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INSTITUTO POLITCNICO

NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS
BIOLGICAS
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA:
LABORATORIO DE FISIOLOGA GENERAL
PRACTICA NO 11:
Propiedades de msculo liso

PROFESORES:
Vanessa Blas Valdivia
Fidel de la Cruz Lpez
ALUMNOS:
Cruz Montiel Mario Arturo
Linares Anaya Ozvaldo
Herrera Mora Sara Lorena
EQUIPO: 1 GRUPO: 4FV1
FECHA DE ENTREGA: 15/07/2015

INTRODUCCIN:
El msculo liso se encuentra en la pared del tubo digestivo, en los conductos de
ciertas glndulas, en algunos conductos respiratorios, en el tero y en las paredes
de los vasos sanguneos, entre otros lugares. Est formado por clulas largas y
fusiformes con un ncleo alargado en posicin central.
A ambos lados del ncleo se observan pequeas zonas de citoplasma donde se
disponen la mayora de los orgnulos. El resto del citoplasma muestra un aspecto
homogneo y es donde se localiza el aparato contrctil que, al contrario que en el
msculo esqueltico o el cardiaco, no se organiza en estructuras regulares visibles
con el microscopio ptico. Son clulas cuya longitud vara entre 0,02 y 0,5 mm y
su dimetro est entre 8 y 10 m. La organizacin de las clulas musculares lisas
es diversa y se adapta a la funcin que desempean. As, pueden aparecer
aisladas en el tejido conectivo, formando haces muy pequeos que conectan los
bulbos pilosos o formando lminas concntricas en el aparato digestivo.
Su contraccin se produce por inervacin desde las clulas del sistema nervioso
autnomo, bien inervando cada clula individualmente o slo a algunas, las cuales
transmiten el impulso elctrico a las vecinas mediante uniones en hendidura por
donde pasa el impulso nervioso entre los que se encuentra la oxitocina y la
histamina. El msculo liso se divide en dos tipos morfolgicos: msculo liso
unitario o visceral y msculo liso multiunitario.

El primero est formado por clulas musculares agrupadas de forma


compacta, formando lminas o haces rodeadas de tejido conectivo. Es
tpico formando las paredes musculares de las estructuras viscerales
huecas.
El segundo, est formado por clulas musculares aisladas, aunque pueden
estar prximas entre s. Forman parte de las trabculas del bazo, etc.
El musculo liso es notablemente distinto
al musculo esqueltico en el modo en
que desarrolla la tensin, pues el ciclo
contraccin-relajacin en el musculo
esqueltico es mucho ms rpido que en
el musculo liso, el musculo liso es capaz
de mantener la tensin durante periodos
largos sin fatigarse.

OBJETIVOS:
- Estudiar las propiedades contrctiles del msculo liso.

- Observar el efecto de las sustancias simptico y parasimpaticomimticas sobre


la actividad del msculo liso intestinal.
- Observar la influencia que ejercen algunos factores externos, como hipoxia,
temperatura y tensin sobre la actividad del msculo liso intestinal.

DIAGRAMA DE FLUJO:
Desarrollo

PREPARACION DE
SISTEMA DE REGISTRO

Llevar el bao a una


temperatura de 37 c

Colocar camara de
organo aislado con
solucion Tyrode en
aeracion continua

Colocar un sifn en el
tubo de desage para
realizar lavados

Sacrificar un conejo con


un golpe en la nuca y
abrir su cavidad
abdominal

Cortar una porcion de


aprox 20 cm de intestino
localizada por dejabjo
del estomago

transferir a una caja de


petri con solucion Tyrode
aireado a 37C

Limpiar adecuadamente
el musculo del intestino
y cortar porciones de
1.5-2 cm

En caso de ser necesario


se vaciaran las asas con
movimientos suaves

A una porcion se le ata


un hilo de 25 cm en cad
uno de los extremos sin
obstruir la luz del organo

Trasladar a camara de
organo aislado y amarrar
uno de los extremos en
el gancho del fondo de
la camara y otro al
trasductor BIOPAC

Calibrar el equipo
BIOPAC para que registre
los movimientos del
duodeno

Realizar registro
basal durante un
minuto

EXPERIENCIAS

ACETILCOLINA

HIPOXIA
Continuar registro
durante 3 minutos
hasta observar
efectos

Sin dejar de
En el momento en
registro
registrar Realizar
basal
que se noten los
suspender
efectos
burbujeo de
reestablecer
oxigeno de la
aereacion
preparacion Lavar con solucion
Tyrode hasta que la
frecuencia y
amplitud regresen a
registro basal

TEMPERATURA

ATROPINA
Aumentar la
temperatura
gradualmente
calentando
Agregar
5
exteriormente
a
gotas de
38C

acetil colina

TENSIN

ADRENALINA

Realizar
registro
basal

Continuar
registro
durante 3
minutos

Sin dejar de
registrar, agregar
solucion Tyrode
fra
Agregar

0.2
ml de
solucion de
atropina
1:100

medir
contracciones en
las que se
aprecie
claramente la
ritmicidad y tono
Sin detener
Dejar
transcurrirregistro
agregar gota a gota
un tiempo
para de
una solucion
1:10
de
acetilcolina
observar el
restablecimiento
de la actividad
contractil

Anotar temperatura
en el interior de la
camara

Registrar
durante 1
minuto

Reestablecer
temperatura original

Realizar registro
basar y sin dejar de
registrar

Aumentar la carga
del musculo
aumentando la
altura del
transductor

Observar y
determinar si la
respuesta se
mantiene durante
3 min

Realizar registro
basal

Sin detener
registro agregar
gota a gota una
solucion 1:10 de
adrenarina

Continuar
registro durante
3 minutos o
hasta observar
efectos

RESULTADOS Y DISCUSIN DE RESULTADOS:

HIPOXIA:
Se realiz un grfico con los datos obtenidos, en uno de ellos observamos el
efecto de la restriccin de oxgeno sobre la frecuencia de contraccin y en el otro
observamos el efecto sobre la amplitud de contraccin, en ambos casos se
observa un disminucin de respuesta, lo que con base a los datos tericos es de
esperarse, debido a que como sabemos en general los msculos necesitan
mantener una alta produccin de energa pues son rganos altamente activos,
dicha energa suele derivarse del ATP, que a su vez resulta de distintas rutas
metablicas que en su mayora suceden en condiciones aerbicas, al restringirse
el oxgeno que el rgano recibe se restringe la cantidad de ATP que el musculo es
capaz de producir, al no existir la suficiente energa, el musculo, lgicamente
tiende a disminuir su respuesta, expresado en un efecto tanto cronotrpico (-)
como inotrpico (-).

AMPLITUD DE LAS CONTRACCIONES DE MSCULO LISO DE DUODENO DE CONEJO RESTRINGIDO DE OXIGENO


2.5
2
1.5
Amplitud (g-fuerza)

1
0.5
0
Basal

Min 1

Min 2
Tiempo

TEMPERATURA:

Min 3

Min 5

Min 7

FRECUENCIA DE CONTRACCIONES EN MSCULO LISO DE DUODENO DE CONEJO AL RESTRINGIRLO DE OXIGENO


14
12
10
8
Contracciones/minuto

6
4
2
0
Basal

Min 1

Min 2

Min 3

Min 5

Min 7

Tiempo

Se observa que a un intervalo de temperatura de entre 36-38 C el musculo liso


tendr su mayor actividad de contraccin, esto se puede explicar debido a que la
contraccin muscular lisa esta mediada por una va de sealizacin por medio de
la protena Gq que como recordaremos requiere de varias enzimas para que se
fosforile a miosina, al aumentar o reducir la temperatura a la que est sometido el
rgano tambin modificamos la velocidad y eficacia de dichas reacciones
enzimticas, desnaturalizando la enzima o inhibindola, es por ello que a
temperaturas bajas o muy altas la fuerza y frecuencia de las contracciones se ver
reducida, expresado en un efecto cronotrpico (-) e inotrpico (-).
FRECUENCIA DE CONTRACCIONES DE MSCULO LISO DE DUODENO SOMETIDO A VARIACIONES DE TEMPERATURA
16
14
12
10
Contracciones/minuto

8
6
4
2
0
24C 28C

30C

32C 34C
Temperatura

36C

38C 37C

AMPLITUD DE CONTRACCION DE MSCULO LISO SOMETIDO A VARIACIONES DE TEMPERATURA


4
3.5
3
Amplitud (g-

2.5
2
1.5
1
0.5
0
24C

28C

30C

32C

34C

36C

38C

37C

Temperatura

TENSIN:
Los resultados obtenidos no coinciden los encontrados en la bibliografa, pues se
esperaba que al aumentar la tensin en el musculo aumentara la frecuencia de
contracciones de este debido a que se abriran mayor nmero de canales para
calcio dependientes de deformacin, al aumentar la concentracin de calcio en el
citosol este se unira en mayor cantidad con Calmodulina que a su vez activara
miosina cinasa la cual se encarga de fosforilar a la miosina, dando como resultado
la contraccin del msculo. Esto pudo no suceder debido a que fue muy fuerte la
tensin y nicamente maltrato el msculo en lugar de activar lo canales,
generando el efecto cronotrpico (-)
FRECUENCIA DE CONTRACCIONES DE MSCULO LISO SOMETIDO A TENSION

Contracciones/minuto

16
14
12
10
8
6
4
2
0
min1

Min2
Tiempo

ADRENALINA:

min3

EFECTO DE ADRENALINA SOBRE LA FRECUENCIA DE CONTRACCION EN MSCULO LISO


18
16
14
12
10
Contracciones/minuto

8
6
4
2
0
min1

Min2

min3

Tiempo

Como se sabe el sistema simptico libera adrenalina en situaciones de estrs o en


aquellas situaciones de huida, es decir en situaciones donde el cuerpo debe
aumentar la actividad de musculo cardaco y esqueltico pero no del liso puesto
que no le es til aumentar la actividad de dichos msculos, esta disminucin de la
actividad es generada por una sealizacin de adrenalina por va protena G s, al
activar el receptor, unir dicha protena y liberar la subunidad , esta estimula la
produccin de AMPc a travs de Adenilato Ciclasa, que activa PKA y esta
posteriormente una fosfatasa, que finalmente desfosforila a miosina y no puede
llevar a cabo una contraccin, generando un efecto cronotrpico (-), como se
observa en el registro:

ACETILCOLINA:

EFECTO DE LA ACETILCOLINA SOBRE LA FRECUENCIA DE CONTRACCIONES DE MSCULO LISO


14.5
14
13.5
13
Contracciones/minuto

12.5
12
11.5
11
min1

Min2

min3

Tiempo

Se
esperaba que para esta experiencia la acetilcolina aumentara la frecuencia de
contraccin del musco liso pues al ser liberada por el sistema parasimptico tiene
la respuesta opuesta a la adrenalina, mediada por una sealizacin va protena
Gq, al activar el receptor, unir dicha protena y liberar la subunidad , esta estimula
la produccin de en IP 3 y Diacil glicerol, cuyo ltimo activa PKC y se encarga de
fosforilar canales de Ca2+ para aumentar la concentracin intracelular del mismo,
por otro lado IP3 es el encargado de liberar dicho ion del interior de RS, al unirse a
los receptores acoples a l en su membrana, aumentando de igual manera la
concentracin del catin, unindose este a Calmodulina y aumentando la
respuesta de contraccin del musculo, pero como puede observarse en el grafico
nuestro resultado fue todo lo contrario, esto puede deberse a la fatiga del msculo,
despus del manejo del mismo comenz a llegar a un lmite en el cual ya no era
ptimo trabajar con l.
ATROPINA, ATROPINA Y ACETIL COLINA
En esta experiencia se observa el efecto de la atropina sobre la contraccin
muscular, la atropina es un antagonista de la acetil colina, bloqueando los
receptores del mismo neurotransmisor, por lo que tendr el efecto opuesto a la
ACh, cronotrpico (-), aunque en la experiencia no se obtuvo la respuesta
esperada, posiblemente por un mal lavado con la solucin Tyrode, pero al agregar
atropina y posteriormente acetilcolina sin haber realizado un lavado al rgano con
solucin Tyrode observamos el efecto cronotrpico (+) esperado, pues dicha
atropina es un inhibidor competitivo, y al aumentar la concentracin de ACh se
puede comenzar a ver el retorno de dichos efectos parasimpticos en este
msculo.

EFECTO DE LA ATROPINA SOBRE LOS RECEPTORES COLINERGICOS DE MSCULO LISO


18
16
14
12
10
Contracciones/minuto 8
6
4
2
0
Basal

Atropina

Ach Min 1 Ach Min 2 Ach Min 3

SUSTANCIA

CONCLUSIONES:

La restriccin de oxgeno en musculo liso genera un efecto cronotrpico (-).


El descenso de la temperatura basal en msculo generan un efecto
cronotrpico (-) e inotrpico (-) sobre el msculo liso.
La tensin gener un efecto cronotrpico (-) en el msculo liso aunque
debera hacer lo contrario.
La adrenalina genera un efecto cronotrpico (-) en el msculo liso.
La acetilcolina produce un efecto cronotrpico (+) e inotrpico (+) en
msculo liso de duodeno de conejo.
La atropina ejerci un efecto cronotrpico (+) en el msculo liso, aunque
debera hacer lo contrario.
Al aumentar la concentracin de ACh en presencia de atropina, el
neurotransmisor recupera sus efectos parasimpticos en msculo liso.

BIBLIOGRAFA:

Dee Unglaub Silverthorn, Fisiologa Humana. Un enfoque integrado 4a


edicin, Ed. Mdica Panamericana, 30/06/2008, pg. 230, 231, 232
www.slideshare.net/janguqui/contraccin-y-excitacin-del-msculo-lisosemana-2, obtenida el 13 de Julio de 2015
Linda S. Costanzo, Bases de Fisiologa Humana, Ed Tebar 2007, pg. (7985)
PDF (Sin autor), Fisiologa: Tejido muscular, pg. (60-68)

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