UNIVERSIDAD NACIONAL DE LUJAN

TRABAJO
PRACTICO N6
Almidn: Hidrlisis enzimtica
QUIMICA 3. Ing. Agronmica

Delorenzi, Juan Ignacio.

Mc dermott, Toms.

TRABAJO PRCTICO N6
ALMIDN: Hidrlisis enzimtica

OBJETIVOS: Realizar reacciones colorimtricas para hidratos de carbono.

Calcular el porcentaje de hidrlisis de una muestra de almidn.

MATERIALES Y METODOS: Se utilizaron los explicitos en la gua de TPs.

PROCEDIMIENTO:

1- Hidrlisis del almidn:

Se prepararon los tubos tal y como lo indica la gua de trabajos prcticos,
y se utilizaron 2 de los mismos para realizar la reaccin de Lugol
(cualitativa). Se incubaron a las muestras (almidn + glucosamilasa) y los
controles en bao a 37 y se teste uno de cada uno cada 5 minutos con
solucin iodo-ioduro hasta observar la coloracin adecuada (amarillonaranja).
2- Determinacin de azucares reductores mediante la reaccin de
Somogyi- Nelson:
De los tubos preparados en la etapa 1, se tomaron 2 (un control y una
muestra) y se las someti a un tratamiento para medir la absorbancia de
la misma en el espectrofotmetro.
Para poder interpolar la absorbancia de la muestra, y calcular su
respectiva concentracin fue necesario realizar una curva de calibracin
con concentraciones conocidas de glucosa (sol 1mg/ml)
A todos los tubos, tanto los de la muestra y control, como a los de la curva
de calibracin se les hizo reaccionar de la misma forma con reactivo de
Somogyi, agua, y reactivo de Nelson; sometindolos entre reactivo y
reactivo 10 min a ebullicin.

RESULTADOS: Los resultados obtenidos fueron los siguientes.

Concentraci Absorban
n
cia
0

0,2

0,285

0,2

0,289

0,4

0,529

0,4

0,517

0,6

0,8

0,6

0,76

0,8

1,085

0,8

1,06

1,322

1,375

Curva de Calibracin
1.6
1.4
f(x) = 1.34x
R = 1

1.2
1
Absorbancia ( 540 nm)

Absorbancia

0.8

Linear (Absorbancia)

0.6
0.4
0.2
0
0

Concentracin (mg/mL)

Una vez realizada la curva de calibracin se interpolaron los datos obtenidos en las
muestras de la siguiente forma:

Concentracin

Absorbancia
0

0
0,046
0,029
0,285
0,289
0,529
0,517
0,8
0,76
0,756
0,816
1,085
1,06
1,322
1,375

C1
C1
0,2
0,2
0,4
0,4
0,6
0,6
M1
M1
0,8
0,8
1
1

Curva de Calibracin (con muestra)

1.6
1.4
1.2
1
Absorbancia ( 540 nm)

Absorbancia

0.8

Linear (Absorbancia)

0.6
0.4
0.2
0
0

Concentracin (mg/mL)

Con la ecuacin de la recta y=1,3369x pudimos conocer los datos de concentracin de

la muestra interpolando en la recta los datos de absorbancia (restando los datos del
control). Los clculos realizados fueron los siguientes:
Muestra 1- 0,756 0,046= 1,339x

x= 0,53

Muestra 1- 0,816 0,029= 1,339x

x= 0,588

Promedio de las concentraciones= 0,56 mg/ml.

Teniendo el dato de la concentracin de glucosa y almidn es posible calcular el

porcentaje de hidrlisis de la siguiente forma:

mg
Glucosa x 10 x 2
ml
de Hidrolisis=
x 100
mg
Almidn
ml

*x2 y x10 por las

correspondientes diluciones realizadas.

% de Hidrlisis

/(10 mg /ml) x 100

% de Hidrlisis= 11,2