Universidad Nacional Autnoma de

Mxico
Facultad de Qumica
Laboratorio de Qumica Orgnica
(1311)

Profesor: Jacinto Eduardo Mendoza

Prez
Semestre 2016-1

Prctica No. 7
Cromatografa en
columna.

Grupo: 25
Equipo:

Integrantes:
Galicia Galicia Carlos
Alberto. 45

Resumen.
En esta ocasin preparamos una disolucin de 30mL de AcOEt con 6g de silica
gel. Colocamos un trozo de algodn en la parte inferior de la columna y
comenzamos a agregar la slice cuidando que no se secara y que todo se fuera
sedimentando de forma regular y horizontal. Ya teniendo la columna montada
procedimos a pesar 0.05g de nuestra pldora muestra y finalmente la colocamos
en la parte superior de la columna. Fuimos extrayendo un total de 8 fracciones en
viales, cada uno contena alrededor de 6mL del extracto; todo el tiempo cuidamos
que el nivel del eluyente permaneciera constante para evitar que la slice secara.
Teniendo nuestras 8 fracciones procedimos a realizar cromatografa en capa fina
colocando una muestra del principal componente activo de nuestra muestra y 10
aplicaciones de cada una de las fracciones (Corrimos la placa en una cmara con
4mL de AcOEt), revelamos e identificamos las fracciones que contenan este
componente en mayor proporcin y puro, para finalmente destilar esas fracciones
y obtener la cantidad de componente aislado.
Antecedentes.

La cromatografa es la separacin de una mezcla de dos o ms compuestos por

distribucin diferencial entre dos fases, una estacionaria y otra mvil. Hay varios
tipos de cromatografa segn la naturaleza de las fases involucradas y si los
compuestos son retenidos en la fase estacionaria por adsorcin o particin. Segn
la naturaleza de las dos fases. Las cromatografas pueden ser: slido-lquido
(Cromatografas en columna, capa delgada y en papel).
La adsorcin es la capacidad de una sustancia slida llamada adsorbente, para
detener o concentrar selectivamente sobre su superficie inmvil o estacionaria,
gases lquidos que van en una disolucin en movimiento. Los adsorbentes deben
ser sustancias incoloras, de partcula fina, inertes con las sustancias que se trata
de separar, con los disolventes y con los eluyentes empleados.
El cociente de la distancia recorrida por cada componente entre la distancia
recorrida por el frente del disolvente, se denomina Rf=a/s y es una caracterstica
para cada sustancia e indica la movilidad en el soporte de cada sustancia. El
agente cromognico puede ser especfico para ciertos grupos funcionales.
Si los compuestos separados en una cromatografa en columna son coloreados, el
progreso de la separacin se puede monitorizar visualmente. No obstante, a
menudo los compuestos que deben ser aislados suelen ser incoloros. En este
caso, se recogen secuencialmente pequeas fracciones de eluatos en tubos
rotulados y la composicin de cada fraccin se analiza por cromatografa en capa
fina. Una vez identificadas las diferentes fracciones que contienen el mismo
producto, se renen, se elimina el disolvente y se analiza la identidad de los
componentes por mtodos espectroscpicos.
Los eluyentes ms usados(ordenados segn su polaridad creciente) son: Hexano,
ter de petrleo, ciclohexano, benceno, tolueno, tricloro etileno, ter dietlico (o
isoproplico), cloroformo, acetato de etilo, propanol-2, acetona, etanol y metanol.
Los reveladores ms comunes son luz ultravioleta, vapores de yodo, 2,4dinitrofenilhidrazina, cloruro de cobalto, sulfato de nquel en cido sulfrico 2N,
vainillina.
Los factores que influyen en una separacin por cromatografa de capa fina son la
temperatura (a menor temperatura las sustancias se adsorben ms en la fase
estacionaria), pureza de los disolventes, limpieza de las placas y que la
cromatografa se lleve a cabo en un rea sin corrientes de aire.

Resultados.

1. La revelacin de la placa en UV indica que las nicas fracciones que

contienen el principio activo (paracetamol) son las fracciones 2,3 y 4. De
ellas se obtuvo un total de 0.03g que representa un 60% del total de la
muestra.

Discusin.

La velocidad en la que el eluyente baja por la columna depende del tipo de

disolvente que se est utilizando, lo ms recomendable es que jams
quede sin disolvente la columna para evitar que se seque la slica gel y no
debes detener la extraccin de tus fracciones pues esto podra generar que
en ellas el disolvente arrastre ms de los componentes que arrastrara
usualmente al extraer de forma constante cada fraccin.
El disolvente utilizado fue trmino medio en cuanto a orden de polaridad,
esto fue as por el tipo de interacciones que tiene el disolvente con el
compuesto activo, pues sabemos que cada componente posee distintos
grupos funcionales que le dan cierta polaridad a la molcula, si una
molcula no es polar entonces el disolvente polar no ser capaz de
arrastrar dicho componente; pasa lo mismo si tenemos una muestra polar y
lo tratamos de correr en un eluyente no polar.
Si al momento de revelar tenemos una mancha uniforma con un valor de Rf
semejante, entonces se trata del mismo componente; fue as como pudimos
identificar las fracciones que contenan el componente activo.
Factores como la temperatura modifican el volumen y la masa de los
instrumentos utilizados, por ello es importante que despus de la
destilacin, los instrumentos se encuentren en equilibrio para poder
determinar la cantidad de compuesto activo.
Hacer caso de esa ltima indicacin es la diferencia para que el instrumento
de medicin te d un valor real y un valor errneo.

Conclusin.
La cromatografa en columna funciona gracias al efecto de gravedad, los factores
que intervienen prcticamente son la naturaleza de la muestra, la fase fija y el

disolvente utilizado para la fase mvil; en algunos casos la presin es importante

porque favorece la velocidad en la que la fase mvil recorre la fase fija.
La cromatografa de columna y de capa fina van de la mano pues la de capa fina
nos ayuda a distinguir cuando nuestras fracciones contienen el compuesto activo
que deseamos pues no en todos los casos se distinguen colores en la columna
que nos puedan indicar cuando termina la extraccin de un compuesto y cuando
empieza el otro.
Ambos mtodos son tiles para la separacin de componentes orgnicos en su
mayora.
Bibliografa.
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia.html