Efecto bactericida de la savia de Musa

acuminata (pltano) utilizada individualmente

y en asociacin con kanamicina y etionamida
contra Mycobacterium tuberculosis
multidrogorresistente en modelo animal
Dr. Ortiz Marn Segundo Helmer - Microbilogo Clnico.

Resumen

Abstract

Palabras claves: Savia de Musa acuminata, Mycobacterium tuberculosis MDR

Keywords: Musa acuminata sap, Mycobacterium

tuberculosis MDR

El objetivo del presente trabajo fue determinar el

efecto bactericida de la savia de Musa acuminata complementado con la kanamicina y etionamida. Es un trabajo de investigacin prospectivo,
longitudinal, experimental, aleatorizado, con dos
grupos de trabajo y uno control. Se utilizaron 18
cobayos jvenes, con 400g de peso corporal, distribuidos en los grupos A, B y C, se los infect por
va intraperitoneal, con una cepa del Mycobacterium tuberculosis MDR, con la concentracin de
3x107 en 1ml. Despus de 40 das de infeccin,
se los observ astnicos y con altos porcentajes
de monocitos activos, evidenciando un gran proceso inflamatorio. La savia se extrajo exprimiendo
las hojas del pseudotallo y se guard en frascos
de vidrio estriles. El Grupo A (6 animales), fueron
tratados con 15ml/da de la savia por va oral, el
Grupo B (6 animales), fueron tratados con 83.3 mg
de kanamicina/da por va intramuscular y 63 mg
de etionamida/da por va oral, mas 15ml. de savia
por va oral; el Grupo C (6 animales), sin tratamiento. Se observaron directos, cultivos y anatoma patolgica negativos luego de 30 dosis de savia en el

The Bactericidal effect of the Musa acuminata

sap alone and supplemented with kanamycin and
ethionamide against Mycobacterium tuberculosis
multidrug resistance in animal model
Mg. Segundo Helmer Marn Ortiz. Teacher of
Department of Basic Medical Sciences, Faculty
of Medicine of Medicine the National University of
Trujillo
The aim of the present work were to determine
the bacterial effect of the Musa acuminata sap
associated with kanamycin and ethionamide. This
is a longitudinal, experimental, prospective and
random work. It had two working groups and one for
control, 18 young guinea pigs weighing 400gr were
distributed in groups A, B an C. The were infected
with a sample of Mycobacterium tuberculosis MDR
with a 3x107 in 1ml, intraperitoneally. After 40
days of infection, the animals became asthenic, had
high percentage of active monocytes, evidence of a
high inflammatory process. The sap was extracted
squeezing the leaves of the pseudostem and kept
in sterilized glass bottles. Group A with six animals
was treated individually with sap 15 ml/ day orally

www.intramed.net

Vol. 1 / Nmero 2
1

Grupo A y 16 dosis de savia mas 16 dosis de kanamicina-etionamida en el Grupo B. Conclusiones: La

savia de Musa acuminata elimina los Mycobacterium tuberculosis detectables bacteriolgicamente
observndose la progresin hacia la curacin histolgica y radiogrfica de la tuberculosis pulmonar.

and group B treated with 83.3 mg of kanamycin

intramuscularly and 63 mg of ethionamide orally.
Group C had no treatment at all. Conclusion: The
Musa acuminata sap eliminates al Mycobacterium
tuberculosis bacteriologically detectable and is
observed progression toward healing histologically
and radiologically the tuberculosis.

Introduccin

cumentados y aislados de diferentes partes del pas y

del mundo, sobre el uso de la savia para curar la TBC,
se ha tenido conocimiento por ejemplo que en Pativilca, al norte de Lima, algunos pacientes con tuberculosis usaron la savia del pltano como tratamiento
con cierta mejora clnica (comunicacin personal, Dr.
Roberto Achinelli).
El incremento de la tasa de enfermedad con cepas
multidrogorresistentes, ha sido propsito del presente
trabajo de investigacin, cuyo objetivo es comprobar
la propiedad micobactericida de la savia de Musa
acuminata individualmente y asociada con kanamicina y etionamida.

La tuberculosis es una enfermedad infecto contagiosa, de evolucin crnica y recurrente cuyo agente patgeno es el Mycobacterium tuberculosis, que infecta
principalmente los pulmones1,2. La incidencia de tuberculosis multidrogorresistente (MDR) y extremadamente resistente (XDR) ha aumentado de forma alarmante sobre todo en pases del tercer mundo como
Per, la pobreza, el uso indiscriminado de drogas antituberculosas, el incumplimiento del tratamiento, entre
otras, han propiciado la aparicin de cepas cada vez
mas resistentes a frmacos antituberculosos convencionales3 En el ao 2007 el Comit d e TBMDR, declar que Per es el pas de Amrica Latina con mayor
nmero de casos de TBMDR y TBXDR, el 80-90% se
encuentran en Lima y la TBMDR existe en casi todas
las regiones del Per 4. Entre los pacientes infectados
con el bacilo de Kock resistente a cinco o ms drogas,
el resultado del tratamiento no fue favorable y su costo con drogas de segunda lnea fue de $10,000 por
paciente5. Segn un estudio de Bonilla, con un total
de 43 pacientes XDR, 37 recibieron ITR, observndose la curacin en 17. Lima tiene el 91% de los casos de
tuberculosis XDR y en la Provincia de Trujillo ya se diagnosticaron 5 casos6. Las proyecciones estadsticas
de la OMS para el ao 2020 son de mil millones de
infectados, 1500 millones enfermarn y 36 millones
de moriran7
La familia Musaceae presenta los siguientes componentes qumicos no alimenticios: fructosanos, cido
fenlico, antocianinas, terpenoides, esteroides alcaloides aislados como la amina alcalidica y alcaloides
indlicos, adems la savia de pltano est constituida por agua en un 85%, en el extracto de la hoja se
encontr una mezcla de polihidroxifenoles y taninos8,
adems posee propiedades antibiticas, contra el Mycobacterium phlei y Rhodococcus 9.
El uso de la savia ha sido probado desde tiempos remotos en Mxico, Colombia y Bolivia para curar la
enfermedad pulmonar.10 Existen antecedentes no do-

Material y mtodos
Es un estudio de tipo prospectivo, longitudinal, experimental, realizado en el laboratorio de la Seccin de
Microbiologa de la Facultad de Medicina, desde el 15
de abril del 2008 hasta octubre del mismo ao.
Clculo de la muestra: n= (Z+Z)
E
Z=1.645
= 0.5%;
Z=0.84
=0.20%
n=6
(6,175)
Se asume que =E por no haber estudios anteriores
La savia de la Musa acuminata se extrajo de las hojas
que conforman el pseudotallo, exprimindolas y obteniendo la savia, esta se deposit en un frasco estril
de boca ancha, conservndose en la parte media del
refrigerador hasta su uso. Las plantas se encuentran
en el vivero de la Ciudad Universitaria de la Universidad Nacional de Trujillo.

Modelo Experimental
Muestra: Constituida por 18 cobayos, cada grupo ex-

www.intramed.net

Vol. 1 / Nmero 2
2

perimental cuenta con 6 animales.

Los cobayos fueron adquiridos de un criador de cuyes.

hasta los seis meses. Para autopsiar cada animal se fijaron las extremidades de los cobayos en una base de
cartn grueso, mediante una pinza y tijera quirrgica
se abrieron los tejidos, aplicando las medidas de bioseguridad16, se extrajeron los pulmones, estos se depositaron en placas de Petri, para apreciarlos en fresco y fotografiarlos. Las muestras de tejido pulmonar se
tomaron mediante un escalpelo para lo cual se realiz
dos incisiones profundas en el pulmn y se extrajeron
porciones de tejido de ambos lbulos superior y medio pulmn en forma de tringulo, con estos se realizaron frotis para la bsqueda de b.a.a.r mediante la
coloracin del Ziehl Neelsen, otros fragmentos de este
tejido pulmonar fueron triturados con la ayuda de una
bagueta dentro de un tubo 13x100mm con 1ml. de
SSF. La suspensin de este tejido se cultiv mediante
una pipeta Pasteur, en el medio Lowenstein Jensen y
se incubaron durante 30 das a 37C; as mismo se
conservaron otros fragmentos de los pulmones en formol al 10%, para el estudio histopatolgico, a cargo
de la Patloga Dra. Patricia Contreras (Anexos). Este
mismo procedimiento se realiz con dos cobayos de
los Grupos A y B, transcurrido seis meses del trabajo
experimental.
Se tomaron placas radiogrficas de trax a dos cobayos de los grupos A , B y C a los 40 das de infectados y
slo a los cobayos de los grupos A y B a los seis meses
de finalizado el experimento el experimento.
Este trabajo de investigacin tuvo una duracin de
180 das.

Los criterios de inclusin fueron:

Animales de tres meses de edad, con 400g de peso
corporal, consumo normal de alfalfa, sin lesiones ni
parsitos intestinales.
Los criterios de exclusin fueron:
Animales sin peso normal, astnicos y con parsitos
intestinal y ectoparsitos
La infeccin se realiz con una cepa joven del Mycobacterium tuberculosis MDR resistente a rifampicina
e isoniacida, esta cepa fue obtenida del laboratorio
del Hospital Regional Docente de Trujillo, cuyo cdigo
es 1097.
Se inyect por va intraperitoneal en 18 cobayos, 1ml.
de la suspensin del cultivo en una concentracin
de 3 x 107 microorganismos en 1ml mediante una
jeringa de 10ml. La dilucin se obtuvo mediante el
Nefelmetro de Mac Farland (tubo N2). Los cobayos
fueron distribuidos en tres grupos, cada uno de seis
animales y ubicados en jaulas de metal en grupos de
a dos animales.
El tamao muestral se obtuvo usando la frmula de
estimacin que se encuentra en el libro de Bioestadstica de Steel Torrie Pag 115.

Grupo A: Despus de 40 das de infeccin se inici

la administracin, diaria de 15ml de savia del pltano

mezclada con alfalfa chancada con una piedra. La extraccin de la savia, se realiz exprimiendo el pseudotallo maduro de la Musa acuminata, guardndose en
un frasco estril y almacenndose en el refrigerador.

tica
Se tuvo en cuenta el cuidado, la utilizacin apropiada y el trato humanitario de los animales empleados
en la investigacin, adems se tuvo en cuenta un ambiente fsico y espacio adecuado de acuerdo a la especie y tamao, segn los documentos publicados en
la Organizacin Panamericana de la Salud, respecto al
animal como sujeto de experimentacin17.

Grupo B: Con el mismo tiempo de infeccin, se les in-

yect diariamente a cada uno de los cobayos 83.3mg

(0.08ml) de kanamicina/da por va intramuscular,
mediante una jeringa de tuberculina y de 63mg de
etionamida/da, diluido en agua destilada y administrado por va oral y 15ml de la savia mezclada con su
alfalfa chancada.

Definiciones Operacionales
Bacilos del Mycobacterium tuberculosis MDR bien coloreados y sin alteracin celular
Cobayo sano. Activo, ingiere alimento de manera
continua, con recuento de monocitos inactivos de
2-4%, frecuencia respiratoria entre 90 - 129 resp/
min, temperatura entre 37 - 38 C y pesa entre 400
500 g. Radiolgicamente los pulmones del cobayo
sano muestran moderada radiolucidez homognea en
ambos hemitorax, con escasos patrones intersticiales
parahiliares.
Cobayo enfermo. Astnico, anorxico, con dificultad

Grupo C: Este grupo Control, slo se le administr

SSF.

Diez das despus de terminado el tratamiento, 30 dosis (grupo A) y 16 dosis (grupo B), se procedi a anestesiar con cloroformo uno a uno, los cobayos de los
Grupos A y B, dejando dos cobayos de estos Grupos

www.intramed.net

Vol. 1 / Nmero 2
3

respiratoria, con 12-16% de monocitos activos( citoplasma amplificado, con pseudpodos). Con pulmones que mostraron mltiples granulomas y baciloscopa positiva para b.a.a.r.
Cobayo curado. Mayor peso corporal, crecieron, vivaces, consumieron toda su alfalfa, con 2-4% de monocitos inactivos. Despus de seis meses de tratados,
los frotis de tejido pulmonar y cultivo fueron negativos
para B.K.
Anlisis Estadstico. Es un trabajo de investigacin
principalmente aleatorizado, donde han intervenido
dos grupos de trabajo y un control.

Foto N1: Pulmones de Cobayo con mltiples

granulomas

Resultados
Se observ un notable aumento del porcentaje y activacin de monocitos durante el tiempo en que el animal estuvo enfermo y disminucin sucesiva y retorno
a su estado inactivo conforme transcurrieron los das
de tratamiento, hasta la progresiva curacin de los
cobayos (esta observacin se tendr que validar con
otro trabajo de investigacin); motivo por el cual no
se hicieron ms observaciones despus de los 16 y
30 das.
El aspecto de los pulmones recin extrados permiti
observar la ausencia de granulomas superficiales, evidenciados mediante las radiografas de trax de los
animales curados.

Foto N2: Pulmones sin granulomas cobayo

del Grupo A

Tabla N 1: Tratamiento de la TB Pulmonar con la

savia de Musa acuminata
Con 16 dosis
+ kanamicna etionamida

Con 30 dosis
de savia

Cobayos
enfermos

Cobayos
curados

Grupo A

Grupo B

Grupo C

Foto N3: Pulmn cobayo del Grupo C en fresco con

muchos granulomas

www.intramed.net

Vol. 1 / Nmero 2
4

Discusin

Foto N4: Radiografa de trax de cobayo enfermo

En presente trabajo de investigacin ha comprobado

que la va peritoneal no desencaden enfermedad
extrapulmonar o generalizada a pesar de la formacin
de gran nmero de granulomas; para corroborar este
hallazgo se hicieron frotis de todos los rganos y examen baciloscpico de heces y orina, cuyo resultado
fue negativo en todas la muestras. Ha sido muy notable la eficaz respuesta del sistema inmune de los
cobayos y sin ningn efecto colateral. Segn Basaraba
las diferentes especies de modelos animales para tuberculosis humana difieren en la morfologa de la lesin pulmonar o extrapulmonar, la cual puede influenciar en la respuesta a la terapia10.
Durante la enfermedad y como consecuencia de la
replicacin masiva de los bacilos de Koch dentro de
los macrfagos, mediante mecanismos de patogenicidad como la inhibicin de la apoptosis celular, por
la resistencia intracelular al bloquear la accin de la
bomba de ATPasa, la cual es la responsable de la acidificacin del medio intracelular en el fagolisosoma;
la consecuencia de ello es la lisis de los macrfagos,
y las micobacterias invaden otros monocitos. Entre los
componentes de la pared celular el 6,6 dimicolato de
trehalosa estimula la generacin de la formacin del
granuloma7.

Foto N5: Radiografa de trax de cobayo curado

Una prueba de la gravedad de la TBC pulmonar se presenta en la (Foto 1), el pulmn de un cobayo con
mltiples granulomas y en contraste el pulmn de un
cobayo sin granulomas, al que se le administr la savia del pltano (Foto 2).
La muerte bacteriana podra ocurrir por efecto de la savia del pltano que estara alterando la estructura de
la pared celular permitiendo el ingreso o libre accin
de los antibiticos; se podra aseverar que habra una
accin sinrgica alcanzando una actividad bactericida
altamente letal12,13. La destruccin de los bacilos
dejaran en libertad ciertos neoantgenos, los cuales
seran fagocitados por las clulas presentadoras de
antgenos (CPA), procesando y generando eptopes
antignicos inmunodominantes, que seran presentados a los Linfocitos THO, estos a la vez se activaran
y sumado a la intervencin de la IL-12, estimularan
la diferenciacin de estos linfocitos al subtipo TH1 y
estos mediante sus mecanismos efectores como la
sntesis del interfern que activa a los monocitos,
ocasionando la destruccin intracelular del BK11.

www.intramed.net

Vol. 1 / Nmero 2
5

En un estudio prospectivo controlado con 39 pacientes con TB pulmonar MDR, se administr kanamicina,
etionamida, cycloserina y PAS, observndose en 29 de
ellos la conversin del esputo a la negatividad dentro
de los seis meses de tratamiento15.

lgica y radiogrfica de la tuberculosis pulmonar con

30 dosis.
2. La savia de Musa acuminata utilizada en asociacin con Kanamicina y Etionamida, elimina los Mycobacterium tuberculosis con 16 dosis.

Los animales que recibieron ambos medicamentos y

conforme disminuyen los antgenos micobacterianos,
empieza a reducirse el proceso inflamatorio y los monocitos disminuyen en nmero y entran en estado de
reposo o inactividad. Paralelamente coincide con la
recuperacin de la salud de los cobayos, estos consumen ms alfalfa y aumentan de peso.

Dr. Ortiz Marn Segundo Helmer:

oms857@hotmail.com

Anexo

La reduccin del tiempo de tratamiento, de poder aplicarse en el futuro sera un beneficio muy importante
para los pacientes, esto nos permite inferir, que los
antibiticos, kanamicina y etionamida, mas la savia de
Musa acuminata causan en tiempo sumamente corto
la muerte del Mycobacterium tuberculosis, como lo
podemos observar en la (tabla 1 ).
El efecto bactericida de la savia de Musa acuminata
contra el Mycobacterium tuberculosis MDR se verific mediante la autopsia que permiti ver en fresco el
tejido pulmonar, sin granulomas, de color rosado, preservado en formol en los grupos A y B. En cambio los
pulmones del grupo control, presentan gran nmero
de granulomas, en fresco se observaron con una coloracin heptica (Foto 3). El cultivo de fragmentos de
los pulmones de los grupos A y B fueron negativos ; en
cambio el cultivo de fragmentos de los pulmones del
grupo C, fueron positivos Las radiografas de trax de
los grupos A y B permiten observar, segn el informe
del radilogo, una radioluminosidad que denota la ausencia de opacidades en el pulmn de los cobayos tratados (Fotos 4 y 5). En el estudio anatomopatolgico
de fragmentos de los pulmones enfermos del cobayo
sin tratamiento se observa una neumonitis granulomatosa altamente caseificante y en el cobayo curado
la presencia de focos linfoides aislados, as como un
cuadro histopatolgicamente compatible con resolucin de TB pulmonar.
Se considera como nica limitacin la parte econmica ya que todos los gastos del presente trabajo fueron
costeados con recursos propios.

Conclusiones
1. La savia de Musa acuminata elimina los Mycobacterium tuberculosis detectables bacteriolgicamente,
observndose una progresin hacia la curacin histo-

www.intramed.net

Vol. 1 / Nmero 2
6

tant pulmonary tuberculosis patiens. Indian J Chest Dis Allied Sci

2006 Jul-Set.;48(3): 183-6

Bibliografa
1.. Frieden TR, Sterling TR, Munsiff SS, Watt CJ, Dye C. Tuberculosis.
The Lancet 2003; 362: 88799

15. Comisin Nacional Chilena de Investigacin Cientfica y Tecnolgica. Manual de normas de bioseguridad. 2 edicin. Chile. 2008.
Disponible en: http://investigacion.uach.cl/archivos/manual_bioseguridad_2008.pdf

2. Brainwald F, Fauci AS. Harrisons principles of internal medicine.

15 edicin. Mc. Graw-Hill. EEUU 2001.
3. Ministerio de Salud. Actualizacin de las normas y procedimientos, para el control de la tuberculosis. Marzo del 2001

16. Organizacin Panamericana de la Salud. Cuadernos del Programa Regional Chileno de Biotica. Chile. 2007. Disponible en: www.
paho.org/spanish/bio/acta15.pdf

4. Anlisis de la situacin actual y propuestas de lineamientos

tcnicos para el control de la TBMDR en el Per. Comit de TBXDR. Per 2008. Disponible en http://www.scielo.org.pe/pdf/amp/
v25n4/allv25n4.pdf
5. Suarez PG, Floy K, Portocarrero J, Alarcn E, Rapiti E, Ramos G,
Bonilla C, et al. Feasibility and cost-effectiveness of standardised
second-line drug treatment for cronic tuberculosis patients: a national cohort study in Per, Lancet 2002;359:1980-89.
6. Bonilla CA, Crossa A, Jave HO, Mitnick CD, Jamanca RB, et al.
(2008) Management of Extensively Drug-Resistant Tuberculosis in
Peru: Cure Is Possible. PLoS ONE 3(8): e2957. doi:10.1371/journal.
pone.0002957. Disponible en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/
articles/PMC2495032/pdf/pone.0002957.pdf
7. Es posible la erradicacin de la tuberculosis? La experiencia del
modelo experimental en ratones ha servido para perpetuar la estrategia errnea del ratn en el diseo de nuevas vacunas. Dr. Cardona
Iglesias PJ. Unidad de Tuberculosis, Hospital Universitario Germans
Triasi Pujol. Barcelona, Espaa. Disponible en www.siicsalud.com/
des/des032/03723003.htm.
8. Fernndez FU, Rodrguez RT, Torrez FM, Oliva IM, Prez FC, Bacallao GM. Caractersticas qumicas y farmacolgicas y propiedades
farmacolgicas del extracto de Musa sp. ABB (pltano burro). Rev
Cubana Plant Med 1997;2(2-3):40-4
9. Scout WE, Mckay HH.,Schaffer PS, Fontaine TD. The partial purification and properties of antibiotic substances from the Musa sapientum (banana). (From the Bureau of Agricultural and Industrial
Chemistry, Agricultural Research Center). J Clin Invest. 1949 September; 28(5 Pt 1): 899902.
10. Basaraba RJ. Experimental tuberculosis: role of comparative
pathology in the discovery of improved tuberculosis treatment strategies. Tuberculosis(Edinb).2008;88(suppl 1): 35-47
11. Abbas AK, Litchman AH. Inmunologa celular y molecular. 5 edicin. Editorial Elsevier. Madrid-Espaa 2004.
12. Goodman y Gilman. Las bases farmacolgicas de la teraputica.
12 Edicin. Mc. Graw-Hill companies inc. Mexico. 2012
13. Ortiz,MS. Tuberculosis: Eficacia bactericida in vitro de la savia de Musa acuminata contra Mycobacterium tuberculosis . UNT.
2004. En los archivos del CONCYTEC
14. Prasad R, Verma SK, Sahai S, Kumar S, Jain A. Efficacy an safety
of kanamycin, ethionamide, PAS and cycloserine in multidrug-resis-

www.intramed.net

Vol. 1 / Nmero 2
7