MEDIO

AGAR ENDO

FUNDAMENTO
La peptona
proporciona los
nutrientes
necesarios para el
desarrollo de los
microorganismos.
La lactosa es el
carbohidrato
fermentable. El
fosfato dipotsico
acta como
regulador de pH
del medio de
cultivo.

INHIBIDOR
Fucsina bsica

INDICADOR
Fucsina bsica

DETECTA H2S
No

TIPO DE MEDIO
Ligeramente
selectivo y
diferencial

REVELADOR
NO APLICA

AGAR EMB

Este medio
combina las
frmulas de HoltHarris y Teague
con la de Levine,
para obtener un
mejor rendimiento
en el aislamiento
selectivo de
enterobacterias y
otras especies de
bacilos Gram
negativos. La
diferenciacin
entre organismos
capaces de utilizar
la lactosa y/o
sacarosa, y

Azul de metileno

Eosina

No

Ligeramente
selectivo

NO APLICA

*Este medio de
cultivo es
moderadamente
inhibitorio ya que
las cepas de
enterococo y
candida pueden
desarrollar en el
mismo,
observndose
como colonias de
tamao
puntiforme.

RESULTADOS
Los coliformes
fermentan la
lactosa,
formando
aldehdo y cido,
desarrollando
colonias rojas
con o sin brillo
metlico,
producido por la
cristalizacin de
la fucsina. Las
bacterias que no
fermentan la
lactosa forman
colonias
incoloras,
quedando del
color del medio
de cultivo o rosa
plido y
translcidas.
Muchas cepas de
Escherichia coli
y Citrobacter
spp. presentan
un caracterstico
brillo metlico.
Las cepas que
utilizan la
lactosa poseen
centro oscuro
con periferia
azulada o
rosada, mientras
que las que no
lo hacen son
incoloras. Este
medio permite el

aquellos que son

incapaces de
hacerlo, est dada
por los indicadores
eosina y azul de
metileno; stos
ejercen un efecto
inhibitorio sobre
muchas bacterias
Gram positivas.

crecimiento de
Candida spp.
como colonias
rosadas y
puntiformes; la
siembra en
profundidad
permite el
desarrollo de
clamidosporas
en C. albicans.
Enterococcus
spp. crece en
este medio como
colonias
puntiformes y
transparentes,
mientras que
Acinetobacter
spp. y otras
bacterias
oxidativas
pueden dar
colonias de color
azul lavanda;
esto puede
ocurrir aunque
las cepas no
sean capaces de
acidificar a partir
de lactosa al
0.5% y ello se
debe a la
incorporacin de
azul de metileno
a sus
membranas. En
este medio se
obtiene adems,
un buen

TERGITOL

El tergitol 7
(heptadecilsulfato
de sodio) acta
inhibiendo la flora
secundaria
indeseable, inhibe
la difusin de
swarming de
Proteus y favorece
una mayor
recuperacin de
coliformes.

HEPTADECILSULFATO

AZUL DE BROMOTIMOL

NO

Medianamente
selectivo y
diferencial

En algunas
ocasiones se
agrega 2,3,5Clorhidrato de
Trifenil-Tetrazolio
para
reconocimiento e
identificacin de
Escherichia coli y
Enterobacter
aerogenes

Mc CONKEY

En el medio de
cultivo, las
peptonas, aportan
los nutrientes
necesarios para el
desarrollo
bacteriano, la
lactosa es el
hidrato de carbono
fermentable, y la
mezcla de sales
biliares y el cristal
violeta son los
agentes selectivos
que inhiben el
desarrollo de gran
parte de la flora
Gram positiva.

Cristal violeta

Rojo neutro

NO

Medianamente
selectivo

NO APLICA

desarrollo de
especies de
Salmonella y
Shigella.
Los
microorganismos
capaces de
fermentar la
lactosa en el
medio producen
colonias
amarillas debido
a la reaccin con
el indicador azul
de bromotimol y
los que no son
capaces de
fermentarla
producen
colonias azules.
Por fermentacin
de la lactosa,
disminuye el pH
alrededor de la
colonia. Esto
produce un
viraje del color
del indicador de
pH (rojo
neutro), la
absorcin en las
colonias, y la
precipitacin de
las sales
biliares.
Los
microorganismos
no
fermentadores
de lactosa
producen

AGAR SS

En el medio de
cultivo la
pluripeptona y el
extracto de carne
aportan los
nutrientes para el
desarrollo
microbiano. Las
sales biliares y el
verde brillante
inhiben el
desarrollo de una
amplia variedad
de bacterias Gram
positivas, de la
mayora de los
coliformes y el
desarrollo invasor
del Proteus spp. La
lactosa es el
hidrato de carbono
fermentable. El
tiosulfato de sodio
permite la
formacin de SH2
que se evidencia
por la formacin
de sulfuro de
hierro. El rojo
neutro es el
indicador de pH y
el agar es el
agente
solidificante.

Sales biliares y
verde brillante

Rojo neutro

Muy selectivo y
diferencial

NO APLICA

AGAR XLD

La presencia del
desoxicolato de
sodio es el agente
que inhibe a los

Desoxicolato de
sodio

Rojo de fenol

Muy selectivo y
diferencial

NO APLICA

colonias
incoloras.
Los pocos
microorganismos
fermentadores
de lactosa
capaces de
desarrollar,
acidifican el
medio haciendo
virar al rojo el
indicador de pH,
obtenindose
colonias rosadas
o rojas sobre un
fondo rojizo.
Salmonella,
Shigella y otros
microorganismos
no
fermentadores
de lactosa,
crecen bien en el
medio de
cultivo, y
producen
colonias
transparentes.
La produccin de
cido sulfhdrico
se evidencia
como colonias
con centro negro
debido a la
formacin de
sulfuro de
hierro.
Escherichia coli,
Klebsiella,
Enterobacter y
algunas especies

AGAR HEKTOEN

microorganismos
Gram positivos. La
xilosa es
fermentada por
casi todos los
microorganismos
entricos a
excepcin de
Shigella, lo cual
ayuda en la
diferenciacin de
la especie. La
presencia de lisina
ayuda en la
diferenciacin del
grupo Salmonella.
La lactosa y la
sacarosa inducen
la produccin de
cido por los
coliformes. El
tiosulfato de sodio
y el citrato frrico
de amonio
constituyen el
sistema indicador
de la formacin de
cido sulfhdrico
produciendo un
precipitado negro
en el centro de las
colonias.
En el medio de
cultivo la proteosa
peptona y el
extracto de
levadura aportan
los nutrientes para
el desarrollo
microbiano. La
lactosa, sacarosa y
salicina son los

de Proteus
pueden utilizar
ms de un
carbohidrato y
producen
colonias amarillo
brillante. El
gnero
Salmonella
desarrolla
colonias rojas
con centro negro
por la
produccin de
cido sulfhdrico.
Shigella,
Providencia y
algunas especies
de Proteus no
utilizan ningn
carbohidrato y
desarrollan
colonias
translcidas.
Citrobacter
desarrolla
colonias
amarillas con
centro negro.

Sales biliares

Azul de bromo-timol
y fucsina cida

Muy selectivo

NO APLICA

Se debe
determinar la
fermentacin de
lactosa y la
produccin de
SH2.
Microorganismos
fermentadores
de lactosa:
colonias

AGAR VERDE
BRILLANTE

hidratos de
carbono
fermentables. Las
sales biliares
inhiben el
desarrollo de la
flora Gram
positiva, de
algunos coliformes
y de la mayora de
las cepas de
Pseudomonas spp.
El azul de
bromotimol y la
fucsina cida son
los indicadores de
la fermentacin de
hidratos de
carbono, mientras
que el citrato de
hierro actua como
indicador de la
formacin de SH2
a partir del
tiosulfato debido a
que se forma
sulfuro de hierro,
compuesto de
color negro. El
cloruro de sodio
mantiene el
balance osmtico
y el agar es el
agente
solidificante
En el medio de
cultivo, la
pluripeptona y el
extracto de
levadura,
constituyen la
fuente de

amarillas o
anaranjadas.
Microorganismos
no
fermentadores
de lactosa:
colonias del
color del medio,
verde-azuladas.
Microorganismos
productores de
SH2 : colonias
con centro
negro.

Verde brillante

Rojo de fenol

No

Muy selectivo

NO APLICA

Bacterias que
fermentan la
lactosa y/o
sacarosa:
colonias
amarilloverdosas,

AGAR HIERRO
KIGLER (KIA)

nitrgeno,
vitaminas y
minerales. La
lactosa y la
sacarosa son los
hidratos de
carbono
fermentables, el
rojo fenol es el
indicador de pH,
que vira al
amarillo cuando
hay produccin de
cido a partir de la
fermentacin de
azcares, el
cloruro de sodio
mantiene el
balance osmtico,
y el verde brillante
acta como
agente selectivo
que inhibe
fundamentalmente
el desarrollo de
flora Gram positiva
y de algunos
microorganismos
Gram negativos. El
agar es el agente
solidificante.
En el medio de
cultivo, la peptona
de carne y la
triptena, aportan
los nutrientes
adecuados para el
desarrollo
bacteriano. La
lactosa y la
glucosa son los
hidratos de

rodeadas por un
halo de color
amarillo verdoso
del medio de
cultivo.
Bacterias que no
fermentan la
lactosa y/o
sacarosa:
colonias de color
blanco rosadas o
transparentes
rodeadas por un
halo rojizo del
medio de
cultivo.

Rojo de fenol

Diferencial

NO APLICA

Observar el color
del medio de
cultivo y la
produccin de
gas. 1Superficie
alcalina/profundi
dad cida (pico
rojo/fondo
amarillo): el
microorganismo

carbono
fermentables. El
tiosulfato de sodio
es el sustrato
necesario para la
produccin de
cido sulfhdrico,
el citrato de hierro
y amonio, es la
fuente de iones
Fe3+, los cuales
se combinan con
el cido sulfhdrico
y producen sulfuro
de hierro, de color
negro. El rojo de
fenol es el
indicador de pH, y
el cloruro de sodio
mantiene el
balance osmtico.
El agar es el
agente
solidificante. Por
fermentacin de
azcares se
producen cidos
que se detectan
por medio del
indicador rojo de
fenol, el cual vira
al color amarillo en
medio cido. El
tiosulfato de sodio
se reduce a sulfuro
de hidrgeno el
que reacciona
luego con una sal
de hierro
proporcionando el
tpico sulfuro de
hierro de color

solamente
fermenta la
glucosa. 2Superficie
cida/Profundida
d cida (pico
amarillo/fondo
amarillo): el
microorganismo
fermenta
glucosa, y
lactosa. 3Superficie
alcalina/Profundi
dad alcalina
(pico rojo/fondo
rojo): el
microorganismo
es no
fermentador de
azcares. 4- La
presencia de
burbujas o la
ruptura del
medio de cultivo
indican que el
microorganismo
produce gas. 5El
ennegrecimiento
del medio indica
que el
microorganismo
produce cido
sulfhdrico.

AGAR CITRATO DE
SIMMONS

negro.
En el medio de
cultivo, el fosfato
monoamnico es
la nica fuente de
nitrgeno y el
citrato de sodio es
la nica fuente de
carbono. Ambos
componentes son
necesarios para el
desarrollo
bacteriano. Las
sales de fosfato
forman un sistema
buffer, el
magnesio es
cofactor
enzimtico. El
cloruro de sodio
mantiene el
balance osmtico, el azul de
bromotimol es el
indicador de pH,
que vira al color
azul en medio
alcalino y el agar
es el agente
solidificante. El
medio de cultivo
es diferencial en
base a que los
microorganismos
capaces de utilizar
citrato como nica
fuente de carbono
usan sales de
amonio como
nica fuente de
nitrgeno, con la
consiguiente

Azul de bromotimol

No

Diferencial

NO APLICA

- Positivo:
crecimiento
bacteriano con
un intenso color
azul en el pico
de flauta. Negativo:
ausencia de
crecimiento y
permanencia del
color verde del
medio de
cultivo.

MEDIO SIM

produccin de
alcalinidad. El
metabolismo del
citrato se realiza,
en aquellas
bacterias
poseedoras de
citrato permeasa,
a travs del ciclo
del cido
tricarboxlico. El
desdoblamiento
del citrato genera
progresivamente,
oxalacetato y
piruvato. Este
ltimo, en
presencia de un
medio alcalino, da
origen a cidos
orgnicos que al
ser utilizados
como fuente de
carbono, producen
carbonatos y
bicarbonatos
alcalinos. El medio
entonces vira al
azul y esto es
indicativo de la
produccin de
citrato permeasa
Medio de cultivo
en el cual la
triptena y la
peptona aportan
nutrientes para el
desarrollo
microbiano. El
triptfano es un
aminocido
constituyente de

Diferencial

Reactivo de Ehrlich
o de Kovac`s

Observar la
movilidad y el
color del medio
de cultivo. Luego
realizar la
prueba de indol.
Movilidad:
Resultado
positivo:
presencia de

muchas peptonas
y particularmente
de la triptena y
puede ser
metabolizado por
algunas bacterias
para formar indol.
En el proceso
interviene un
conjunto de
enzimas llamadas
triptofanasa. El
indol producido se
combina con el
aldehido del
reactivo de Ehrlich
(Indol Reactivo
REF B1550361) o
de Kovacs, para
originar un
compuesto de
color rojo. A partir
del tiosulfato de
sodio los
microorganismos
pueden generar
cido sulfhdrico
que reacciona con
el hierro presente
formndose un
compuesto de
color negro. El
agar es el agente
solidificante y a
esta concentracin
le otorga al medio
la propiedad de
ser semislido,
condicin
necesaria para
detectar
movilidad, que se

turbidez o
crecimiento mas
all de la lnea
de siembra.
Resultado
negativo:
crecimiento
solamente en la
lnea de
siembra.
Produccin de
SH2 : Resultado
positivo:
ennegrecimiento
del medio de
cultivo a lo largo
de la lnea de
siembra o en
todo el medio.
Resultado
negativo: el
medio
permanece sin
cambio de color.
Prueba del indol:
Agregar al
medio de cultivo
3 a 5 gotas de
Indol Reactivo
(REF B1550361).
Resultado
positivo: color
rojo. Resultado
negativo: el
color del
reactivo
revelador
permanece
incoloroamarillento.

MEDIO SACAROSA
UREASA
(SUCARRO)

VOGUES
PROSKAUER

evidencia por el
enturbiamiento del
medio o por
crecimiento que
difunde mas all
de la lnea de
siembra del
microorganismo
en estudio.
El medio de cultivo
est libre de
carbohidratos
fermentables, si el
microorganismo
en estudio es
capaz de
fermentar la
sacarosa, se
produce vire del
indicador a
amarillo

En el medio de
cultivo, la
pluripeptona aporta
los nutrientes
necesarios para el
desarrollo bacteriano
y la glucosa es el
hidrato de carbono
fermentable.
La glucosa puede ser
metabolizada por los
microorganismos, a
travs de distintas
vas metablicas.
Segn la va
utilizada, se
originarn productos
finales cidos (cido
lctico, cido actico,

Rojo de fenol y Azul

de bromo-timol

No

Diferencial

NO APLICA

Los
microorganismos
que tienen la
capacidad de
utilizar la urea,
forman amonio,
produciendo una
reaccin alcalina
en el medio que
se manifiesta
por un color rosa
fuerte por vire
de los
indicadores rojo
de fenol y azul
de timol.

Rojo de metilo

No

Diferencial

a-Prueba del rojo

de metilo:

1-Prueba del rojo

de metilo:
Positivo: color rojo.
Negativo: color
amarillo.

Aadir unas gotas de

una solucin de rojo
de metilo al 0.04%,
observar el color del
medio.
b-Prueba del Voges
Proskauer:
Aadir 0,6 ml de alfa
naftol al 5% en
alcohol etlico
absoluto y 0.2 ml de
hidrxido de potasio
al 40% a 2.5 ml de
cultivo. Agitar

2-Prueba de
Voges
Proskauer:
Positivo: desarrollo
de un color rojo en
pocos minutos
despus de una
completa agitacin
del tubo.
Negativo: ausencia
de color rojo.

cido frmico), o
productos finales
neutros (acetil metil
carbinol).
Esta diferencia en el
metabolismo
bacteriano, podra
ser reconocida por la
adicin de un
indicador como rojo
de metilo, para
revelar la presencia
de productos cidos,
y por la adicin de
alfa naftol e hidrxido
de potasio para
evidenciar la
presencia de
productos finales
neutros. Voges y
Proskauer,
describieron una
coloracin rojiza que
apareca despus de
adicionar hidrxido
de potasio a los
cultivos de ciertos
microorganismos en
medio con glucosa.
Esta coloracin se
debe a la oxidacin
del acetilmetil
carbinol a diacetilo el
cual reacciona con la
peptona del medio
para dar un color
rojo.

vigorosamente el
tubo, y dejar a
temperatura
ambiente durante 1015 minutos. Observar
el color de la
superficie del medio.