APLICAR TECNICAS DE VALORACIN DE COLESTEROL

PROFESOR: ALEJANDRO IZQUIERDO

REPORTE: PRACTICA
Determinacin Cuantitativa de Colesterol

Mircoles 15 de abril 2015

OBJETIVOS
Determinar la cantidad de los niveles de Colesterol que el paciente tiene en su
organismo, a partir de una muestra sangunea de suero o plasma, para diagnosticar en
basa a los valores de resultados si existe alguna anomala que nos pueda indicar alguna
posible patologa, generalmente a nivel cardiovascular.
FUNDAMENTO
CHE
steres colesterol + HO Colesterol + c. Grasos
CHOD
Colesterol + O 4-colesterona + HO
POD
HO + 4-AF+ Fenol Quinonimina + HO
CHE
steres colesterol + HO Colesterol +c. Grasos
CHOD
Colesterol + O 4-colesterona + HO
POD
HO + 4-AF+ Fenol Quinonimina + HO
El colesterol esterasa hidroliza los steres de colesterol presentes en la muestra dando
colesterol libre y cidos grasos, una posterior oxidacin enzimtica mediante el colesterol
oxidasa se forma HO y colesterona. El HO se valora por la reaccin de Trinder,
mediante un cromgeno, fenol y 4-Aminoantipirina, en presencia de Peroxidasa,
formando una quinonimina cuya coloracin, encarnada, es proporcional a la
concentracin de colesterol presente en la muestra.

INTRODUCCIN
El colesterol fue descubierto en 1770 por el francs Poulletire de la Salle, en los
clculos biliares. Al principio se llam colesterina (del griego coles, bilis, y stereos,
slido), y la denominacin actual se debe al descubrimiento de la funcin alcohol que
tiene en uno de los anillos.
El colesterol es el precursor, es decir, la molcula a partir de la cual fabrica el organismo:
los cidos biliares, los esteroles fecales, ciertas hormonas sexuales masculinas
(androsterona y testosterona), tambin femeninas (estrona y estradiol), corticoides y la
provitamina D.
Es insoluble en el agua y pertenece al grupo de los lpidos, siendo por tanto miscible con
las grasas, es decir, es liposoluble.
Como el suero sanguneo es un lquido acuoso, para ser conducido por la sangre
necesita vehculos de transporte, que son unas protenas especiales llamadas
lipoprotenas.
El colesterol es estable a las temperaturas a las que se cocinan los alimentos, es decir,
no se destruye por la coccin, fritura o asado de los mismos.
En el organismo humano, las mayores concentraciones de colesterol se encuentran en el
cerebro, mdula espinal y vsceras.
Su procedencia puede ser de los alimentos ricos en colesterol (y es el llamado colesterol
exgeno) y tambin del llamado endgeno, que fundamentalmente se fabrica en el
hgado a partir del Acetil-CoA que procede bien sea de los azcares o de las grasas.
Esto debe tenerse muy en cuenta por las personas a las que el mdico les dice que ellas
mismas fabrican el colesterol, sabiendo que tomando grasas slidas (aunque sean
vegetales) o azcares en exceso aunque vengan de las frutas, si no disminuyen la
ingesta de estos alimentos, no bajarn su concentracin en la sangre; es verdad que hay
medicamentos que impiden la fabricacin de este colesterol endgeno, pero lo
aconsejable es regularlo sin recurrir a ellos, pues el metabolismo del hgado es tan
complicado que enseguida se tienen efectos secundarios indeseables.
MATERIAL
A) MATERIAL y EQUIPO
1. Pipetas de 2 ml y de 50 L
2. Bao termoestable a 37C
3. Cronometro o reloj
4. Fotmetro con filtro de lectura de 505nm
B) REACTIVOS
REACTIVOS
Reactivo 1 ,Pipes pH 6.9Fenol, 90mmol/L26mmol/L
Reactivo 2 Vial enzimas, Peroxidasa
Colesterol esterasa Colesterol oxidasa4-Aminoantipirina | 1250 U/L300 U/L300 U/L0.4
mmol/Dl |
Standard | Sol. Colesterol | 200 mg/dL |

* MATERIAL BIOLGICO
1. Suero o plasma heparinizado o plasma recogido con EDTA
2. La estabilidad de la muestra es de una semana guardada tapada a 2-8C o 3 meses
congelada a -20C.
PROCEDIMIENTO
| Blanco
Standard
| -Muestra
| -Reactivo al uso | 1.0 Ml

| Standard
| 10L
| -| 1.0mL

| Muestra |
| -- |
| 10 L |
| 1.0Ml |

* Mezclar e incubar 5 min a 37C 10 min a temperatura ambiente.

* Ajustar el aparato a 0 con el blanco de reactivos.
* Leer a 505nm (500-550) la D.Opt. del Standard y de la muestra.
La coloracin es estable 60 min.
CALCULO:
(D.O muestra )/(D.O standard)x conc. Standard (200 mg/dL)= conc. Muestra
Factor de conversin: mg/dL x 0.0258=mmol/L(SI)
VALORES NORMALES:
Valores sospechosos a partir de: 220 mg/dL (5.7 mmol/L)
Elevados a partir de: 260 mg/dL (6.7 mmol/L)
RESULTADOS
DISCUSIN
El proceso de una determinacin cuantitativa de Colesterol es una tcnica usada muy
constantemente por lo tanto se debe realizar el procedimiento correctamente para que
no se presenten errores al ejecutar dicha prctica; Por ejemplo se puede errar al pipetear
reactivo y/o muestra.
No obstante, es importante saber que existe un amplio margen de error en los anlisis
que determinan los niveles de colesterol.
Cuando existe colesterol en exceso, se deposita a lo largo del interior de las paredes de
las arterias, y cuando estos depsitos aumentan, las arterias se endurecen y se van
haciendo ms estrechas, bloqueando as el flujo sanguneo y contribuyendo al desarrollo
de graves enfermedades, por esto es importante que exista un chequeo constante y que
exista una dieta balanceada y moderada de grasas.
Los valores normales de colesterol en la sangre son:
VALORES SOSPECHOSOS A PARTIR DE : 220 mg/ dL (5.7 mmol/L)
ELEVADOS A PARTIR DE: 260 mg/ dL (6.7 mmol/L)
Se determin el nivel cuantitativo de colesterol presente en la sangre del paciente,
utilizando una muestra de suero o plasma.
Debido a que existe un margen de error en la prueba es muy aceptable y congruente
realizar una segunda prueba para corroborar los resultados para evitar cualquier
infortunio que pudiese presentarse.

CONCLUSIN
El colesterol es una sustancia de tipo grasosa, que existe naturalmente en todas las
partes del cuerpo.
El cuerpo necesita determinada cantidad de colesterol para funcionar adecuadamente.
Pero el exceso de colesterol en la sangre puede adherirse a las paredes arteriales
(placa), que pueden estrechar las arterias o incluso obstruirlas.
Los niveles de colesterol elevados en la sangre pueden aumentar el riesgo de
enfermedades cardacas. Los niveles de colesterol tienden a aumentar con la edad. El
aumento de colesterol no suele tener signos ni sntomas, pero puede detectarse con un
anlisis de sangre. Es de suma importancia para la prevencin o en el control de los
niveles de colesterol el constante chequeo mdico, y frecuente anlisis sanguneo para
medir las concentraciones en el organismo, y as poder llevar un control.
Influyen demasiado los hbitos alimenticios que se adquieran, es decir el consumir tan
solo alimentos de origen animal, o cosas que contienen mucho colesterol, se debe llevar
una alimentacin balanceada para no exceder las concentraciones de este lpido en el
organismo.
Se pueden tener probabilidades de tener un nivel de colesterol alto si tiene antecedentes
familiares, sobrepeso o consume muchas comidas grasosas.
Es posible disminuir el colesterol mediante el ejercicio y el consumo de ms frutas y
verduras. Tal vez sea necesario tomar medicamentos que disminuyan el colesterol.

BIBLIOGRAFA
* Melvin H. Williams
Nutricin para la salud, la condicin fsica y el deporte
Editorial Paidotribo,2003
N de pginas: 502 pgs.
Pgs. Consultadas: 159-163
* Ana Mara Lajusticia Bergasa
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Edit. EDAF, 2008
N de Pgs. : 160 pgs.
Pginas consultadas: 143-147
* http://www.alimentacion-sana.com.ar/informaciones/Nutricion/colesterol.htm
* http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/cholesterol.html