BENEMERITA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE PUEBLA

Practica 2.
PREPARACION
DE MEDIOS DE CULTIVO
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA GENERAL
Maestra: Mara del Carmen Avelino Flores
EQUIPO:
Edmundo Cervantes Gonzlez
Karla Yuridia Olgun Prez
Kevin Cruz Mrquez
Ftima Esmeralda Alducin Baylon
Jorge Alberto Hernndez Aguirre

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OBJETIVO:
Conocer el procedimiento para la preparacin de los distintos medios de cultivos
para el aislamiento e identificacin de microorganismos cepas.
INTRODUCCIN:
Un medio de cultivo es un sustrato slido, lquido

o semislido que contiene

todos los nutrientes necesarios para el crecimiento y desarrollo de los

microorganismos.
Es importante destacar que la transicin exitosa de un microorganismo in vivo a
un ambiente in vitro va a depender de la disponibilidad de nutrientes esenciales,
condiciones ambientales adecuadas, fuentes de energa, minerales, pH,
temperatura, presin y luz.
La elaboracin de medios de cultivo requiere proporcionar los elementos antes
citados de una forma asimilable
La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares
en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de
muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y peptona a las
que se complementa con otros ingredientes.
En la microbiologa el material gelificante es el agar, qumicamente es un
polisacrido obtenido a partir de algas marinas presentado entre sus ventajas que
la mayora de los microorganismos no lo utilizan como nutrientes. La presencia y
cantidad de este permite diferenciar los medios solidos de los semislidos por su
concentracin.
CONDICIONES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
1. Contener sustancias nutritivas necesarias para el desarrollo de los
microorganismos

(tales

vitaminas, minerales).

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como

aminocidos,

carbohidratos,

polialcoholes,

2. Tener un pH que permita un desarrollo ptimo, por lo general las bacterias

patgenos necesitan un pH neutro o ligeramente alcalino (7.0 7.4), en cambio
las levaduras y hongos requieren un pH cido (5.0).
3. Estar previamente esterilizados o preparados en condiciones aspticas.
4. Estar protegidos de la contaminacin ambiental por tapones de algodn card,
tapones de goma, tapas metlicas o roscas.
UTILIDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
1. Aislamiento de bacterias desde una muestra o material patgeno (secrecin
purulenta, orina, rgano, fecas, etc.) o de un alimento (leche, carne, etc.)
2. Estudio morfolgico de las colonias.
3. Conservacin de cepas identificadas (coleccin de cepas microbianas o
cepario).
4. Clasificacin y tipificacin de bacterias por estudio de sus propiedades
bioqumicas en medios diferenciales.
5. Obtencin de toxinas o investigacin de sus caractersticas.
6. Cultivo y cosecha de bacterias para la elaboracin de productos biolgicos
(vacunas, antgenos, bacterianas, toxoides, etc.).

MATERIAL Y EQUIPO

10 cajas de petri estriles

1 matraz Erlenmeyer
pipetas
mechero
autoclave.

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REACTIVOS:

AGAR PAPA DEXTROSA

AGAR NUTRITIVO
AGAR MAC CONKEY

AGARA PAPA DEXTROSA

Formula aproximada por litro:
Almidn de papa (Infusin de papa solidos) 4.0 g.
Dextrosa 20.0 g.
Agar 15.0 g.

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METODOLOGA:

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DIAGRAMA PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

OBSERVACIONES:

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Las observaciones de la prctica son de gran importancia a considerar para evitar

futuros errores empezando a mencionar est el vigilar de manera adecuada los
reactivos con los que est trabajando en este caso fue la mala disolucin y falta de
agitacin mientras se calentaba, esto produjo que se quemara la mescla.
Tomar cuidadosamente el material de trabajo y saber lo que se est haciendo al
uso por el motivo de abrir con fuerza la bolsa de cajas Petri y produjo que salieran
volando dos de ellas eso podra haber cado en otras muestras.
Dentro del rea de trabajo pueden existir ciertas restricciones de seguridad para
las muestras una de ellas en la prctica fue el mantener el proceso dentro de un
rea de esterilidad un error de levantar el matraz al aire evito que se llenara la
ltima caja Petri debido a que se contamino al sacarlo fuera del rea marcada.
OPERACIONES Y RESULTADOS:
Se prepar el medio en un matraz de acuerdo a las caractersticas y componentes
de cada uno; se dej enfriar hasta que la temperatura fuese soportable al tacto,
posteriormente, la mezcla se verti en las cajas Petri; se hizo una breve pausa
hasta que la mezcla gelificara. Las cajas de Petri fueron cerradas ya estriles y
con la mezcla gelificada; se envolvieron bolsas estriles y, por ltimo, se
almacenaron para su uso posterior.
En la presente prctica se prepararon exitosamente los medios de cultivo tanto de
agar nutritivo, papa dextrosa y MacConkey para poderse utilizar en la siguiente
prctica.
DISCUSIN DE RESULTADOS:
Dentro del marco de discusin podemos enmarcar diversos aspectos importantes
y fundamentales de la prctica. Destacamos el resultado positivo sobre los medios
de cultivo, ya que en l aplicamos toda la teora estudiada en la clase, es decir, los
diversos modos de cultivo fueron necesarios para hacer comparaciones entre
ellos, y de esta manera definir el que se acomodara de mejor forma a la prctica
que elaboraramos.
Otro punto a debatir ser la diversidad de microorganismo que crecer en los
cultivo. Hablamos de que dentro del cultivo crecern hongos y bacterias
primordialmente. Como es el caso del medio papa dextrosa, donde se espera el
crecimiento de hongos debido a sus componentes qumicos y al proceso de
incubacin al que ser sometido.
CONCLUSIN

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Los medios de cultivo son mtodos usados para el anlisis de microorganismos

con varios fines, como el de multiplicacin, identificacin, antibiograma, entre
otros, y puede ofrecer informacin valiosa sobre los mismos si se realiza de
manera adecuada e higinica para evitar la contaminacin del medio y la
alteracin de los resultados.

BIBLIOGRAFIA
Garca, V. (1996). INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA. (2a Ed). Espaa:
EUNED.
Totora G., J., 2007, Introduccin a la Microbiologa, Ed Medica Panamericana.
http://www.danival.org/notasmicro/medioscult/_madre_medios.html

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