INVESTIGACION BASlCA APLICADA

Frecuencia del intercambio de cromtides hermanas

en un grupo de individuos expuestos ocupacionalmente
a los vapores de derivados del petrleo

Resumen
La frecuencia de los intercambios de cromtides hermanas (XICH) fue establecida en
156 individuos expuestos ocupacionalmente a los vapores de derivados del petrleo y
en 36 individuos ocupacionalmente no expuestos. El grupo expuesto se subdividi en
4 grupos de acuerdo con el rea de trabajo. Se encontr una XICH altamente
significativa (P<0,01) en los cuatro gruposde individuos expuestos de las reas G1, PA,
PB y LI (9,51, 9,66, 10,20 y 9,38, respectivamente), comparado con el grupo control
(7,74). Se encontr que tanto la antigedad laboral como el hbito de fumar y las
condiciones intrnsecas de cada rea de trabajo, tuvieron efecto sobre la induccin de
ICH. La edad de los individuos no influy significativamente sobre los ICH. Se encontr
una reduccin significativa (P<0,05) del ndice de cintica celular (ICC) en un grupo de
73 individuosocupacionalmenteexpuestos (ICC=2,08) con relacin al grupode individuos
control (ICC=2,37). Los resultados sugieren que la exposicin crnica y10 aguda a los
vapores de productos de derivados del petrleo inducen la formacin de ICH y podran
causar reduccin del ciclo y proliferacin celular in vitro en algunos de los individuos
expuestos ocupacionalmente a los vapores de derivados del petrleo, dependiendo de
la susceptibilidad de cada genoma expuesto.
Summary
Sister chromatid exchange frequencies (XSCE) were evaluated in 156 individuals
occupationally exposed to petroleum-vapour derivatives and in 36 non-occupationally
exposed individuals. The exposed group was subdivided into fourwith regard to the work
area. A high XSCE (P,0.01) was found in the four exposed groups, G1, PA, PB and LI
(9.51,9.66,10.20,9.38, respectivelly),compared tothecontrol group (7.74). It wasfound
that the total work-exposed time (duration of employment), smoking habits and intrinsic
work-area environment, induce SCE. Age did not affect SCE induction. A significant
reduction (P<0.05) in the celullar kinectics' index (ICK) of 73 exposed individuals
(ICK=2.08) compared to 27 control individuals (ICK=2.37) was found. The results
suggest that chronic andlor acute exposure to petroleum vapourderivatives induce SCE
and also could reduce the proliferation and reduction of the cellular cycle in vitroof come
of the occupationally exposed individuals, with regard to work-area, total work-exposure
time and smoking habits, the susceptibility depending on the degreeof radiation to which
each genome was exposed.

Facultad de Medicina, Instituto de Biotecnologa, Universidad Nacional de Colombia.

197

Biqmdica 1994;l 4:197-203

GUZMAN M.

En los humanos, la exposicin ocupacional a los

solventes orgnicos y10 productos derivados del
petrleo se haasociado con rupturasy rearreglos
cromosmicos en linfocitos de sangre perifrica
(1- 3) y la exposicin al benceno con el desarrollo
de cncer (8-lo), especialmente de leucemia
mieloideaguda(LMA) (9-11). Estudios realizados
en mdula sea de trabajadores expuestos a
benceno y de animales experimen tales han
mostrado que la exposicin aguda a este compuesto produce depresin del sistema nervioso
central, dependiente de la dosis, mientras que la
exposicincrnicapuedeconducirapancitopenia
o anemia aplstica con dosis mayores de 30 ppm
y, en algunos casos, al desarrollo de leucemia
con dosismayoresde 100 ppm (8-10). En ratones,
Maltoni etal. (11) demostraron que el benceno es
un carcingeno multipotencial y otros estudios
concluyen que son los metabolitos fenlicos de
este compuesto los responsables de los efectos
cito y genotxicos (12-14). Despus de una
apropiadaactivacinmetablicainvitro, el benceno
causa aumento del intercambio de cromtides
hermanas (ICH) y retraso de la divisin celular de
linfocitos humanos en cultivo (12, 15). Tambin,
el benceno inhibe la proliferacin celular de la
mdula sea de ratones expuestos por inhalacin a este compuesto (16). Los informes sobre
lainduccinde ICHen linfocitosdesangrepeifrica
por la exposicin de humanos al benceno o a
otros solventes orgnicos son escasos y contradictorios. Salamanca, Gmez etal. (17) y Exeron
et al. (18) encontraron diferencias significativas
en lafrecuenciadeICH, en un grupodeinhaladores
de pegantes a base de benceno y en trabajadores ocupacionalmente expuestos a este compuesto, respectivamente. Otros estudios no informan diferenciassignificativas(19-23). Portanto,
un punto de inters sigue siendo si estos
compuestossonmutagnicosy/o carcinognicos
en trabajadores expuestos ocupacionalmente
dentro de las concentraciones limites tcnicamente aceptadas (8, 24).
En el presente trabajo se evalu el efecto de la
exposicin ocupacional a los vapores de compuestos derivados del petrleo utilizando la prueba de ICH (25) considerada como una prueba

sensible para detectar mutgenos carcingenos

ambientales (26) y para el estudio de la cintica
celular (12, 15, 27).
Materiales y mtodos
Muestra de estudio: se analizaron 156 trabajadores expuestos a vapores de productos derivados
del petrleo. En la tabla 1 se presenta la distribucin de estos individuos en cuanto al rea de
trabajo y se relaciona con la edad, la antigedad
laboral y el hbito de fumar. Se presenta la
informacin del grupo control (individuos no expuestos ocupacionalmente). Todos los trabajadores realizan rotacionesperidicasdentro de su
misma rea de trabajo. El espacio de trabajo es
abierto en las reas G1, PA y PB y cerrado en LI.
Las plantas funcionan con un sistemacerrado de
tubera y el riesgo de exposicin se presenta por
los empaques de las vlvulas y en la toma de
muestras. En general, los trabajadores utilizan
proteccin con filtros, mscaras y guantes. No se
dispuso de informacin sobre valoraciones atmosfricas de los compuestos. Las muestras de
sangre perifrica se mantuvieron a 4C y se
cultivaron dentro de las primeras 24 horas.
Tcnica de ICH
El anlisis cromosmico se realiz sobre cultivos
de sangre perifrica (28). En resumen, se utilizaron 0,25 ml de sangre venosa heparinizada y se
cultivaron durante 72 h a 37C en 5 ml de medio
de cultivo RPMl 1640 (Sigma) con antibiticos
Tabla 1. Muestra de estudio. Distribucin por rea de trabajo. edad, antigedad, hbito de fumar.
G1

PA

PB

Ll

GC

Nmerode individuos

47

35

39

35

Edad promedio (aos)

38

34

34

33

33

Rango de edad (aos)

: 25-63

23-46

23-47

24-49

24-46

Antigedadpmmedio

: 13.5

10.0

11.0

11.0

1-18

1-19

1-26

7
8
10
:
12
: 1.410 1192 1.143 1.258

1.045

Rangoantigedad (anos):
lndividuosfumadores
Clulas analizadas

36

1-31

GI: planta de refinacin de matetias primas (produccin de nana)

PA: planta de aromticos (produccin de hidracatburas aromticos)
PE: planta de balance (produccin de gas metano y coke)
LI: laboratorio industal (control de calidad)
GC: gnipo control (individuos no expuestos ocupacionalmente)

INTERCAMBIO DE CROMATIOES HERMANAS

Biorndica 1994:14:197-203

(50 pg de penicilina y 50 ml de estreptomicina),

suplementado con 10% de suero bovino fetal y
0,1%defitohemaglutinina P (Gipco). Durante las
ltimas48 h decultivo, se adicionaron 4 pglml de
5-bromo-2-deoxiuridina(Sigma)y se mantuvieron
en laoscuridad. ~eadicion&,l pglml decolcemid
(Sigma) 20 minutos antes de la recoleccin. Se
utiliz KCL (0,075 M) como solucin y como
fijador se utiliz metanol: cido actico (3:l). Las
extensiones se secaron al aire y se procesaron
para la visualizacin de ICH siguiendo la tcnica
de fluorescencia ms giemsa (FPG) (27).
Anlisis estadstico
1. Frecuencia del intercambio de cromtides
hermanas (XICH). Para cada individuo se
obtuvo unaXlCH sobre30 metafasesanalizadas en segunda divisin celular. Sedetermin
la XlCH de cada grupo de individuos expuestos (Gl, PA, PB, Ll) y del grupo control (GC).
Se realizaron tres tipos de anlisis teniendo
en cuentalaantigedad, laedad y el hbitode
fumar. En el primero, el grupo de individuos
de cada rea de trabajo G1, PA, PB y LI se
subdividi arbitrariamente en dos de acuerdo
con la antigedad: entre 1 a 10 aos y ms de
11 aos. En el segundo, el grupo de individuos de cada rea de trabajo G1, PA, PB y LI
se subdividi en dos de acuerdo con la edad:
menores de 35 aos y mayores de 36 aos.
En el tercer anlisis, se compararon los indi-

viduos fumadores y no fumadores de los

grupos de individuos ocupacionalmente expuestos y del grupo control. Los anlisis estadsticos se realizaron con un anlisis de varianza
de una cola y la prueba de Fisher (F-test).
~

2. lndice de cintica celular. La cintica celular

se analiz en 36 individuos del grupo expuesto (PA), 37 individuos del grupo expuesto (Ll)
y 27 individuos del grupo control (GC). Se
analizaron 80 clulas por individuo y se catalogaron como clulas de primera, segunda y
tercera o ms generaciones dependiendo de
latincindiferencialde loscromosomas,tincin
homognea, tincin en arlequn y tincin
asimtrica, respectivamente.Seestableci el
porcentaje de clulas en cada divisin celular
y se determin el ndice de cintica celular
(ICC = 1xM1+2xM2+3xM3/M1 +M2+M3) (22).
Para el anlisis estadstico se utiliz la prueba
de t Student.
Resultados
En la figura 1 (b) se muestran los ICH en la clula
de segunda divisin cuyos cromosomas tienen
cromtides con tincin en arlequn, blanco y
negro. Los ICH se observan en los sitios de
cambio de coloracin dentro de un mismo
cromosoma. En la tabla 2 se muestra la XICH de
cada grupo expuesto y del grupo control. En los
grupos G1, PA, PB, LI y GCse encontraron XlCH

Tabla 2. Frecuencia de ICH en los grupos expuestos y grupo control. ICH con relacin a la antigedad.

F
Gruoo

No. cel.

G1= planta refinacin

PA= planta aromticos
BP= planta balance
LI= laboratorio industrial
C= grupo control
()nmero de individuos

Ind.

ICH

SD

Antigedad labora
4 0 years>
10 years
ICHIcel i SD
ICHIcel + SD

cel. clulas
Ind. individuos
F= prueba de Fisher
SD= desviacion estndar; ns= no significativo
"=(P<0,05)

GUZMAN M.

Biorndica 1994:14:197-203

de 9,51, 9,66, 10,20, 9,38 y 7,74, respectiva- En el grupo PA, los 25 individuos no fumadores
mente.Se encontraron diferencias altamente sig- presentaron una XlCH levemente aumentada
nificativas (P<0,01) en la comparacin de cada (9,69) sobre los 10 individuos fumadores (9,58).
grupo expuesto con el grupo control. En la tabla Sin embargo, en estos casos particulares no se
2 tambin se muestra la XlCH de cada grupo realizaron pruebas de significancia. Los 7 fumaexpuesto con relacin a la antigedad laboral, dores del grupo PB (11,18) presentaron la XlCH
individuos con menos o ms de 10 aos labora- ms alta de todos los grupos de fumadores
les. La comparacin de XlCH dentro de cada analizados. En la figura 1 (a, b, c) se muestra
grupo expuesto (G1 = 9,07 vs 9,87; PA = 9,11 vs cromosomas de clulas de primera, segunda y
10,23; PB = 10,60 vs 9,69) mostr diferencias tercera divisin celular, respectivamente. La clasignificativas(P<0,05) mientras que las XlCH del sificacin de las divisiones celulares se realiz
grupo LI no se afectaron significativamente por la por la tincin tpica de los cromosomas en cada
antigedad (LI = 9,26 vs 9,48). La edad de los una de ellos. En la tabla 4 se muestran los
individuos expuestos y controles, menores y resultados del anlisis de la cintica celular. En
mayoresde 35 aos, no influysignificativamente el grupo de 73 individuos expuestos (PA+LI) el
la XlCH (los resultados no se presentan). En la ICC fue de 2,08 y en el grupo 27 controles fue de
tabla 3 se muestra la XlCH con relacin al hbito 2,37, mostrandodiferenciassignificativas(P<0,05).
de fumar, fumadores y no fumadores, de cada La comparacin entre individuos expuestos y
grupo expuesto (G1 = 9,71 vs 9,44; PA = 9,58 vs controles, de los porcentajes de clulas en pri9,69; PB = 11,18 vs 9,99 y LI = 9,74 vs 9,28) del mera generacin (34,24% vs 15,38%) y terceras
grupo total de individuosexpuestos (GTE = 10,05 generaciones (28,53% vs 53,20%), mostr difevs 9,60) y del grupo control (GC = 9,60 vs 7,64). rencias altamente significativas (P<0,01). La
Se encontr un aumento altamente significativo comparacin de los porcentajes de clulas en
(P<O,Ol) de losfumadoresvs no fumadorestanto segundageneracin (34,66%vs 31,26%) mostr
en los grupos expuestos como en el grupo con- diferencias significativas (P<0,05).
trol. La XlCH de fumadores del grupo control
(9,60) tiende a ser mayor que la XlCH de los Discusin
grupos expuestos no fumadores G1 (9,44) y LI En el presente estudio se encontr que los cuatro
(9,28) y similar a la del grupo PA, tanto de grupos de individuos expuestos ocupaciofumadores (9,58) como de no fumadores (9,69). nalmentea losvaporesde productosderivados del
Tabla 3. Frec~enc
a na C d i!fl lod VidJos CXpJesiOs y
trol con ic dciGii al Iiauiiu de f.mar
Grupo fumador
ICHICEL + SD

INO

Nofumador

ICHICEL+SO

IND

culi-

FISHERS'
TEST

Tabla 4. r i d cc occ neiica c c , l ~

ar !lCC) y porccii!dlcsccl. ares en el g l ~ p u
cx~)-esioy CO~IIIUI
Grupo CELL

IND

ICC

tstudent

5.000

(73)

2.08

2,300

(27)

2.37

PA+Ll
C

PA+LI= planta aromticos

Y&TD

34.24

34.66

28.53

31.26 53.20

+ laboratorio industrial

Ind= individuos
*= P<O,OSO

grupo total de expuestos

%CSD

15.83

C= grupo control

TE=

%PO

ICC= ndice de cintica celular

IND= individuos

CPD= clulas de primera divisin

SD=

desviacin ectndar

CSD= clulas de segunda divisin

**=

(P<O,Ol)

CTD= clulas de tercera divisin

Biomdica 1994:14:197-203

INTERCAMBIO DE CROMATIDES HERMANAS

ClNETlCA CELULAR

1WivisiQn celular
A

2Wdiviin celular
B

3Vivisin celular
C

Fiaura 1. Cintica celular: ai crornosomas con tincin homoanea Drovenientes de clulas en orimera divisin:. b\,
cr~mosomascontincin simiricaen arlequn provenientes declulas en segunda divisin. d as flechas sealan intercambio
de cromtides hermanas (ICH); c) cromosomas con tincin asimtrica provenientes de clulas en tercera divisin.

petrleo, G1, PA, PB y LI, presentaron una XICH

de 9,51, 9,66, 10,20 y 9,38, respectivamente,
significativamentems alta (P<0,01) que el grupo
control de individuos no expuestos ocupacionalmente (7,74). Se encontr un efecto de la
antigedad laboral en las XICH. Las XICH de los
grupos G1, PA y LI estn afectadas por los
individuos con ms de 10 aos de antigedad
(9,87,10,23y 9,48) respectivamente. Es impofiante resaltar que los individuos PA tienen un alto
riesgo de exposicin a los hidrocarburos aromticos incluido el benceno. Sin embargo, dada la
metodologa utilizada no se puede establecer una
correlacin directa con un compuesto especfico.
En el rea PB, se utilizan fondos de vaco para la
produccin de gases metano, propano y tambin
coke. En esta planta, los individuos pueden estar
expuestos tambin a metales pesados y otros
compuestos. La XICH en la planta PB fue alta
(10,20) y se afect principalmente por los
individuos con menos de 10 aos de antigedad
(10,60) sobre los de individuos de ms de 10 aos
(9,69). Estos resultados sugieren que en el rea
PB los individuos con menos de 10 aos de
antigedad podran estar expuestos a concentraciones ms altas de algunos compuestos, o

expuestos a un mayor riesgo de exposiciones

agudas. Se hainformado que los metales pesados
podran ser causa de mayor frecuencia de
aberraciones cromosmicas (29). De otra parte,
podraserque los7fumadoresdel grupo PB (XICH
= 11,08), pertenezcan al grupo de individuos con
menos de 10 aos de antigedad laboral. Al igual
que en otros reportes de la literatura (29-31) se
encontr que el cigarrillo es un inductor de ICH. El
conjunto de fumadores del grupo de individuos
expuestos (10,05) y del grupo control (9,60)
presentaron aumento altamente significativo
(P<0,01) de la XICH. Sin embargo, en el rea de
trabajo PA no se encontraron diferencias
significativas entre 10 individuosfumadores (9,58)
y 25 individuos no fumadores (9,69). Es decir, que
en algunos individuos las XICH altas podran
deberse al efecto de un conjunto complejo de
factores, sin efectos importantes del cigarrillo,
mientrasque en otros individuoselcigarrillo podra
actuar sinergsticamente como lo plantea Skyberg
etal. (24). Sin embargo, no se realiz un anlisis
de multivarianzaparaestablecer la estrictadependencia de cada variable sobre la XICH. Es
interesante anotarque entre el 66% y el 75% de los
ICH se localizan en los mismos puntos cromos-

GUZMAN M.

micos de algunos sitios frgiles (31,32) y algunos

sitios frgiles podran ser base de rupturas y
rearreglos cromosmicos (32 - 35). De otra parte,
no se encontr efecto de la edad sobre la XICH, al
compararen cadagrupomayoresy menoresde35
aos. En la literatura los informes sobre el efecto
de la edad como inductor de ICH son contradictorios (30,36). El rango de XICH dentrode cada
grupo expuesto y control, mostr amplias
diferencias interindividuales (6,21 a 16,74 y 5,78 a
113). Es decir que, adems de la influenciade los
factores medioambientales, se debe tener en
cuenta que hay susceptibilidades genmicas
diferentes al estrs medioambiental, (34). El
anlisis de cintica celular mostr una reduccin
significativa (P<0,05) cuandose compar el grupo
de individuos expuestos (ICC= 2,08) con el grupo
control (ICC=2,37). Se encontraron diferencias
altamente significativas (P<0,01) en la comparacin del porcentaje de clulas en primera,
segunda y tercera o ms generaciones. En el
grupo control el porcentaje de clulas fue 15,85%,
31,26% y 53,20% para primeras, segundas y
terceras o ms generaciones y en el grupo
expuesto la progresin fue lineal para primeras y
segundas generaciones con disminucin de
terceras generaciones (34,24%; 34,66%; 28,53%)
respectivamente. Los resultados indican que el
tiempodel ciclo celulares ms largo en el grupo de
individuos expuestos, con reduccin de la
proliferacin celular para el mismo tiempo de
cultivo que el grupo control. Algunos trabajos
muestran evidencias de la accin especfica del
benceno sobre la cintica celular, ya por retraso
del ciclo celular por exposicin al benceno in vitro
(12, 15, 18) o por cambios en la cintica celular en
individuos ocupacionalmenteexpuestos (14,24) o
reduccin de la proliferacin celular en ratones
expuestos (11, 1.6). Otros au-tores no encuentran
diferencias significativas (21-23). Los resultados
sobre la cintica celular son importantes puesto
que se sabe que algunos individuos expuestos
crnicamente al benceno pueden desarrollar
anemia aplstica o pancitopeniacon disminucin
general de las lneas celulares hematopoyticas y
con un alto riesgo de desarrollar LMA (8, 10, 11).
Sin embargo, en el presente trabajo no se tiene
certeza sobre si los resultados de la cintica
celular reflejan el efecto exclusivo de la exposicin

Biomdica 1994:14:197-203

al benceno o a un conjunto de compuestos pues

no todos los individuos estn expuestos directamente al benceno, no todos mostraron alteracin
de la proliferacin celular. En conclusin, el conjunto de resultados sobre la XICH y la cintica
celular refleja el efecto sobre los cromosomas de
laaccin continua, crnicade posibles mutgenos
carcingenos ambientales derivados del petrleo, los cuales pueden alterar las caractersticas
normales de la estructura y10 funcionamiento de
los cromosomas y la posible alteracin del
funcionamiento celular.

Agradecimientos
Agradezco a Ecopetrol y sus trabajadores; y la
colaboracin tcnica de Miriam Leivobici y Olga
Moreno, de la Seccin de Gentica g de a
Universidad Nacional.

Referencias
1. Forni A, Pacfico E, Limonta A. Chromosome studies
in workers exposed to benzene or toluene or both. Ach
Env Health 1971; 22:373.
2. Bauchinger M, Schmid E, Oresp J, etal. Chromocome
changes in iymphocytes after occupational exposure to
toiuene. Mutat Res 1982: 102:83.
3. Yarlev-Jones A. Anderson D. Lovell D. Jenkinson P.
Analyssotchrornosorna abcrraiions nnordarsexposcd
10 IOW
Ievel ~~IIZCIIC.
Br na Meo 1990. 47 48
~

4 Yin S. Li G, Tain F. etal. -e-Kem a n hervcnc workcrs:

a retrospectivecotiuii siduy. Br Ind Me0 1987.44 124.
5. Wong O. An industry wide moriaiity study of chemical
workers occupationally exposed to benzene l. General
results. Br J Ind Med 1987; 44:365.
6. Aksoy M, Ozeris S, Sabuncu H, et al. Exposure to
benzene in Turkey between 1983 and 1985; a
haematologicalstudy of231 workers. BrJ Ind Med 1987;
44:785.
7. Wongsrichanalai Ch, Delzell E, Cole P. Mortality from
leukemiaandotherdiseasesamongwo&enatapetroleum
refinery. J Occ Med 1989; 31:106.
8. Golstein B. Benzene toxicity. J Occ Med 1988; 3:541
9. Health and Safety Executive. Benzene Toxicity Review
1982; 4:l.
10. Rosen M, Snyder R. Protacted exposure to C57BU6
miceto300ppm benrenedepressed BandTiymphocyte
numben and mitogen responses. Evidence for thymic
and bone rnarrow proiiferations in response to the
exposure.Toxicology 1985; 37:13.
11. Maltoni C, Conti 8, Cotti G, Belpoggi F. Experimental
studiesonbenzenecarcinogenicityattheBologna lnstitute

Biomdica 1994;14:197-203
of Oncology: current results and the ongoing research.
Am J Ind Med 1985; 7:415.
12. MorimotoK.WolfS.lncreasedsisterchromatidexchanaes
"
and petturbations of cell division kinetics in human
lymphocyies by benzene metabolites. Cancer Res 1980;
13. Witz G, Gad S, Tice R, et a l . Genetic toxicity of the
benzene metabolite trans, trans-muconalde-hyde in
mammalian and bacteria1cells. Mut Res 1990; 240:295.
14. Eastmond D, Smith M, lrons R. An interaction of
benzene metabolites reproduces the myelotoxicity
observed with benzene exposure. Toxicol and Applie
Pharmacol 1987; 91:85.
15. Morimoto K. lnduction of sister chromatid exchanges
andcellcycledelay in human lymphocyiesbymicrosomal
activation of benzene. Cancer Res 1983; 43:1330.
16. Tice R, Costa D, Drew R. Cytogenetic effectsof inhaled
benzene in rnurine bone marrow: lnduction of sister
chromni dexchanges.chromosomeaoerraiOnandcellJ ar
proliIc1~11011
IIIIIU
IIUIIII UB&? ~ i i i c cPrtx:Niil A<:ricl Si'i
USA 1980; 77:2148.
17. Salamanca F, Moreta G, Palma V, etal. Cytogenetic
study in children chronically habituated to inhalation of
volatile substances. Arn J Med Genet 1987; 27:391
18. Erexson G. Wilmer J.. Kliaerrnan A. Sister chromatid
exchange induction in human lymphocytes exposed to
benzene and its metabolites in vitro. Cancer Res 1985;
452471.

INTERCAMBIO DE CROMATIDES HERMANAS

to benzene, trichloroethylene, or tetrachloroethylene,
with reference to smoking habits. Int Arch Env Health
1990; 62:171.
24. Skyberg K, Hansteen 1, Jelmeri O, Ronneberg A. A
cytogeneticandhaematologicalinvestigationofoilexposed
workers in a Norwegian cable manufacturing company.
Br J Ind Med 1989; 46:791
25. Perry P, Wolf S. New giemsa method for differential
staining of sister chromatids. Nature 1974; 251:156.
26. Perry P, Evans H. Cytological detection of mutagencarcinogen exposure by sister chromatid exchange.
Nature 1975; 258:121.
27. Tice R, Schneider S, Rary J. The utilization of
bromodeoxiuridineincorporationinto DNAfortheanalysis
of cellular kinetics. Exp Cell Res 1976; 102:232.
28. Moorhead P, Novweel P,Mellam W, etal.Chromosome
preparationsofleukocytesculturesfromperipheralblood.
Exp Cell Res 1960; 20:613.
2% HednerK, Hogster B. Kolning A, ctal. Sasicrcnromaia
exchanaes a11u s t r ~ c i ~ raocrrai
a
ons n re a l on io 91
smoking individuals. Hereditas 1983; 98:77.
30. HussumB,WulfC,NeibuthrE.Sisterchromatidexchange
frequency correlates with age, sex and cigarrette smoking in a 5 year material of 553 healthy adults. Hereditas
1986; 105:17.
31. Kao-Shan C, Fina R, Whang-Peng J, etal. lncreased
f r a ~ i l esites and sister chromatid exchanqes in bone
marrowandperipheralbloodofyoungcigarre~esmokers.
Cancer Res 1987; 47:6.278.

19. Watanabe T, Endo A, Kato Y, et al. Cyiogenetics and

citokineticsofculturedlymphocyiesfrombenzene-exposed
workers. Ind Arch Occup Env Health 1980; 46:311.

32. GloverT,SteinC.lnductionofsisterchromatidexchanges
atcommon fragile sites. Am J Hum Genet 1987; 41:882.

20. Sarto F, Cominato 1, Pinton A, e t al. A cytogenetic

study on workers exposed to low concentrations of
benzene. Carcinogenesis 1984; 5:827.

33. Yunis J, Soreng L, Bowe A. Fragile sites are targets of

diverse mutagens and carcinogens. Oncogene 1987;
159.

21. Clare G, Yarley A, Mclean A, Dean B. Chromosome

analysis from peripheral blood lymphocyies of workers
after acute exposure to benzene. Br J Ind Med 1984;
41 249.

34. Hetch F.Thefragile hypothesisof cancer. CancerGenet

and Cytogenet 1988; 31:119.

22 Yarley A, Anderson D. Jenkinson P. etal. Genotoxic

cllccis in pcriphcral n non ann irine nfworkcrs exposcu
in low cvol ocn,ciic Hr nd Med 1988: 4S:694.
23 Seiji K, Jin Ch. Watanabe T. et al. S sicr zlirulriai u
exchangcs inpcr pncrai lynipnocyiesol wornersexposeo

35. Hetch F. Fragilesites, cancerchromosome breakpoints,

and oncogenes al1 clustering light G bands. Cancer
Genet, and Cytogenet 1988; 31:17.
36. Wasvick H, Magnus P, Berg K. Effects of age, sex and
genes on sister chromatid exchange. Clin Gene 1981;
20:449.