Practica No.

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Pruebas Cruzadas de Compatibilidad Sanguinea

Objetivo: El alumno al finalizar la prctica determinar si dos sangres; del donador y del receptor, son
compatibles, para practicar la transfusin sangunea.

Generalidades: En todo banco de sangre y ante la inminencia de transfundir sangre a un individuo, es

obligatorio efectuar la determinacin del tipo sanguneo y el factor Rh del receptor; al seleccionar la sangre a
transfundir, deber ser del mismo tipo sanguneo y factor Rh del paciente, cumpliendo con esta premisa, se
efectuar en el laboratorio un anlisis que nos permita en vitro detectar si en ellas, tenga un anticuerpo
anormal, que pueda causar aglutinacin o hemlisis de los glbulos rojos en la circulacin sangunea del
receptor. La identificacin correcta de la sangre elegida para la donacin, la del paciente que ha de recibir la
transfusin, la exactitud, velocidad, prevencin y de control de calidad y omisin de errores, son aspectos que
al realizar las pruebas cruzadas, revisten gran importancia, pues errores humanos descubiertos despus de
iniciada una transfusin son imposibles de corregir y ponen en peligro la vida del paciente.

Fundamento: Las pruebas cruzadas deben:

a)
Detectar anticuerpos IgM de carcter aglutinante o hemolizante que fijan complemento, por lo que se
debe trabajar con sangre recin extraidas y coaguladas.
b)
Investigar Anticuerpos IgG que por su naturaleza no producen aglutinacin y se deben utilizar
distintos medios que permitan demostrar su presencia, produciendo aglutinacin o hemlisis.

Material y equipo:

1 gradilla

4 tubos 13x 100

12 tubos 10 x 75

6 pipetas Pasteur con bulbo

2 centrifugas Serofuge

Bao mara a 37C

Slucion salina en pizetas

Albmina bovina al 22%

Suero Antiglobulina Humana (Coombs)

Tcnica:

1.
2.
3.

Separar los sueros de los globulos rojos

Realizar una suspensin de globulos rojos del disponente y del receptor al 5% previamente lavados
Se colocan 7 tubos en lnea recta y se marcan:
1
2
3
4
5
6
7
Er

1.
2.

Sr

Ed

Sd

FM

fm

A la Fase mayor se le pone una gota de suero del receptor ms una gota de globulos rojos al 5% del
disponente
A la fase menor se le pone una gota de suero del disponente ms una gota de globulos rojos al 5%
del receptor

3.

Al tubo control se le pone una gota de suero del receptor ms una gota de globulos rojos al 5% del
receptor
4.
Se centrifugan a 2500 rpm por 30 y se lee desprendiendo suavemente el sedimento en busca de
aglutinacion de no existir aglutinacin, se continuar
5.
Se agregan dos gotas de Albmina Bovina al 22% y se centrifuga a 2500 rpm por 30 y se lee
6.
Se incuban a 37C durante 30 minutos, se extrae los tubos
10.Se centrifuga a 2500 rpm por 30 y se leen
11.Se llenan con solucin salina 3/4 de ambos tubos (fase mayor y menor) se mezclan y se centrifugan a
2500 rpm por 30, se sacan de la centrfuga y se decantan y se vuelve a aplicar solucin salina (sta
operacin se repite tres veces) en el ltimo lavado, se decantan completamente el tubo
12.Al sedimento residual se le agregan dos gotas de reactivo de Coombs a ambos tubos y se centrifugan a
2500 rpm por 30, se leen cuidadosamente para buscar que no haya hemlisis ni aglutinacin
13.Se le agrega a cada tubo una gota de clulas control se centrifuga a 2500 rpm por 30 y se leen en busca
de aglutinacin.
Conclusin:

La prueba mayor, menor y control contienen:

Prueba mayor: suero del receptor con globulos rojos del disponente (2 gotas de suero del receptor
ms 1 gota de suspencin de eritrocitos del disponente)

Prueba menor: suero del disponente con globulos rojos del receptor (2 gotas de suero del
disponente ms 1 gota de suspencin de eritrocitos del receptor)

Control: suero del recpetor y globulos rojos del receptor (2 gotas del suero del receptor ms 1 gota
de suspencin de e ritrocitos del receptor )

Si en todos los pasos no existi aglutinacin o hemlisis, las pruebas son 100% compatibles y la
sangre puede transfundirse, en caso de existir aglutinacin o hemlisis, en cualquiera de los pasos se
considera incompatibilidad, las pruebas se suspenden y se comienza a investigar otra bolsa de sangre
del mismo tipo sanguneo y factor Rh, siguiendo los mismos pasos.

Si la incompatibi lidad, se encuentra en los tubos con salina (1 y 2) probablemente se trata de una
IgM y hay una equivocacin en el tipo sanguneo, por lo tanto se debe ratificar el tipo del donador.

Si la aglutina cin es en el tubo menor en salina se trata de una IgM del donante y es de
esperarse, en el caso de emplearse sangre O.

Cuandose efectua el cruce con receptores de tipo sanguneo distinto esta sangre puede emplearse,
de preferencia el paquete globular. Es de hacerse notar que tanto la aglutinacin como la hemlisis son
macroscpicas y que en muy pocos casos es necesario utilizar el microscopio.
Este mtodo por los numerosos pasos que hay que efectuar, al parecer es complicado, pero la
prctica continua del mismo se vuelve simple y automatizado y en muchas ocasiones de acuerdo con la
urgencia se puede reducir la incubacin, con primera lectura a los 20 minutos, si se reporta negativo, enviar la
sangre a transfundir, continuando con el mtodo hasta cumplir con los tiempos sealados.

Las investigaciones de mtodos ms sencillos y gran confiabilidad, han llevado a buscar que la
velocidad de algunas reacciones antgeno anticuerpo de grupos sanguneos, aumentan considerablemente si
la incubacin se lleva a cabo en condiciones de ba ja fuerza inica entre sus ventajas, se encuentra el
acortamiento de los tiempos de incubacin, la posibilidad de detectar algunos anticuerpos dbiles que no
pueden detectarse por otros mtodos y la formacin de aglutinados ms fuertes que los producidos por otras
tcnicas en la fase de Antiglobulina, aumentan un tanto las reacciones dbiles, probablemente debido a la
unin inespecifica de los componentes del complemento. Los reactivos que han de utilizarse en las tcnicas
deben prepararse y controlarse con esmero, y las condiciones de las reacciones deben ser tan precisas para
evitar resultados positivos falsos no cabe duda de que los mtodos con LISS, si se efectuan adecuadamente
son excelentes, siempre y cuando lo empleen pesonal debidamente entrenados este recurso no es de uso
comn y su uso est restringido a muy pocos centros especializados.

Interpretacin de Resultados

Para el corrector manejo de los resultados se deber anotar despus de cada observacin

Aglutinacin en cualquiera de las pruebas mayores no sera necesario proseguir con los siguientes
pasos, pus demuestra in compatibilidad

Las anotaciones se pueden realizar en tarjetas diseadas exprofeso y de las cuales cada
laboratorio contar con un modelo, cualquiera que ste sea debe contener los datos generales, de
receptor y donador, cada tarjeta debe ser adherida a la bolsa de sangre correspondiente y al enviarse a
la aplicacin del paciente, se guardar en el expediente del mismo.