MARCO TEORICO

El sistema ms importante para la identificacin de microorganismos es

observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas
en el laboratorio, a este material se le llama medio de cultivo. Un medio de
cultivo esta constituido por una mezcla de diversos nutrientes que en
concentraciones adecuadas permite el crecimiento de microorganismos,
bajo determinadas condiciones fsico-qumicas. Dichos medios de cultivo
tienen una composicin qumica variada, pero de manera general, todos
ellos contienen una fuente de energa (compuesto orgnico o inorgnico)
una fuente carbonada, sales minerales, vitaminas y agua.
Para que los microorganismos crezcan adecuadamente en un medio de
cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como: temperatura,
grado de humedad y presin de oxigeno adecuada, as como un grado
correcto de acidez, o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener
nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de
microorganismos contaminantes.
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
Medio sinttico: es un medio que contienen una composicin qumica
definida cualitativamente y cuantitativamente
Medio mnimo: es un medio de cultivo que contiene una cantidad mnima
de nutrientes capaz de permitir el desarrollo de microorganismos no tan
altamente exigentes, desde el punto de vista nutricional
Medio complejo (completo): es un medio de cultivo que contiene
nutrientes de composicin qumica el cual permite el crecimiento de
diversos microorganismos (Agar soya tripticasa, etc.)
Medio enriquecido: es un medio que contiene, adems, de los nutrientes
bsicos de un medio de cultivo sustancias altamente nutritivas, como son,
suero, sangre, etc.(Agar sangre, etc.)
Medio selectivo: es un medio que slo permite el crecimiento de un grupo
de microorganismos e inhibe el crecimiento de otros tipos de
microorganismos (Agar eosina azul de metileno o EMB), etc.)
Medio diferencial: es un medio que permite revelar caractersticas
fisiolgicas de los microorganismos (Agar Mac Conkey, etc.)
La mayora de las bacterias se desarrollan en un medio de cultivo bsico
que contiene agua, extracto de carne y peptona (producto soluble que

resulta de autolisis o de una hidrolisis enzimtica de protenas de origen

animal o vegetal). Este medio se le denomina medio nutritivo y puede ser
liquido (caldo nutritivo) o solido (agar nutritivo)
CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve
afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos
casos, son ajenos por completo al propio medio.
Disponibilidad de nutrientes adecuados: Un medio de cultivo adecuado
para la investigacin microbiolgica ha de contener, como mnimo, carbono,
nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos casos sern
necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento.
Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer de
donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que
tengan lugar.
Consistencia adecuada del medio: Partiendo de un medio lquido
podemos modificar su consistencia aadiendo productos como albmina,
gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en estado semislido o
slido. Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de
que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a
temperaturas inferiores al punto de fusin de este solidificante y de que
otros tienen la capacidad de licuarla.
Presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases: Gran cantidad de
bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de oxgeno normal.
Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados sustratos.
Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se desarrollarn
adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto
intermedio, los microorganismos microaerfilos crecen mejor en condiciones
atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy reducida),
mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de
adaptarse a cualquiera de las citadas condiciones.
Condiciones adecuadas de humedad: Un nivel mnimo de humedad,
tanto en el medio como en la atmsfera, es imprescindible para un buen
desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los cultivos. Hay que
prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas en las estufas de
cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de agua que
mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar
as que se deseque el medio.
Luz ambiental: La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en
la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como
sera el caso de los microorganismos fotosintticos.
Ph: La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el
crecimiento de los microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan

mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios
ms o menos cidos. No se debe olvidar que la presencia de cidos o bases
en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin
embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metablicos normales.
Temperatura: Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a
temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a 0C y los
temfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores (hipertemfilos). En
lneas generales, los patgenos humanos crecen en rangos de temperatura
mucho ms cortos, alrededor de 37C, y los saproftos tienen rangos ms
amplios.
Esterilidad del medio: Todos los medios de cultivo han de estar
perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida que
puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano
normal del o de los especmenes inoculados en dichos medios. El sistema
clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza
vapor de agua a presin como agente esterilizante)