Conocimiento y manejo del espectrofotmetro

Knowledge and use of Spectrophotometer

Carrillo Briones Alberto; Crdenas Espaa Diego Armado ; Meja Velzquez Yaena, ;
Prez Mndez Rigoberto, Jazmn

RESUMEN.
En esta prctica se realiz el manejo de diferentes espectrofotmetros; anlogos visibles y digitales, para la
realizacin de identificacin y cuantificacin de diversas sustancias, en este caso se utiliz como muestra
problema CuSO4 y muestra patrn H2O. La espectroscopia de absorcin de basa en ver las longitudes de
onda particulares de la luz que se absorben por molculas que estn en la trayectoria del haz. Por otra parte se
tom lectura de diferentes longitudes de onda, as como su absorbancia y transmitancia, finalizando con la
comparacin de los datos con los diferentes espectrofotmetros.

Palabras claves: espectrofotmetro, espectroscopia, muestra problema.

INTRODUCCION:

Las espectroscopias pticas estn entre los

mtodos fsicos ms usados en investigacin
de
estructuras
moleculares,
anlisis
cuantitativo y cualitativo. Una gran ventaja de
los mtodos es que no son destructivos por
ello nos permite estudiar estructuras qumicas
y biolgicas en condiciones iguales o
cercanas a las condiciones naturales, adems
nos permite trabajar con cantidades
sumamente pequeas.
La Espectrofotometra es una de las tcnicas
experimentales ms utilizadas para la
deteccin especfica de molculas. Se
caracteriza por su precisin, sensibilidad y su
aplicabilidad a molculas de distinta
naturaleza (contaminantes, biomolculas, etc)
y estado de agregacin (slido, lquido, gas).
Los fundamentos fsico-qumicos de la
espectrofotometra
son
relativamente
sencillos. Las molculas pueden absorber
energa luminosa y almacenarla en forma de

energa interna. Esto permite que se inicien

ciclos vitales de muchos organismos, entre
ellos el de la fotosntesis en plantas y
bacterias. La Mecnica Cuntica nos dice que
la luz est compuesta de fotones cada uno de
los cules tiene una energa:
Efotn = h = hc/
La espectroscopia de absorcin se basa en las
longitudes de onda particulares de la luz que
se observan por molculas que estn en la
trayectoria de haz. Los primeros instrumentos
espectroscpicos fueron diseas para la
regin visible y en consecuencia recibieron la
denominacin de instrumentos pticos.
Los espectros de absorcin se miden
mediante un instrumento denominado
espectrmetro. Los instrumentos que vamos a
usar en esta prctica constan de una fuente de
luz blanca caracterizada por un espectro de
emisin continuo en un intervalo amplio de
longitudes de onda (en nuestro caso 325 nm900 nm) y de un monocromador que acta
como filtro ptico transmitiendo un haz de

luz de longitud de onda fija e intensidad I0.

Este haz de luz penetra en la cubeta de
anlisis donde se encuentra la muestra. Un
detector sensible a la luz mide la intensidad
del haz a la salida.

METODOLOGA Y MATERIA.

4.- se ajust a cero la transmitacia con la perilla

introduciendo una porta cubetas con agua
destilada (blanco).

5.- se retir el blanco y se introdujo la celda con

CuSO4 al 0.1 N. (hacer la lectura con 0.05 y x
repitiendo los pasos anteriores).

1.- Se utilizaron tres soluciones de CuSO4 al

0.1N, 0.05 N y una solucin desconocida para
conocer su absorbancia

2.- previo se encendi el espectrmetro y se

calent por 20 minutos hasta obtener un haz de luz
constante

3.- se seleccion una longitud de onda de 540nm.

6.- se tom lectura de absorbancia y transmitancia,

despus se cas la muestra del contenedor y se
volvi a repetir los pasos para las siguientes
pruebas. La longitud de onda fue de 550 y 560

RESULTADOS Y DISCUSIONES.

En la prctica realizada se demostr que la

absorbancia y la concentracin son
directamente proporcionales. Tambin se
comprob en base a los resultados obtenidos,
que para una sustancia
(en trmino de
concentraciones molares), a medida que una
disolucin se encuentra ms diluida, es decir,
est a menor concentracin la Absorbancia es
menos, en otras palabras a mayor
concentracin de una disolucin mayor es
la Absorbancia.
As mismo el conocer el adecuado uso del
espectrofotmetro permiti obtener en el
laboratorio
resultados con una calidad
analtica en las mediciones que son emitidas
por ste. Se identific que el equipo presenta
una adecuada precisin y exactitud
determinando que las mediciones realizadas
en este pueden ser confiables.

Espectrofotmetro anlogo visible CuSO4

Onda 540

Onda
560

Debido a que el sulfato de cobre presenta una

rango de 550 en el espectrofotmetro, se
puedo cuantificar su absorbancia y su
transmitancia en un rango emitido de 540 a
560 y as poder comparar los datos en la
grfica y concentraciones fueron de 0.1 N Y
0.05 N, estos datos arrojaron una
significativa diferencia debido a sus
diferentes concentraciones.

0.1 M sulfato de
cobre
0.1 absorbancia
98 transmitancia
0.5 absorbancia
89 transmitancia
0.05 M sulfato de
cobre
0.05 absorbancia
99 transmitancia

0.05 M
0.05 absorvancia
99 transmitancia
0.01 M
0.01 absorvancia
0.02 98 transmitancia
Desconocido
0.6 absorvancia
87 transmitancia

Espectrofotmetro elctrico (digital )

Onda
CONCLUSIONES.
Con los resultados obtenidos en el anlisis de
los dos espectrofotmetros que son el anlogo
visible y el electrnico hubo una variacin
debida que el electrnico arrojo los valores
ms precisos en comparacin del manual
porque a hay una interferencia con el entorno
y a la hora de tomar la lectura.

550

Desconocido
78.5 transmitancia
- 0.075 absorvancia
0.1M
- 0.168 absorvancia
96.8 transmitancia
0.05 M
- 0.156 absorvancia
96.2 transmitancia

Onda
540

0.05 M
0 absorbancia
100 transmitancia
0.1 M
0.05 absorbancia
99 transmitancia
Desconocido
0.4 absorbancia
91 transmitancia

Bibliografa
Materiales (espectrofotometra)
http://materias.fi.uba.ar/6305/downlo
ad/Espectrofotometria.pdf

ms conce

Bioqumica espectrofotometra
Laboratorio. 2010.
http://www.bioquimica.dogsleep.net/
Laboratorio/Plummer/Chp04.pdf
Qumica Analtica Cuantitativa, Day
and Underwood. Qumica Analtica,
Skoog
and
West.
Anlisis
Instrumental, Douglas R. Skoog and
Donald M. West.
Quimica II . 2010
Espectrofotometria
file:///C:/Users/pedro/Downloads/Gui
a_TP_2_Quimica_II_2010.pdf