Identificación de hongos micorrícicos para balsa

FONDO COMPETITIVO DE
INVESTIGACION CIENTIFICA Y TECNOLGICA
F O C I C Y T
CONVOCATORIA EXTRAORDINARIA # 3
FORMULARIO 1 PARA LA PRESENTACIN DE PROYECTOS DE
INVESTIGACIN CIENTFICA Y TECNOLGICA 2015-2016
A. Datos Generales
Ttulo:
Identificacin y seleccin de hongos formadores de micorriza arbuscular

para el mejoramiento de la calidad de plntulas de Ochroma pyramidale
(balsa) a nivel de vivero.
Tipo de Investigacin:
Tecnolgica
Cientfica
rea de Investigacin
Lnea de Investigacin
Microbiologa del Suelo
Evaluacin de la calidad del suelo, agua y aire, y

alternativas de mitigacin.
Duracin del Proyecto en meses (Mximo 18 meses):

Presupuesto (USD)1:
12 meses
8.526,oo
Tipo de Proyecto:
Nuevo
Continuacin
Si el proyecto es continuacin conteste las siguientes preguntas:

Nombre del Proyecto:
Director del Proyecto:
Presupuesto asignado USD:
Resultado de la evaluacin
(llenado por evaluador)
Investigador(es)2
Director del Proyecto3
Nombre:
Departamento/Facultad:
Formacin:
Cargo Actual:
Dr. Carlos Belezaca Pinargote

Facultad de Ciencias Ambientales
Pregrado:
Postgrado:
Docente de la Facultad de Ciencias Ambientales
Investigadores principales4
Nombre:
Formacin:
Cargo Actual:
Nombre:
Formacin:
Cargo Actual:
Ing. M. Sc. Oscar Prieto Benavides

Pregrado:
Postgrado:
Pregrado:
Postgrado:
Estudiantes tesistas5
Nombres:
1
2
3
4
5
Por definir
Los montos de apoyo asignados a cada proyecto tendrn un tope de $10,000.00 USD (Formulario 2)
Debe adjuntar la hoja de vida de todos los investigadores (Formulario 3)
Docente con formacin de cuarto nivel con el grado cientfico de maestra o doctorado con demostrada experiencia en la direccin de
tesis de grado (mnimo 2).
Son colaboradores cientficos, con experiencia en la docencia y/o investigacin, dentro o fuera de la UTEQ
Becarios que realicen sus tesis en un programa de pregrado o postgrado de la UTEQ
COORDINACIN DE INVESTIGACIN, DESARROLLO E INNOVACIN
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Formacin:
Nombres:
Formacin:
Personal tcnico
Nombres:
Formacin:
Institucin:

Pregrado:
X
Postgrado:
Pregrado:
Postgrado:
Estudiante
Egresado(a)
RESUMEN DEL PROYECTO. En esta pgina se debe exponer una sntesis de los objetivos, la metodologa
y los resultados (Mximo 300 palabras).
El inters por plantar Ochroma pyramidale (balsa) en Ecuador ha aumentado significativamente,

principalmente por su versatilidad de adaptacin y rentabilidad a corto plazo. No obstante, la
tendencia mundial de los mercados, cada vez ms inclinados hacia una produccin verde y
limpia, demanda que en las nuevas plantaciones se empleen tecnologas menos contaminantes,
sin descuidar la calidad de las plantas. Es aqu donde la aplicacin de inculos microbianos con
potencial biofertilizante, se convierte en una de las alternativas ms viables. Los hongos formadores
de micorriza arbuscular (HMA) son simbiontes obligados que pueden estimular el crecimiento y
desarrollo vegetal. En esta investigacin planteamos que plantas de O. pyramidale inoculadas a
nivel de vivero con consorcios de HMA, incrementan el desarrollo hasta en un 20%, reflejado en las
variables dasonmicas. Para responder esta hiptesis, se seleccionarn especies, o consorcios de
HMA nativos, cuya inoculacin en plntulas de O. pyramidale estimule y mejore el crecimiento en la
etapa de vivero. Para el efecto, se muestrearn cinco plantaciones adultas de balsa en el Trpico
Hmedo Ecuatoriano (THE). Desde el suelo se determinar el nmero de esporas, morfoespecies
de HMA y colonizacin micorrzica radicular. A nivel de vivero, por cada morfoespecie o consorcio de
morfoespecies (tratamientos) se inocularn 30 esporas en la base de las plntulas, 48 horas
despus de la germinacin en sustrato estril. Las variables dasonmicas de respuesta se
registrarn a los 30, 45, y 60 das posterior a las inoculaciones. Se seleccionarn las morfoespecies
o consorcios que generen variables de respuesta superiores. Al final de la investigacin se contar
con una fuente de inculo-biofertilizante de HMA eficientes para balsa, en etapa de vivero, y
dispondr de un banco germoplsmico de HMA para futuros estudios de inoculantes en otras
especies forestales de importancia econmica del THE.
B. Objetivo general y objetivos especficos

Objetivo General: Identifica la finalidad hacia la cual deben dirigirse los recursos y esfuerzos. El objetivo
debe responder a las preguntas "qu" y "para qu". Es el conjunto de resultados cualitativos que el proyecto se
propone alcanzar a travs de determinadas acciones.
Mejorar la calidad de las plntulas de Ochroma pyramidale (balsa) a nivel de vivero, mediante la
aplicacin de biofertilizantes, empleando hongos formadores de micorrza arbuscular.
Objetivo(s) especfico(s). (Mximo cinco objetivos. Deben ser bien delimitados, estar claramente
expuestos y ser coherentes con el tema propuesto; ser medibles en trminos de logros o impactos observables
y verificables durante el perodo de ejecucin del proyecto. Deben estar vinculados con las diversas actividades
a desarrollarse en el proyecto y guardar relacin con las metas.).
1.
Determinar la tasa de colonizacin micorrzica radicular, y densidad de esporas de hongos

formadores de micorriza arbuscular en el suelo de plantaciones de O. pyramidale.
Tcnicos o auxiliares de investigacin, estudiantes o egresados de la UTEQ y/o instituciones pblicas o privadas que
tengan convenio con la UTEQ, adems del personal de apoyo administrativo (secretaria, digitador, etc.) y de servicio
(operadores de maquinarias, vehculos, equipos, etc.).
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Aislar e identificar morfolgicamente hongos formadores de micorriza arbuscular nativos,

asociados a plantaciones adultas de O. pyramidale.
Seleccionar especies individuales, o consorcios de hongos formadores de micorriza
3.
arbuscular nativos, cuya inoculacin en plntulas de O. pyramidale estimule una mayor
capacidad de respuesta a variables dasonmicas en condiciones de vivero.
Establecer un banco germoplsmico de hongos formadores de micorriza arbuscular
4.
nativos, como fuente para la produccin comercial de biofertilizantes para O. pyramidale.
C. Descripcin detallada del proyecto
2.
Exponer de manera concreta el problema o necesidad que el proyecto intentar resolver. La descripcin del
proyecto debe ser concisa y responder a preguntas tales como: cul es el problema?, por qu es importante
investigar sobre el tema?, qu se conoce al respecto hasta ahora?, cmo lo va a hacer?, cules son los
resultados esperados? Sea informativo y cite datos especficos y comprobables; evite una redaccin sin
referencias concretas. Utilice referencias bibliogrficas relevantes y ctelas en el texto utilizando el nmero de
referencia. En la Seccin D detallar las referencias bibliogrficas. Use mximo seis pginas a un espacio
en letra de 10 puntos Arial (Ver Anexo 1a).
1. INTRODUCCIN
Ochroma pyramidale (Cav. Ex Lam.) Urb. (balsa) es una especie forestal endmica del trpico
americano, de elevada importancia econmica (Francis, 1991). La demanda mundial de madera de
esta especie, es creciente, debido a sus bondades y versatilidad para diferentes usos (CICO
CORPEI, 2009; Midgley et al. 2010). Segn Gonzlez-Osorio et al. (2010) hasta el ao 2010, en
Ecuador existan ms de 20.000 ha -1 plantadas con balsa, donde las condiciones edafoclimticas
sobresalientes del pas y en especial del Trpico Hmedo (regin Litoral), favorecen el desarrollo
dasonmico y excelentes propiedades anatmicas, y fsico-mecnicas (Butterfield, 1995), a tal
punto, que el 95% de la produccin nacional con fines de exportacin, se concentra en esta rea
ecolgica. Representa un rubro importante para la economa del Ecuatoriana y debido a la
superficie plantada y volumen de exportacin, Ecuador es considerado el mayor exportador
mundial de balsa (PRO ECUADOR, 2013).
O. pyramidale es una especie autctona de Ecuador, de crecimiento rpido, que no demanda
grandes esfuerzos silviculturales (Gonzlez-Osorio et al. 2010) debido a su rusticidad. Sin
embargo, la patologa forestal brinda evidencia que la masificacin de plantaciones
monoespecficas y coetneas, conducen al aparecimiento de plagas, que sumado a un escaso
manejo tcnico en etapa de vivero, conducen a complejos escenarios fitosanitarios en mediano y
largo plazo (Peterson & Greffith, 1999).
La literatura da cuenta que una plantacin forestal vigorosa, est en funcin de una adecuada
etapa de vivero, donde la fertilizacin, manejo de plagas, y una acertada aclimatacin garantiza el
xito del proyecto forestal (Turnbull, 2007). No obstante, en la actualidad existe el compromiso
global de reducir el empleo de sustancias sintticas, ampliamente usadas para el control de plagas
y estimular el crecimiento vegetal, pero que a su vez ejercen impactos negativos sobre la salud
humana y ambiental, mostrando una clara tendencia al cambio, mediante el uso de nuevos
productos de origen natural, derivados del metabolismo microbiano (metabolitos), y
microorganismos per s, etc. (Cano, 2011).
Entre los microorganismos empleados en silvicultura se destacan los hongos formadores de
micorriza arbuscular (HMA), los mismos que son simbiontes obligados y forman asociaciones con
la mayor parte (~80%) de las plantas terrestres (Colard et al. 2011). Taxonomicamente pertenecen
al phylum Glomeromycota (Schssler, 2001), con una presencia muy antigua en la tierra, cuya
evidencia es atestiguada por el registro fsil, dando cuenta de su existencia desde hace 460
millones de aos, durante el periodo Ordovcico de la era paleozoica (Schler et al. 2002, Lee et
al. 2013). Estructuras fngicas de HMA se han encontrado en fsiles de las primeras plantas
terrestres, existentes hace unos 400 millones de aos, lo cual es una fuerte evidencia que la
asociacin existi desde el momento en que los vegetales evolucionaron a partir de las algas
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verdes marinas, convirtindose en una herramienta imprescindible en el proceso de colonizacin

hacia el ambiente terrestre, mucho antes que la evolucin permitiera a las plantas el desarrollo de
races capaces de captar nutrientes del suelo (Retallack 2009, Schler et al. 2011, Taylor et al.
2015). Desde entonces, los HMA y vegetales han evolucionado en una estrecha relacin, siendo
probablemente esta evolucin conjunta la causa de su biotrofa obligada, que condiciona al hongo a
encontrar y colonizar una raz hospedadora para poder continuar su crecimiento y completar su
ciclo de vida, que culmina con la formacin de propgulos nuevos y viables (Azcon-Aguilar et al.
1998).
La asociacin entre HMA y races vegetales es mutualista, se inicia con la penetracin y posterior
colonizacin de las clulas radicales, en donde se forma un sistema de transferencia bidireccional,
basado en el flujo de nutrientes inorgnicos, especialmente de aquellos con poca movilidad en el
suelo (P, Zn, Cu, K, etc.), y agua desde el hongo hacia la planta, y de compuestos orgnicos
(carbohidratos) desde la planta hacia el hongo, producto del proceso fotosinttico (Strack et al.
2003, Peterson et al. 2004). Adems, la simbiosis genera otros beneficios para las plantas
micorrizadas desde la etapa de vivero, como mayor resistencia al ataque de patgenos radiculares
(Hooker et al. 1994), a la presencia de metales pesados en el suelo (Del Val et al. 1999), al estrs
hdrico (Marulanda et al. 2003), a condiciones extremas de pH del suelo (Clark et al. 1999),
mejorando su supervivencia, adaptacin, produccin de biomasa, y reproduccin (Fisher &
Jayachandran, 2002). Por otra parte, la red de hifas extraradicales y ciertas sustancias
(glicoprotenas) secretadas por el hongo durante la asociacin, favorecen la formacin de
agregados estables en el suelo y por consiguiente la conservacin de la estructura fsica de este
(Borie et al. 2000; Jeffries & Barea, 2001).
Por tanto, dada la importancia econmica y social que tiene la balsa para el pas, se hace
necesario identificar, seleccionar, masificar, y generar inoculantes de HMA eficientes, para a travs
de inoculaciones inducidas, mejorar la calidad de plantas en etapa de vivero, con el propsito de
fortalecerlas frente al estrs generado por agentes biticos y abiticos, posteriores al transplante a
campo definitivo, permitiendo una mayor supervivencia, adaptacin, desarrollo, y una considerable
disminucin de gastos en fertilizantes y pesticidas qumicos.
2. HIPTESIS
En funcin a los antecedentes arriba expuestos se plantea la siguiente hiptesis de investigacin:
Plantas de O. pyramidale inoculadas a nivel de vivero con consorcios de hongos formadores de
micorriza arbuscular nativos, incrementan el desarrollo hasta en un 20%, reflejado en las variables
dasonmicas.
3. MATERIALES Y MTODOS
3.1. REA DE ESTUDIO
La investigacin a nivel de campo se realizar en cinco plantaciones de O. pyramidale adulta,
localizadas en el centro del Trpico Hmedo Ecuatoriano), correspondiente a la zona de influencia
de la Universidad Tcnica Estatal de Quevedo (UTEQ). Los estudios a nivel de laboratorio e
invernadero se llevaran a cabo en el Laboratorio de Microbiologa Ambiental y Vegetal de la UTEQ,
localizado en el Campus Ing. Manuel Haz Alvares, ubicado en el Km 1,5 de la va Quevedo Quito.
3.2. MTODOS
3.2.1. Muestreo de suelo y races de O. pyramidale. Desde cada plantacin en estudio, tanto en
la estacin lluviosa como la seca, se extraern tres muestras de suelo de aproximadamente 1 kg
cada una, entre 0 a 30 cm de profundidad. Del mismo modo, por cada plantacin se extraern tres
muestras de races finas activas jvenes de balsa, de entre 100 a 200 g. Tanto el suelo como las
races, sern trasladados desde el campo hasta el laboratorio bajo refrigeracin, y su anlisis ser
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inmediato con el propsito de evitar cambios en su biologa.

3.2.2. Estimacin de la colonizacin micorrzica en races de balsa. Para el efecto se emplear
el mtodo de Phillips y Hayman (1970) y Giovannetti y Mosse (1980) que consiste en:
Lavar las races con abundante agua corriente.
Cubrir las races con solucin de hidrxido de potasio (KOH) al 10% y colocarlas al bao de
mara (90C) durante 10 a 15 minutos.
Eliminar el hidrxido de potasio, lavando con agua corriente las races, utilizando
preferiblemente un tamiz adecuado para evitar prdidas durante el enjuague.
Si las races son muy oscuras y pigmentadas, un tratamiento adicional de blanqueo con
perxido de hidrogeno (3 %) por 10 a 20 minutos ser necesario. Las races clareadas y
blanqueadas se lavarn con abundante agua.
Lavar las races por inmersin durante 5 a 10 minutos en una solucin fresca de KOH al
10% y H2O2 al 10%, mezclados en proporcin 1:1 (V/V).
Lavar en agua corriente las races.
Acidificar con una solucin de cido clorhdrico (HCl) al 1N durante 10 minutos.
Decantar el HCl, y sin lavar adicionar Azul de Tripano al 0.05% en lactoglicerol o cualquier
otro colorante y colocar las races al bao de mara por 10 minutos.
Retirar el colorante y guardarlo en un recipiente.
Lavar las races en agua destilada y dejarlas en reposo por 12 horas para eliminar el
exceso de colorante. O desteirlas durante la noche con lactoglicerol o glicerol (50 %).
Montar en un portaobjetos, 10 races de ms o menos 1 cm de largo cada una y observar al

microscopio.
Por cada muestra de races de O. pyramidale se realizarn montajes al microscopio. En una lmina
portaobjetos se colocaran 10 segmentos de races adicionando gotas de glicerol (50%). Las
observaciones se harn por triplicado (3 repeticiones) en un microscopio a 40x.
La frecuencia (%) de colonizacin radicular se determinar considerando los segmentos
colonizados y no colonizados. Se obtendr por la relacin del total de segmentos colonizados con
respecto a los segmentos totales evaluados. Se contabilizar con base a colonizacin total por
arbsculos o/y por vesculas.
3.2.3. Aislamiento e identificacin de HMA. Se emplear el mtodo descrito por Gerderman y
Nicholson (1963) que consiste en el tamizado y decantacin en hmedo, con modificaciones. A
continuacin se describir el proceso.
Se pesarn 100 g de suelo y colocarn en un vaso de precipitacin, al que se aadir 1000

mL-1 de agua y agitar durante 3 a 5 minutos. Con la agitacin se producir la disgregacin
de los terrones.
Paralelo a lo anterior se pesar una submuestra de suelo y secar a 70 C hasta obtener

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un peso constante. Este dato permitir estimar el nmero de esporas por gramo de suelo
seco.
La suspensin deber dejarse reposar durante unos segundos y el sobrenadante se pasar

a travs de tamices con apertura de mallas de 500, 250 y 38 m para separar las esporas
de acuerdo a su tamao. La agitacin y decantacin deber repetirse por lo menos tres
veces.
El material que queda atrapado en los diferentes tamices se recoger en placas de Petri
cuadriculadas, y observarn a la lupa, para cuantificar el nmero de esporas por gramo de
suelo seco.
La identificacin de los HMA se efectuar a nivel de morfoespecies. La observacin de rasgos

distintivos en las estructuras fngicas se llevaran a cabo en un microscopio ptico, y compararn
con las claves taxonmicas disponibles (Brundrett et al. 1996; Powell & Bagyaraj, 2000; Peterson et
al. 2004; INVAM, 2015).
3.2.4. Inoculacin de plntulas de O. pyramidale con HMA a nivel de invernadero. Una vez
identificadas y aisladas las morfoespecies de HMA, se proceder a la inoculacin en plantas de
balsa a nivel de invernadero. Para el efecto, previamente se sembrarn semillas de O. pyramidale
en macetas de 2000 cm3, conteniendo como sustrato, suelo + vermiculita o arena estriles, y 48
horas despus de la germinacin, al pie de cada plntula se inocularn 30 esporas de la
morfoespecie, o consorcios de morfoespecies de HMA, segn corresponda a cada tratamiento. Los
tratamientos estarn representados por cada morfoespecie, y consorcios de morfoespecies, con
sus respectivos controles (testigos) y constituidos por 45 repeticiones (plantas de balsa) cada uno,
distribuidos en un diseo completo al azar (DCA).
Las evaluaciones de las diferentes variables estudiadas, se realizar en tres periodos: 30, 45 y 60
das despus de las inoculaciones, y para el efecto se emplearn 15 repeticiones (plantas) por
cada periodo de evaluacin. Se evaluar el efecto de los tratamientos sobre las siguientes
variables: altura de plantas, dimetro del tallo a 10 cm sobre el nivel del suelo, peso hmedo y seco
del sistema foliar y radicular, largo total de raz (RL), densidad radicular (RLv), categora de pelos
radicales, nmero de esporas por gramo de suelo seco, porcentaje de colonizacin micorrzica
radicular. Para el caso de las dos ltimas variables, se emplear la misma metodologa descrita en
3.2.2. y 3.2.3.
3.2.5. Seleccin y masificacin de HMA con potencial inculo-biofertilizante para balsa. Una
vez analizadas las variables estudiadas, se seleccionar la morfoespecie o consorcio de
morfoespecies de HMA que haya generado variables de respuesta superiores en las plantas de O.
pyramidale. Estos HMA sern recuperados desde el sustrato donde crecieron asociados a las
plantas de balsa, y nuevamente identificados. Posteriormente, con el propsito de conservarlos y
masificarlos como inoculantes, estos se inocularan en plantas de Zea maz (maz) bajo condiciones
de invernadero, a partir del cual se podr disponer de considerables cantidades de inoculo viable
que podr ser multiplicado rpidamente y sin mayores complicaciones. Por otra parte, y con el
propsito de conservar los HMA estudiados, se dispondr de un banco germoplsmico, que para el
efecto se conservar en plantas trampa, como Z. maz, o Brachiaria decumbens.
3.3. ANLISIS ESTADSTICO

Los datos obtenidos se sometern a un anlisis de varianza (ANOVA) con un nivel de significancia
de 95% (P < 0,05), previa comprobacin de los supuestos de normalidad y homocedasticidad de
varianzas. Posteriormente se aplicar la prueba LSD (mnima diferencia significativa), con un nivel
de significancia del 95% (P < 0,05). Los anlisis estadsticos se efectuarn en el programa SAS 9.0,
pg. 6
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versin para Windows.

D. Bibliografa y otra produccin cientfica citada
Corresponde a las referencias bibliogrficas citadas en el proyecto (Ver Anexo 1b).
4. BIBLIOGRAFA
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Series Report No. 45. Australian Government. Australian Centre for International Agricultural Research.
Canberra, 76 p.
E. Manteniendo consistencia con los objetivos y la descripcin realizada, especifique la

produccin externa esperada del proyecto
Productos
Se contar con inoculo de morfoespecies o
consorcios de morfoespecies de HMA con
Usuarios
Acadmicos,
Investigadores,
estudiantes, y productores.
tcnicos,
pg. 8
F O C I C Y T
potencial biofertilizante, que podrn ser

empleados para el mejoramiento de la calidad
de plantas de balsa a nivel de vivero
Se realizar una tesis de pregrado, y los
resultados publicados mediante un artculo
cientfico, y ponencias en congresos.
Resultados
Contar con una metodologa eficiente para el
aislamiento, identificacin y masificacin de
HMA con fines de inoculante-biofertilizante
Efectos
Viveros de balsa podrn contar con HMA como
inoculante-biofertilizante
que
podr
ser
empleado en balsa.
Se mejorar la calidad de las plntulas de balsa
a nivel de vivero, contribuyendo a disminuir la
mortalidad posterior al transplante en el campo
definitivo, por estrs biticos y abiticos.
Beneficiarios Inmediatos
Acadmicos,
Investigadores,
productores, industria.
tcnicos,
Beneficiarios Mediatos
Viveristas, productores de balsa, industria.
DETALLE DEL PRESUPUESTO

1. VIAJES TCNICOS (Componente del presupuesto destinado nicamente a financiar viajes
nacionales para el desarrollo de actividades tales como muestreo, entrenamiento y ejecucin de
encuestas)
ACTIVIDAD
LUGAR
Identificacin de plantaciones de
balsa para el estudio.
Muestreo de suelo y Races
Cantones:
Santo
Domingo
de
Los
Tsachilas, Quevedo,
La Mana, Ventanas,
Quinind, Babahoyo.
Cantones:
Santo
Domingo
de
Los
Tsachilas, Quevedo,
La Mana, Ventanas,
Quinind, Babahoyo.
5 das
NO.
PERSONAS
2
600
1080
DURACION
TOTAL
COSTO
1680
2. RECURSOS BIBLIOGRFICOS Y SOFTWARE7 (Sealar los libros especializados,

publicaciones peridicas y software necesarios para la ejecucin del proyecto, indique sus
respectivos precios)
LIBROS / REVISTAS / BASES DE DATOS
Libro: Introduccin a la Microbiologa
Libro: Modern Soil Microbiology, third edition
PRECIO
120
150
Los libros y software que se adquieran tambin sern parte de los activos de la UTEQ
pg. 9
F O C I C Y T
Libro:Geomicrobioloy, Fifth edition
250
Libro: Environmental Microbiology
50
Libro: Handbook of Media for Environmental Microbiology, Second Edition
220
Libro: Microbiology for Minerals, Metals, Materials and the Environment
200
140
Libro: Mycorrhizal Symbiosis, Third Edition

Libro: Working with mycorrhizas in forestry and agriculture
100
TOTAL
1230
3. MATERIALES Y SUMINISTROS (Solo materiales fungibles y reactivos necesarios en la

ejecucin del proyecto)
MATERIAL / SUMINISTRO
1 galn de alcohol antisptico
2 galones de alcohol para mecheros
1 caja de pipetas Pasteur (100 unidades)
4 picetas de 500 mL
1 juego de micrmetro objetivo y ocular
200 placas de Petri plsticas de 9 cm de dimetro
200 placas de Petri plsticas de 4 cm de dimetro
500 g de Hidrxido de potasio
2 litros de agua oxigenada de 10 volumenes
2,5 litros de cido Clorhdrico
50 g de azul de tripano
1 galon de glicerol
1 galon de cido Lctico
300 Macetas plsticas de 2000 cm3
3 toallas de mano de tela
10 royos de papel toalla
2 paquetes de bolsas plsticas tipo camiseta de100 unidades cada una
2 paquete de bolsas plsticas transparentes de 100 unidades de 25 x 30 cm
4 rollos de parafilm
1 rollo de Sarn
500 frascos plsticos hermticos de 100 mL
500 frascos plsticos hermticos de 200 mL
5 resmas de papel para impresin tamao A4
2 resmas de papel para impresin tamao carta
100 kg de vermiculita
TOTAL
PRECIO
30
80
60
40
200
150
150
200
10
150
150
150
150
900
15
50
10
6
240
200
300
400
25
10
200
3876
4. PLAN DE TRANSFERENCIA DE RESULTADOS8
Pueden ser posters, artculos cientficos, boletines, talleres, das de campo, casa abierta, ferias cientficas.
pg. 10
F O C I C Y T
ACTIVIDAD
PRECIO
2 Poster para presentar en congresos

1 artculo cientfico
1 Charla a viveristas y productores de balsa
240
500
1000
TOTAL
1740
F. Describir los impactos
(De acuerdo al objetivo del proyecto, sea ambiental, social, productivo,

cientfico, etc.) (Mximo 300 palabras)
Mediante la ejecucin del proyecto se brindar una alternativa biolgica, sostenible y amigable con
el ambiente, para el mejoramiento de la calidad de plantas de balsa en etapa de vivero, a travs del
empleo de HMA con propiedades biofertilizantes, minimizando el uso de componentes sintticos.
Al finalizar la investigacin se espera generar una metodologa amigable y eficiente, para la
bsqueda y masificacin de hongos formadores de micorriza arbuscular, con potencial inoculantebiofertilizante para O. pyramidale en etapa de vivero, que puede ser utilizada por viveristas y
productores de balsa.
Se contar con una fuente de inculo de HMA con caractersticas sobresalientes, cuya inoculacin
en plntulas de balsa a nivel de vivero, brindar ventajas comparativas frente a aquellas no
inoculadas.
Finalmente, se dispondr de un banco germoplsmico de HMA a partir de plantaciones de balsa, el
mismo que podr ser utilizado para investigaciones en otras especies vegetales de importancia
econmica del Trpico Hmedo Ecuatoriano.
G. Si el resultado es de desarrollo tecnolgico, ya sea un producto, variedad, prototipo o

una patente describa su plan de transferencia a la industria de este resultado (Mximo 200
palabras).
Considerando que en la investigacin se vincular a un estudiante tesista, se estimular a este

futuro profesional, para que una vez graduado y adquirido los conocimientos, habilidades y dominio
de la metodologa de produccin masiva de bioinoculantes, pueda crear una microempresa propia,
a travs de la cual se ofrezca el producto al sector forestal y genere empleos.
Por otra parte, se invitar a empresas vinculadas a la produccin y comercializacin de insumos
relacionados con el sector de la balsa, para transmitirle la tecnologa y desarrollar un estrategia de
mercado y comercializacin del bioinsumo.
H. Declaracin Final
pg. 11
F O C I C Y T
Los abajo firmantes declaramos bajo juramento que el proyecto descrito en este documento no ha
sido presentado a otra institucin nacional o internacional para su financiamiento, no causa perjuicio
al ambiente, es de nuestra autora y no transgrede norma tica alguna.
I. Firmas de responsabilidad
Lugar:
Fecha:
Quevedo, Ecuador
18 de marzo del 2015
Firmas
Carlos Belezaca Pinargote
Elias Cuasquer Fuel
Nombre:
Nombre:
CC: 1203790777
CC: 0400474615
Director del Proyecto
Director del Departamento/Escuela/Decano

Facultad
ANEXO 1.
a) Citas bibliogrficas en el texto. La literatura publicada a la que se haga referencia en el texto
puede incluirse en dos formas: 1) Stobbs (1975) y Avellaneda-Cevallos et al. (2003) han
sealado que la ganancia de peso de animales pastoreando en asociaciones es mayor durante la
poca seca 2)la ganancia de peso de animales pastoreando en asociaciones es mayor,
particularmente durante la poca de sequa (Stobbs, 1975; Avellaneda-Cevallos et al., 2003). Ver
anexo 1.
Cuando se incluyen dos o ms citas dentro de una misma frase, las citas se arreglan en
orden cronolgico. Citas que tengan el mismo ao de publicacin se arreglan en orden
alfabtico. Cuando la cita tiene slo uno o dos autores, se incluye el (los) apellidos y el ao de
publicaciones. Si los autores del trabajo citado son tres o ms, se incluye slo el apellido del
pg. 12
F O C I C Y T
primer autor seguido de et al. y la fecha (por ejemplo, Avellaneda-Cevallos et al., 2003). Si el
(los) mismo (s) autor (es) tiene (n) varias publicaciones con distintas fechas pueden citarse juntas
en el texto (Avellaneda-Cevallos et al., 2003, 2004). Si dos citas bibliogrficas distintas se
abrevian de la misma manera en el texto, se debe incluir despus de la fecha, una letra que las
distinga, tanto en el texto como en la Literatura Citada. La Literatura no publicada se cita
solamente en el texto de la manera siguiente:segn S. Gonzlez (2005, comunicacin
personal); (S. Gonzlez, 2005; comunicacin personal).
b) Literatura Citada. Se recomienda minimizar el nmero de referencias que se incluyen en el
manuscrito, seleccionando solo aquellas ms pertinentes o de mayor actualidad, excepto cuando
se trate de tcnicas o procedimientos. Por lo general, tres referencias son ms que suficientes
para documentar un concepto especfico.
Las referencias bibliogrficas se citan en estricto orden alfabtico, iniciando con el apellido
del primer autor seguido de la (s) inicial (es) de su (s) nombre (s).
Si todos los autores son idnticos en dos o ms referencias, la fecha de publicacin
dictar su ordenamiento en la lista final. Si se da el caso de que existan dos o ms artculos, de
los mismos autores y publicados en el mismo ao, en la lista de referencias se incluirn por
orden alfabtico de los ttulos de los artculos, agregando una letra como sufijo (por ejemplo,
1991a).
En los ttulos de los artculos cientficos, solo la primera palabra y los nombres propios van
en mayscula y se indica el nmero de la primera y ltima pgina. Si la revista cientfica en el
cual est incluido numera las pginas dentro de cada ejemplar en vez del volumen anual, se
debe incluir el nmero del ejemplar (o el mes de publicacin) en parntesis despus del nmero
del volumen. Cuando se citan libros, la primera letra de las principales palabras va en
maysculas y no se incluye el nmero de pginas. Cuando se cita slo un captulo o seccin de
un libro, se debe incluir el nmero de la primera pgina.
Al citar un resumen(o abstract), siempre se debe indicar. No se pueden citar artculos
que hayan sido sometidos para publicacin pero que an no haya sido aceptados. Manuscritos
que hayan sido aceptados para publicacin pueden incluirse en la lista de referencia, indicando la
revista que aparecer seguido de las palabras en prensa entre parntesis. No se deben incluir
como referencias artculos que hayan sido publicados en revistas que no se consideren
cientficas o que carezcan de Comit editorial. Algunos ejemplos se indican a continuacin:
AOAC. 1990. Oficial Methods of Anlisis (15 th Ed.). Association of Official Analytical Chemist,
Alington, Virginia.
Goering, H. K., and P. J. Van Soest. 1970. Forage fiber analyses (appatus, reagents, procedures
and some applications). Agric. Handbook 379. ARS, USDA, Washington, D.C.
Herrera, R. S. 1983. La Calidad de los Pastos. En: Ugarte, J., S. Herrera, R. Ruiz, R. Garca,
C. M. Mrquez y A. Senra (Ed.). Los pastos en Cuba, Tomo II. Instituto de Ciencia Animal,
La Habana, Cuba. P 59.
Klopfenstein, T. 1978. Chemical treatments of crop residues. J. Anim. Sci. 46:841.
NCR. 1988. Nutrient Requirements of Swine (9th Ed.). National Academy Press, Washington, D:C.
Owen, E. 1978. Processing of Roughages. In: Haresign, W., and D. Lewis (Ed.). recent Advances
in Animal Nutrition. Butterworths, London.
Quiroga, E. J. y J. M. Farias. 1983. Efecto del estado de madurez al corte sobre la cantidad de
protena lignificada de los forrajes. Memorias ALPA 20:161 (Resumen).
Riquelme, E., and G. Rojas. 1980. In vitro digestibility of sesame straw as affected by chemical
treatment and protein levels and/or sources. J. Anim. Sci. 51 (Supplement 1): 342 (Abstr.).
Surez, M., J. Herrera, A. Pr y M. Cuca. 1985. Interaccin genotipo x ambiente en lneas
comerciales de pollos de engorda. Memorias ALPA 20:165
pg. 13
F O C I C Y T
Steel, R. G. D., and J.H. Torrie. 1980. Principles and Procedures of statistics: A Biometrical
Approach (2nd Ed.). McGraw Hill Book Co., New York.
Tilley, J. M. A. and R. A. Terry. 1963. A two stage technique for the in vitro digestion of forage
crops. J. Br. Grassal. Soc. 18:104.
ANEXO 2
Matriz del Marco Lgico
El Marco Lgico es una matriz explicativa de los objetivos, los componentes, las actividades, indicadores,
medios de verificacin y supuestos del proyecto, que permiten tanto al formulador como al evaluador tener
una imagen global del proyecto propuesto, que permiten tanto al formulador como al evaluador tener una
imagen global del proyecto propuesto.
Matriz de Marco Lgico
Jerarqua de Objetivos
Fin
Obtener un biofertilizante
eficiente, basado en
hongos formadores de
micorriza
arbuscular
(HMA), para emplearse
en
viveros
de
O.
pyramidale.
Lnea de Base
Se cuenta con
capacitacin
avanzada en el
rea de Micorrizas,
e investigaciones
previas en HMA
asociados a cacao
en sistemas
agroforestales del
Trpico Hmedo
Ecuatoriano.
Definicin del
Indicador
Contar con un
biofertilizante
constituido por
HMA, que estimule
el desarrollo de
plantas de balsa en
etapa de vivero
Fuentes de
Verificacin
Biofertilizante per
se.
Informe final del
proyecto.
Supuestos
Viveristas y
productores de
balsa, prefieran
fertilizantes e
insumos qumicos
tradicionales
(sintticos)
pg. 14
F O C I C Y T
Objetivo General
Mejorar la calidad de las
plntulas de Ochroma
pyramidale (balsa) a
nivel de vivero, mediante
la
aplicacin
de
biofertilizantes,
empleando
hongos
formadores de micorrza
arbuscular.
Objetivo Especfico 1
Determinar la tasa de
colonizacin micorrzica
radicular, y densidad de
esporas
de
hongos
formadores de micorriza
arbuscular en el suelo de
plantaciones de
O.
pyramidale.
Aislar
e
identificar
morfolgicamente
micorriza
arbuscular
nativos, asociados a
plantaciones adultas de
O. pyramidale.
Seleccionar
especies
individuales,
o
consorcios de hongos
formadores de micorriza
arbuscular nativos, cuya
inoculacin en plntulas
de
O.
pyramidale
estimule
una
mayor
capacidad de respuesta
a variables dasonmicas
en condiciones de vivero.
Se realiz una
investigacin en la
UTEQ, donde se
determin que HMA
originarios de
sistemas
agroforestales con
cacao nacional en el
Trpico Hmedo
Ecuatoriano,
contribuyen al
aumento de
biomasa vegetal en
plantas de
Brachiaria
decumbens.
Se dispone de
metodologa y
protocolos para
determinar el grado
de colonizacin
micorrzica,
tomando como
modelo races de
Theobroma cacao
(leosa) y B.
decumbens
(herbcea)
Se cuenta con
experiencia,
habilidades y
protocolos para el
aislamiento, e
identificacin de
HMA a partir de
suelos de sistemas
agroforestales
basados en cacao
nacional.
Experiencia en la
seleccin de
consorcios de HMA,
como fuente
potencial de
inoculobiofertilizantes. Esto
se logr en estudios
de HMA en
sistemas
agroforestales con
cacao nacional.
Aumentar en 5% el
porcentaje de
supervivencia de las
plantas de O.
pyramidale en la
etapa de vivero y
aclimatacin, previo
al transplante.
Informe final del

proyecto.
Publicacin de
artculos cientfico.
O. pyramidale no
responde
favorablemente a
la inoculacin
inducida de HMA.
Memorias de
congresos y
reuniones cientfica
Incrementar en un
20% el porcentaje
de biomasa vegetal
en las plantas de O.
pyramidale
inoculadas con
HMA.
Porcentaje de
Libro de campo.
plantaciones
muestreadas.
Informe de
Nmero de
progreso.
muestras de suelo y
races analizadas.
Publicacin.
Nmero de
morfoespecies o
consorcios de
morfoespecies de
HMA aisladas e
identificadas
Libro de campo.
Baja tasa de
colonizacin y
densidad de
esporas de HMA
en el suelo de las
plantaciones de
balsa.
Morfoespecies
difciles de aislar e
identificar.
Informe de
progreso.
Publicacin.
Nmero y
Libro de campo.
porcentaje de
morfoespecies o
consorcios de
Informe de
morfoespecies de
progreso.
HMA seleccionados.
Publicacin.
Plntulas de
pyramidale
responden
igual
a
inoculacin
todas
morfoespecies
consorcios
HMA.
pg. 15
O.
por
la
de
las
o
de
F O C I C Y T
Establecer un banco
germoplsmico
de
micorriza
arbuscular
nativos, como fuente
para
la
produccin
comercial
de
biofertilizantes para O.
pyramidale.
Se ha adquirido
experiencia y
destrezas en esta
rea, mediante
investigaciones
previas realizadas
en la UTEQ y
capacitacinen
centros de
investigacin
internacionales.
Nmero y
porcentaje de
morfoespecies o
consorcios de
morfoespecies de
HMA, presentes en
el banco
germoplsmico
Libro de campo.
Informe de
progreso.
Publicacin.
Los
HMA
establecidos en el
banco
germoplsmico, no
responden
uniformemente a
la micorrizacin en
las plantas trampa
utilizadas.
pg. 16

Identificación de hongos micorrícicos para balsa

Caricato da

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Identificación de hongos micorrícicos para balsa

Caricato da

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Formati disponibili

FONDO COMPETITIVO DE

INVESTIGACION CIENTIFICA Y TECNOLGICA

Identificacin y seleccin de hongos formadores de micorriza arbuscular

Microbiologa del Suelo

Evaluacin de la calidad del suelo, agua y aire, y

Duracin del Proyecto en meses (Mximo 18 meses):

Si el proyecto es continuacin conteste las siguientes preguntas:

Dr. Carlos Belezaca Pinargote

Ing. M. Sc. Oscar Prieto Benavides

Facultad de Ciencias Ambientales

El inters por plantar Ochroma pyramidale (balsa) en Ecuador ha aumentado significativamente,

B. Objetivo general y objetivos especficos

Determinar la tasa de colonizacin micorrzica radicular, y densidad de esporas de hongos

Aislar e identificar morfolgicamente hongos formadores de micorriza arbuscular nativos,

verdes marinas, convirtindose en una herramienta imprescindible en el proceso de colonizacin

inmediato con el propsito de evitar cambios en su biologa.

Lavar las races con abundante agua corriente.

Lavar en agua corriente las races.

Acidificar con una solucin de cido clorhdrico (HCl) al 1N durante 10 minutos.

Retirar el colorante y guardarlo en un recipiente.

Montar en un portaobjetos, 10 races de ms o menos 1 cm de largo cada una y observar al

Se pesarn 100 g de suelo y colocarn en un vaso de precipitacin, al que se aadir 1000

Paralelo a lo anterior se pesar una submuestra de suelo y secar a 70 C hasta obtener

La suspensin deber dejarse reposar durante unos segundos y el sobrenadante se pasar

La identificacin de los HMA se efectuar a nivel de morfoespecies. La observacin de rasgos

3.3. ANLISIS ESTADSTICO

versin para Windows.

COORDINACIN DE INVESTIGACIN, DESARROLLO E INNOVACIN

E. Manteniendo consistencia con los objetivos y la descripcin realizada, especifique la

COORDINACIN DE INVESTIGACIN, DESARROLLO E INNOVACIN

potencial biofertilizante, que podrn ser

Viveristas, productores de balsa, industria.

DETALLE DEL PRESUPUESTO

Muestreo de suelo y Races

2. RECURSOS BIBLIOGRFICOS Y SOFTWARE7 (Sealar los libros especializados,

Libro:Geomicrobioloy, Fifth edition

Libro: Environmental Microbiology

Libro: Handbook of Media for Environmental Microbiology, Second Edition

Libro: Microbiology for Minerals, Metals, Materials and the Environment

Libro: Mycorrhizal Symbiosis, Third Edition

3. MATERIALES Y SUMINISTROS (Solo materiales fungibles y reactivos necesarios en la

4. PLAN DE TRANSFERENCIA DE RESULTADOS8

2 Poster para presentar en congresos

F. Describir los impactos

(De acuerdo al objetivo del proyecto, sea ambiental, social, productivo,

G. Si el resultado es de desarrollo tecnolgico, ya sea un producto, variedad, prototipo o

Considerando que en la investigacin se vincular a un estudiante tesista, se estimular a este

COORDINACIN DE INVESTIGACIN, DESARROLLO E INNOVACIN

Carlos Belezaca Pinargote

Elias Cuasquer Fuel

Director del Proyecto

Director del Departamento/Escuela/Decano

COORDINACIN DE INVESTIGACIN, DESARROLLO E INNOVACIN

Informe final del

COORDINACIN DE INVESTIGACIN, DESARROLLO E INNOVACIN

COORDINACIN DE INVESTIGACIN, DESARROLLO E INNOVACIN

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