IV JORNADAS SOBRE INNOVACIN

EN EL SECTOR FRUTCOLA
EXTREMEO
Don Benito, 29 de Enero de 2009

UNIN EUROPEA
Fondo Europeo de
Desarrollo Regional

Vicepresidencia Segunda y Consejera de

Economa, Comercio e Innovacin

IV JORNADA SOBRE INNOVACIN EN EL SECTOR HORTOFRUTCOLA

Don Benito, 29 de Enero de 2009

PROGRAMA

11:00 Apertura. D. Francisco Prez Urbn (Secretario General de Desarrollo Rural

y Administracin Local) y D. Jess Alonso Snchez (Director General de
Innovacin y Competitividad Empresarial)
11:25 Influencia del 1-MCP en la calidad postcosecha de tres cultivares de ciruela
Beln Velardo Micharet. INTAEX
11:50 La polinizacin del ciruelo japons en Extremadura. Problemtica y
seleccin de variedades polinizadoras.
Engracia Guerra Velo. Finca La Orden
12:15 Sistema de Vigilancia del Sector de la Fruta en Extremadura: Un proyecto
hecho realidad.
Juan Manuel Lpez - Roberto Ballesteros. (InfocenterSudoeste Recursos)
12:40 Nuevas variedades de fruta adaptadas al consumidor final: EL SABOR Y LA
TEXTURA.
Luis M Aliseda Martn, Director Centro I+D de Viveros Provedo SA
13:05 Comportamiento varietal y optimizacin de la calidad de comercializacin y
de consumo de fruta de hueso.
Cristina Jos Miguel Pintado. INTAEX
13:30 Fitosanitarios: Presente y Futuro.
Miguel Valero Valero. Dtor Gerente. Asesor rea Agroalimentaria.
AGQ Labs. (Sevilla)
14:00 Clausura. Da. Ana M Alejandre Bueno (Directora General de Promocin
Empresarial) y D. Antonio Chavero Hidalgo (Presidente AFRUEX)

LA
POLINIZACIN
DEL
CIRUELO
JAPONS
EXTREMADURA. PROBLEMTICA Y SELECCIN
VARIEDADES POLINIZADORAS.

EN
DE

ME. Guerra1,2, A. Wnsch2, M. Lpez-Corrales1 y J. Rodrigo2

1

Departamento de Hortofruticultura. Centro de Investigacin 'Finca La Orden- Valdesequera'.

06187 Guadajira, Badajoz.
2
Unidad de Fruticultura. Centro de Investigacin y Tecnologa Agroalimentaria de Aragn
(CITA) Avda. Montaana 930, 50059 Zaragoza.

El ciruelo japons en Extremadura

El ciruelo japons ha experimentado un gran crecimiento de superficie cultivada
en Extremadura en los ltimos aos, pasando de 959 ha en 2000 a 4.223 ha en 2007 y
superando la superficie destinada al cultivo de melocotones (2.760 ha) y nectarinas
(2.800 ha). Este protagonismo creciente del ciruelo en la fruticultura extremea queda
reflejado en un aumento de las producciones, que llegaron a 68.000 t en 2007.
La produccin de ciruelas en Extremadura se centra en variedades de
maduracin temprana destinadas al consumo en fresco, recayendo ms del 50% de la
produccin en variedades de piel negra, y el resto en variedades de piel roja amarilla.
Las ms cultivadas en la actualidad son Angeleno, Larry Ann, Songold, Fortune,
Black Diamond, Black Amber, Red Beaut, Black Star y Black Gold.
A pesar de la gran importancia que ha alcanzado el cultivo del ciruelo japons
en Extremadura, en ocasiones sufre grandes oscilaciones en el cuajado de un ao a otro
que repercuten negativamente en la cosecha.

Polinizacin y cuajado
El cuajado en el ciruelo japons se puede ver afectado por diferentes causas,
desde plagas y enfermedades a factores climticos adversos durante la floracin como
las heladas. La polinizacin tambin es determinante en el establecimiento del cuajado
definitivo, ya que es necesario que se produzca la fecundacin de al menos un vulo
para que se produzca el cuajado, por lo que es importante la presencia de suficientes
insectos polinizadores para asegurar el transporte del polen hasta el estigma de las
flores. Al igual que otros frutales de hueso, el ciruelo japons presenta incompatibilidad
polen-pistilo de tipo gametoftico, controlado por un mecanismo gentico de
reconocimiento de alelos S. En el pistilo de la flor se expresan dos alelos S distintos,
mientras que en el grano de polen se expresa un nico alelo S. Este mecanismo impide
la autofecundacin, de manera que una variedad no pueda ser fecundada por su propio
polen, promovindose as el cruzamiento.
Durante la polinizacin, las abejas depositan los granos de polen en el estigma
de la flor, donde germinan generando un tubo polnico. Las flores de variedades
autocompatibles pueden ser fecundadas con su propio polen, mientras que las
variedades autoincompatibles necesitan ser polinizadas con polen de otra variedad que
tenga al menos un alelo S diferente, lo que hace necesaria la presencia en la plantacin
de rboles polinizadores de otras variedades.

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En las relaciones compatibles entre

variedades, si el alelo S del polen de la
variedad polinizadora es distinto a los alelos
S del pistilo de la variedad polinizada, los
tubos polnicos crecen a lo largo del estilo
hasta el vulo, donde se produce la
fecundacin, la formacin del embrin y el
posterior desarrollo de fruto (Fig. 1). Sin
embargo, en las relaciones entre variedades
incompatibles entre s, el grano de polen
presenta el mismo alelo que el pistilo y los
tubos polnicos detienen su crecimiento en el
estilo antes de alcanzar el ovario,
impidiendo que el vulo sea fecundado (Fig.
1) y por consiguiente impidiendo que haya
cuajado.
Aunque en el cultivo de
variedades autoincompatibles se asegure la
presencia de polen compatible con la
introduccin de variedades polinizadoras,
puede producirse falta de cuajado si el polen
no se traslada adecuadamente hasta el
estigma de las flores. Para ello es necesario
asegurar la presencia de insectos
polinizadores mediante la introduccin de
colmenas durante la floracin.
Adems de existir polen compatible en
la plantacin de otra variedad es
imprescindible que las dos variedades
coincidan en floracin, por lo que es
importante conocer la poca de floracin de
cada variedad en la zona de cultivo.

Sc
Sc Sa

SaSb
SaSb

Figura 1. Crecimiento de los tubos

polnicos en relaciones entre variedades
compatibles (Sc) e incompatibles (Sa).

En este trabajo se analizan las posibles causas de los bajos cuajados encontrados
en algunas de las principales variedades de ciruelo japons cultivadas en Extremadura,
con la finalidad de suministrar al sector frutcola extremeo una alternativa agronmica
que permita solucionar cuajados errticos. Para ello, se analiza si los problemas de
produccin son debidos a una falta de polinizacin mediante la realizacin de ensayos
de polinizacin y cuajado en campo. A continuacin, se determina si la causa de esta
situacin es la incompatibilidad polen-pistilo mediante la observacin del crecimiento
de los tubos polnicos al microscopio en auto-cruzamientos y cruzamientos entre
variedades realizados en laboratorio. Finalmente, se identificaron los grupos de
incompatibilidad de las principales variedades cultivadas en nuestra Comunidad
mediante la determinacin gentica de los alelos S de cada variedad usando tcnicas
moleculares.

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Estudio de la polinizacin en campo

Con el fin de determinar si la falta de cuajado est causada por un problema de
polinizacin o se debe a otros factores externos, se realizaron ensayos de cuajado en
campo utilizando variedades con un historial de cuajados irregulares en diferentes
parcelas. En cada una de ellas se establecieron tres ensayos. En el primero, se marcaron
ramas de varios rboles al azar, en las que se realiz un seguimiento del proceso de
cada y cuajado de frutos en condiciones reales de cultivo. En los restantes ensayos se
seleccionaron flores en estado de botn globoso prximo a la apertura de la flor (Fig.
2), a las que se les quit manualmente los ptalos y los estambres (Fig. 3) para impedir
la llegada de insectos con polen externo. Una parte de estas flores fueron polinizadas
manualmente con polen previamente obtenido de la misma variedad, y el otro grupo de
flores emasculadas fueron polinizadas con polen de otras variedades coincidente en
floracin. En todos los ensayos se realizaron conteos semanales del nmero de flores y
de frutos en desarrollo hasta la maduracin.

Figura 2. Flores en estado de botn globoso, Figura 3. Flores emasculadas en las que se
han eliminado manualmente ptalos y
un da antes de la apertura de la flor.
estambres.
Los porcentajes de cuajado obtenidos en el tratamiento en condiciones reales
fueron variables dependiendo de las plantaciones y variedades, pero en general fueron
muy bajos, reflejando la falta de produccin de las variedades analizadas en las
condiciones de cultivo. En las autopolinizaciones de estas variedades no se obtuvo
cuajado, indicando que la falta de produccin se debe a una polinizacin inadecuada.
Finalmente, en los ensayos de polinizacin cruzada se obtuvieron diferentes resultados;
mientras que en algunas combinaciones no se obtuvo cuajado, en otras se obtuvo un
cuajado mucho mayor que el obtenido en el resto de la plantacin en las condiciones de
cultivo, revelando una clara influencia de la variedad polinizadora en el cuajado.
Determinacin de las relaciones de compatibilidad
Una vez detectada la polinizacin como posible causa de cuajados errticos, se
evalu la incompatibilidad floral. Por un lado se analiz la autocompatibilidad o
autoincompatibilidad de cada variedad y por otro se estudiaron las relaciones de
compatibilidad entre variedades. Para ello, se realizaron ensayos de autopolinizacin y
polinizacin cruzada en laboratorio.

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En estos ensayos se recogieron

flores en estado de botn globoso, se
emascularon, se colocaron en bandejas
(Fig. 4), se polinizaron manualmente y
varios das despus, una vez
transcurrido el tiempo suficiente para
que los tubos polnicos alcanzaran el
ovario, se recogieron los pistilos y se
prepararon para su observacin al
microscopio. En las variedades
autocompatibles y en los cruzamientos
entre variedades compatibles entre s se
observ el crecimiento de los tubos
polnicos a travs del estilo hasta llegar
al ovario (Fig. 5A), mientras que en los
autocruzamientos
de
variedades
autoincompatibles
y
en
los
cruzamientos
entre
variedades
incompatibles entre s, los tubos
polnicos se detuvieron en la mitad del
estilo sin alcanzar el ovario (Fig. 5B).

Figura 4. Flores emasculadas para realizar

cruzamientos en laboratorio.

COMPATIBLE

INCOMPATIBLE

(A)

(B)

Figura 5. Tubos polnicos en relaciones de compatibilidad (A) e incompatibilidad (B) en ciruelo

japons.

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La combinacin de los resultados obtenidos en campo y en laboratorio permiti

determinar la autocompatibilidad de algunas variedades como Laettitia, Casselman
Santa Rosa y la autoincompatiblidad de otras como Angeleno, Fortune, Songold
Black Amber. Igualmente, se determinaron relaciones entre variedades compatibles
(como Songold y Fortune Angeleno y Santa Rosa) e incompatibles como Fortune y
Black Amber.

Composicin allica S de las variedades

La compatibilidad entre variedades tambin puede ser determinada
identificando los alelos de cada variedad mediante el uso de marcadores moleculares.
Se pueden identificar los alelos presentes en cada variedad usando tcnicas de PCR,
mediante el uso de cebadores especficos complementarios en zonas conservadas del
ADN. Ya que los distintos alelos S tienen diferente tamao, esta tcnica permite
detectar las diferencias de tamao entre los diferentes alelos y asignar a cada variedad
sus alelos correspondientes (Fig. 6).
Estndar
de tamao Frontier Nubiana Eldorado

Sb

Sb

Q. Rosa Angeleno S. Rosa Ambra

Sb

Se

Sb

Sf
So
Sc

Sh

Sh

Sh

Sc

Sc

Sh

Figura 6. Composicin allica S de siete variedades de ciruelo japons mediante

amplificacin por PCR de ADN de cada variedad.

En este trabajo se determin la composicin allica S de algunas variedades de

ciruelo japons ampliamente cultivadas en nuestra regin as como la de otras de ms
reciente introduccin (Tabla 1).

Grupos de Incompatibilidad
Las variedades analizadas mediante PCR fueron incluidas en sus correspondientes
grupos de incompatibilidad segn los alelos identificados, obtenindose 18 grupos de
incompatibilidad distintos. Aquellas variedades que presentan los mismos alelos son
variedades incompatibles entre s y se incluyen dentro del mismo grupo de

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incompatibilidad. Por el contrario, aquellas variedades que se encuentren en grupos de

incompatibilidad distintos tendrn al menos un alelo S diferente y sern por tanto
variedades compatibles entre s, pudiendo utilizarse como polinizadoras unas de otras
siempre que coincidan en floracin (Tabla 1).

Tabla 1. Grupos de Incompatibilidad (G.I.) de las variedades analizadas en este trabajo.

G. I.

Composicin
allica

I
II

SaSb
SbSc

III
IV

SbSf
SbSh

VII
VIII

ScSh
SeSh

IX
X
XI

SfSg
ShSk
ScSe

XII
XIII
XIV
XV
XVII
0

SbSe
SeSf
SaSc
SgSh
SbSo
SaSh
ScSo
SeSk
ShSq
SrSs

Variedades

606, Red Beaut

Black Amber, Black Beaut, Delbartazur, Fortune, Laroda,
October Sun, Tc Sun, Zanzi Sun
Frontier, Golden Globe
Eldorado, Freedom, Hirome Red, Larry Ann, Queen Ann,
Songria 10, Nubiana, Owen T
Angelenex, Angeleno, Queen Rosa, Ruby Crunch
Black Diamond, Black Gold, Black Late, Early Queen,
Extremagold, John W, Diamex,Laettitia, Showtime, Souvenir
Golden Japan
31-SG-6, Golden Plum, Howard Sun, Songold
Autum Giant, Black Splendor, Casselman, Royal Zee,
Royal Garner, Santa Rosa
Pioneer, Sapphire
Black Star, Primetime
87-91, Crison Glo
30-AN-7
Ambra, Olinda
Songria 15
Red Herat
Simka
October Red
Joana Red

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Conclusiones
- Se han identificado problemas de polinizacin como causantes de la falta de cuajado de
algunas variedades de ciruelo japons.
- Las oscilaciones de cuajado observadas en algunas variedades son provocadas por problemas
de incompatibilidad floral.
- A diferencia de lo que ocurre en otras especies frutales cuyas variedades son
mayoritariamente autocompatibles, como el melocotonero y la nectarina, o
mayoritariamente autoincompatibles, como el cerezo, en ciruelo japons la situacin no es
tan clara, existiendo algunas variedades autocompatibles que pueden polinizarse con su
propio polen y otras autoincompatibles, que necesitan polinizacin cruzada.
- Es necesario conocer el carcter de autocompatibilidad o autoincompatibilidad del resto
de variedades para determinar las necesidades de polinizacin de cada una. Existe un
trabajo en curso para el estudio de las variedades ms importantes.
- En el cultivo de las variedades autoincompatibles, el establecimiento de la composicin
allica S de las variedades y su distribucin en grupos de incompatibilidad permite por un
lado realizar una correcta seleccin de variedades polinizadoras, siendo adecuadas aquellas
que presenten diferentes alelos, y por otro detectar posibles problemas en plantaciones
adultas.
- Las variedades polinizadoras deben coincidir en floracin con la variedad a polinizar, por
lo que es importante conocer las pocas de floracin en la zona de cultivo de las posibles
variedades a utilizar.
- A pesar de haber un abanico amplio de variedades disponibles en Extremadura, se estn
introduciendo en nuestra regin nuevas variedades procedentes de distintos programas de
mejora de las que es necesario conocer su comportamiento en nuestras condiciones.
- En el diseo de nuevas plantaciones comerciales es necesario tener en cuenta las premisas
anteriores para disminuir en lo posible los problemas de falta de cuajado.
Agradecimientos
Agradecemos a Agroseguro SA, Manuel Alonso Escobar [Cooperativa de Regantes
de Extremadura (CREX)], J. R. Rituerto (RITUCON Consultora Agronmica), Viveros
Provedo, Grupo ALM, J. L. Espada [Centro de Tcnicas Agrarias (CTA-Gobierno de
Aragn)] e Ignasi Iglesias [Institut de Recerca i Tecnologia Agroalimentries (IRTAGeneralitat de Catalunya)] por el suministro de material vegetal para el desarrollo de este
trabajo. El soporte financiero para la realizacin de este trabajo corri a cargo del
Ministerio de Ciencia e Innovacin - Unin Europea (FEDER) (Proyecto AGL2006-13529C02-00/AGR), Gobierno de Aragn (Grupo de Excelencia A-43) y Agroseguro S.A. Este
trabajo se engloba dentro de una beca predoctoral INIA-MEC que desarrolla M.E. Guerra.

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