Biologia

DNA
1. Extrao

ORIENTAO PARA O PROFESSOR

RECOMENDAES
Os alunos devero responder a questo prvia individualmente e por escrito antes de iniciar a
atividade. No final, o professor dever discutir novamente a questo com os alunos;
Comentar com seus alunos que o procedimento para extrao do DNA em clulas animais
basicamente o mesmo;
A totalidade do DNA extrado ser composta por vrias rplicas das mesmas molculas, uma
vez que inmeras clulas do mesmo organismo sero degradadas para que possamos
visualizar o DNA;
Chamar a ateno dos alunos para o fato de que a estrutura de dupla hlice do DNA s pode
ser visualizada de modo indireto e por meio de metodologias sofisticadas. O que ser
observado ao final do experimento so milhares de fitas de DNA juntas.

OBJETIVOS
Conhecer como se d o procedimento de extrao do DNA;
Identificar o local onde o DNA encontrado;
Visualizar um aglomerado de fitas de DNA.

OBSERVAES
Explicao do procedimento e da utilizao dos reagentes utilizados no experimento.
Maceramento
A cebola (morango ou banana) deve ser macerada para que a parede celular (estrutura
espessa e rgida presente em clulas vegetais) seja rompida. A aplicao de fora mecnica pode
tambm romper a membrana celular de algumas poucas clulas, embora esta estrutura deva ser
desestruturada quimicamente, conforme explicado no prximo item. Alm disso, o maceramento
dissocia os tecidos, permitindo que a soluo de lise (detergente + sal) aja sobre um nmero maior
de clulas, liberando um grande nmero de molculas de DNA. Assim, a cebola (morango ou
banana) deve ser muito bem macerada para garantir um bom rendimento do experimento.
Peneirar
Peneirando o material possvel separar restos de estruturas celulares da soluo contendo
DNA de outras molculas.
Detergente
As membranas plasmtica e nuclear so compostas principalmente por lipdios. A funo do
detergente desestruturar as molculas de lipdio das membranas biolgicas. Desta maneira, as
membranas sofrem ruptura e todo o contedo celular - inclusive o DNA - fica disperso na soluo.

Banho-maria
O aumento da temperatura promove uma maior agitao molecular, o que ajuda o detergente
a desestabilizar as membranas lipdicas. Alm disso, a alta temperatura inativa enzimas que podem
degradar o DNA (DNAses).
Sal
A adio do sal (NaCl) no incio da experincia proporciona um ambiente favorvel para a
extrao, pois o sal, depois de dissolvido na gua, se dissocia e contribui com ons positivos que
neutralizam a carga negativa do grupo fosfato do DNA. As molculas de DNA passam a no sofrer
repulso de cargas entre si, o que favorece sua aglomerao.
lcool
O lcool desidrata o DNA, de forma que este no mais fica dissolvido no meio aquoso. Alm
disso, o DNA tende a no ser solvel em lcool e, deste modo, suas molculas se agrupam. Como
o DNA tem menor densidade que os outros constituintes celulares, ele surge na superfcie do
extrato. Quanto mais gelado o lcool, menos solvel ser o DNA.
Preparao da soluo
Preparar a soluo de lise na jarra de vidro.
Colocar 450 mL de gua, adicionar duas colheres de sopa de detergente incolor e uma
colher de caf de sal de cozinha. Agitar bem para que o sal e o detergente se dissolvam
totalmente.

SUGESTO
Este experimento pode ser utilizado conjuntamente por professores de biologia e qumica.
O professor de biologia pode explorar a estrutura das membranas celulares e o professor de
qumica a ao dos reagentes qumicos sobre estas estruturas.