Memorias II Congreso Latinoamericano de Ingeniera Biomdica, Habana 2001, Mayo 23 al 25, 2001, La Habana, Cuba

ADQUISICIN Y PROCESAMIENTO AUTOMATIZADO DEL

POTENCIAL DE ACCIN CARDACO
D.G. Fainstein, M.F. Domnguez, C.M. Franke, M.C. Mntaras, A.C. Morales, C.P.A. Pennisi, I.P.
Riob & L.C. Nicola Siri
Laboratorio de Bioelectricidad Facultad de Ingeniera Universidad Nacional de Entre Ros Argentina
Av. Laurencena 142, (3100) Paran, Entre Ros, Argentina pluma@iname.com

RESUMEN
Se describe el desarrollo de un programa para la
adquisicin y procesamiento de los potenciales de
accin cardiacos, registrados con la tcnica de
microelectrodos intracelulares. El mismo realiza la
medicin online de los parmetros que caracterizan
los potenciales de accin ventriculares: potencial de
reposo (Vrep), potencial de pico (Vpico), duraciones
del potencial de accin al 30%, al 50% y al 90% de la
repolarizacin
(APD30,
APD50,
APD90
respectivamente). El programa fue desarrollado bajo
un entorno de programacin grfica, LabVIEW 5.1,
para ser utilizado bajo MS-Windows.
El programa fue evaluado en comparacin con la tcnica de procesamiento manual mediante cursores (off
line) arrojando valores similares, pero independientes
de la subjetividad del operario ya que se promedian los
parmetros para un conjunto de potenciales de accin.
Adicionalmente, dado que se permite la obtencin de
los parmetros en simultneo con la adquisicin, disminuyen los tiempos de procesamiento.
Los resultados obtenidos permiten concluir que el desarrollo cumpli con los objetivos planteados, ya que es
de uso sencillo, facilitando su utilizacin en el trabajo
habitual del laboratorio
Palabras clave: potenciales de accin cardiacos,
microelectrodos,
instrumentacin
virtual,
procesamiento de seales

que modifican la morfologa de los potenciales de accin [2].

En el caso de las clulas cardacas ventriculares, el
potencial de accin (PA) se caracteriza por los siguientes parmetros: potencial de reposo (Vrep), potencial de pico (Vpico), duraciones del potencial de
accin al 30%, al 50% y al 90% de la repolarizacin
(APD30, APD50, APD90 respectivamente) y mximo
valor de la derivada del voltaje respecto del tiempo
(dV/dt,max).
Para la medicin de estos parmetros existen programas comerciales en los cuales el proceso de medicin
debe hacerse offline, mediante cursores que se desplazan manualmente sobre los registros digitalizados. Este
es un procedimiento relativamente lento, que limita el
nmero de PA que se puede evaluar en corto tiempo
[1]. Adems no pueden observarse cuantitativamente
las variaciones de los parmetros durante la realizacin
de los experimentos. Existen otros programas que calculan de forma automtica los parmetros, pero estn
desarrollados bajo plataforma MS-DOS, lo cual limita
sus prestaciones y provee una interfase poco amigable
con el usuario.
En este trabajo se presenta un programa de adquisicin
de los PA, registrados con la tcnica de microelectrodos intracelulares, que realiza la medicin online de
los parmetros, desarrollado mediante programacin
grfica para ser utilizado bajo MS-Windows.

2. METODOLOGA
1. INTRODUCCIN
Los estudios de electrofisiologa cardaca permiten
investigar la actividad elctrica del corazn, responsable de la generacin y transmisin del impulso excitatorio que da origen a la contraccin mecnica del mismo.
Esta actividad elctrica puede ser explorada tanto por
tcnicas in vivo como in vitro [5]. Entre las tcnicas in
vitro se encuentra el registro transmembranal mediante
microelectrodos intracelulares, una tcnica estndar
imprescindible en los laboratorios de electrofisiologa
celular [4]. Los potenciales de accin de las clulas
cardacas registrados mediante esta tcnica constituyen
uno de los tipos de seales ms importantes para la
investigacin bsica, cuyo estudio es til para caracterizar los fenmenos que dan origen a diferentes situaciones fisiolgicas y fisiopatolgicas del sistema cardiovascular. Por otra parte, la accin teraputica de
drogas cardioactivas puede comprenderse a travs del
conocimiento del efecto especfico sobre determinadas
corrientes o canales inicos de las clulas cardacas,

A continuacin se describen las diferentes etapas del

desarrollo del programa. El mismo fue desarrollado
bajo un entorno de programacin grfica, LabVIEW
5.1, de National Instruments, que presenta una gran
versatilidad para el desarrollo de aplicaciones de adquisicin y procesamiento de seales.
Adquisicin de la seal: Como se mencion previamente, los registros de los potenciales de accin fueron
obtenidos mediante la tcnica de microelectrodos intracelulares. Se utiliz para ello un sistema de registro
desarrollado en el Laboratorio de Bioinstrumentacin
de la FIUNER [3]. En este sistema, la seal elctrica
registrada es acondicionada mediante un amplificador
de microelectrodos e ingresada a una computadora
personal que cuenta con un procesador Pentium
100MHz. La digitalizacin se lleva a cabo mediante
una placa conversora A/D de 12 bits (PCLPM16
PnP, de National Instruments). La frecuencia de
muestreo fue establecida en 5[KHz] y el rango de
voltaje de entrada en 5[V].

950-7132-57-5 (c) 2001, Sociedad Cubana de Bioingeniera, artculo 00164

La seal adquirida se almacena dentro de una porcin

fija de memoria dentro de la PC (buffer). De esta forma
el microprocesador pueda atender otras tareas simultneamente con la adquisicin sin que se pierdan datos
de la seal, puesto que los mismos permanecen temporalmente dentro del buffer hasta que son ledos por el
microprocesador o hasta que su capacidad se llena y
nuevos datos son sobreescritos sobre los ms viejos.
Procesamiento de la seal: El programa lee los datos
contenidos en el buffer y los transfiere hacia un vector.
Cuando este vector alcanza un tamao prefijado
[TBLOQ] se inicia el algoritmo que detecta los potenciales de accin del registro y calcula sus parmetros
de inters.
Para la deteccin de los potenciales de accin se cuenta
con un algoritmo que evala cundo la seal se mantiene por encima de un cierto nivel de voltaje [UMBRAL]
durante una determinada cantidad de tiempo [ANCHO
DE PULSO]. Como resultado se obtienen los ndices
de tiempo con los cuales se identifica el inicio de los
potenciales de accin individuales que componen el
registro de [TBLOQ] segundos.
Para calcular los parmetro representativos del PA
(Vrep, Vpico, APD30, APD50 y APD90 en nuestro
caso) se extrae del registro un PA individual, se calcula
el parmetro de inters sobre el mismo, y se contina
con el siguiente PA. Finalmente se calcula el promedio
y el desvo estndar de cada parmetro.
El Vrep se obtiene promediando una cierta cantidad
[PREP] de valores de potencial previo a la aparicin de
la fase de despolarizacin rpida del mismo.
En algunos casos, el artefacto del sistema de estimulacin supera en amplitud el voltaje mximo del PA, de
manera tal que no puede considerarse el mximo valor
de voltaje entre el inicio de dos PA como el Vpico.
Para evitar este inconveniente se procede de la siguiente manera: dado un vector conteniendo N elementos que representan un PA completo, se construye
otro con igual cantidad de elementos. El elemento ai
del nuevo vector (con i=1,2,..,N) corresponde al elemento aNi+1 del original (figura 1). Luego, partiendo
de i=1 se busca el primer elemento de este vector que
supera el [UMBRAL], y a continuacin el primer elemento que cae por debajo del [UMBRAL]. Finalmente
se busca entre estos dos valores el mximo voltaje y el
tiempo en el que ocurre [TPICO], evitando as que el
artefacto del estimulador sea considerado para el clculo del Vpico.

50 y 90% de la repolarizacin, de acuerdo a las ecuaciones (1), (2) y (3) respectivamente.

V30% = Vrep + (VpicoVrep)70%
V50% = Vrep + (VpicoVrep)50%
V90% = Vrep + (VpicoVrep)10%

(1)
(2)
(3)

donde V30%, V50% y V90% son los voltajes al 30%,

50% y 90% de la repolarizacin respectivamente.
Para medir el APD30 se busca dentro del vector, a
partir del elemento ai correspondiente al [TPICO],
incrementando el ndice i hasta encontrar el tiempo
para el cual el PA tiene un voltaje igual a V30% (t1). Se
hace lo mismo despus, partiendo desde TPICO pero
decrementando el ndice i, encontrndose el tiempo t2.
Finalmente se restan estos valores de tiempo obtenindose el APD30%. Para obtener el APD50 y el APD90
se procede de manera similar pero con los valores de
voltaje V50% y V90%.

3. RESULTADOS
Uso del programa: el programa posee una pantalla
principal (panel frontal) con 5 controles (figura 2). El
botn ADQUIRIR inicia o detiene la adquisicin;
RECONFIGURAR abre una pantalla desde donde se
seleccionan opciones de visualizacin y de clculo
(figura 3); SINTONIZAR abre otra pantalla donde se
ajustan variables que afectan el clculo de los parmetros de los PA (figura 4); GRABAR permite almacenar
un registro y los resultados de las mediciones; SALIR
para finalizar la ejecucin del programa.

Fig. 2. Panel frontal del programa donde puede observarse un registro que se est adquiriendo y los valores medidos de manera online.

Fig. 1. Clculo del Vpico: en azul se indica la franja que se encuentra por encima del UMBRAL, donde se evita considerar el artefacto
del estimulador. En la abcisa los valores de tiempo se dan en milisegundos y en la ordenada los voltajes en milivolts.

Los APDs se obtienen luego de medir el Vpico y el

Vrep. Se calculan los voltajes correspondientes al 30,

Desde la pantalla de CONFIGURACIN se seleccionan las condiciones de adquisicin y de visualizacin.

All es posible modificar la frecuencia de muestreo, el
tamao del buffer, la cantidad de datos que el microprocesador extrae del buffer en cada lectura (Segundos/Scan), el tamao del registro que es analizado para
realizar las mediciones [TBLOQ] y el ancho de la seal
que es visualizada en el panel frontal.

registro. A continuacin se comparan los resultados

obtenidos mediante ambas tcnicas de medicin (tabla
I).

Fig. 3. Pantalla de configuracin donde se seleccionan las condiciones de adquisicin y visualizacin.

Tabla I
Comparacin entre los resultados obtenidos por la
tcnica manual y por el programa desarrollado en uno
de los registros de PA analizados.
Parmetro
Tcnica
Programa
Diferencia
de inters
manual desarrollado Porcentual
Vrep [mV]
-75,2
-75,0
0,27%
Vpico [mV]
25,3
25,2
0,40%
APD90 [ms]
166,0
166,3
0,17%
APD50 [ms]
124,0
122,2
1,48%
APD30 [ms]
100,0
98,3
1,72%

4. DISCUSIN
Al acceder a la pantalla de SINTONIZAR se pueden
seleccionar diferentes valores de UMBRAL y ANCHO
DE PULSO. Esto se debe a que existen condiciones
experimentales que pueden modificar sustancialmente
la morfologa de los PA dificultando el algoritmo de
deteccin de los PA individuales que componen el
registro. Adems se puede ajustar el punto inicial a
partir del cual se promedian los voltajes para obtener el
Vrep (PORCENTAJE PREVIO) y la cantidad de puntos que son promediados (PUNTOS A PROMEDIAR).
Cuando se presiona el botn GRABAR se procede al
almacenamiento de los datos (el registro de los PA) y
de los resultados (parmetros de los PA), en formato
ASCII, legible por cualquier planilla de clculo o procesador de texto estndar.
Cabe aclarar que esta versin del programa fue ajustada
convenientemente para satisfacer las necesidades expresadas por los investigadores del Laboratorio de
Bioelectricidad de la FIUNER.
Prueba del programa: para validar la consistencia de
los resultados entregados por el programa, se adquirieron seales de potenciales de accin de trozos de tejido
cardaco de conejos neocelandeses de 30 das.

La medicin manual off-line de los parmetros representativos del PA no resulta adecuada cuando se pretende evaluar cuantitativamente los efectos de determinadas maniobras en simultneo con la adquisicin. Esta
ltima situacin es deseable porque permite realizar
cambios y/o ajustes en las condiciones de experimentacin a medida se observan cambios en la morfologa de
los PA.
Adicionalmente, en la medicin manual interviene la
subjetividad del operador, tanto al elegir un PA representativo del registro sobre el cual realizar la medicin,
como al estimar visualmente el valor del potencial de
reposo, que puede estar contaminado con ruido. Adems, como el valor del potencial de reposo interviene
en el clculo de los APD, un error en su estimacin se
propaga a los dems resultados. En el programa desarrollado, el Vrep se calcula promediando un nmero de
valores [PREP] de voltajes, por lo que se obtiene una
estimacin ms precisa del mismo.
Las diferencias que se consignan en la tabla I son
indicativas del grado de aproximacin entre ambos
mtodos, y no deben interpretarse como errores. Esto
debido a que el programa desarrollado calcula los parmetros promediando sobre un nmero mayor de PA
que el mtodo manual.

5. CONCLUSIONES

Fig. 4. Pantalla de SINTONA donde se seleccionan variables para el

clculo de los PA.

Se realiz la medicin de los parmetros de los PA

mediante el programa desarrollado. Se almacenaron los
registros y los resultados. Luego se llevaron a cabo
mediciones manuales offline sobre los registros almacenados utilizando el programa Axoscope 1.0 (Axon
Instruments) que permite trabajar con cursores sobre el

En el Laboratorio de Bioelectricidad de la FI-UNER se

estudia el efecto de anticuerpos contra receptores betaadrenrgicos sobre el potencial de accin cardiaco.
Previo al desarrollo de este programa, las mediciones
sobre los registros digitalizados de potenciales de accin se realizaba en forma manual y off-line. El programa desarrollado cumpli con los objetivos planteados ya que resulta de uso sencillo, facilitando su utilizacin en el trabajo habitual del laboratorio, y permite
la obtencin de los parmetros representativos de los
PA en forma automtica y en simultneo con la adquisicin.
La programacin de las variables involucradas en el
clculo de los parmetros desde la pantalla de
SINTONA le otorga versatilidad al programa, ya que
permite que el mismo se adapte a los cambios que
pueden ocurrir en la seal de PA bajo diferentes situaciones experimentales.

REFERENCIAS
[1] M.R. Franz, P.F. Kirchhof, C.L. Fabritz, M. Zabel. Computer
analysis of monophasic action potentials: manual validation and
clinically pertinent applications. Pacing Clin Electrophysiol. 18 (9
Pt 1):1666-1678. 1995
[2] L.C. Nicola Siri. Las bases inicas de la actividad elctrica
del corazn. Captulos de Cardiologa. Arritmias. IV (1): 9-44.
1994.
[3] C.P.A. Pennisi. "Sistema para el registro del potencial de
accin de clulas cardacas con microelectrodos intracelulares".
Tesis de grado. Carrera de Bioingeniera. FI-UNER. Oro Verde.
Entre Ros. 1998.
[4] R.D. Purves. Microelectrode Methods for Intracellular Recordings and Ionophoresis. Academic Press. London UK. 1981.
[5] M.J.A. Walker and M.K. Pugsley. Methods in Cardiac Electrophysiology. CRC Press. USA. 1998

ACQUISITION AND AUTOMATED PROCESSING OF CARDIAC

ACTION POTENTIALS
ABSTRACT
It is described the development of a software for acquisition and processing of the cardiac action potentials, registered
with the intracellular microelectrodes technique. It does the online measurement of the parameters that characterizes
the ventricular action potentials: resting potential (RP), peak potential (PP), action potential durations at 30%, 50% and
90% of repolarization (APD30, APD50, APD90 respectively). The software was designed under a graphical
development environment, LabVIEW 5.1, to be used under MS-Windows.
The software was evaluated in comparison with the manual processing technique which uses cursors (off-line) giving
similar values, but not dependent on the operators subjetivity because a set of action potentialss parameters are
averaged. Additionaly, since it is allowed the simultaneous measurement with the acquisition, the processing times
diminishes. The obtained results allow us to conclude that the development fulfilled the outlined objectives, since it is
of simple use, facilitating its use in the habitual work of the laboratory