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Comensales
No es anormal tenerlos.
Reflejan contaminacin fecal del medio.
Se deben informar en el examen de laboratorio.
Protista
Animalia
Algae
Slime molds
Protozoo
Helmintos
X
X
Arthropoda
X
Flagelata
Sarcodina
Ciliata
Esporozoa
Plathelmintos
Nematoda
Acanthocephala
Cestodes
Trematodes
in vitro
in vivo
Caractersticas
propias
de los parsitos
Ciclos de vida complejos:
Distintos hospedadores
Distintas formas
morfolgicas o estados
Formas intracelulares
Localizacion subcelulares
Respuesta inmune del
hospedador
Mecanismos protectores
del parsito
Numerosas variables
a considerar para
el cultivo
Distintas temperaturas
optimas
Distintos requerimientos
nutricionales
Cultivos
axnicos/monoxnicos
Distintas especies, cepas o
aislamientos pueden
comportarse de manera
diferente
Entamoeba histolytica
Giardia intestinalis
Trichomonas vaginalis
Balantidium coli
Diantamoeba fragilis*
Blastocystis hominis*
* parsitos de importancia clnica controversial
Protozoo unicelular
Ciclo de vida simple: forma replicativa
(trofozoto) y forma de resistencia (quiste).
Transmisin por ingestion de quistes en agua
o alimentos contaminados con materia
fecal (MF)
Humanos pueden infectarse con al menos 6
especies de Entamoeba, pero solo E.
histolytica es patgena
Es la 3 causa de mortalidad y morbilidad
por infecciones parasitarias en el hombre
(despus de malaria y schistosomiasis)
Se estiman 50,000-100,000 muertes al ao
Tratamiento: metronidazol (Flagyl)
Cultivos Monoxnicos:
Cleveland y Sanders,1930: primer cultivo con una nica bacteria en medio
bifsico
Cultivos monoxnicos con tripanosomtidos (T. cruzi, Crithidia fasciculata)
Hoy solo se usan como punto intermedio para alcanzar un cultivo axnico.
Cultivos Axnicos:
Primera vez logrado por Diamond en 1961 en un medio bifsico complejo
1968: Medio monofsico TP-S-1 (Diamond
1978: Medio monfsico TYI-S-33* (Diamond et al.)
Medio de cultivo axnico casero PEHPS, con extractos de hgado y
pncreas, es una alternativa a los medios comerciales (Said-Fernandez et
al.1988)
Cultivos Clonales:
Obtencin de colonias clonales en agar (Gillin y Diamond,1978; Mueller y
Petri, 1995)
Micromanipulacin para obtener clonar cultivos xnicos (Farri 1978) y
axnicos (Diamond et al. 1976)
* Medios ms usados actualmente
de casena)
Acidos nucleicos (extracto de levadura)
Carbohidratos (glucosa)
Lpidos (suero)
vitaminas
Con Acriflavina (tb afecta a las bacterias y por consiguiente a las amebas)
Mtodo de Dobell y Laidlaw (1926): Tratamiento con 0.1N HCl a RT 10 min, lavar
con H2Od y re-inocular en el medio de cultivo con bacterias adecuadas.
HCl mata bacterias, hongos, B.hominis, trichomonas intestinales y amebas no
enquistadas, permaneciendo viables e intactos los Quistes.
Adaptacin a una
nueva forma de vida
Muestra Fecal
Separar elementos grandes
Enriquecer en Quistes de E. histolytica
Cultivo Xnico
Cultivo Monoxnico
Cultivo Axnico
# Organismos
asociados: C. fasciculata, T. cruzi: son crecidos como cultivo stock a RT, y no crecen
a la T optima de crecimiento de amebas
ATB: depende de la flora pte. en el cultivo xenico; x ej. Cocktail de rifampin, amikacin,
oxitetraciclina, cefotaxima
Protozoo flagelado
(Diplomonadida)
Ciclo de vida simple: forma
replicativa (trofozoto) y
forma de resistencia
(quiste).
Forma infectante: QUISTE
Transmisin por ingestion de
quistes en agua o alimentos
contaminados con materia
fecal (MF)
Tratamiento: metronidazol
(Flagyl)
Trypanosoma cruzi
Trypanosoma brucei
Leishmania spp.
A)
B)
C)
D)
vertebrado insecto
cambios en la disponibilidad de nutrientes
cambios de temperatura
diferentes formas del parsito
adaptacin a los distintos habitats
Medio HX25
sin sangre
con hemina
Transmisin :
Cultivo de epimastigotes
cultivos axnicos en LIT o BHIT
suplementar con Hemina y 10% SFB
pasajes cada 4-7 das
criopreservacin
Metaciclognesis in vitro
Obtencin de tripomastigotes (forma infectante) a partir
de un cultivo axnico de epimastigotes (forma pte. en el
insecto vector)
Baker (1987): La metaciclognesis no ocurrir en
condiciones que permitan el crecimiento exponencial