UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA

DE MXICO
Facultad de Estudios Superiores Cuautitln Campo 1
Licenciatura en Farmacia

QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL

2 SERIE DE EJERCICIOS:
UNIDAD 3 Y UNIDAD 4
Elaborado por:

Prez Rivera Juan Adrin.

Hernndez Lima Samantha Karen.
Otero Ramrez Erika.
Salgado Machuca Mariana.

Grupo: 2601.
Periodo: 2015-II.
Profesora: Elia Granados Enrquez.
Fecha de entrega: 05/ 05/ 2015.
Equipo: No.4.

1.- Dibuje en un diagrama de bloques los componentes bsicos de:

a) Un cromatgrafo de lquidos de alta presin
Explicar su funcin brevemente e indicando el tipo de solutos que se separan en este.

Fase mvil: es la fase que recorre toda la longitud de la columna (fase estacionaria)
disolviendo al analto para que pueda pasar por la columna.

Bomba: sistema que permite impulsar la fase mvil a travs de la columna. Estas bombas
utilizan presiones muy altas y velocidades de flujo, para que la fase mvil y el analto
puedan recorrer toda la columna con facilidad.

Inyector: sirve para introducir las muestras. Existen 3 tipos: inyector de lopp fijo, inyector de
loop variable e inyector automatizado.

Columna: la parte ms importante del sistema, es la fase fija o estacionaria donde se va a

llevar a cabo la separacin de los analitos. Se lleva a cabo la interaccin soluto-solvente.

Detector: est compuesto por una celda en forma de Z. El detector tipo uv-visible es el
ms utilizado. Es el sistema de respuesta a la propiedad de los analitos cuando salen de la
columna.

Registrador: parte del equipo que permite interpretar la seal mostrando el cromatograma
obtenido. El cromatograma reporta los tiempos de retencin de las reas y el porcentaje de
los componentes del analito.

2.- Describa en breves palabras los siguientes trminos:

a) Cromatografa Fase Reversa

b) C. Fase Normal

c) C. Intercambio Inico

d) C. Exclusin

e) Cromatografa de adsorcin

f) Cromatografa de Reparto

Cromatografa de fase reversa (RPC): Permite separar molculas en base a su

polaridad. El principio de la cromatografa en fase reversa es semejante al de la
cromatografa en capa fina. La fase estacionaria es de partculas de slica qumicamente
modificadas con hidrocarburos saturados, insaturados o aromticos de diferentes tipos.
Esto convierte a la fase estacionaria en una matriz apolar, se emplean mezclas de
solventes polares, tales como agua, acetonitrilo, acetato de etilo, acetona y alcoholes
alifticos.

C. Fase normal: Se caracteriza por separar los compuestos en base a su polaridad. Esta
tcnica utiliza una fase estacionaria polar y una fase mvil apolar, y se utiliza cuando el
compuesto de inters es bastante polar. El compuesto polar se asocia y es retenido por la
fase estacionaria. La fuerza de adsorcin aumenta a medida que aumenta la polaridad del
compuesto y la interaccin entre el compuesto polar y la fase estacionaria polar (en
comparacin a la fase mvil) aumenta el tiempo de retencin.

C. Intercambio inico: Se basa en la diferencia de afinidad para el intercambio de iones

de los componentes de la muestra. Las especies cargadas negativamente se unen a la
matriz slida cargada positivamente y son retenidas, + son rechazadas.

C. Exclusin: Se basa en la separacin por tamao molecular, es decir, por tamaos. Las
molculas pequeas penetran en los poros de las partculas de gel, por lo que necesitan
ms tiempo para salir.

C. Adsorcin: Diferente afinidad de los componentes de la muestra sobre la superficie de

un solo activo.

C. de Reparto: Separacin en base a las diferencias de los coeficientes de reparto en los

lquidos de las fases estacionaria y mvil.

Kd=

[ A ] F . mvil.
[ A ] f . Est .

3.- Completar la tabla, calculando los parmetros que se piden. Explicar si esta separacin
es eficiente, para al menos tres compuestos de la muestra, dibujar el cromatograma
correspondiente.
Componente

Tr

w (cm)

(min)
21.5

0.46

7.6

34952.741

1.0421

17.777

22.3.

0.55

7.92

26302.9421

1.2828

93.3333

27.9

0.67

10.16

27744.6202

Tiempo muerto ( to ) es de 2.5 min.

Factor de capacidad, k (adimensional). Representa el nmero de molculas que, en el equilibrio,
pasan a la fase estacionaria respecto a las que permanecen en la fase mvil. Tambin se
denomina relacin de capacidad o factor de retencin.

K A=

Tr A 21.5 min2.5 min

=7.6
=
2.5 min

K B =

Tr B 22.3 min2.5 min

=7.92
=
2.5 min

K C=

Tr C 27.9 min2.5 min

=10.16
=
2.5 min

Nmero de platos tericos, eficiencia, N (adimensional). Es la longitud de columna requerida

para que se establezca un equilibrio del soluto entre la fase mvil y la estacionaria. Es una medida
estimada de la agudeza del pico y es caracterstico de cada soluto en cada sistema cromatogrfico.

N A =16

Tr 2
21.5 2
=16
=34952.741
W
0.46

( ) ( )
N B =16

N C =16

Tr
22.3
=16
=26302.9421
W
0.55

( ) ( )

Tr
27.9
=16
=27744.6202
W
0.67

( ) ( )

Selectividad, (adimensional). Determina la separacin entre picos y representa una relacin de

la retencin relativa de dos compuestos que eluyen uno a continuacin del otro. Un valor de igual a
1 representa tiempos de retencin iguales y por lo tanto no existe separacin. Un nmero ms
grande representa una columna ms selectiva. Cuanto ms alejado de 1, mayor separacin.

AB =

Tr A 21.52.5
=
=1.0421
Tr B 22.32.5

BC =

Tr B 22.32.5
=
=1.2828
Tr C 27.92.5

Resolucin, Rs (adimensional). Es una medida cuantitativa del grado de separacin de dos

picos. Un valor de 1,5 representa una separacin hasta la lnea base de ambos picos y un valor de
1,0 representa una resolucin del 90%. Valores de Rs < 1 indican solapamiento; valores de Rs 1
indican separacin.

Rs A B=

Tr B TR A 2(22.321.5)
=
=17.777
WBWA
0.550.46

RsB C =

Tr c TR b 2(27.922.3)
=
=93.3333
WcWB
0.670.55

4.-Dar dos ejemplos, explicando brevemente su fundamento de deteccin. De:

a) Detector en C. lquidos
b) Detector En C. Gases
DETECTOR EN CROMATOGRAFA DE
LQUIDOS

DETECTOR EN CROMATOGRAFA DE
GASES

Un detector para Cromatografa de Lquidos es

un dispositivo que permite medir, a la salida de
la columna, una propiedad fsica del eluyente,
que depender de la composicin de ste. La
deteccin se realiza habitualmente en continuo
aunque es posible la utilizacin de colectores
de fracciones para la identificacin y
cuantificacin de pequeas fracciones del
eluyente. Ejemplos:

Los detectores utilizados en Cromatografa de

Gases son de tipo diferencial, no ofrecen seal
cuando pasa por ellos solamente el gas
portador y responden ante alguna propiedad
que pueda variar cuando ste se encuentra
mezclado con alguna sustancia eluida de la
columna. Ejemplos:
-

Detector de conductividad trmica

Detector de ionizacin de llama

Detector de ndice de refraccin

- Detector de UV/Vis

5.- Anotar el nombre de cada parte indicado como se llama en equipo y que tipo de
sustancias se determinan en este.

CROMATOGRAFO DE GASES
Separa sustancias voltiles, mezclas orgnicas complejas, compuestos organometlicos y
sistemas bioqumicos. Su otra aplicacin es como mtodo para determinar cuantitativa y
cualitativamente los componentes de la muestra.
La cromatografa de gases es una tcnica cromatogrfica en la que la muestra se volatiliza y se
inyecta en la cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase
mvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos de cromatografa, la fase mvil no interacta con
las molculas del analito; su nica funcin es la de transportar el analito a travs de la columna.
6.-Realizar un cuadro comparativo de similitudes y diferencias entre voltaamperometra y
potenciometra.
VOLTAAMPEROMETRA

Relacin entre la intensidad de

corriente y el voltaje aplicado a
la celda.
Se mide la intensidad.
Polarizacin completa.
Consumo mnimo del analito.
Voltamperometra
I = f (E)

POTENCIOMETRA

Relacin entre la FEM y la

actividad concentracin del
analito por aplicacin de la Ec.
de Nerst.
Intensidad se aproxima a 0.
Polarizacin ausente.
El analito se transforma.
Potenciometra
E (pH, ISE, FET)

7.-Describir tres ejemplos de procesos de transferencia de masa en una microelectrolisis y

como se evitan.

La voltametra cclica (VC) es una tcnica electroqumica de microelectrlisis, de tipo transitorio

(donde el transporte de materia al electrodo se produce por difusin). Se utiliza para la obtencin
de informacin de forma muy rpida sobre las reacciones qumicas asociadas a los procesos de
transferencia electrnica, como los producidos en los materiales electrocrmicos.
De esta manera se puede estudiar el comportamiento durante la reaccin redox de las especies
qumicas presentes en ella. Existen varias formas de voltametra:
Salto Escaln (Potencial Step)
Barrido Lineal (Linear sweep)
Voltametra cclica (Cyclic Voltammetry)
8.-Para determinar valsatrn por el mtodo de adicin del estndar interno se preparan las
siguientes soluciones:
a) Se toman 0.1 mL de una sol. De valsatrn 200 ppm y 0.15 mL de losartan 200 ppm y
se aforan a 10 mL se obtienen tr=5.1
rea=1003 y tr= 3.3 y rea=2513
respectivamente. Calcular el factor respuesta.

rea Estndar Externo

Concentracin Estndar Externo
=F
rea Estndar Interno
Concentracin Estndar Interno

F=

Estndar Externo
( rea
rea Estndar Interno )
Estndar Externo
( Concentracin
Concentracin Estndar Interno )

Valsatrn (Estndar
Externo)

Losartan (Estndar
Interno)

Concentracin

Concentracin

0.1 mL
200 ppm
10 mL

200 ppm

mL
( 0.15
10 mL )

= 2 ppm

= 3 ppm

tr=5.1

tr=3.3

1003
(
2513 )
F=
( 23 )

1003
( (3)
F=
(2513)(2)
F=

rea=1003

3009
5026

rea=2513

F=0.5986

b) Para determinar el contenido en suero se toman 0.2 mL de este se le adicionan 0.15

mL de de losartan 200 ppm aforando a 10 mL se obtienen tr=5.1 rea=1203 y tr= 3.3 y
rea=2498 respectivamente. Calcular los mg/ dL de valsatran en el suero analizado.

9.-PARA CALCULAR EL CONTENIDO de Acetofenona en una solucin etanlica acuosa, 10

ml de una solucin desconocida de acetofenona se diluy a 25 ml(sol. A).
Se cuenta con un estndar de acetofenona preparado de la siguiente manera : Se pesan 59
mg del reactivo estndar ( 97 % de pureza y PM 120.16 ) aforado a 250 ml con sol. Etanlica,
se prepararon los siguientes sistemas:
SISTEMA
SOL. A
Estndar
Sol. Etanlica(aforo)
i (A)

1
3
0
10
2.1

2
3
1
10
4.2

3
3
2
10
6.0

4
3
3
10
8.0

5
3
4
10
10.1

6
3
5
10
12.3

a) Calcular la concentracin del estndar.

b) Trazar la curva i = f (ppm de Acetofenona), Dar los parmetros de la regresin y

asociarlo a la funcin correspondiente.

c) Calcular el %(p/v) de Acetofenona en la solucin desconocida.

d) Dibujar el voltaamperograma de la reduccin de la acetofenona i = f( E), cuando su

E1/2 = -0.34 v.

10.- Indicar el orden de elusin(con migracin hacia el ctodo) de los siguientes

compuestos en una separacin por electroforesis capilar con un buffer pH = 9.0 : cido
saliclico C6H4(OH)COOH pKa= 2.97 y Amonio NH 4+ pKa=9.26, cido actico CH 3COOH pKa =
4.76 y glicina ( +NH3CH2COOH ) pKa(s) = 2.35 , 9.78 Justificar en base a la relacin
carga/masa.
-cido Saliclico

C6H4(OH)COOH

C6H4(OH)COOpH

2.97

-Amonio

NH4+
pH
9