Anuario Toxicologa 2001;1(1):104-8

Centro de Toxicologa y Biomedicina.

DETERMINACIN DE LA TOXICIDAD AGUDA DEL DICROMATO

DE POTASIO EN LARVAS DE ARTEMIA SALINA
Lic. Yuleidis Gonzlez Prez1 y Lic. Patricia Aportela Gilling1

RESUMEN: Por el potencial impacto que rrepr

epr
esenta par
omatos
epresenta
paraa el ambiente
ambiente,, la emisin de cr
cromatos

y dicromatos (cromo VI), vertidos producto de la actividad de diferentes sectores industriales, se

determina la toxicidad aguda del K2Cr 2O 7 en larvas de Artemia salina como mtodo alternativo
aplicado a la ecotoxicologa. En este verstil mtodo se exponen nauplius de 24 h a diferentes
concentr
aciones del compuesto y se determina la LLC50
C50 corr
espondiente
os efectos
otros
concentraciones
correspondiente
espondiente,, as como otr
adv
er
sos que pueda ocasionar
apidez, confiabilidad y bajo
adver
ersos
ocasionar.. Esta metodologa combina simplicidad, rrapidez,
costo, por lo que su empleo como screening en pruebas ecotoxicolgicas permite en un corto plazo
predecir la toxicidad de numerosas sustancias qumicas para los ecosistemas acuticos.
TO DE PO
TASIO/toxicidad; TEST
S DE TTO
O XICID
AD/mtodos; AR
TEMIA.
DeCS: DICROMA
DICROMAT
POT
TESTS
XICIDAD/mtodos;
ARTEMIA.
El cromo es uno de los metales pesados de mayor importancia toxicolgica en
la actualidad. Est presente en rocas, plantas, suelos, animales, humos y gases volcnicos.
Sus diversos efectos en la vida de los
organismos estn relacionados con las formas fsicas y qumicas, en las cuales se
presenta. El estado metlico (valencia 0)
es biolgicamente inerte; la forma
trivalente representa el cromo como elemento esencial, es la ms estable, y el estado hexavalente, usualmente es de origen
antropognico y el de mayor importancia
toxicolgica.1-5 Los compuestos derivados
de ste son fundamentalmente los cromatos
y dicromatos, los cuales se utilizan en operaciones de cromado, manufactura de
1

pigmentos y colorantes, curtido de pieles y

tratamiento de madera. Los dicromatos
sdico y potsico son usados con frecuencia en la industria como fuente de otros
compuestos del cromo, particularmente del
xido de cromo VI, y estos procesos son la
mayor fuente de contaminacin por cromo
hexavalente. En general, los efluentes industriales que contienen cromo, se incorporan a las aguas y, eventualmente llegan a
los ocanos, la forma qumica depender
de la presencia de materia orgnica en las
aguas pues, si sta est presente en grandes cantidades, el Cr6+ se reducir a Cr3+, el
cual se podr absorber en las partculas o
formar complejos insolubles. stos pueden
permanecer en suspensin cerca del sitio
de entrada al ambiente, ser transportados a

Licenciada en Ciencias Biolgicas.

104

los ocanos, o bien precipitar y ser incorporados a los sedimentos.1

Las larvas de Artemia salina han sido
utilizadas en bioensayos por numerosos
laboratorios de todo el mundo, y los resultados en la determinacin de la LC50 han
sido publicados para una serie de toxinas y
qumicos conocidos.2 Es reciente su empleo en el campo de la ecotoxicologa, el
cual incluye investigaciones de la toxicidad
en mezclas de qumicos y muestras ambientales, evaluacin de riesgos, screening agudo de sustancias qumicas, productos alimenticios y farmacuticos; adems, el estudio de la transferencia trfica de contaminantes, ya que desde el punto de vista
ecotoxicolgico los invertebrados acuticos juegan un importante papel en la transferencia de alimentos o flujo de energa dentro de la cadena alimentaria de estos
ecosistemas, por lo que las alteraciones originadas por la presencia de un agente txico
en uno de estos grupos pueden en algn
grado, interferir con otros componentes
interdependientes de la cadena trfica.3
Este trabajo va dirigido a determinar la
LC50 y la toxicidad aguda tras 24 h de exposicin del dicromato de potasio (K2Cr2O7)
sobre larvas de Artemia salina de 24 h con
el propsito de estudiar la susceptibilidad
de estos organismos a diferentes concentraciones del compuesto.

Mtodos
Los quistes de Artemia salina leach
fueron suministrados por el Centro de
Investigaciones pesqueras de Provincia
Habana. Se almacenaron en un lugar seco
a una temperatura estable de 25 C.
En el ensayo se emple agua de mar
artificial preparada segn la frmula de
Dietrich & Kalle: para 1 L de agua destilada, 23 g de NaCl, 11g de MgCl2 6H2O, 4g
de Na2SO4, 1,3g de CaCl2 2H 2O y 0,7 de
KCl; se ajust el pH de la solucin a 9,0
con Na2CO3.

Para la eclosin de los huevos se utiliz

una cmara de vidrio de 2 compartimentos
(uno oscuro y el otro iluminado por una
lmpara de 18 W colocada a una distancia
aproximada de 30 cm). El agua se aire a saturacin 15 min antes de colocar los huevos.
Durante el tiempo de incubacin se mantuvo
un flujo constante de aire para garantizar la
eclosin; temperatura de 28 C; salinidad
de 32g/mL y pH 9,0.

Ensa
yo de toxicidad a guda
Ensay
en Ar temia salina
El dicromato de potasio (K2Cr2O7) grado analtico (99,9 % de pureza) suministrado por la BDH AnalaR fue disuelto en
agua destilada; las distintas concentraciones se obtuvieron a partir de una solucin
madre fresca (1 mg/ml)2. Para la determinacin de la LC50 se hicieron grupos de 10
nauplius y se prob un rango de concentraciones de 5,0;10, 15 y 20 mg/L, donde se
establecieron 3 rplicas por tratamiento,
incluyendo el grupo control. El tiempo de
exposicin fue de 24 h. Culminado ste, se
contaron las sobrevivientes y se anot
cualquier comportamiento anormal (dificultades en la natacin).
CL50: se refiere a la concentracin estimada a la cual se produjo la muerte en el
50 % de la poblacin.
Dificultades en la natacin:
Se refiere a cualquier comportamiento
natatorio anormal.

Tratamiento estadstico
de los resultados
La determinacin de la LC50 se realiz
por estimacin grfica. sta pudo obtenerse

105

representando la mortalidad de las larvas

en porcentajes, en funcin de la concentracin de la sustancia a ensayar, utilizando
ejes con escala lineal a partir de los cuales
se pudo estimar este parmetro por
interpolacin. Se emple adems el programa Microsoft Excel 97 con el estadgrafo
pronstico el cual calcula o predice un valor futuro en una tendencia lineal usando
valores existentes.

Resultados y Discusin
La eclosin de los huevos comenz a
ocurrir aproximadamente a partir de las 16 h
bajo las condiciones antes descritas para
los ensayos preliminares y definitivos. En
el ensayo de toxicidad la viabilidad en el
grupo control fue de un 100 % (tabla) no se
observaron alteraciones en el comportamiento. Los efectos txicos del dicromato
de potasio no se manifestaron en ninguno
de los casos en las primeras 3 h del tratamiento.
En las concentraciones correspondientes a 5, 10 y 15 mg/L se observ en
algunas larvas dificultades en la natacin
a las 24 h, relacionndose con lo reportado sobre los efectos subletales descritos

para diferentes especies de crustceos.5 La

tabla resume los resultados obtenidos en el
ensayo definitivo.
En la figura se muestra el porcentaje de
mortalidad respecto a la concentracin de
la sustancia de estudio en un tiempo de
24 h. La LC50 estimada fue de 12,5 mg/L,
la cual est en el rango de valores reportados en la literatura para ensayos agudos en
invertebrados acuticos, (0,067-59,9 mg/L).4
El cromo hexavalente es acumulado por
los organismos acuticos por difusin
pasiva.6 La toxicidad para los diferentes
grupos, especies y estadios no es la misma
y vara adems de acuerdo con las condiciones ecolgicas y a las caractersticas
qumicas del agua. Las especies de invertebrados como los crustceos son ms sensibles a sus efectos que los vertebrados
como los peces.4
Las mudas en Artemia salina son
muy frecuentes y las nauplius de 24 h
presentan una cutcula muy fina lo que las
hace especialmente sensibles al txico
(cromo VI), el cual penetra a travs de las
barreras fisiolgicas absorvindose rpidamente y provocando diferentes alteraciones en estos organismos, que van desde
efectos subletales sobre la movilidad, la
reproduccin y la hematologa hasta la
muerte de la larva.

TABLA. Valores registrados para el clculo de la LC50 24 h

Concentracin
mg/l

0 (Control)
5,0
10
15
20

Nmero de artemias vivas por pocillo

1
2
3

10
9
6
4
0

10
10
7
4
0

10
10
7
3
0

30
29
20
11
0

T= es el total de artemias vivas al final del ensayo para cada concentracin.

P= es el porcentaje de artemias muertas al final del ensayo para cada concentracin.

106

0
3,3
33,4
63,3
100

M or ta lida d ( % )
FIG. Interpolacin de
la CL 50.

Conclusiones
La LC50 del dicromato de potasio determinada para las condiciones de estudio fue de 12,5 mg/L.

La concentracin de 5,0 mg/L fue la mnima ensayada que provoc efectos adversos en las larvas.
Con los resultados obtenidos se corrobora la sensibilidad de los invertebrados
acuticos frente al dicromato de potasio.

SUMMARY: Due to the potential impact that represents for the environment the emission of
chromates and dichromates (chromium VI) poured as a result of the activity of different industrial
sectors, it is determined the acute toxicity of K2Cr2O 7 in larvae of artemia salina as an alternative
method applied to ecotoxicology
er
satile method, 24-hour nauplius ar
ent
ecotoxicology.. In this vver
ersatile
aree exposed to differ
different
concentr
ations of the compound and the corr
esponding LLC50,
C50, as w
ell as other adv
er
se effects it
well
adver
erse
concentrations
corresponding
ma
apidity
eliability and lo
w cost
mayy cause
cause,, ar
aree determined. This methodology combines simplicity
simplicity,, rrapidity
apidity,, rreliability
low
and, therefore, its use as screening in ecotoxicological tests allows to predict in a short time the
toxicity of numerous chemicals for the aquatic ecosystems.
Subject headings: PO
TASSIUM DICHROMA
TE/toxicity; TTO
O XICITY TEST
S/methods; AR
TEMIA.
POT
DICHROMATE/toxicity;
TESTS/methods;
ARTEMIA.

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Recibido: 29 de mayo del 2001. Aprobado: 30 de
junio del 2001.
Lic. Yuleidis Gonzlez Prez. Centro de Toxicologa y Biomedicina. Autopista Nacional km 1,
Santiago de Cuba, Cuba.

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