin

Gliclisis
C.Krebs
V.pentosas

Glucgeno

Glucosa y Glucgeno
INSULINA
(-)

glucgeno
Glucgeno sintetasa

(-)
UDP glucosa
AMPc

Fosforilasa +
glucano transferasa

(+)

UDPg pirofosforilasa

(+)

Glucosa 1-fosfato

GLUCAGON
glucosa

Glucosa 6-P

REGULACION ENZIMATICA DE LA GLICEMIA

La regulacin de la glicemia la

llevan a cabo algunas ENZIMAS en el hgado.

El hgado es permeable a la
glucosa va el transportador
GLUT2 que tambin lo tienen
las clulas b del pncreas, el
in-testino delgado y el rin .
La hexoquinasa se autocontrola por la glucosa 6 P pero la
glucoquinasa del hgado no .
La glucoquinasa tiene menos
a-finidad (Km mayor) . Por lo
que slo se activa a alta
concentra-cin de glucosa en
sangre .

Hexoquinasa
muscular
100

50

Glucoquinasa
heptica

5 10

15

20

25

Lanzadera del glicerofosfato

Lanzadera del malato

La piruvato carboxilasa es una enzima mitocondrial, por lo

tanto el oxalacetato que se forma en la matriz mitocondrial

debe salir al citosol para continuar la gluconeognesis.
La membrana interna mitocondrial es impermeable al oxalacetato por lo que debe transformarse en malato para el
cual existe un transportador en la membrana y volverlo a
transformar en oxalacetato afuera.
Dicho mecanismo llamado lanzadera, consiste en una protena transportadora de malato y dos isoenzimas de malato
deshidrogenasa, una dentro y otra fuera de la mitocondria.

Lanzadera del malato

MITOCONDRIA

CITOSOL
Oxalacetato

Oxalacetato
NADH
Malato
deshidrogenasa
NAD
Malato

NADH

Malato
deshidrogenasa

NAD

Malato