Mitosis en clulas de raz de cebolla

Laboratorio de Procesos Qumico Biolgicos, Escuela de Qumica, Universidad

Nacional. Heredia, Costa Rica. Fecha de entrega: 16 de septiembre del 2015

Resumen
Se realiz la observacin de la clula de la cebolla a travs de un microscopio, para esto
se cort parte del extremo final de la raz, sumergindolas en alcohol y HCl con el fin de
observar claramente las diferentes fases de la mitosis en la reproduccin de la clula
vegetal. Se utiliz clulas de la mucosa de la cavidad oral con el objetivo de observar en
las clulas la cromatina sexual, para esto se hidroliz con HCl el epitelio bucal y se
observ a travs del microscopio.
Introduccin
La mitosis es el tipo de divisin del
ncleo celular por el cual se conservan
los orgnulos y la informacin gentica
contenida en sus cromosomas, que pasa
de esta manera a las clulas hijas
resultantes de la mitosis. La mitosis es
igualmente un verdadero proceso de
multiplicacin celular que participa en
el desarrollo, el crecimiento y la
regeneracin del organismo1. Este
proceso tiene lugar por medio de una
serie de operaciones sucesivas que se
desarrollan de una manera continua, y
que para facilitar su estudio han sido
separadas en varias etapas. El resultado
esencial de la mitosis es la continuidad
de la informacin hereditaria de la
clula madre en cada una de las dos
clulas hijas

se realizan procesos preparatorios para

poder realizar, posteriormente, la
mitosis: Se duplica el ADN, la clula
duplica su tamao y aumenta la
cantidad de organelas para repartir entre
sus clulas hijas y se sintetizan distintos
compuestos para auxiliar en la mitosis.
Durante esta etapa, el ADN se encuentra
como cromatina, laxo, por lo que no se
distinguen los cromosomas dentro del
ncleo, aunque puede observarse una o
ms manchas claras: los nucleolos. La
clula puede contener un par de
centrolos (o centros de organizacin de
microtbulos en los vegetales) los
cuales son sitios de organizacin para el
huso mittico2.

Interfase
Es el perodo comprendido entre dos
divisiones celulares sucesivas. Durante
esta etapa ocurren todos los procesos de
rutina en el funcionamiento de la clula
(degradaciones, sntesis y transporte de
sustancias, movimiento, etc.). Adems,

Fig. 1. Proceso de interfase en una clula

observada desde el microscopio.

Profase
La cromatina en el ncleo comienza a
condensarse y se vuelve visible en el

microscopio ptico como cromosomas.

El nucleolo desaparece. Los centriolos
comienzan a moverse a polos opuestos
de la clula. Algunas fibras cruzan la
clula para formar el huso mittico, un
armazn estructural formado por
microtbulos, que es el encargado de
guiar a los cromosomas en su
movimiento por la clula. Un poco ms
tarde, la membrana nuclear se disuelve
y, sin nada que los contenga, los
cromosomas comienzan a esparcirse por
el citoplasma. Los cromosomas
comienzan a moverse por la clula en
forma ordenada, ya que son guiados por
el huso mittico, y se dirigen hacia la
mitad de la clula.

Fig. 3. Proceso de metafase en una

clula observada desde el microscopio.
Anafase
Los cromosomas se separan por
divisin simultnea de los centrmeros
y cada cromtida hermana viaja a un
polo opuesto de la clula. Ahora los
cromosomas estn formados por una
cromtida en vez de dos. Esta etapa es
la ms rpida y espectacular de todas.

Fig. 4. Proceso de anafase en una clula

observada desde el microscopio.
Telofase

Fig. 2. Proceso de profase en una clula

observada desde el microscopio.
Metafase
Es la etapa ms corta de la mitosis. Las
fibras del huso alinean los cromosomas
a lo largo del ecuador de la clula (es la
lnea imaginaria que la divide a la
mitad). Esta organizacin ayuda a
asegurar que en la prxima fase, cuando
los cromosomas se dividan, cada nuevo
ncleo recibir una cromtida de cada
cromosoma.

Las cromtidas llegan a los polos

opuestos de la clula, y nuevas
membranas se forman alrededor de los
ncleos hijos. Los cromosomas se
descondensan y ya no son visibles bajo
el microscopio ptico. Las fibras del
huso se dispersan, y la citocinesis o la
particin de la clula pueden comenzar
tambin durante esta etapa.

Fig. 5. Proceso de telofase en una clula

observada desde el microscopio.

Citocinesis
Anafase

La citocinesis es la divisin del

citoplasma de la clula "madre" para

generar las dos clulas hijas. En clulas

vegetales, la existencia de pared celular
impide que la clula se estrangule por lo
que se sintetiza un tabique llamado
fragmoplasto entre las dos clulas
hijas.3

Fig. 6. Proceso de citocinesis en una

clula observada desde el microscopio.
El corpsculo de Barr (o cromatina
sexual) es una minscula masa de
cromatina (forma bajo la cual el ADN
est presente en el ncleo de las clulas)
que encontramos nicamente en las
hembras de los mamferos (tambin en
la mujer, pues). De forma sistemtica
encontramos un corpsculo de Barr
menos que el nmero de cromosomas X
(los que definen el sexo de un
individuo). As, excepto en casos
particulares, los hombres slo disponen
de un corpsculo de Barr ya que tienen
los cromosomas X e Y. La
determinacin del Cospsculo de Barr
puede, pues, servir para determinar el
sexo de una persona3.
Como objetivos principales cabe sealar
el de reconocer la importancia del
proceso de mitosis, como el identificar
sus diferentes fases y diferenciar una de
las otras.

Materiales y mtodos

La presente investigacin se llev a

cabo en el Laboratorio de Procesos
qumicos-biolgicos de la Escuela de
Qumica de la Universidad Nacional de
Costa Rica.
Material vegetal
El material experimental consisti en
elegir un material constituido por
clulas que se hallen en continua
divisin. Esta condicin la rene los
meristemos terminales o primarios, tales
como los que se encuentran en el pice
de las races. El bulbo de cebolla cuya
base se mantuvo en contacto con el agua
durante 4 5 das, proporcion
abundante cantidad de raicillas jvenes,
apropiadas para la obtencin de
muestras destinadas a observar figuras
de mitosis.

Fig. 7. Bulbo de cebolla sumergida en agua para

la formacin de races jvenes

Se cort con bistur de 1 a 2 cm del

extremo de las raicillas y deposit en un
beaker de 50mL el que se ha verti
previamente alcohol al 70%, cuidando
que las races queden cubiertas. Luego
se pas las races a otro recipiente que
contenga alcohol absoluto por tres
minutos. Esto para desinfectar y evitar
la presencia de microrganismos.
Con las pinzas se tom uno de los
extremos de las raicillas y se coloc en
un recipiente que contena HCl diluido
durante 3 minutos, esto para degradar la

pared celular de la clula y poder

observar el proceso de mitosis en el
microscopio.
Se coloc la raz sobre el portaobjeto y
se agreg una gota de hematoxilina
frrica esperando 3 minutos, con el fin
de teir la clula con sus respectivos
ncleos y mejorar la visualizacin de
sta. Se calent, pasando el portaobjetos
sobre la llama del mechero para
eliminar el exceso de colorante.

Fig. 8. Clula del tejido de raz de cebolla.

Se coloc el cubreobjetos con mucho

cuidado sobre la raz. Con el mango de
una aguja enmangada se dieron unos
golpecitos sobre el cubre sin romperlo
de modo que la raz quede extendida.
Con la presin sobre el portaobjeto de la
preparacin se logr una extensin y
difusin de las clulas del meristemo de
la cebolla.
Se observ al microscopio a 4X, 10X,
40X y 100X, este ltimo con ayuda de
aceite de inmersin con el fin de no
rayar ni daar el microscopio.
METODO PARA LA CROMATINA
SEXUAL (CUERPO DE BARRR).
Se tom un portaobjetos lavado y
desengrasado previamente (alcohol
etlico-cido actico 45%, 3:1).
Se coloc en el portaobjetos
una
muestra de epitelio bucal (raspando
varias veces con un palillo de dientes
dentro de la boca). Se hidroliz con HCl
1N durante 60 segundos. Cubriendo con
un cubreobjetos y sellando con barniz.
Se observ al microscopio con 40X,
10X, 40X y 100X3.
Resultados y Discusin

Fig. 9. Clula del tejido bucal

En los resultados, las clulas no se
observ ninguna fase de la mitosis, esto
se puede asociar a varios errores, como
el que se pudo haber dejado durante
mucho tiempo la cebolla en agua y las
clulas ya se encuentran demasiado
viejas y no existe tanta reproduccin
como si estuvieran jvenes, o muy poco
tiempo y que no existiera la
reproduccin de stas an. Asimismo se
pudo haber dejado ms tiempo que el
recomendado en el cido y as degradar
la clula.
Si se hubiera obtenido races jvenes
con una buena reproduccin de clulas
se hubieran observado claramente la
divisin celular encontradas en dicha
raz, donde el crecimiento en un

organismo
es
cuidadosamente
controlado regulando el ciclo celular. A
diferencia de las clulas animales, se
observ ntidamente la separacin entre
clulas adyacentes debido a la presencia
de la pared celular (de celulosa) por
fuera de la membrana celular. En las
plantas la mitosis se produce sobre todo
en los meristemos, que son los tejidos
que permiten el crecimiento de la planta
y que se encuentran, entre otros lugares,
en los extremos de los tallos y de las
races4. Las races continan creciendo
mientras buscan agua y nutrientes. Estas
regiones de crecimiento sirven para
estudiar el ciclo celular porque en
cualquier momento se pueden encontrar
clulas que estn sufriendo mitosis.
Para examinar las clulas en la punta de
una raz de cebolla, un delgado corte de
sta se coloca sobre un portaobjeto y se
tie para que los cromosomas sean
visibles. Las clulas que se vieron con
un microscopio ptico.
Aunque el corte de la raz de cebolla
captura muchas clulas en diferentes
fases del ciclo celular, el ciclo celular es
un proceso continuo. Los cientficos han
dividido el proceso en 5 fases, cada una
caracterizada por importantes eventos,
pero estas divisiones son arbitrarias10.
Importancia de la divisin celular.
Algunas clulas pasan por varias
divisiones celulares durante toda la vida
del organismo. Un ejemplo lo
proporcionan las clulas madre de la
mdula sea humana, que dan origen a
los glbulos rojos de la sangre. Los
glbulos rojos viven slo 120 das, y
hay cerca de 25 billones en la sangre de
un adulto. Para mantener este nmero
constante, deben formarse unos 2,5

millones de nuevos glbulos rojos por

segundo por divisin celular (mitosis)
de las clulas madre de la mdula. Otro
ejemplo de mitosis ocurre cuando, luego
de la fecundacin, a partir de la cigota
se desarrolla el embrin por sucesivas
divisiones celulares5.
Muchas clulas no pueden dividirse
cuando se encuentran en estado adulto.
Este es el caso de las neuronas, las
fibras musculares y los glbulos rojos
(por eso estos ltimos se forman a partir
de la mdula). Las clulas del hgado,
aunque en estado adulto no se dividen,
pueden
hacerlo
en
situaciones
especiales: si parte del rgano es
removido quirrgicamente, las clulas
restantes (incluso si slo queda un tercio
de ellas) empiezan a dividirse hasta que
el hgado recupera su tamao inicial y
entonces se detienen. Esta caracterstica
es aprovechada para realizar trasplantes
de donantes vivos.5
Para la muestra de epitelio bucal la cual
era masculina no se observaron los
corpsculos de Barr debido a que no
posee el cromosoma x inactivo o en su
defecto no posee un cromosoma X
adicional6 por lo que se podra decir
que es un individuo XY normal, pues si
se hubiera presentado un cromosoma X
adicional (si se hubiesen observado en
el sujeto corpsculos de barr), as
mismo presentara el sndrome de
Klinefelter (47 XXY) lo cual muestra a
individuos con fenotipo masculino y
con cromatina X. 7(Salinas.J, 1998)
En las mujeres si se hubiera podido
observar estos corpsculos por su
inactivacin de uno de sus cromosomas
X ya que la cromatina X o corpsculo
de Barr es un cromosoma inactivo que

puede verse en algunas clulas en

interfase
como
una
masa
de
heterocromatina
adherida
a
la
membrana nuclear y se observa como
un pequeo punto adicional.8 (Lpez
M, 1996).
Conclusiones

En las plantas la mitosis se produce

sobre todo en los meristemos, que
son los tejidos que permiten el
crecimiento de la planta y que se
encuentran, entre otros lugares, en
los extremos de los tallos y de las
races.
Las races continan creciendo
mientras buscan agua y nutrientes.
Estas regiones de crecimiento
sirven para estudiar el ciclo celular
El ciclo celular es un proceso
continuo, dividido el proceso en 5
fases, cada una caracterizada por
importantes eventos, pero estas
divisiones son arbitrarias.
De
los
fenmenos
ms
significativos
en
gentica
progresiva
encontramos
la
inactivacin de uno de los
cromosomas X en individuos
femeninos (XX), proceso que
mantiene la proporcin gentica en
ambos sexos al igualar el contenido
de ADN cromosmico activo9.
La inactivacin del cromosoma X
resulta en la formacin del
corpsculo de Barr o cromatina X
que se ve en los ncleos de clulas
femeninas durante la interfase y
este cromosoma X en la mujer se
inactiva haciendo que la relacin
autosomas-sexo cromosomas sea
igual que en el hombre.

Bibliografa
1. Curtis,
Barnes,
Schnek,
Massarini, Biologa, 7 edicin,
Editorial mdica panamericana,
2008. Pg. 133.
2. Loureiro, C. Citognica: Base
de la Vida. 2 edicin. Editorial
Santillana S. A. Bolivia. 2008.
Pg. 53.
3. Campos, Bedolla, Biologa 2, 1
edicn, editorial Limusa S.A.
2002. Pg. 57.
4. 5- MSc. Borbn, H.

Valds,
J.
Procesos
qumicos-biolgicos.
2014. Pg. 31.
5. Lacadena J. Citogentica, 1
edicin, Editorial Computense
S. A. 1996. Pg. 374.
6. Robertis, Determinacin del
sexo y Citogenica.Biologa
Celular. 9 edicin. Editorial El
Ateneo. Argentina. 1977. Pg
296.
7. Palomera, G. Vsquez, M. Vega,
J. Lecciones de embriologa, 1
edicin, Editorial Universidad
de Oviedo. Pg. 506.
8. Salinas.J. Determinacion del
Sexo. Biologia Celular y
Molecular. 2 edicin. Fac. de
Medicina UMSS. Bolivia. 1998.
Pg 57.
9. Lpez-Lpez, M. Cervantes, A.
Kofman, A. Avances en el
conocimiento
del
proceso
gentico en la diferenciacin
sexual del humano. 1996. Pg
129.
10. Taiz, L. Zeiger, E. Fisiologa
Vegetal, 3 edicin, editorial

Sinauer Associates. 2006. Pg.

152.